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代谢综合征相关新基因MSRG实时荧光PCR检测方法的建立

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解放军医学杂志 2007年第5期32卷 489-492页

作者：陈瑾歆方定志四川大学华西基础与法医学院生物化学与分子生物学教研室

目的建立测定MSRG mRNA表达量的实时荧光定量PCR检测方法,为新基因的功能研究奠定基础。方法根据MSRGcDNA序列设计荧光PCR适用的引物和探针,构建质粒标准品,建立标准曲线用于荧光PCR相对定量,检测荧光PCR方法的灵敏性、特异性和重复性... 详细信息

目的建立测定MSRG mRNA表达量的实时荧光定量PCR检测方法,为新基因的功能研究奠定基础。方法根据MSRGcDNA序列设计荧光PCR适用的引物和探针,构建质粒标准品,建立标准曲线用于荧光PCR相对定量,检测荧光PCR方法的灵敏性、特异性和重复性。荧光PCR检测不同浓度葡萄糖[5.6mmol/L(G5.6)、22mmol/L(G22)、33.3mmol/L(G33.3)]刺激人肝癌细胞株HepG2细胞MSRG的表达并与半定量RT-PCR方法进行比较。结果建立了MSRG mRNA表达的实时荧光PCR检测方法。荧光PCR检测显示G33.3、G22和G5.6组HepG2细胞MSRG表达均有显著差异,半定量RT-PCR方法检测G33.3组MSRG表达显著增加,但不能检测出G22和G5.6组间有差异。结论本实验建立的MSRG mRNA表达实时荧光PCR检测方法灵敏性、特异性和重复性较好,为MSRG功能的研究提供了一种重要手段。

关键词：代谢综合征实时荧光定量PCR 半定量RT-PCR HepG2

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芪胶膏的质量控制

中国医院药学杂志 2012年第21期32卷 1731-1734页

作者：张燕文永兰陈瑾歆曹阳黄彬韩平南充市中心医院四川南充637000 四川省中西医结合医院四川成都610072 川北医学院生物化学教研室四川南充637000 南充市食品药品检验所四川南充637000

目的:建立中药芪胶膏的质量标准。方法:采用TCL法对制剂中黄芪和三七进行定性鉴别,采用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷的含量。结果:TCL鉴别色谱特征斑点明显。黄芪甲苷进样量在1.90464～13.9674μg范围内时,质量与峰面积积分值呈良好的线性关... 详细信息

目的:建立中药芪胶膏的质量标准。方法:采用TCL法对制剂中黄芪和三七进行定性鉴别,采用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷的含量。结果:TCL鉴别色谱特征斑点明显。黄芪甲苷进样量在1.90464～13.9674μg范围内时,质量与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9991,n=6),平均加样回收率为98.52%,RSD=3.7%(n=6)。结论:所建立的TLC和HPLC-ELSD法专属性强,重复性好,可用于芪胶膏的质量控制。

关键词：芪胶膏黄芪甲苷黄芪三七质量控制

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舒肝解郁胶囊的抗抑郁作用及其机制

中成药 2018年第1期40卷 187-190页

作者：王含彦郭冬梅唐珍陈瑾歆川北医学院基础医学院生物化学教研室四川南充637000

目的研究舒肝解郁胶囊(贯叶金丝桃、刺五加)对抑郁大鼠血清5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、下丘脑-垂体-肾上腺轴(hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPA axis)分泌因子皮质酮(corticosterone,CORT)、促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)和海马区脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响,探讨该药的抗抑郁作用机制。方法采用慢性不可预见性轻度应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)结合孤养法制作抑郁大鼠模型,对各组动物的体质量和行为学表现进行评测,以确认模型有效以及各药物组的抑郁症状得到改善;采用酶联免疫法分析5-HT、CRH和CORT的水平;采用荧光定量PCR测量BDNF的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠体质量增长明显减少(P<0.01),直立次数和穿格数明显减少(P<0.01),强迫游泳静止时间显著延长(P<0.01),糖水消耗减少(P<0.01),说明抑郁模型有效;与模型组比较,氟西汀和舒肝解郁胶囊组的上述检测指标均显著改变(P<0.05或P<0.01);ELISA和qRT-PCR检测结果显示,CUMS大鼠血清5-HT水平降低(P<0.01),CRH和CORT水平升高(P<0.01),BDNF mRNA表达减少(P<0.01),使用氟西汀或舒肝解郁胶囊后,5-HT和BDNF的表达明显升高(P<0.01),CRH和CORT的水平均显著降低(P<0.01)。结论舒肝解郁胶囊具有抗抑郁作用,其作用机制可能是通过提高突触间隙单胺递质5-HT浓度进一步调节HPA轴功能,同时提升神经营养因子BDNF的水平,保护神经元功能。

关键词：舒肝解郁胶囊抑郁症 5-HT HPA轴 BDNF

黄芪多糖对人肝癌细胞HepG2凋亡相关基因表达的影响

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中国老年学杂志 2014年第1期34卷 124-126页

作者：陈瑾歆何军张娟娟蒲宇王含彦川北医学院生物化学教研室四川南充637000 齐齐哈尔医学院解剖教研室川北医学院医学影像实验室

目的研究黄芪多糖(APS)联合斑蝥酸钠(SCA)对人肝癌细胞HepG2细胞凋亡及Bcl-2基因表达的影响。方法实验分为对照组、SCA处理组、APS处理组、APS联合SCA处理组,采用免疫组化染色法(IH)观察APS联合斑蝥酸钠对HepG2细胞增殖的抑制作用,采用W... 详细信息

目的研究黄芪多糖(APS)联合斑蝥酸钠(SCA)对人肝癌细胞HepG2细胞凋亡及Bcl-2基因表达的影响。方法实验分为对照组、SCA处理组、APS处理组、APS联合SCA处理组,采用免疫组化染色法(IH)观察APS联合斑蝥酸钠对HepG2细胞增殖的抑制作用,采用Western印迹法检测各组细胞Bcl-2基因表达的变化。结果与对照组相比,各处理组HepG2细胞中Bcl-2基因表达均明显减少,APS联合SCA处理组减少最为明显。结论 APS联合SCA可明显抑制HepG2细胞Bcl-2基因的表达。

关键词：黄芪多糖人肝癌细胞HepG2 凋亡

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医学生物化学实验教学改革的思考

现代医药卫生 2009年第23期25卷 3666-3668页

作者：陈瑾歆川北医学院生物化学教研室四川南充637000

生物化学特别是分子生物技术已经渗透到医学各领域,成为疾病诊断、预防、治疗及预后判断的重要手段。在整个生物化学及医学的发展史上,实验技术的创新变革起着决定性的作用,但目前医学院校的生物化学实验教学普遍存在着许多弊端和不足,... 详细信息

生物化学特别是分子生物技术已经渗透到医学各领域,成为疾病诊断、预防、治疗及预后判断的重要手段。在整个生物化学及医学的发展史上,实验技术的创新变革起着决定性的作用,但目前医学院校的生物化学实验教学普遍存在着许多弊端和不足,极大限制了学科的发展和创新,因此,如何通过实验教学来培养学生建立良好的科研思维能力、

关键词：医学生物化学实验教学改革分子生物技术化学实验教学疾病诊断预后判断实验技术医学院校

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医学院校生物化学考试改革的思考

检验医学与临床 2010年第6期7卷 563-564页

作者：陈瑾歆川北医学院生物化学教研室四川南充637000

生物化学是医学院校各专业的重要基础课程.基础学科是医学教育的起步阶段,学生对其基本理论和技能的系统掌握和运用,为以后学习临床课程以及实际工作所需的各种知识、技能奠定坚实的基础.

关键词：生物化学考试改革

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代谢综合征发病机制的研究进展

川北医学院学报 2008年第4期23卷 409-414页

作者：陈瑾歆陈建业川北医学院基础医学院生化教研室应用技术研究所四川南充637007

随着生活水平的提高,肥胖与心血管疾病患病率的迅速增长,与之密切相关的代谢综合征(meta-bolic syndrome,MS)越来越引起人们的重视.MS是以胰岛素抵抗为基础,高血压、致动脉粥样硬化性脂代谢紊乱、空腹血糖增高和向心性肥胖等为特征的一... 详细信息

随着生活水平的提高,肥胖与心血管疾病患病率的迅速增长,与之密切相关的代谢综合征(meta-bolic syndrome,MS)越来越引起人们的重视.MS是以胰岛素抵抗为基础,高血压、致动脉粥样硬化性脂代谢紊乱、空腹血糖增高和向心性肥胖等为特征的一种多种异常聚集存在状态,代表着一系列心血管疾病危险因子的集合,是心血管疾病发生的重要因子[1].代谢综合征的临床表现复杂多变,人类对其开始深入的认识和研究较晚,1988年Reaven首先全面的描述了代谢综合征现象即心血管疾病、糖尿病等一组代谢异常在个体聚集的现象,并命名为'X综合征'[2].

关键词：代谢综合征发病机制疾病危险因子动脉粥样硬化性向心性肥胖胰岛素抵抗脂代谢紊乱心血管

内参照基因在实时荧光定量RT-PCR检测中的应用

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中国老年学杂志 2011年第14期31卷 2687-2688页

作者：陈瑾歆陈建业李云祥川北医学院生物化学教研室四川南充637000 南充市中心医院泌尿外科

目的建立测定内参照β-actin表达量的实时荧光定量RT-PCR两步法检测方法。方法根据Genbank中人β-actin保守区域序列设计荧光PCR适用的引物和探针,构建质粒标准品建立标准曲线用于荧光PCR相对定量,检测荧光PCR方法的特异性和重复性。结... 详细信息

目的建立测定内参照β-actin表达量的实时荧光定量RT-PCR两步法检测方法。方法根据Genbank中人β-actin保守区域序列设计荧光PCR适用的引物和探针,构建质粒标准品建立标准曲线用于荧光PCR相对定量,检测荧光PCR方法的特异性和重复性。结果建立了人β-actin实时荧光RT-PCR检测方法。结论本实验建立的人β-actin表达实时荧光RT-PCR两步法检测方法特异性和重复性较好,为β-actin作为定量RT-PCR中内参照基因进行人其他功能基因和病原基因表达的定量分析奠定了基础。

关键词：内参照基因实时荧光定量RT-PCR

重度子痫前期患者基因834+7G/A和+1332C/T多态性的研究

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中华医学遗传学杂志 2017年第1期34卷 45-49页

作者：叶丽燕关林波范平刘兴会刘瑞陈瑾歆朱月魏星刘宇白怀四川大学华西第二医院遗传代谢性疾病及围生医学实验室四川大学华西第二医院遗传代谢性疾病及围生医学妇产科华西医院人类疾病相关多肽研究室华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室

目的探讨生长停滞特异基因6(growth arrest specific gene 6,GAS6)多态性是否与重度子痫前期发病有关联。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法对成都地区167例重度子痫前期患者和312名健康孕妇GAS6基因834+7G/A和+1332C/T... 详细信息

目的探讨生长停滞特异基因6(growth arrest specific gene 6,GAS6)多态性是否与重度子痫前期发病有关联。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法对成都地区167例重度子痫前期患者和312名健康孕妇GAS6基因834+7G/A和+1332C/T多态性进行分析。结果 GAS6基因+1332C/T位点C、T等位基因的频率在重度子痫前期组为85.63%、14.37%,在正常孕妇组为78.04%、21.96%。+1332C/T位点基因型和等位基因频率在重度子痫前期组和正常妊娠对照组之间差异具有统计学意义(均P0.05) 。此外,重度子痫前期组和正常妊娠对照组GAS6基因两位点基因型对血压水平未见显著影响。结论中国成都地区汉族人GAS6基因+1332T等位基因与重度子痫前期发病的风险降低可能存在关联,但未见834+7G/A位点与重度子痫前期的发生有关。

关键词：妊娠高血压疾病子痫前期生长停滞特异基因6 基因多态性