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大黄泄浊方对5/6肾切除大鼠肾脏保护作用及对PERK/ATF4/CHOP通路的影响

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时珍国医国药 2022年第12期33卷 2908-2913页

作者：张欣欣辛鑫吴振华檀淼杨凤文张翠轻任美芳赵美姣陈素枝檀金川河北中医学院河北石家庄050200 河北省中医院河北石家庄050011 河北医科大学第四医院河北石家庄050000

目的通过观察大黄泄浊方对慢性肾衰竭大鼠内质网应激凋亡途径相关蛋白的影响,探讨其延缓肾间质纤维化的可能作用机制。方法 90只SD雄性健康大鼠随机分为假手术组,模型组,大黄泄浊方低、中、高剂量组(6.825g·kg^(-1)、13.65g·kg^(-1)... 详细信息

目的通过观察大黄泄浊方对慢性肾衰竭大鼠内质网应激凋亡途径相关蛋白的影响,探讨其延缓肾间质纤维化的可能作用机制。方法 90只SD雄性健康大鼠随机分为假手术组,模型组,大黄泄浊方低、中、高剂量组(6.825g·kg^(-1)、13.65g·kg^(-1)、27.30g·kg^(-1))和尿毒清颗粒组(2.60g·kg^(-1)),除假手术组外其余分组大鼠均采用5/6肾切除术造模。模型诱导成功后,各药物干预组分别给予规定剂量的中药混悬液灌胃,每日1次,连续8周。给药结束后,检测大鼠血清中血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、血白蛋白(ALB)水平及大鼠24h尿蛋白定量(UTP)水平;苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)染色观察肾脏病理学改变;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测大鼠肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、IV胶原蛋白(collegen IV)mRNA的相对表达量情况;免疫组织化学法(IHC)检测肾组织中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白、大分子B淋巴细胞瘤(Bcl-xl)蛋白、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2基因相关启动子重组蛋白(Bad)的表达情况;蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测肾组织中蛋白激酶RNA样内质网激酶(PERK)、转录激活因子4(ATF4)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白的表达情况。结果与假手术组相比,模型组大鼠血SCr、BUN水平显著增高(P<0.05),ALB水平显著降低(P<0.05),UTP水平显著增高(P<0.05),肾组织中α-SMA、collegenIV mRNA相对表达量显著增高(P<0.05),Bcl-2、Bcl-xl表达水平显著降低(P<0.05),Bax、Bad、PERK、ATF4、CHOP蛋白表达水平显著增加(P<0.05);与模型组相比,各药物干预组血SCr、BUN水平均有不同程度降低(P<0.05),ALB水平均有不同程度增高(P<0.05),UTP水平均有不同程度降低(P<0.05),肾组织中α-SMA、collegenIV mRNA相对表达量均有不同程度降低(P<0.05),Bcl-2、Bcl-xl表达水平均有不同程度增高(P<0.05),Bax、Bad、PERK、ATF4、CHOP蛋白表达均有不同程度降低(P<0.05)。结论大黄泄浊方可改善肾功能、延缓肾纤维化,其机制可能是通过调控PERK/ATF4/CHOP通路相关蛋白的表达,抑制内质网应激,减少细胞凋亡有关。

关键词：大黄泄浊方 5/6肾切除肾纤维化内质网应激蛋白激酶RNA样内质网激酶(PERK)/转录激活因子4(ATF4)/转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路

基于miR-29a/MDM2通路探讨益肾通络方对膜性肾病大鼠足细胞的影响

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中华中医药杂志 2021年第12期36卷 7356-7360页

作者：毛竞宇高飞陈素枝刘昊杨冰张尧杨凤文檀金川河北中医学院中西医结合学院石家庄050200 河北中医学院第一附属医院石家庄050000 河北中医学院第一附属医院肾病一科石家庄050000

目的:探讨益肾通络方对膜性肾病大鼠足细胞的影响及作用机制。方法:将36只SD大鼠随机分为正常组(12只)和造模组(24只),造模途中死亡1只,取正常组、造模组大鼠各2只检测肾脏结构,确定造模成功,然后再随机分为模型组(11只)和益肾通络方组... 详细信息

目的:探讨益肾通络方对膜性肾病大鼠足细胞的影响及作用机制。方法:将36只SD大鼠随机分为正常组(12只)和造模组(24只),造模途中死亡1只,取正常组、造模组大鼠各2只检测肾脏结构,确定造模成功,然后再随机分为模型组(11只)和益肾通络方组(10只),各组大鼠均分别给对应药物4周后,测定其24h尿白蛋白排泄量(UTP),及血清中总胆固醇(TC)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)的水平;留取肾脏组织,光镜下观察肾小球基底膜增厚及"钉突"形成情况,电镜下观察足细胞结构情况,免疫荧光法检测IgG的沉积状态;RT-qPCR法检测肾组织中MDM2 mRNA、miR-29a的表达情况;Western Blot检测肾组织中MDM2、Nephrin及Podocin、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠UTP、TC均显著上升(P<0.05),TP、ALB均显著下降(P<0.05);病理检测示肾组织病理明显改变;肾组织中miR-29a mRNA表达下降(P<0.05),MDM2 mRNA表达上升(P<0.05),MDM2、Bax、Caspase-3蛋白表达上调(P<0.05),Bcl-2、Nephrin、Podocin蛋白表达下调(P<0.05)。与模型组比较,益肾通络方组UTP、TC均显著下降(P<0.05),TP、ALB均显著上升(P<0.05);肾小球基底膜增厚程度减轻,"钉突"减少,足细胞内足突融合缓解,IgG荧光强度减弱;肾组织中miR-29a mRNA表达上升(P<0.05),MDM2 mRNA表达下降(P<0.05),MDM2、Bax、Caspase-3蛋白表达下调(P<0.05),Bcl-2、Nephrin、Podocin蛋白表达上调(P<0.05)。结论:益肾通络方可基于miR-29a/MDM2信号通路,调节Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达水平,进而抑制足细胞的凋亡,从而延缓膜性肾病进展。

关键词：益肾通络方膜性肾病足细胞 miR-29a MDM2

基于mTORC1/p70S6K通路探讨大黄泄浊方对慢性肾衰竭大鼠自噬和凋亡的影响

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时珍国医国药 2023年第2期34卷 321-324页

作者：吴振华曹雯萱檀淼高飞杨凤文陈素枝任美芳袁国栋檀金川河北中医学院河北石家庄050200 河北省中医院河北石家庄050011 河北医科大学第四医院河北石家庄050000 北京中医药大学东直门医院北京100700

目的观察大黄泄浊方对5/6肾切除大鼠mTORC1/p70S6K信号通路蛋白的影响,进一步研究其在保护肾脏功能可能的作用机制。方法随机将90只雄性SD大鼠分为假手术组与造模组,其中假手术组15只,造模组75只。造模组大鼠采用5/6肾切除方法建立慢性... 详细信息

目的观察大黄泄浊方对5/6肾切除大鼠mTORC1/p70S6K信号通路蛋白的影响,进一步研究其在保护肾脏功能可能的作用机制。方法随机将90只雄性SD大鼠分为假手术组与造模组,其中假手术组15只,造模组75只。造模组大鼠采用5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭模型,造模成功后,将75只大鼠随机分为模型组、尿毒清颗粒组(2.60g·kg^(-1))、大黄泄浊方低剂量组(6.825g·kg^(-1))、大黄泄浊方中剂量组(13.650g·kg^(-1))和大黄泄浊方高剂量组(27.30g·kg^(-1)),每组均为15只。连续给药8周后,检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、β2-微球蛋白(β2-MG)含量;Masson染色光镜下观察肾组织的病理形态改变;免疫组织化学(IHC)检测Bcl-2、cleaved-caspase3、BAX、Beclin-1、LC3、P62蛋白表达;蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测p-mTORC1、mTORC1、p-p70S6K、p70S6K蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠β2-MG、BUN、SCr含量显著增高(P<0.05);肾脏病理损害加重;cleaved-caspase3、BAX、p-mTORC1/mTORC1、p-p70S6K/p70S6K、P62蛋白表达明显升高(P<0.05);Bcl-2、Beclin-1、LC3明显降低(P<0.05);与模型组对比,各给药组β2-MG、BUN、SCr含量显著降低(P<0.05);肾脏病理损害均有不同程度减轻;cleaved-caspase3、BAX、p-mTORC1/mTORC1、p-p70S6K/p70S6K、P62蛋白表达明显下降(P<0.05);Bcl-2、Beclin-1、LC3明显升高(P<0.05),其中以大黄泄浊方高剂量组改善明显。结论大黄泄浊方能有效诱导CRF大鼠细胞自噬而抑制凋亡,发挥保护和改善CRF肾脏功能的作用,其机制可能与调控mTORC1/p70S6K通路有关。

关键词：慢性肾衰竭大黄泄浊方 mTORC1/p70S6K信号通路自噬凋亡

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檀金川教授治疗慢性肾小球肾炎的临床经验

天津中医药 2022年第5期39卷 632-636页

作者：张尧陈素枝高飞杨冰檀金川河北中医学院研究生院石家庄050000 河北省中医院肾病一科石家庄050000

慢性肾小球肾炎是临床常见的慢性肾脏疾病,随着病程进展,最终可发展至终末期肾脏疾病,对患者生命健康造成严重威胁。檀金川教授认为,肺失通调,脾失健运,肝失疏泄,肾失开阖,三焦气化失司,是该病的基本病机,肺、脾、肝、肾4脏为基本病位,... 详细信息

慢性肾小球肾炎是临床常见的慢性肾脏疾病,随着病程进展,最终可发展至终末期肾脏疾病,对患者生命健康造成严重威胁。檀金川教授认为,肺失通调,脾失健运,肝失疏泄,肾失开阖,三焦气化失司,是该病的基本病机,肺、脾、肝、肾4脏为基本病位,其中以脾肾为主,尤以肾为关键,因久病入络,所以又以肾络为重点,湿、热、痰、瘀为基本病理产物。治疗上强调辨病诊治、辨证诊治和阶段论治,辨病治疗结合西医辨病和中医辨病,辨证治疗中强调无症辨证、病初辨本证、病进辨变证、病中辨并发症、肾脏病理辨证,阶段论治中应该审证求因,动静结合,从激素和免疫抑制剂使用前、使用中和病久3个阶段分别结合临床实际进行治疗。

关键词：慢性肾小球肾炎临床经验病证结合阶段论治檀金川

阶段性观察益肾通络方治疗PLA2R-Ab阳性膜性肾病患者的临床疗效及PLA2R-Ab与蛋白尿的关系

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中国中西医结合肾病杂志 2019年第5期20卷 428-431页

作者：陈素枝陈文军孔怡然李跃林檀金川天津中医药大学天津300193 河北省石家庄市中医院石家庄050000 河北中医学院石家庄050200

目的:阶段性观察益肾通络方治疗PLA2R-Ab阳性的特发性膜肾病的临床疗效及PLA2R-Ab的变化,观察PLA2R-Ab与尿蛋白的关系。方法:方法:60例肾穿刺活检为膜性肾病(MN)、病理分期Ⅰ期~Ⅱ期、PLA2R-Ab阳性、肾功能正常,并排除继发性因素的MN患... 详细信息

目的:阶段性观察益肾通络方治疗PLA2R-Ab阳性的特发性膜肾病的临床疗效及PLA2R-Ab的变化,观察PLA2R-Ab与尿蛋白的关系。方法:方法:60例肾穿刺活检为膜性肾病(MN)、病理分期Ⅰ期~Ⅱ期、PLA2R-Ab阳性、肾功能正常,并排除继发性因素的MN患者随机分为对照组和观察组,各30例。对照组给予基础治疗(激素联合雷公藤多苷片、ACEI/ARB、降脂、利尿、抗凝),观察组在对照组基础上服用益肾通络方。每月检测一次PLA2R-Ab、24h尿蛋白定量(24hUTP)、血常规、血生化(Alb、AST、ALT、TC、BUN、Scr)。观察6个月。结果:有效率比较,第3个月,观察组83.3%VS对照组53.3%(P<0.05);第6个月,观察组90.0%VS对照组63.3%(P<0.05)。两组PLA2R-Ab均在第1个月就有明显下降(P<0.01),且观察组较对照组下降更明显(P<0.05);两组UTP均在第1个月就有明显下降(P<0.01),但从第3个月开始观察组较对照组明显下降(P<0.01,P<0.05);观察组Alb则从第2个月就有明显上升(P<0.01),而对照组则在第4个月才有明显上升(P<0.05)。两组治疗后TC均明显下降,组间比较无明显差异;两组BUN、Scr在治疗前后均无明显变化。结论:蛋白尿的减少与抗体水平的降低相比具有时间滞后。西药基础上加用益肾通络方治疗PLA2R-Ab阳性的特发性膜肾病可以提高临床疗效,使患者更早的进入缓解期,缩短病程。

关键词： PLA2R-Ab 膜性肾病益肾通络方

用中西医结合疗法治疗原发性肾病综合征的效果观察

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当代医药论丛 2018年第4期16卷 224-225页

作者：杨凤文臧倩男陈素枝檀金川袁国栋河北省中医院河北石家庄050011 天津中医药大学天津300193 河北医科大学河北石家庄050011

目的:探讨用中西医结合疗法治疗原发性肾病综合征的效果。方法:选取某医院收治的58例原发性肾病综合征患者作为研究对象。将这些患者平均分为中西医结合组和西医组。为西医组患者使用强的松进行治疗,为中西医结合组患者使用复方丹参丸... 详细信息

目的:探讨用中西医结合疗法治疗原发性肾病综合征的效果。方法:选取某医院收治的58例原发性肾病综合征患者作为研究对象。将这些患者平均分为中西医结合组和西医组。为西医组患者使用强的松进行治疗,为中西医结合组患者使用复方丹参丸和强的松进行治疗。然后比较两组患者的临床疗效。结果:进行治疗后,中西医结合组患者24 h尿蛋白定量、血Scr的水平及不良反应的发生率均低于西医组患者(P<0.05)。中西医结合组患者血BUN的水平高于西医组患者(P<0.05)。结论:用中西医结合疗法治疗原发性肾病综合征的效果较为理想。

关键词：原发性肾病综合征强的松复方丹参滴丸中西医结合治疗

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膜性肾病中医证型与预后因素的相关性分析

中国中西医结合肾病杂志 2022年第3期23卷 204-207页

作者：陈文军陈素枝闫慧明檀金川河北省石家庄市中医院石家庄050051 河北省中医院石家庄050011

目的:分析膜性肾病(MN)患者中医证型分布特点及预后因素在中医证型中的分布差异,探讨MN患者中医证型与预后因素的可能关系。方法:对MN患者的中医证型进行评估,收集患者的性别、年龄、病理类型、有无高血压、24 h尿蛋白定量(24 h-UTP)、... 详细信息

目的:分析膜性肾病(MN)患者中医证型分布特点及预后因素在中医证型中的分布差异,探讨MN患者中医证型与预后因素的可能关系。方法:对MN患者的中医证型进行评估,收集患者的性别、年龄、病理类型、有无高血压、24 h尿蛋白定量(24 h-UTP)、血清白蛋白(Alb)、总胆固醇(TC)、肾小球滤过率(GFR)、有无肾小血管病变等预后因素相关信息,分析MN患者的中医证型分布特点并采用Logistic回归分析方法进行多因素相关分析。结果:(1)该组MN患者,本虚证各中医证型分布以脾肾气虚、脾肾阳虚为主,标实证中医证型分布以血瘀证为主。(2)本虚证24 h-UTP不同患者的中医证型分布差异存在统计学意义(P<0.05),标实证24 h-UTP、GFR及肾小血管病变情况不同患者的中医证型分布差异存在统计学意义(P<0.05)。(3)回归分析显示,24 h-UTP与脾肾气虚证呈正相关;24 h-UTP及肾小血管病变情况与血瘀证呈正相关;GFR与血瘀证呈负相关。结论:(1)MN患者的中医证型分布中,本虚证以脾肾气虚、脾肾阳虚证为主,标实证以血瘀证为主。(2)在MN患者预后相关因素中,24 h-UTP、GFR及肾小血管病变与MN患者中医证型具有相关性。

关键词：膜性肾病中医证型预后因素相关性分析

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乙型肝炎病毒相关性肾炎中医研究进展

中国中西医结合肾病杂志 2016年第1期17卷 93-94页

作者：陈文军檀金川邢晓静陈素枝康丽霞天津中医药大学天津300193 河北省中医院石家庄050011

乙型肝炎病毒（HBV）感染是全球范围内重要的公共卫生课题之一-[1],估计全球范围内约有3.5亿慢性HBV携带者。1971年Combes等第一次报道病人因输血引起肝炎并出现肾病综合征,以后乙肝病毒与肾病的研究引起医学界的极大重视。HBV-GN的临... 详细信息

乙型肝炎病毒（HBV）感染是全球范围内重要的公共卫生课题之一-[1],估计全球范围内约有3.5亿慢性HBV携带者。1971年Combes等第一次报道病人因输血引起肝炎并出现肾病综合征,以后乙肝病毒与肾病的研究引起医学界的极大重视。HBV-GN的临床表现多种多样-[2],主要表现为肾炎综合征或肾病综合征,起病多缓慢隐匿,伴有不同程度的水肿和疲乏无力,几乎所有的患者均可出现蛋白尿或镜下血尿,

关键词：中医研究进展肾病综合征肾炎综合征乙型肝炎病毒乙肝病毒携带者免疫功能镜下血尿公共卫生二至丸

益肾通络方抑制EGFR及下游信号途径对膜性肾病大鼠肾脏保护作用的研究

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中草药 2021年第16期52卷 4913-4920页

作者：陈素枝杨凤文李永章宋蕾王广建檀淼袁国栋杨冰张尧赵方檀金川河北省中医院河北石家庄050011 天津中医药大学天津301617 河北医科大学第四医院河北石家庄050011 河北中医学院河北石家庄050200

目的探究益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及足细胞和肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法SD大鼠尾ⅳ阳离子牛血清白蛋白(cationic bovine serum albumin,C-BSA)建立膜性肾病大鼠模... 详细信息

目的探究益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及足细胞和肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法SD大鼠尾ⅳ阳离子牛血清白蛋白(cationic bovine serum albumin,C-BSA)建立膜性肾病大鼠模型,给予益肾通络方和盐酸贝那普利进行干预,检测各组大鼠24 h尿蛋白(urinetotal protein,UTP)、血清中白蛋白(albumin,ALB)和总胆固醇(total cholesterol,TC)水平;观察各组大鼠肾组织病理变化;采用TUNEL法检测各组大鼠肾组织足细胞和肾小管上皮细胞凋亡情况;采用免疫组化法检测各组大鼠肾组织磷酸化EGFR(p-EGFR)和剪切型半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)的表达情况;采用Western blotting法检测各组大鼠肾组织p-EGFR、Ras相关的C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate l,Racl)、c-jun、c-fos、FasL和cleaved Caspase-3蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠24 h UTP以及血清中TC水平明显升高(P<0.01),ALB水平显著降低(P<0.01);肾小球基底膜、足细胞结构发生改变;肾组织足细胞和肾小管上皮细胞凋亡明显增多(P<0.01);肾组织p-EGFR、Racl、c-jun、c-fos、FasL和cleaved Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,益肾通络方中、高剂量组大鼠24 h UTP以及血清中TC水平明显降低(P<0.01),ALB水平明显升高(P<0.01);肾组织病理损伤得到改善;肾组织足细胞和肾小管上皮细胞凋亡明显减少(P<0.05、0.01),肾组织p-EGFR、Racl、c-jun、c-fos、FasL和cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.05、0.01)。结论益肾通络方可以减轻膜性肾病大鼠肾脏病理损伤,抑制肾组织足细胞和肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与抑制EGFR及下游Racl/c-jun、c-fos/FasL信号途径有关。

关键词：益肾通络方膜性肾病表皮生长因子受体足细胞肾小管上皮细胞凋亡