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免疫检测技术在食品安全中的应用

免疫检测技术在食品安全中的应用

原核表达抗克伦特罗重组单链抗体及其纯化研究

2010第二届中国食品安全高峰论坛

作者：陈舒迟 College of Food South China Agricultural University

食品免疫检测技术是食品分析检测领域的新热点,在残余药物、残余农药、有害微生物等的检测方面取得了显著进展。免疫检测技术是基于抗体抗原反应的原理对待测物进行定量定性分析的检测方法,具有特异性强、灵敏度高、简便等优点。本文简... 详细信息

食品免疫检测技术是食品分析检测领域的新热点,在残余药物、残余农药、有害微生物等的检测方面取得了显著进展。免疫检测技术是基于抗体抗原反应的原理对待测物进行定量定性分析的检测方法,具有特异性强、灵敏度高、简便等优点。本文简述了近几年来出现的免疫检测技术的方法,简要介绍了它们的原理、特点及其应用和发展现状。

关键词：免疫检测技术食品检验技术应用

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中国食品学报 2009年第4期9卷 45-50页

作者：王弘刘细霞梁艳张宏斌孙远明陈舒迟广东省食品质量安全重点实验室/华南农业大学食品质量安全研究所广州510642 广州市质量监督检测研究院广州510110 广州军区广州总医院广州510010

目的:原核表达抗克伦特罗重组单链抗体,对表达的包涵体蛋白进行提取和纯化,并鉴定重组抗体特性。方法:通过温度诱导大肠杆菌表达抗克伦特罗单链抗体,超声破碎菌体细胞,采用不同洗涤溶液提取包涵体。以不同变性剂溶解包涵体,Ni-NTA亲和... 详细信息

目的:原核表达抗克伦特罗重组单链抗体,对表达的包涵体蛋白进行提取和纯化,并鉴定重组抗体特性。方法:通过温度诱导大肠杆菌表达抗克伦特罗单链抗体,超声破碎菌体细胞,采用不同洗涤溶液提取包涵体。以不同变性剂溶解包涵体,Ni-NTA亲和柱纯化后,经脉冲稀释法将其复性。超滤及透析浓缩蛋白复性液,经Ni-NTA亲和柱二次纯化,得到纯化重组目的蛋白。通过SDS-PAGE电泳分析重组目的蛋白纯度,采用Western blotting和间接竞争ELISA对所制备的抗克伦特罗重组单链抗体特异性进行鉴定。结果:以大肠杆菌Es-cherichia coli BL21(DE3)为宿主菌诱导表达重组单链抗体,产率最高,占菌体蛋白的31%。以1mol/L尿素洗涤包涵体,6mol/L盐酸胍为变性剂,经Ni-NTA亲和柱纯化,所得复性重组单链抗体蛋白的纯度达96%。Western blotting分析显示,纯化并复性后的单链抗体可与鼠抗His标签蛋白单克隆抗体发生特异性的结合反应。间接竞争ELSIA结果表明,该重组抗体IC50值为3.35ng/mL,与沙丁胺醇等结构类似物无交叉反应。结论:原核表达制备的抗克伦特罗重组单链抗体具有较好的抗原结合活性及特异性,为进一步开展克伦特罗的免疫快速检测研究奠定基础。

关键词：克伦特罗单链抗体原核表达纯化

苏码罐采样预浓缩-GC-MS法测定环境空气中的挥发性有机化合物

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环球人文地理 2014年第18期 78-80页

作者：陈舒迟郭岩黄宜耀广东省汕头市环境保护监测站

采用苏码罐采样技术,预浓缩系统与GC-MS联用,建立了测定环境空气中77(VOCS)种挥发性物的监测方法,回收率在75%-125%,方法检出限在0.16-0.96μg/m3,该方法用于环境空气监测,结果令人满意。

关键词：预浓缩系统气相色谱-质谱挥发性有机化合物环境空气

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电子废物拆解区大气细颗粒物源解析及应用

环境科学与技术 2018年第3期41卷 88-93,162页

作者：郭岩张宇烽肖亮洪姜国陈舒迟卓春锦汕头市环境保护监测站广东汕头515041 广州禾信仪器股份有限公司广东广州510530

首次采用高时间分辨率在线单颗粒气溶胶质谱技术(SPAMS)对电子废弃物拆解典型区域广东贵屿的大气细颗粒物进行了来源解析,填补了国内此类研究空白。结果表明:(1)污染较严重的冬春季期间细颗粒物首要污染源是工业工艺源,占26.1%,显著高... 详细信息

首次采用高时间分辨率在线单颗粒气溶胶质谱技术(SPAMS)对电子废弃物拆解典型区域广东贵屿的大气细颗粒物进行了来源解析,填补了国内此类研究空白。结果表明:(1)污染较严重的冬春季期间细颗粒物首要污染源是工业工艺源,占26.1%,显著高于同期其他区域的平均占比11.1%,污染程度较轻的夏秋季期间首要源是机动车尾气源,占20.5%,工业工艺源退居第三,比冬春季低8.1%;(2)颗粒物成分中高比例溴离子、磷酸盐及捕获的含溴高分子有机碎片等代表了电子废弃物拆解作业典型区域大气细颗粒物环境特征,反映了细颗粒物来源与电子废弃物产业之间的内在关联性;(3)建议严格实行电子废弃物拆解集中规范化运营和配套更有效的环保处理设施等措施以减少电子废物拆解行业废气对贵屿大气环境质量的负面影响。

关键词：电子废弃物大气细颗粒物源解析

抗克伦特罗单链抗体在毕赤酵母GS115中的表达

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食品工业科技 2011年第7期32卷 217-219,236页

作者：陈舒迟何永盛徐小艳陆田珍王弘广东省食品质量与安全重点实验室/华南农业大学食品质量与安全研究所广东广州510642

构建表达抗克伦特罗单链抗体(CBL scFv)的毕赤酵母菌株,筛选高拷贝转化子并诱导CBL scFv在毕赤酵母中的分泌表达。将构建的含有CBL scFv基因的重组真核表达载体pPICZαA-CBL经BstX I酶切线性化后,利用电转化方法转化毕赤酵母菌GS115感... 详细信息

构建表达抗克伦特罗单链抗体(CBL scFv)的毕赤酵母菌株,筛选高拷贝转化子并诱导CBL scFv在毕赤酵母中的分泌表达。将构建的含有CBL scFv基因的重组真核表达载体pPICZαA-CBL经BstX I酶切线性化后,利用电转化方法转化毕赤酵母菌GS115感受态细胞,通过Zeocin抗性平板筛选高拷贝转化子,以甲醇诱导蛋白表达,对表达产物进行SDS-PAGE、Western blotting鉴定及ELISA活性分析。结果显示,通过筛选出的重组毕赤酵母菌株分泌表达了1个分子量约为41kDa的蛋白,该蛋白可与鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性结合,且可被游离的CBL竞争性抑制,IC50值为5.1ng/mL。经检测,重组抗体表达量为0.095g/L。这说明分泌表达CBL scFv的毕赤酵母菌株构建成功,为后期CBL scFv发酵与制备奠定了基础。

关键词：克伦特罗单链抗体毕赤酵母蛋白表达

汕头市挥发性有机物变化特征及O3污染成因研判

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环境污染与防治 2020年第12期42卷 1515-1522页

作者：陈苗李成柳黄宜耀陈舒迟张宇烽李娟杨应琅郭岩汕头市环境保护监测站广东汕头515041 壹点环境科技(广州)有限公司广东广州510250

采用全自动气相色谱(GC)/火焰离子化检测器(FID)方法对汕头市大气挥发性有机污染物(VOCs)进行了为期1个月的在线实时观测,分析了VOCs的变化特征及其O 3生成潜势(OFP),并结合基于观测的模型对O 3污染成因进行了探析。研究结果表明:(1)汕... 详细信息

采用全自动气相色谱(GC)/火焰离子化检测器(FID)方法对汕头市大气挥发性有机污染物(VOCs)进行了为期1个月的在线实时观测,分析了VOCs的变化特征及其O 3生成潜势(OFP),并结合基于观测的模型对O 3污染成因进行了探析。研究结果表明:(1)汕头市的VOCs均值为1.91×10-8(以大气中体积分数计),其中烷烃类占比最高,为64.4%,甲苯、苯质量比(T/B)为3.34,表明气团除受机动车尾气影响外,还受到其他污染源影响;(2)芳香烃和烯烃是大气VOCs中对OFP贡献最大的组分;(3)观测期间,在前期O 3残留(贡献率19.9%)、局部O 3生成(贡献率40.8%)以及区域传输(贡献率39.3%)共同作用下,O 3出现轻度污染。

关键词：挥发性有机物 O 3 生成潜势基于观测的模型

电子废弃物拆解典型区域大气细颗粒物(PM2.5)源解析及应用研究

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电子废弃物拆解典型区域大气细颗粒物(PM2.5)源解析及应用研究

2017中国环境科学学会科学与技术年会

作者：郭岩张宇烽肖亮洪姜国陈舒迟卓春锦汕头市环境保护监测站广州禾信仪器股份有限公司

首次采用高时间分辨率在线单颗粒气溶胶质谱技术(SPAMS)对电子废弃物拆解典型区域广东贵屿的大气细颗粒物进行了来源解析,填补了国内此类研究空白。结果表明:①污染较严重的冬春季期间细颗粒物首要污染源是工业工艺源,占26.1%,显著高于... 详细信息

首次采用高时间分辨率在线单颗粒气溶胶质谱技术(SPAMS)对电子废弃物拆解典型区域广东贵屿的大气细颗粒物进行了来源解析,填补了国内此类研究空白。结果表明:①污染较严重的冬春季期间细颗粒物首要污染源是工业工艺源,占26.1%,显著高于同期其他区域的平均占比11.1%,污染程度较轻的夏秋季期间首要源是机动车尾气源,占20.5%,工业工艺源退居第三,比冬春季低8.1%;②颗粒物成分中高比例溴离子、磷酸盐及捕获的含溴高分子有机碎片等代表了电子废弃物拆解作业典型区域大气细颗粒物环境特征,反映了细颗粒物来源与电子废弃物产业之间的内在关联性;③建议严格实行电子废弃物拆解集中规范化运营和配套更有效环保处理设施等措施以减少电子废物拆解行业废气对贵屿大气环境质量的负面影响。

关键词：电子废弃物大气细颗粒物源解析

来源： cnki会议评论

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气相色谱法测定非甲烷总烃的研究

广州化工 2013年第11期41卷 181-183页

作者：黄文鑫郭岩黄宜耀陈舒迟汕头市环境保护监测站广东汕头515041

用玻璃注射器(气袋)采集气体样品,以双柱单氢火焰离子化检测器的气相色谱仪直接进行测定。进样1.0 mL样品分别进入汽化室的总烃柱和甲烷柱中,由于这两个柱子填充材料和长短差异,总烃先在FID上产生响应,然后甲烷在FID上产生响应。总烃的... 详细信息

用玻璃注射器(气袋)采集气体样品,以双柱单氢火焰离子化检测器的气相色谱仪直接进行测定。进样1.0 mL样品分别进入汽化室的总烃柱和甲烷柱中,由于这两个柱子填充材料和长短差异,总烃先在FID上产生响应,然后甲烷在FID上产生响应。总烃的浓度扣除甲烷浓度和除烃空气氧的浓度值,即可得到非甲烷总烃(NMHC)的浓度,可以实现单次进样,同时完成总烃、甲烷、非甲烷总烃浓度的测定。文章研究1.37～22.3 mg/m3浓度甲烷标准气,得出甲烷标准曲线方程为Y=715X+829,r=0.9990,相对标准偏差为0.26%～1.8%,总烃标准曲线方程Y=695X+724,相对标准偏差为0.35%～1.4%,除烃空气(O2-N2,20.8%)相对标准偏差为0.75%。该法用于环境空气和固定污染源有组织排放中NMHC含量分析,操作简单,实验结果满意。

关键词：气相色谱法非甲烷总烃固定污染源

家蚕乙酰胆碱酯酶基因bmace在毕赤酵母GS115中的表达及其分析

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中国农业科学 2012年第11期45卷 2189-2198页

作者：何永盛陈舒迟王弘韩双艳杨琼刘细霞董洁娴杨武英孙远明广东省食品质量与安全重点实验室/华南农业大学食品质量与安全研究所华南理工大学生物科学与工程学院广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所

【目的】构建表达家蚕乙酰胆碱酯酶(BmAChE)的毕赤酵母菌株,实现BmAChE在毕赤酵母中分泌表达并对其活性进行分析。【方法】从家蚕头部提取总RNA,经RT-PCR反转录成cDNA,通过PCR扩增出家蚕乙酰胆碱酯酶基因bmace并进行序列测定。采用PCR... 详细信息

【目的】构建表达家蚕乙酰胆碱酯酶(BmAChE)的毕赤酵母菌株,实现BmAChE在毕赤酵母中分泌表达并对其活性进行分析。【方法】从家蚕头部提取总RNA,经RT-PCR反转录成cDNA,通过PCR扩增出家蚕乙酰胆碱酯酶基因bmace并进行序列测定。采用PCR及重叠延伸PCR去除原bmace中的信号肽和疏水肽,并对序列中存在的2个A+T富含区进行同义密码子替换的改造。将改造后的bmace与表达载体pPIC9K连接,转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组蛋白,以Ellman法测定酶活力,毒扁豆碱和有机磷及氨基甲酸酯类农药抑制试验分析重组BmAChE(rBmAChE)的生物活性。【结果】改造后的bmace经重组毕赤酵母菌株分泌表达了1个分子量约为70 kD的蛋白,具有AChE活性,酶比活力约为1 187 ***-1。抑制试验显示,该rBmAChE能够被毒扁豆碱强烈抑制,并且可被皮蝇磷等10种有机磷农药和克百威等5种氨基甲酸酯类农药抑制,最低抑制浓度IC50值可达2.78×10-10mol.L-1。【结论】成功构建分泌表达BmAChE的毕赤酵母菌株,其表达了具有良好活性的rBmAChE,可用于进一步制备有机磷及氨基甲酸酯类农药快速检测分析制剂。

关键词：毕赤酵母重组家蚕乙酰胆碱酯酶表达活性分析有机磷农药氨基甲酸酯类农药