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表皮干细胞向汗腺细胞分化的表型改变及其通路机制研究

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中国修复重建外科杂志 2016年第2期30卷 245-250页

作者：陈甫寰岳晓彤宋慧锋柴家科何秀叶王统民刘玲英解放军总医院第一附属医院烧伤整形科北京100048

目的探讨表皮干细胞(epidermal stem cells,ESCs)诱导分化为汗腺细胞(sweat gland cells,SGCs)过程中表型的改变及其通路的调控机制。方法取健康成人包皮,采用中性蛋白酶消化后高浓度Ⅳ型胶原黏附法分离培养获得ESCs,行β_1整合素、角蛋... 详细信息

目的探讨表皮干细胞(epidermal stem cells,ESCs)诱导分化为汗腺细胞(sweat gland cells,SGCs)过程中表型的改变及其通路的调控机制。方法取健康成人包皮,采用中性蛋白酶消化后高浓度Ⅳ型胶原黏附法分离培养获得ESCs,行β_1整合素、角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)及p63免疫荧光染色法鉴定;取健康成人全层皮肤,采用Ⅱ型胶原酶消化法分离提取汗腺组织,体外增殖培养SGCs,行CK7、CK18、CK19和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)免疫荧光法鉴定。取第2代ESCs分为4组:A组将ESCs及SGCs两种细胞通过Ttranswell共培养系统共培养,B组通过单纯添加汗腺上清液培养ESCs,C组在A组基础上加入浓度为60 ng/mL的EGF,D组在A组基础上加入浓度为10 mmol/L的PD98059。分别通过倒置相差显微镜进行细胞形态学观察、流式细胞术检测ESCs表型阳性率及Western blot检测分化过程中的信号通路机制。结果经细胞形态学观察及免疫荧光染色鉴定提示培养细胞为ESCs和SGCs。倒置相差显微镜观察示,A、C、D组培养后细胞形态变化相似,9 d后细胞开始出现扁平多角形结构改变;B组形态变化较慢培养12 d后与其他3组结构相似。流式细胞术结果示,与B组比较,A组Transwell共培养系统共培养后,ESCs的β_1整合素阳性率显著下调、CEA阳性率显著上调(P<0.05);C组加入EGF可降低共培养系统中ESCs的β_1整合素下调和CEA上调,D组加入PD98059可增强共培养系统中ESCs的β_1整合素下调和CEA上调,A、C、D组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测示,4组均有较高水平细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)表达,但B组明显低于其他3组(P<0.05);磷酸化-ERK表达A组最高、C组最低,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论处于SGCs生长环境中时,通过Transwell共培养系统共培养,ESCs可经诱导分化为SGCs,其表型发生相应改变;通过对丝裂原活化蛋白激酶/ERK通路的控制,可以调节ESCs的分化方向和程度。

关键词：皮肤表皮干细胞汗腺细胞细胞分化表型信号通路

血小板衍生生长因子-C对人毛乳头细胞生物学活性的影响

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中华整形外科杂志 2016年第3期32卷 215-220页

作者：岳晓彤陈甫寰何秀叶宋慧锋王统民郭希民钱智勇中国人民解放军总医院第一附属医院烧伤整形科、全军烧伤研究所北京100048 军事医学科学院

目的观察血小板衍生生长因子-C（PDGF-C）对体外培养的人毛乳头细胞生物学作用的影响。方法取整形外科除皱患者所弃头皮分离培养毛乳头，免疫荧光细胞染色法鉴定碱性磷酸酶在人毛乳头细胞的表达，CCK-8法检测浓度分别为0、10、20、30、4... 详细信息

目的观察血小板衍生生长因子-C（PDGF-C）对体外培养的人毛乳头细胞生物学作用的影响。方法取整形外科除皱患者所弃头皮分离培养毛乳头，免疫荧光细胞染色法鉴定碱性磷酸酶在人毛乳头细胞的表达，CCK-8法检测浓度分别为0、10、20、30、40ng／ml的PDGF—C，在0、1、2、3、4、5、6d7个时间点对体外培养毛乳头细胞增殖的影响，绘制细胞生长曲线。流式细胞仪分析最适合浓度下人毛乳头细胞的细胞周期变化。Transwell细胞迁移实验及细胞划痕实验测定PDGF—C对毛乳头细胞迁移、趋化能力。结果碱性磷酸酶在人毛乳头细胞中呈阳性表达。PDGF—C在0～40ng/ml范围内，能明显促进人毛乳头细胞的增殖，并成剂量依赖关系，对人毛乳头细胞的促增殖作用在30ng／ml达高峰，差异有统计学意义（P〈0．05），在PDGF-C为30ng／ml条件下体外培养的人毛乳头细胞，处于S期细胞的比例较对照组显著增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。PDGF-C组相对于对照组向划痕处迁移细胞数明显增多。PDGF-C组向Transwell小室下面迁移细胞数多于对照组，2组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。PDGF-C组碱性磷酸酶活性能力增高，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PDGF—C可促进体外培养的人毛乳头细胞的增殖、迁移及诱导能力。

关键词：血小板衍生生长因子-C 毛乳头细胞细胞增殖细胞运动

下颌骨外板矢状劈开自体骨充填术矫正半侧颜面短小

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中华整形外科杂志 2024年第3期40卷 249-257页

作者：归来牛峰俞冰刘剑锋陈莹付茜徐史兴乔嘉靳琦贺宇梁雪冰崔蕾陈甫寰陈琪中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院颅颌面外科北京100144

目的探讨采用矢状劈开患侧下颌骨外板并植入健侧切取的下颌骨外板修复重建半侧颜面短小的新方法。方法回顾性分析2006年3月至2023年3月,中国医学科学院整形外科医院颅颌面外科收治的半侧颜面短小患者临床资料。术前根据临床表现和影像... 详细信息

目的探讨采用矢状劈开患侧下颌骨外板并植入健侧切取的下颌骨外板修复重建半侧颜面短小的新方法。方法回顾性分析2006年3月至2023年3月,中国医学科学院整形外科医院颅颌面外科收治的半侧颜面短小患者临床资料。术前根据临床表现和影像学检查结果进行诊断和手术设计。所有病例均在全身麻醉下完成手术。经口内入路将患侧下颌骨外板劈开,然后根据术前设计采取健侧适当形态和大小的下颌骨外板植入劈开的骨间隙并采用钛合金小夹板予以坚强内固定。术后随访患者的并发症发生、面部形态改善情况及患者对手术效果满意度,满意度评分为1~5分,分数越高表示越满意。在术前、术后即刻和术后远期(末次)随访时拍摄照片并分析畸形严重程度。将患者术前、术后即刻、术后远期随访CT数据以Dicom格式导入Surgicase Proplan医学三维图像工作站后,利用Segmentation功能重建下颌骨,测量术前、术后即刻和术后远期随访的下颌骨厚度,对其测量值比较采用重复测量方差分析,多重比较采用LSD检验;用多样本Kruskal-Wallis秩和检验对畸形矫正外观满意度评分进行统计分析,以P0.05)。结论下颌骨外板矢状劈开符合下颌骨解剖学特点并为自体骨的植入和愈合提供了良好条件。健侧下颌骨外板的切取,在充填患侧增加厚度的同时,缩小健侧下颌角区厚度,从而有效矫正下颌骨不对称畸形。该方法操作简单,并发症少,效果良好,是矫正半侧颜面短小的理想治疗手段之一。

关键词：下颌骨颜面发育不全下颌骨重建骨移植骨生成下颌骨外板下颌骨外板矢状劈开半侧颜面短小

氧还蛋白过氧化物2在表皮干细胞向汗腺细胞诱导分化过程中对表型改变的影响

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中华整形外科杂志 2017年第1期33卷 37-42页

作者：陈甫寰宋慧锋郭希民岳晓彤刘玲英周勇刘东华钱智勇王统民何秀叶解放军总医院第一附属医院烧伤整形科、全军烧伤研究所北京100048 军事医学科学院

目的探讨氧还蛋白过氧化物2基因在表皮干细胞向汗腺细胞分化过程中对表型改变的影响。方法分离培养健康包皮获取表皮干细胞，分离培养健康成人皮肤获取汗腺细胞，以免疫荧光细胞化学染色鉴定。慢病毒载体介导的氧还蛋白过氧化物2基因分... 详细信息

目的探讨氧还蛋白过氧化物2基因在表皮干细胞向汗腺细胞分化过程中对表型改变的影响。方法分离培养健康包皮获取表皮干细胞，分离培养健康成人皮肤获取汗腺细胞，以免疫荧光细胞化学染色鉴定。慢病毒载体介导的氧还蛋白过氧化物2基因分为过表达组、敲低表皮干细胞组及空白对照组，***和WesternBlot技术分别在基因和蛋白水平检测3组的氧还蛋白过氧化物2表达。每组分别通过Transwell板与汗腺细胞共培养，流式细胞术检测共培养前、后表皮干细胞CEA和B1整合素的表达情况。结果表皮干细胞及汗腺细胞符合其相应特异性抗原。共培养前表皮干细胞B1整合素高表达（98．69±0．67）％，CEA几乎不表达（6．20±3．15）％；共培养后B1整合素表达程度：敲低组（19．30±0．53）％〈空白对照组（65．77±2．32）％〈过表达组（92．63±10．97）％；共培养后CEA表达程度：敲低组（95．43±2．36）％〉空白对照组（51．20±0．79）％〉过表达组（45．91±0．93）％。以上结果组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论氧还蛋白过氧化物2基因可抑制表皮干细胞向汗腺细胞分化的表型改变，并可提高保留其本身特异性抗原表达水平的能力。

关键词：表皮干细胞汗腺细胞分化氧还蛋白过氧化物2

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汗腺细胞在人体皮肤创伤及修复中的研究进展

中国美容医学 2015年第19期24卷 73-77页

作者：陈甫寰宋慧锋王统民何秀叶岳晓彤解放军医学院解放军总医院第一附属医院烧伤整形科北京100048

汗腺作为人体最大的器官-皮肤重要的附属器,在人体中具有重要的作用。大面积重度烧创伤患者因其皮肤均为增生性瘢痕修复,大部分汗腺结构被破坏且无法再生,失去了通过汗液蒸发来调控体温这一基本功能,严重影响了患者的生存质量。组织工... 详细信息

汗腺作为人体最大的器官-皮肤重要的附属器,在人体中具有重要的作用。大面积重度烧创伤患者因其皮肤均为增生性瘢痕修复,大部分汗腺结构被破坏且无法再生,失去了通过汗液蒸发来调控体温这一基本功能,严重影响了患者的生存质量。组织工程技术的发展为大面积皮肤缺损修复提供了新的方法,并获得了一定疗效。文章首先借助于前言文献研究,介绍汗腺细胞的基本形态,功能等;其次,探究相关干细胞向汗腺细胞的分化进展研究,详细地介绍了表皮干细胞、间充质干细胞及毛囊干细胞向汗腺细胞的分化,以及其分化的通路MAPK,ERK等介绍;然后对汗腺细胞体外培养现状进行了阐述;最后研究分析了再生汗腺细胞用于皮肤创伤与修复。

关键词：汗腺汗腺细胞表皮干细胞间充质干细胞皮肤创伤修复

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成人表皮干细胞和汗腺细胞的体外分离和培养

中国美容医学 2015年第14期24卷 36-42页

作者：陈甫寰宋慧锋岳晓彤刘玲英王统民何秀叶解放军总医院第一附属医院烧伤整形五病区北京100048

背景:人表皮干细胞和汗腺细胞的分离培养及鉴定,为探讨人表皮干细胞再生汗腺的可行性打下基础。目的:探讨体外分离培养人表皮干细胞及汗腺细胞的有效方法。方法:采集不同年龄段的泌尿外科患者术后包皮组织,充分清洗消毒后去除皮下组织,... 详细信息

背景:人表皮干细胞和汗腺细胞的分离培养及鉴定,为探讨人表皮干细胞再生汗腺的可行性打下基础。目的:探讨体外分离培养人表皮干细胞及汗腺细胞的有效方法。方法:采集不同年龄段的泌尿外科患者术后包皮组织,充分清洗消毒后去除皮下组织,将其修剪成0.5cm×0.5cm的皮片,用Ⅳ型胶原纯化、富集成人表皮干细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态:使用免疫荧光染色对成人表皮干细胞表型进行分析;CCK-8检测细胞的增殖曲线;采用胶原酶消化法从人全层无损伤皮肤中分离提取汗腺细胞,并进行扩增和鉴定。结果:倒置相差显微镜下见分离培养的成人表皮干细胞呈卵圆形、细胞之间紧密相连,呈铺路石状,免疫荧光染色显示细胞表达CK19、β1整合素。倒置相差显微镜下见汗腺细胞呈扁平多角形,表达汗腺细胞标志细胞CK7、18、19及CEA。结论:本实验结果说明胶原酶消化法分离培养成人表皮干细胞及汗腺样细胞是可行的。

关键词：汗腺细胞表皮干细胞培养分离鉴定

橘小实蝇离子型受体基因家族的全基因组注释及分析

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昆虫学报 2025年

作者：杨明寰王齐严善春刘伟王桂荣东北林业大学林学院森林生态系统可持续经营教育部重点实验室中国农业科学院(深圳)农业基因组研究所岭南现代农业科学与技术广东省实验室深圳分中心农业农村部合成生物重点实验室

[目的]离子型受体(ionotropic receptors,IRs)在昆虫的嗅觉、味觉、温度和湿度感受等方面起到重要的作用。本研究结合转录组数据在全基因组水平上对橘小实蝇Bactrocera dorsalis离子型受体基因家族进行鉴定,为进一步研究橘小实蝇离子型... 详细信息

[目的]离子型受体(ionotropic receptors,IRs)在昆虫的嗅觉、味觉、温度和湿度感受等方面起到重要的作用。本研究结合转录组数据在全基因组水平上对橘小实蝇Bactrocera dorsalis离子型受体基因家族进行鉴定,为进一步研究橘小实蝇离子型受体基因功能提供理论基础。[方法]利用隐马尔可夫模型、多重比对、基因结构域和系统发育分析在橘小实蝇全基因组中鉴定IR基因。利用TBtools对IR基因家族进行染色体定位、基因全长结构、蛋白保守基序和共线性分析,并通过EasyCodeML计算进化压。利用Hisat2及Stringtie软件计算分析橘小实蝇IR基因在外周神经组织(触角、口器、前足、中足、后足和产卵器)中的表达模式,并利用qPCR进行验证。[结果]在橘小实蝇全基因组中共鉴定获得39个候选IR基因,全部位于常染色体上,其中26个IR基因获得了转录组支持的CDS全长结构;全长IR基因共享2～8个相同的蛋白保守基序,说明其结构的保守性;28个候选IR基因与果实蝇属Bactrocera其他实蝇的IR基因存在共线性关系,其中1个IR基因受到强烈的负选择;17个候选IR共线性基因在橘小实蝇外周神经组织中表达,其中10个仅表达于触角,2个仅表达于口器,1个仅表达于产卵器。另外,1个IR基因仅在触角和雄性生殖器中表达,1个IR基因除产卵器不表达其余组织都表达,2个IR基因在所有外周神经组织中都表达,另有6个IR基因存在雌雄表达差异,其他11个候选IR基因在外周神经组织中无表达。[结论]本研究利用基因组和转录组数据对橘小实蝇离子型受体基因家族进行了系统鉴定,并对该基因家族成员的结构特征、进化关系和表达模式进行了分析,为进一步研究橘小实蝇离子型受体基因的功能提供了理论基础。

关键词：橘小实蝇离子型受体全基因组鉴定基因特征系统发育进化

江苏高邮灌区水稻需水量时频域特征及影响因素分析

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农业工程学报 2025年

作者：侯苗杨星齐斐翁松干鞠艳张雯叶王志寰江苏省水利科学研究院

水稻需水量研究面临多方面挑战，包括海量数据处理、时空尺度变化的复杂性，这使得采用单一方法难以捕捉其关键特征。因此，为解决单一方法难以捕捉水稻需水量变化的关键特征的困难，该研究提出了一种时域和频域相结合的需水量关键影响... 详细信息

水稻需水量研究面临多方面挑战，包括海量数据处理、时空尺度变化的复杂性，这使得采用单一方法难以捕捉其关键特征。因此，为解决单一方法难以捕捉水稻需水量变化的关键特征的困难，该研究提出了一种时域和频域相结合的需水量关键影响因素识别方法。利用Penman-Monteith公式，基于7个气象指数、4个环流指数，研究了高邮灌区1980—2021年水稻生育期内作物需水量（crop water requirement,ETc）和灌溉需水量（irrigation water requirement,IR）特征，并从时频域角度，综合Pearson相关性、小波、投影长度和M-K检验等分析方法，结合能量分区，提出了水稻需水量关键影响因素的分析方法，识别水稻需水量关键影响因素及变化趋势。结果表明：1)ETc和IR多年均值分别为532.88、285.04 mm/a；年际距平显示，ETc和IR在2000年由偏少向偏多转变；月度变化显示，每年8月需水量最高，10月最低；2)ETc和IR存在2个主能量区（I、II区），I区相对II区，时间尺度更大、周期更长；ETc在I、II区分别受到相对湿度、日照时长主导，其中相对湿度领先ETc约1/2周期，日照时长与ETc无相位差；IR在I、II区均受降水量主导，二者相位差均为1/2周期；3)从能量分区及相关性的分析结果来看，ETc的关键影响因素是日照时长和相对湿度，分别呈显著负相关和正相关；IR的关键影响因素是降水量，两者呈显著负相关。总体来看，ETc和IR与关键影响因素呈现了一种“主震有序、余震不断”的特点；4)ETc和IR呈现缓慢震荡上升趋势，在2005年后更为明显。研究提出的需水量关键影响因素识别方法，可为高邮灌区水稻及其他区域作物合理灌溉制度的制定提供参考。

关键词：水稻需水量时频域 Penman-Monteith公式相关性影响因素

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采用延迟补偿和曲率增广的车辆路径跟踪控制

控制与决策 2025年

作者：寇发荣宋阳阳杨朝旭李强强韩楚寰西安科技大学电气与控制工程学院西安科技大学机械工程学院

针对转向系统的延迟和道路曲率的变化会降低路径跟踪精度和稳定性问题,本文提出了一种采用延迟补偿和曲率增广的模型预测路径跟踪控制策略.首先建立1阶惯性模型表示转向系统因信号传输、机械摩擦引起的响应延迟,采集实车转角数据并利用... 详细信息

针对转向系统的延迟和道路曲率的变化会降低路径跟踪精度和稳定性问题,本文提出了一种采用延迟补偿和曲率增广的模型预测路径跟踪控制策略.首先建立1阶惯性模型表示转向系统因信号传输、机械摩擦引起的响应延迟,采集实车转角数据并利用粒子群优化算法完成转向延迟模型的参数辨识;在此基础上融合转向延迟模型到路径跟踪误差方程中以提高控制系统模型的准确性,并将曲率作为模型预测控制的增广量以减小曲率对跟踪精度的扰动;最后对所设计的控制策略进行仿真和实车试验.仿真结果表明,所设计的控制策略在大曲率转工况下的横向偏差和横摆角偏差分别降低了63.1%和7.5%,在双移线工况下的横向偏差和横摆角偏差分别降低了30.9%和43.4%,避免了转向延迟引起的转角振荡,提高了车辆路径跟踪精度和稳定性.实车试验结果表明,所设计的控制策略在双移线工况下的横向偏差和横摆角偏差分别降低了36.6%和30.4%,验证了控制策略的有效性.

关键词：智能车辆路径跟踪控制转向延迟曲率增广模型预测控制参数辨识