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作者：陈秋燃扬州大学

学位级别：硕士

我国是毛兔产销大国,随着兔毛纺织技术的革新,生活水平的提高,目前约60%-70%兔毛用于国内市场需求,国内市场对其需求量越来越大。深入了解毛兔毛囊发育的控制因素,对我国毛兔产业的发展具有重要意义。毛囊是毛兔兔毛生长发育的基础,对... 详细信息

我国是毛兔产销大国,随着兔毛纺织技术的革新,生活水平的提高,目前约60%-70%兔毛用于国内市场需求,国内市场对其需求量越来越大。深入了解毛兔毛囊发育的控制因素,对我国毛兔产业的发展具有重要意义。毛囊是毛兔兔毛生长发育的基础,对兔毛的生长具有调控作用。研究发现有一些细胞因子可以调控毛发生长,如胰岛素生长因子-1（Insulion-Like Growth Factor-1,IGF-1）和表皮生长因子（Epidermal Growth Factor,EGF）,但其对毛兔毛囊发育的调节作用有待进一步研究。基于此,我们通过体外分离培养毛兔毛囊器官,确定毛兔毛囊最适培养环境,并利用毛囊器官,选出EGF与IGF-1联合使用的最佳培养浓度。然后皮下注射IGF-1与EGF联合因子,观察联合因子对毛囊发生、生长的影响,以期为毛兔毛囊发育提供理论基础,助力我国毛兔产业的发展。1、不同体外培养条件对毛兔毛囊体外培养的影响采集毛兔触须毛囊,分离多余组织和脂肪,保留完整毛囊,构建触须毛囊器官培养模型,分别利用Williams E、DMEM、MEM三种不同培养基进行培养,结果发现Williams E和MEM培养基分别培养的毛囊在第2天与第4天时,毛囊生长速度极显著大于第6天（P＜0.01）,而DMEM组显著大于第六天（P＜0.05）。在第2天和第6天Williams和DMEM组生长速度显著大于MEM组,第4天Williams组生长速度显著大于DMEM和MEM组。整个体外培养周期中,WilliamsE组在3组中生长最快,平均生长速度显著高于DMEM和MEM组（P＜0.05）。毛囊HE染色结果显示3组毛囊结构存在差异,Williams E组和DMEM毛囊结构完整清晰无明显差异,而MEM组毛囊开始萎缩,内根鞘向前方移动,并且与外根鞘分离,毛囊变得相对较短圆。进一步利用PCNA免疫荧光染色发现,PCNA在Williams E组的毛乳头部阳性表达清晰可见,阳性表达明显高于DMEM组和MEM组,DMEM组仅有毛囊外根鞘有微弱表达,MEM组基部基本无明显表达,说明Williams E组的毛囊增殖能力最强。以上结果表明,与其他两组相比,Williams E培养基更适合毛兔毛囊体外生长。2、IGF-1与EGF因子对毛兔毛囊体外生长的影响设置不同浓度的IGF-1因子和EGF因子,对照组不加因子,利用CCK-8检测毛乳头细胞的增殖能力,筛选IGF-1与EGF因子单独使用的最适浓度,结果发现IGF-1在浓度为10 ng/mL时毛乳头细胞增殖最快,EGF在浓度20 ng/mL时毛乳头细胞增殖最快,进一步发现2种因子联合使用（10 ng/mLIGF-1+20 ng/mL EGF）的效果极显著高于因子单独使用（P＜0.01）。根据以上结果,将联合因子加入体外毛囊培养基中,并设置对照组,发现联合因子组毛囊毛发生长长度高于对照组（P＜0.05）。生长速率结果表明,联合因子组与对照组在第4天差异显著（P＜0.05）,两组毛囊在第4天生长速度极显著大于第6天（P＜0.01）。加入IGF-1和EGF因子后刺激毛囊生长作用与对照组相比更明显。培养4天后毛囊HE染色发现两组结构均保持完整性,无明显区别。利用PCNA免疫荧光染色发现,培养四天的两组毛囊毛球部均有PCNA表达,但联合因子组毛乳头外表达更强,说明联合因子组的毛囊增殖能力强,与对照组相比,更能促进毛发生长。因此,兔毛囊体外培养可优先考虑在基础培养液中联合添加IGF-1和EGF,这两种因子浓度分别为10 ng/mL IGF-1、20ng/mLEGF。3、IGF-1与EGF因子联用对毛兔毛发生长的影响为了进一步分析IGF-1与EGF因子联用对毛兔毛发生长的影响,进行了毛兔活体注射实验。联用因子组从第8天毛兔毛发开始出现,对照组第10天毛发开始出现,对照组比联合因子组明显延迟,说明联合因子处理组毛兔背部进入毛发开始出现的时间早于对照组。HE染色结果显示在同一处理时期,与联合因子组相比,对照组毛囊密度更为稀疏。进一步检测两组在不同处理时期皮肤组织中毛囊发育相关基因表达量（LEF1、IGF-1、CCND1、WINT2、EGF、IGF-1和FGF2）,结果发现处理后第7天,联合因子处理组LEF1和WINT2的表达水平极显著高于对照组（P＜0.01）,IGF-1和EGF的表达水平显著高于对照组（P＜0.05）,其他基因的表达水平不显著（P＞0.05）。在处理后第14天,联合因子组CCND1、WINT2、IGF-1的表达水平极显著高于对照组（P＜0.01）,LEF1和EGF显著高于对照组（P＜0.05）。当处理第21天时,两组毛发生长均覆盖表皮,联合因子组只有LEF1和EGF显著大于对照组（P＜0.05）。当毛囊形成时在7、14天PCNA开始表达于毛囊,

关键词：毛兔毛囊体外培养 IGF-1 EGF

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喜炎平注射液致顽固性呃逆1例

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中国现代应用药学 2020年第18期37卷 2279-2280页

作者：陈秋燃王南刘敏宋燕青吉林大学第一医院药学部长春130021 吉林大学第一医院手足外科长春130021

1病例资料患者,男,47岁,因"发热伴咳嗽、咳痰4 d",于2019年4月3日收住入院。患者于4 d前无明显诱因出现发热伴咳嗽、咳痰,最高体温达39.2℃,咳白色黏痰,无寒战,无痰中带血,无异味,于当地诊所静滴"头孢类和阿奇霉素"后未见好转,患者为求... 详细信息

1病例资料患者,男,47岁,因"发热伴咳嗽、咳痰4 d",于2019年4月3日收住入院。患者于4 d前无明显诱因出现发热伴咳嗽、咳痰,最高体温达39.2℃,咳白色黏痰,无寒战,无痰中带血,无异味,于当地诊所静滴"头孢类和阿奇霉素"后未见好转,患者为求进一步诊治就诊于吉林大学第一医院。患者既往高血压病病史7年,否认食物、药物过敏史。

关键词：喜炎平注射液顽固性呃逆不良反应

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甲磺酸帕珠沙星氯化钠注射液与质子泵抑制剂配伍稳定性研究

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中国现代应用药学 2020年第18期37卷 2185-2189页

作者：刘晓月李月阳陈秋燃高欢吉林大学第一医院药学部长春130000

目的分析甲磺酸帕珠沙星氯化钠注射液与质子泵抑制剂的配伍稳定性。方法室温(25℃)条件下考察甲磺酸帕珠沙星氯化钠注射液分别与注射用奥美拉唑钠、注射用泮托拉唑钠和注射用兰索拉唑配伍后放置0,2,4,6,8h的外观及pH值变化;采用HPLC和... 详细信息

目的分析甲磺酸帕珠沙星氯化钠注射液与质子泵抑制剂的配伍稳定性。方法室温(25℃)条件下考察甲磺酸帕珠沙星氯化钠注射液分别与注射用奥美拉唑钠、注射用泮托拉唑钠和注射用兰索拉唑配伍后放置0,2,4,6,8h的外观及pH值变化;采用HPLC和分光光度法测定含量和溶血率。结果甲磺酸帕珠沙星氯化钠注射液与注射用奥美拉唑钠、注射用泮托拉唑钠和注射用兰索拉唑配伍后立即发生颜色变化并且随着配伍时间延长逐渐形成沉淀,配伍后溶液的pH值有明显变化,甲磺酸帕珠沙星氯化钠注射液的含量分别降为83%,76%和83%,溶血率明显增加。结论甲磺酸帕珠沙星氯化钠注射液与注射用奥美拉唑钠、注射用泮托拉唑钠和注射用兰索拉唑存在配伍禁忌,因此甲磺酸帕珠沙星氯化钠注射液不能与质子泵抑制剂类药物同容器配制,如需联合使用时应在使用前后冲洗输液管路。

关键词：配伍稳定性甲磺酸帕珠沙星氯化钠注射液质子泵抑制剂溶血率用药安全

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獭兔Slc7a11基因过表达对黑色素相关基因的影响及SNP检测

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四川农业大学学报 2019年第4期37卷 550-556页

作者：陈秋燃李佳丽刘明周娟陈阳吴信生扬州大学动物科学技术学院/农业与农产品安全国际合作联合实验室

【目的】为了深入探究Slc7a11基因对獭兔毛色生成的影响。【方法】运用直接测序结合PCR-SSCP分子标记技术检测163只獭兔Slc7a11基因12个外显子的多态性,同时通过构建pEGFP-N1-Slc7a11过表达载体,转染RAB-9细胞,分析Slc7a11过表达对黑色... 详细信息

【目的】为了深入探究Slc7a11基因对獭兔毛色生成的影响。【方法】运用直接测序结合PCR-SSCP分子标记技术检测163只獭兔Slc7a11基因12个外显子的多态性,同时通过构建pEGFP-N1-Slc7a11过表达载体,转染RAB-9细胞,分析Slc7a11过表达对黑色素生成基因的影响。【结果】兔Slc7a11基因CDS区序列1 509 bp,经预测为碱性不稳定疏水性蛋白;多态性分析发现,Slc7a11基因在4种毛色的獭兔群体中不存在SNP位点,说明Slc7a11在獭兔群体中非常保守;进一步功能研究发现Slc7a11过表达后,黑色素生成相关基因MC1R、SLC24A5相对于阴性对照组,试验组表达量显著增加(P<0.05)。【结论】Slc7a11基因可影响黑色素生成相关基因的表达进而影响黑色素形成。

关键词：獭兔 Slc7a11 多态性过表达黑色素

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亚甲基水杨酸杆菌肽对断奶仔兔血清与肠道抗氧化指标的影响

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云南农业大学学报（自然科学版） 2020年第2期35卷 276-281页

作者：刘明朱杰李佳丽陈秋燃周娟陈阳潘雨来吴信生扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏省金陵种兔场江苏南京211103

【目的】探讨亚甲基水杨酸杆菌肽对断奶仔兔血清和肠道组织抗氧化指标的影响。【方法】将300只35日龄断奶的新西兰白兔根据不同饲粮添加成分,分为5个处理组,分别是亚甲基水杨酸杆菌肽(BMD)高、中、低剂量添加组(100、50、25 mg/kg),杆... 详细信息

【目的】探讨亚甲基水杨酸杆菌肽对断奶仔兔血清和肠道组织抗氧化指标的影响。【方法】将300只35日龄断奶的新西兰白兔根据不同饲粮添加成分,分为5个处理组,分别是亚甲基水杨酸杆菌肽(BMD)高、中、低剂量添加组(100、50、25 mg/kg),杆菌肽锌(BZ)对照组(50 mg/kg)、空白对照组(无添加)。饲喂35 d后测定血液和肠道中抗氧化功能相关指标。【结果】与空白对照组相比,BMD和BZ显著提高了血清和肠道中总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性(P0.05)。【结论】日粮中添加BMD可提高断奶仔兔的抗氧化功能,且以100 mg/kg的添加量最适宜。

关键词：亚甲基水杨酸杆菌肽断奶仔兔血清肠道抗氧化指标

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獭兔线粒体基因组全序列的测定与分析

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中国兽医学报 2020年第4期40卷 823-827页

作者：周娟李佳丽陈秋燃刘明陈阳吴信生扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009

通过PCR扩增和TA克隆技术,获得獭兔线粒体基因组全序列,序列全长17361 bp,碱基组成分别为31.48%A、26.66%C、13.58%G、28.28%T。獭兔线粒体基因组包含13个蛋白质编码基因、2个rRNA基因、22个tRNA基因和1个非编码控制区(D-loop)。在这37... 详细信息

通过PCR扩增和TA克隆技术,获得獭兔线粒体基因组全序列,序列全长17361 bp,碱基组成分别为31.48%A、26.66%C、13.58%G、28.28%T。獭兔线粒体基因组包含13个蛋白质编码基因、2个rRNA基因、22个tRNA基因和1个非编码控制区(D-loop)。在这37个编码的基因中,由轻链(L链)编码的基因9个,它们是ND6基因和8个tRNA基因,其余28个均由重链(H链)编码。其线粒体基因组成与其他兔属动物线粒体全基因组的排列顺序一致,表明兔属动物线粒体DNA进化上有较高的保守性。

关键词：獭兔线粒体基因组序列分析

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新西兰白兔毛囊体外培养条件优化及其增殖能力的研究

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中国畜牧杂志 2022年第4期58卷 172-175页

作者：孙少宁陈秋燃李佳丽张琛靳荣帅白少成姚凡陈阳吴信生扬州大学动物科学技术学院江苏扬州225009 农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州225009

为建立新西兰白兔毛囊体外培养模型,探究其最适的培养环境,本实验选用2月龄新西兰白兔,采集触须毛囊,分离组织和脂肪,保留完整毛囊。将完整无损的毛囊放入24孔板,每孔1根,加入William’s E、DMEM、MEM3种不同培养基,每组6个重复,每2d在... 详细信息

为建立新西兰白兔毛囊体外培养模型,探究其最适的培养环境,本实验选用2月龄新西兰白兔,采集触须毛囊,分离组织和脂肪,保留完整毛囊。将完整无损的毛囊放入24孔板,每孔1根,加入William’s E、DMEM、MEM3种不同培养基,每组6个重复,每2d在倒置显微镜下观察毛囊毛干的生长,并利用HE和PCNA免疫荧光染色检测毛囊的形态和增殖能力。结果显示:3种培养基中毛囊毛干在体外培养4d后生长减缓,在2 d与4 d时的生长速度均大于6 d(P<0.05)。其中,William’s E组生长速度高于MEM组(P<0.05),且William’s E组生长最快。4 d时,HE染色发现William’s E组毛囊结构完整,毛乳头清晰,而此时DMEM和MEM组毛乳头已经消失。进一步用PCNA免疫荧光染色,发现Williams’E组PCNA在毛乳头阳性表达,DMEM和MEM组毛囊表达仅表达在外根鞘。因此,William’sE培养基最适宜新西兰白兔触须毛囊生长,毛乳头增殖能力最强。

关键词：新西兰白兔触须毛囊体外培养 William’s E

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运用品管圈活动降低急诊不合理处方发生率的实践

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中国药事 2018年第12期32卷 1720-1726页

作者：陈秋燃王秀秀胡雪刘鑫吉林大学第一医院长春130021

目的:运用品管圈活动降低我院急诊不合理处方发生率,促进急诊合理用药,保障患者用药安全。方法:按照品管圈十大步骤及七大手法开展活动,分别调取我院2016年8月至9月(活动前)和2016年12月至2017年1月(活动后)的急诊处方,对处方进行点评,... 详细信息

目的:运用品管圈活动降低我院急诊不合理处方发生率,促进急诊合理用药,保障患者用药安全。方法:按照品管圈十大步骤及七大手法开展活动,分别调取我院2016年8月至9月(活动前)和2016年12月至2017年1月(活动后)的急诊处方,对处方进行点评,通过所得数据对此次活动进行效果确认。结果:急诊不合理处方发生率由活动前的46.28%降低至改善后的15.17%。结论:通过开展此次活动,再次印证了品管圈是推动医疗质量持续改进的有效管理工具,在降低急诊不合理处方发生率方面效果显著,提升了药学服务质量,体现了药师的价值。

关键词：品管圈急诊不合理处方发生率医疗质量药学服务

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MLPH基因多态性位点与獭兔毛色的关联性分析

MLPH基因多态性位点与獭兔毛色的关联性分析

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中国畜牧兽医学会养兔学分会第二届学术交流大会

作者：李佳丽陈阳刘明陈秋燃周娟吴信生扬州大学动物科学与技术学院

本试验采用PCR产物直接测序法,分析了黑色、白色和青紫蓝色3种毛色60只獭兔MLPH基因的多态性,探究MLPH基因SNP位点及獭兔毛色关联性,为阐明獭兔毛色调控机理提供科学依据,同时为獭兔的定向化培育分子标记辅助选择提供重要依据。试验随... 详细信息

本试验采用PCR产物直接测序法,分析了黑色、白色和青紫蓝色3种毛色60只獭兔MLPH基因的多态性,探究MLPH基因SNP位点及獭兔毛色关联性,为阐明獭兔毛色调控机理提供科学依据,同时为獭兔的定向化培育分子标记辅助选择提供重要依据。试验随机抽取同批出生、健康的5月龄獭兔共60只(其中青紫蓝色獭兔20只、白色獭兔20只、黑色獭兔20只),每只獭兔剪取一小块耳组织提取DNA。根据Ensembl上公布的MLPH基因序列设计外显子特异性引物,PCR产物送华大基因公司测序。试验数据使用DNASTAR Lasergene 8.0将序列进行比对。采用直接计数法计算多态性MLPH的基因型和等位基因频率,探究MLPH基因多态性位点的遗传结构。用卡方检验评估每个SNP的Hardy-Weinberg平衡。用Haploview4.2软件对MLPH基因13个突变位点进行单倍型的构建,探究单倍型与表型性状的关联性。结果表明:在3种毛色獭兔群体中共检测出13个SNPs,分别存在于5号、8号、9号、12号外显子中。其中,5号外显子的C18169A、T18173C、C18205G位点,9号外显子的A28529G、C28554T位点及12号外显子的C31682G位点(χ>5.99,P0.8,进一步证明了这13个位点间处于紧密的连锁不平衡状态。结论:本研究MLPH在3种毛色獭兔群体中共检测出13个SNPs,而3种毛色獭兔群体的主要单倍型不尽相同,推测13个突变位点和5个主要单倍型是区分青紫蓝、黑色和白色獭兔的重要功能位点和单倍型,为獭兔的定向化培育提供有价值的分子标记。

关键词：獭兔 MLPH基因 SNP 毛色

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我院儿科急诊处方雾化吸入型糖皮质激素用药分析

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儿科药学杂志 2019年第5期25卷 32-35页

作者：胡雪张月明陈秋燃刘鑫吉林大学第一医院吉林长春130021

目的:了解我院儿科急诊处方中雾化吸入型糖皮质激素用药情况,为临床合理用药提供参考。方法:从我院2017年6-11月的儿科急诊处方中,每月随机抽取雾化吸入处方3 000张,共计1.8万张。根据就诊卡号筛除同一患儿连续多日用药的重复处方,得到6... 详细信息

目的:了解我院儿科急诊处方中雾化吸入型糖皮质激素用药情况,为临床合理用药提供参考。方法:从我院2017年6-11月的儿科急诊处方中,每月随机抽取雾化吸入处方3 000张,共计1.8万张。根据就诊卡号筛除同一患儿连续多日用药的重复处方,得到6 327张处方,选取其中应用雾化吸入型糖皮质激素的处方5 881张(93.0%),对处方患儿年龄、药品名称、用法用量、联合用药、临床诊断进行统计分析。结果:5 881张处方中,使用吸入用布地奈德混悬液的处方4 133张(70.3%),吸入用丙酸倍氯米松混悬液的处方1 748张(29.7%);雾化吸入型糖皮质激素主要应用于6岁以下患儿(75.2%),但未见用于新生儿;单用糖皮质激素雾化的处方仅72张(1.2%),二联用药处方3 442张(58.5%),三联用药处方2 367张(40.3%);明确使用吸入型糖皮质激素治疗哮喘或支气管哮喘的处方682张(11.6%),超说明书适应证用药处方5 199张(88.4%)。结论:我院儿科急诊处方中雾化吸入糖皮质激素广泛应用于治疗小儿呼吸系统疾病,联合用药普遍存在,用药符合治疗指南。超适应证用药普遍存在,有循证医学证据支持,属于合理超说明书用药,但亦存在小部分不合理超说明书用药情况。

关键词：儿科雾化吸入糖皮质激素用药分析

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