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野油菜黄单胞菌bioC和bioH基因功能研究

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野油菜黄单胞菌bioC和bioH基因功能研究

作者：陈群一华南农业大学

学位级别：硕士

野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xanthomonas campestris ***,Xcc)是十字花科黑腐病的病原菌,其危害严重,因此迫切需要研发新型抗黑腐病药物。生物素是生物体内许多酶的辅因子,参与到多种代谢途径中,对生物的正常生长和生理活动至关重要... 详细信息

野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xanthomonas campestris ***,Xcc)是十字花科黑腐病的病原菌,其危害严重,因此迫切需要研发新型抗黑腐病药物。生物素是生物体内许多酶的辅因子,参与到多种代谢途径中,对生物的正常生长和生理活动至关重要。在病原菌中,生物素的合成与其致病力密切相关,因此生物素合成途径已成为一个极具潜力的新型抗菌药物的作用靶标。因此,本论文研究了野油菜黄单胞菌中生物素合成的机制以及丙二酸单酰ACP甲基转移酶(Bio C)和甲酯庚二酸单酰ACP酯酶(Bio H)的生理功能。本文第一部分是关于野油菜黄单胞菌bio C和bio H的鉴定和功能研究。通过生物信息学分析,在Xcc中,Xcc0383和Xcc1678都标注为丙二酸单酰ACP甲基转移酶(Bio C)基因,而Xcc0385标注为甲酯庚二酸单酰ACP酯酶(Bio H)基因,这是首次发现在同一细菌基因组中存在2个基因可能编码Bio C蛋白,此现象在其他种属中的细菌都未发现过。首先将Xcc0383、Xcc1678和Xcc0385导入大肠杆菌(Escherichia coli)Δbio C和Δbio H基因突变株,结果显示只有Xcc0383能恢复ΔEcbio C突变株在基础培养基上的生长,初步表明Xcc0383编码蛋白具有Ec Bio C类似的功能,而Xcc0385能恢复ΔEcbio H突变株的生长,初步表明Xcc0385编码蛋白具有Ec Bio H类似的功能其次,分别构建Xcc0383、Xcc1678和Xcc0385敲除突变株,结果发现敲除Xcc0383和Xcc0385后突变株为生物素营养缺陷型菌株,但敲除Xcc1678对Xcc的生长并无影响。而Xcc0383和Xcc0385的回补突变株都能恢复到野生菌的生长表型,进一步确定在Xcc中Xcc0383和Xcc0385编码蛋白分别具有Bio C和Bio H活性。再次,在大肠杆菌中异体表达Xcc0385,并利用亲和层析法纯化获得Xcc0385蛋白,体外构建酶促反应,结果显示Xcc0385蛋白能将甲酯庚二酸单酰ACP去甲基化,生成庚二酸单酰ACP,再次说明Xcc0385蛋白具有Bio H活性。最后,检测突变株的致病力、致病相关因子以及抗逆性的变化。敲除Xcc0383和Xcc0385后Xcc侵染甘蓝的能力下降,而敲除Xcc0383后胞外蛋白酶的分泌量下降,突变株对逆境耐受性显著弱于Xcc野生菌株。结果表明阻断Xcc的生物素合成后,其致病力有所下降。而Xcc0383通过生物素合成以外的机制影响着胞外蛋白酶的分泌与对逆境的耐受性。综合上述结果,在Xcc中Xcc0383和Xcc0385分别编码Bio C和Bio H蛋白,并参与到生物素合成途径当中;敲除Xcc0383和Xcc0385后,Xcc无法自身合成生物素,致病力下降;Xcc0383还与致病因子的产量和逆境耐受性相关。本文第二部分对野油菜黄单胞菌中bio C、fab G和bio H之间的关系进行探索。通过生物信息学发现,在Xcc0383和Xcc0385之间存在Xcc0384基因,标注编码3-酮脂酰ACP还原酶(Fab G),Fab G在脂肪酸合成中具有催化3-酮脂酰ACP还原成3-羟脂酰ACP的功能,但目前Xcc0384的生理功能仍然未知,且此基因簇在黄单胞菌属中其他菌种均有出现具有保守性,因此本文开展了对Xcc0383、Xcc0384和Xcc0385的研究,探索三者之间的关系。首先,构建Xcc0384表达载体,发现Xcc0384无法使大肠杆菌fab G温敏突变株CL104在42℃下生长。而表达纯化Xcc0384蛋白,体外构建酶促反应也发现Xcc0384无法催化脂肪酸合成反应的进行,表明Xcc0384并不具备3-酮脂酰ACP还原酶的活性。其次,分别构建ΔXcc0383ΔXcc0384和ΔXcc0384ΔXcc0385双基因敲除菌株以及ΔXcc0383ΔXcc0384ΔXcc0385突变株,发现双突变株ΔXcc0383ΔXcc0384的生长显著慢于Xcc野生菌株和其他突变株,且在基础培养基中外源添加生物素仍无法生长,但可利用外源庚二酸维持生长;ΔXcc0383ΔXcc0384对Xcc野生菌株有轻微的抑菌作用;在ΔXcc0384ΔXcc0385中共回补Xcc0384和Xcc0385后,其长势要优于单独互补Xcc0385;Xcc0384敲除后,突变株的致病表型无明显变化。根据上述结果提出下列假设,在Xcc中Xcc0385除负责生物素合成外,还参与到其他物质代谢途径中,催化产生的某种毒性物质,而Xcc0384则负责还原降解毒性物质;Xcc0384与吸收利用外源庚二酸相关。

关键词：野油菜黄单胞菌野油菜致病变种生物素合成丙二酸单酰ACP甲基转移酶甲酯庚二酸单酰ACP酯酶 3-酮脂酰ACP还原酶

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秘书长工作的“三心不二意” 005

野油菜黄单胞菌BioC蛋白的生物信息学分析

中华工商时报

作者：陈群一

江苏省常州市武进区建筑业协会成立于1986年，2013年9月，按照武进区委区政府关于理顺行业商（协）会管理体制要求，业务主管单位变更为区工商联。协会现有会员单位353家，其中会长、副会长单位31家，理事单位62家。协会秘书处现有专职... 详细信息

江苏省常州市武进区建筑业协会成立于1986年，2013年9月，按照武进区委区政府关于理顺行业商（协）会管理体制要求，业务主管单位变更为区工商联。协会现有会员单位353家，其中会长、副会长单位31家，理事单位62家。协会秘书处现有专职工作人员6名。协会2015年通过民政部首

关键词：秘书长武进区建筑行业企业家建筑业 “营改增”

来源： cnki报纸评论

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基因组学与应用生物学 2020年第11期39卷 5091-5099页

作者：陈群一吴晓妍陈博王海洪余永红华南农业大学生命科学学院广州510642 华南农业大学群体微生物研究中心广州510642 广东食品药品职业学院广州510520

野油菜黄单胞菌ATCC 33913基因组中Xcc0383、Xcc1678被标注丙二酸单酰-ACP甲基转移酶(BioC)编码基因,从KEGG数据库检索Xcc0383和Xcc1678的氨基酸序列,运用生物信息学在线分析软件对这2个基因编码的蛋白进行了理化性质、蛋白结构、亲水... 详细信息

野油菜黄单胞菌ATCC 33913基因组中Xcc0383、Xcc1678被标注丙二酸单酰-ACP甲基转移酶(BioC)编码基因,从KEGG数据库检索Xcc0383和Xcc1678的氨基酸序列,运用生物信息学在线分析软件对这2个基因编码的蛋白进行了理化性质、蛋白结构、亲水性、跨膜结构、信号肽、磷酸化位点及蛋白相互作用网络的预测分析。结果表明2个蛋白理化性质相近,但Xcc0383为亲水性蛋白,Xcc1678位疏水性蛋白。2个蛋白都具有甲基转移酶功能结构域,不存在跨膜结构域和信号肽,磷酸化位点和翻译后修饰位点的数量和位置类似。Xcc0383和Xcc1678二级结构中组成最多的是α-螺旋,分别占46.36%和51.69%,三级结构预测结果与二级结构一致。蛋白相互作用预测后发现,Xcc0383与BioH、BioF、BioA等负责生物素合成的蛋白关系最为密切,而Xcc1678与其毗邻的糖基转移酶关系密切。氨基酸序列同源比对显示Xcc0383与大肠杆菌(***)的BioC相似性较高。Xcc0383编码蛋白负责在野油菜黄单胞菌体内合成生物素,而Xcc1678作为甲基转移酶负责为不同的受体分子提供甲基基团。

关键词：生物信息学野油菜黄单胞菌丙二酸单酰-ACP甲基转移酶预测分析

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2006年汽车设计走向“软硬”结合

轻型汽车技术 2006年第5期 30-31页

作者：刘袁娜陈群一王峥

刘袁娜:从奔驰S级、宝马3系、奥迪A6到丰田凯美瑞,世界车坛似乎进入了新的产品换代高峰.这一代产品身上,究竟体现了怎样的造型设计趋势?

关键词：汽车设计产品换代奔驰S级宝马3系奥迪A6 设计趋势丰田

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公司被吊销营业执照后的不动产处置

中国房地产 2010年第6期 55-56页

作者：宋祖芳陈群一赵君常州市武进区房地产管理处

一、公司被吊销营业执照后的法律地位根据《公司登记管理条例》第三条的规定：“公司经公司登记机关依法登记，领取《企业法人营业执照》，方取得企业法人资格。自本条例施行之日起设立公司，未经公司登记机关登记的，不得以公司名义从... 详细信息

一、公司被吊销营业执照后的法律地位根据《公司登记管理条例》第三条的规定：“公司经公司登记机关依法登记，领取《企业法人营业执照》，方取得企业法人资格。自本条例施行之日起设立公司，未经公司登记机关登记的，不得以公司名义从事经营活动。”

关键词：营业执照吊销不动产处置企业法人法律地位管理条例经营活动

2022年IAEA国际比对γ谱分析结果及思考

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核电子学与探测技术 2024年

作者：史晓东陈群杨小勇马加一江苏省疾病预防控制中心

对2022年国际原子能机构（IAEA）国际比对测试中的γ谱分析进行总结，为以后的检测和比对组织工作提供参考。方法使用高纯锗γ谱仪，采用相对比较法，对3种不同水样中的60Co、134Cs、137Cs、210Pb、241Am的活度浓度进行了检测。结果 ... 详细信息

对2022年国际原子能机构（IAEA）国际比对测试中的γ谱分析进行总结，为以后的检测和比对组织工作提供参考。方法使用高纯锗γ谱仪，采用相对比较法，对3种不同水样中的60Co、134Cs、137Cs、210Pb、241Am的活度浓度进行了检测。结果各核素检测结果与目标值的相对偏差范围为-15.25%～8.95%，可接受率100%，对于传统上采用放化方法测量的210Pb，本次使用γ谱测量，与目标值的相对偏差为8.95%。结论对于质控样中给出的核素，采用相对比较法得到的结果相对偏差较小，由比对组织者提供统一的质控样可有效减小比对结果中由标准品溯源带来的误差。

关键词：放射性核素 γ谱分析国际比对

信控交叉口公交专用车道动态共享实时控制方法

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哈尔滨工业大学学报 2024年第3期56卷 98-109页

作者：刘嘉晖陈科陈群中南大学交通运输工程学院长沙410075 湖南省交通规划勘察设计院有限公司长沙410200

针对目前交叉口拥堵、公交专用车道利用率低的问题,提出一种信控交叉口公交专用车道动态共享实时控制方法。利用GPS定位实时获取交叉口处公交车的位置,并通过交通检测设备获取专用道内小汽车车辆数,结合主信号显示情况综合计算当前时刻... 详细信息

针对目前交叉口拥堵、公交专用车道利用率低的问题,提出一种信控交叉口公交专用车道动态共享实时控制方法。利用GPS定位实时获取交叉口处公交车的位置,并通过交通检测设备获取专用道内小汽车车辆数,结合主信号显示情况综合计算当前时刻公交专用道共享前后交叉口车辆总延误。将延误大小判断结果反馈给车道信号,车道信号显示红灯或绿灯以提醒司机是否能够进入公交专用道。引入受影响车辆概念,建立以减少交叉口车辆总延误为目标的公交专用车道共享控制模型。通过对当前时刻主信号显示红灯和显示绿灯两种情况分析,提出一种综合考虑车辆司乘系数、受影响车辆的交叉口延误计算方法,得到共享公交专用车道前后交叉口车辆总延误差值的表达式。利用示例数值模拟在多种不同场景下车道信号的显示情况,分析了专用道内已有车辆、公交车位置以及主信号显示情况对车道共享的影响。结果表明:该控制方法较符合实际情况,并能有效提高公交专用车道利用率,能够充分利用交叉口绿灯时间,为解决公交专用车道的动态共享、缓解道路拥堵提供了一种新的思路。

关键词：交通运输工程车道共享方案建模仿真公交专用车道 GPS观测交叉口延误

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“无障碍”成权何以可能?

湖南社会科学 2024年第2期 111-120页

作者：陈群苏州大学王健法学院

“无障碍”概念起源于为使残障人士出行便利而研发的建筑领域内的特殊设计，现今已发展至法学领域。国内外皆通过立法明确了“无障碍”概念及内容，但“无障碍”应从福利模式转变为权利模式，才能更有利于保障无障碍需求者权利的实现。... 详细信息

“无障碍”概念起源于为使残障人士出行便利而研发的建筑领域内的特殊设计，现今已发展至法学领域。国内外皆通过立法明确了“无障碍”概念及内容，但“无障碍”应从福利模式转变为权利模式，才能更有利于保障无障碍需求者权利的实现。同时，保护主体也应从残障人士、老年人扩大到所有对无障碍有需求的群体。无障碍权的实现首先应当明确国家及非国家行为体是其义务主体，其次二者通过分别承担着主要义务及补充义务来保障无障碍权的落实。

关键词：无障碍残障人士残疾人权利公约无障碍权主体无障碍权

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基于学情分析的小学英语课外阅读教学设计

中小学英语教学与研究 2024年第3期 19-22页

作者：陈群江苏省扬州市宝应县教育局教研室

英语课外阅读在小学阶段具有重要作用,但很多课外阅读教学设计未能进行深入的学情分析或学情分析不到位,这在一定程度上影响了课外阅读教学的效果。本文认为,基于学情分析的小学英语课外阅读教学设计需找准学生的学习起点、重视学习难... 详细信息

英语课外阅读在小学阶段具有重要作用,但很多课外阅读教学设计未能进行深入的学情分析或学情分析不到位,这在一定程度上影响了课外阅读教学的效果。本文认为,基于学情分析的小学英语课外阅读教学设计需找准学生的学习起点、重视学习难点、探寻学习兴趣点和关注学生差异点。实践表明,只有基于扎实的学情分析,课外阅读教学才能真正激发学生的阅读兴趣,切实提高学生阅读能力。

关键词：小学英语课外阅读学情分析教学设计