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作者：陈瑞佶西北农林科技大学

学位级别：硕士

传统分类认为,小麦贮藏蛋白包括麦谷蛋白（glutenin）和麦醇溶蛋白（gliadin）2大类,小麦贮藏蛋白不仅是人类植物蛋白的重要来源,也是面粉加工品质的决定因素。近年来,随着人们对小麦品质的重视,关于小麦储藏蛋白的研究越来越广泛而深... 详细信息

传统分类认为,小麦贮藏蛋白包括麦谷蛋白（glutenin）和麦醇溶蛋白（gliadin）2大类,小麦贮藏蛋白不仅是人类植物蛋白的重要来源,也是面粉加工品质的决定因素。近年来,随着人们对小麦品质的重视,关于小麦储藏蛋白的研究越来越广泛而深入。尤其是分子生物学和基因组学研究的迅速发展,为小麦品质改良开辟了一条崭新的途径。国内外在这方面已开展了大量研究,并取得了重大进展,生物技术在改良小麦外观品质、加工品质和营养品质等方面已显示出了巨大潜力,相关研究主要集中于小麦储藏蛋白编码基因的发现、定位及转基因技术等。近年来,在小麦胚乳中发现了一类新型的蛋白质,这类蛋白质与燕麦储藏蛋白（avenin）有一定的同源性,故称为类燕麦储藏蛋白（avenin-like）。作为一种特殊的储藏蛋白类型,由于其高冗余的半胱氨酸残基含量,类燕麦储藏蛋白（avenin-like）基因的发现及克隆既是对种子储藏蛋白类型的完善,也为品质的综合改良提供更为多样化的筛选指标;同时,对该类型基因的表达及功能鉴定将为小麦育种工作提供更丰富的分子标记。Kan等经序列比对,揭示了a-型avenin-like蛋白与先前所鉴定的低分子量麦谷蛋白相对应,而且对该类型亚基进行了蛋白组学及蛋白质片段的研究。虽然已对普通小麦近缘种属的b-型avenin-like蛋白展开了克隆及表达分析,并且发现了包含19个半胱氨酸残基的罕见类型,但对该亚基的总体研究尚不够深入,尤其对六倍体普通小麦本身的研究信息也相对贫乏。由于上述类型的蛋白所含的半胱氨酸残基（一般在18个以上）远远超过先前报道的小麦储藏蛋白和燕麦储藏蛋白的含有量,并且如此多的半胱氨酸残基可能会形成更为丰富的分子内或分子间的二硫键,从而可能对面粉的加工品质产生影响。目前对小麦贮藏蛋白亚基的研究主要存在以下四个方面的问题:（1）缺乏有效的蛋白质分离手段。小麦贮藏蛋白家族较为庞大,变异广泛,目前的蛋白纯化技术不仅不能将各个亚基分离开来,同时也不能将麦谷蛋白与醇溶蛋白彻底分离;（2）难以获得能满足体外结构与功能研究所需的蛋白量;（3）缺乏方便、简单、可行的研究方法,可以在短时间内进行贮藏蛋白功能的研究;（4）难以消除不同遗传背景、栽培环境对贮藏蛋白品质效应的影响,使结论具有可重复性。为了分离大量的类燕麦储藏蛋白亚基,本研究从小麦品种“陕253”中分离出类燕麦储藏蛋白的编码基因,利用PCR方法从小麦品种“陕253”中克隆新型avenin-like基因,将克隆的avenin-like基因亚克隆至表达载体,经酶切及测序鉴定后,转化宿主菌Escherichia coli Rosetta-gami B （DE3）,经IPTG诱导表达融合蛋白,并利用Western blot进行检测。结果从小麦品种“陕253”克隆获得3条新avenin-like基因,GenBank登录号分别为GQ903577、GQ903578和GQ903579。序列分析表明,其中GQ903579为假基因,利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,实现了对登录号为GQ903578的基因在原核系统的特异性表达。具体结果如下: 1.克隆了小麦“陕253”的三个类燕麦储藏蛋白亚基基因（GenBank序列号GQ903577、GQ903578、GQ903579）。序列分析表明,其全长均为855bp ,与大麦（Hordeum vulgare）avenin-like基因家族成员相似性最高,介于99.5%-99.7%。初步确定该基因为燕麦储藏蛋白亚基基因。 2.对avenin-like基因编码序列进行比对分析,结果表明,该家族成员的编码序列差异主要表现为重复区段的碱基替换,不存在碱基的插入或缺失（InDel）碱基的多态性同样存在明显的偏好与区域性:信号肽区最为保守;N端以C→G、A→G为主要的替换类型;重复区最为活跃,且以A→T颠换为最高,其次为T→C、G→C、A→G;C端相对稳定,并表现为A→C、G→C的高频颠换。 3.氨基酸序列比对表明,GQ903577和GQ903578可编码284个氨基酸残基的成熟蛋白质,推测相对分子质量约为33 kD,两者之间的错配源于第50位氨基酸V对残基A置换所致;而GQ903577与GQ903579之间的空位则产生于后者在第158位发生的氨基酸无义突变（Q→*）,从三联体密码角度看,GQ903579发生了谷氨酰胺密码子第一位碱基的转换（CAA→TAA）,从而导致终止密码的出现,推测GQ903579为avenin-like假基因,不能编码有功能的成熟蛋白质。 4.将该基因亚克隆到预先构建的高效表达载体上,阳性质粒pET32a-avenin-S253经IPTG诱导,在宿主菌Rosetta gami B（DE3） plysS中进

关键词：小麦陕253 avenin-like基因基因克隆载体构建融合蛋白原核表达

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玉米新品种垦丰101特征特性及全程机械化高产栽培技术

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种子 2020年第5期39卷 127-129页

作者：陈瑞佶张建刘兴舟付华马桂美李猛宿州市农业科学院安徽宿州234000

介绍了玉米新品种垦丰101品种特性、抗逆性、丰产性等生物学特性,从缓控释肥种肥同播、病虫害绿色防控、完熟机收、秸秆还田等方面总结了垦丰101全程机械化高产栽培技术。

关键词：玉米垦丰101 全程机械化栽培技术

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玉米品种SY1102绿色高产栽培技术

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中国种业 2019年第6期 77-78页

作者：陈瑞佶张建刘兴舟付华马桂美李猛安徽省宿州市农业科学院

介绍了玉米品种SY1102的品种特性、抗逆性、丰产性等生物学特性,从免耕直播、病虫害防治、一次性施肥、完熟机收、秸秆还田等方面总结了SY1102绿色高产栽培技术,为该品种的栽培和推广提供参考。

关键词：玉米 SY1102 绿色高产栽培技术

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黄淮海玉米新品种育种技术研究

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中国种业 2020年第2期 22-24页

作者：陈瑞佶张建刘兴舟付华马桂美李猛安徽省宿州市农业科学院

黄淮海夏玉米区是我国最大的玉米集中产区。对黄淮海地区夏玉米的生产现状和品种应用情况进行了论述,在此基础上探讨了黄淮海地区夏玉米新品种的选育技术。结果表明,黄淮海地区夏玉米生产的主要方式是小麦茬直播,主要品种优势明显。今后... 详细信息

黄淮海夏玉米区是我国最大的玉米集中产区。对黄淮海地区夏玉米的生产现状和品种应用情况进行了论述,在此基础上探讨了黄淮海地区夏玉米新品种的选育技术。结果表明,黄淮海地区夏玉米生产的主要方式是小麦茬直播,主要品种优势明显。今后,夏玉米品种的发展趋势是耐密度、高产、机械化。新品种育种技术应以地方优势品种的质量为核心进行改进和创新,加强抗逆性育种研究,不断培育能够支持玉米生产可持续发展的新品种。

关键词：黄淮海地区玉米育种技术

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优质糯玉米宿糯3号特征特性及简化栽培技术

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安徽农学通报 2015年第16期21卷 20-21页

作者：张建李猛付华陈瑞佶刘兴舟陈现平宿州市农业科学研究所安徽宿州234000

该文主要介绍宿糯3号植物学、生物学、品质特征及简化栽培技术。主要包括:播前种子精选包衣、机械免耕贴茬直播、强化田间管理、适时机收等。

关键词：糯玉米宿糯3号特征特性简化栽培技术

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陕253γ-醇溶蛋白基因的克隆与序列分析

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作物学报 2010年第3期36卷 526-532页

作者：王明霞高翔陈其皎董剑赵万春李艳亮李敏陈瑞佶庞红喜李哲清刘俊西北农林科技大学农学院陕西省小麦工程技术研究中心陕西省小麦新品种培育工程研究中心陕西杨凌712100

针对γ-醇溶蛋白基因家族成员,设计了覆盖其启动子及全长编码区的3对特异引物,从强筋小麦品种陕253中克隆了8条1000bp左右的片段(GenBank登录号为GQ871770～GQ871777)。该片段群包含典型醇溶蛋白亚基的完整编码序列,并在重复区存在丰富... 详细信息

针对γ-醇溶蛋白基因家族成员,设计了覆盖其启动子及全长编码区的3对特异引物,从强筋小麦品种陕253中克隆了8条1000bp左右的片段(GenBank登录号为GQ871770～GQ871777)。该片段群包含典型醇溶蛋白亚基的完整编码序列,并在重复区存在丰富的插入/缺失(InDel);推导的氨基酸序列显示,8个基因均具有γ-醇溶蛋白亚基的典型结构特征,其中GQ871771为假基因,4条序列(GQ871770、GQ871772、GQ871776和GQ87177)具有9个半胱氨酸残基;启动子区序列分析表明,GQ871770、GQ871772、GQ871774和GQ871776在胚乳框存在6处SNP变异,其中两处变异发生于GCN4基序内,利用WebLogo3在线构建了储藏蛋白更具代表意义的30bp保守胚乳盒模式。进化分析证实克隆序列属于γ-醇溶蛋白基因家族成员。

关键词：普通小麦 γ-醇溶蛋白基因克隆序列分析

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小麦品种陕253新型avenin-like的克隆与原核表达分析

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中国农业科学 2010年第9期43卷 1954-1962页

作者：陈瑞佶高翔陈其皎董剑赵万春李艳亮王明霞李敏庞红喜李哲清刘俊西北农林科技大学农学院陕西省小麦工程技术研究中心陕西省小麦新品种培育工程研究中心

【目的】克隆小麦品种陕253中的新型avenin-like(类燕麦储藏蛋白),并构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。【方法】利用PCR方法从小麦品种陕253中克隆新型avenin-like,将克隆的avenin-like亚克隆至表达载体,经酶切... 详细信息

【目的】克隆小麦品种陕253中的新型avenin-like(类燕麦储藏蛋白),并构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。【方法】利用PCR方法从小麦品种陕253中克隆新型avenin-like,将克隆的avenin-like亚克隆至表达载体,经酶切及测序鉴定后,转化宿主菌Escherichia coli Rosetta-gami B(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白,并利用Western blot进行检测。【结果】从小麦品种陕253克隆获得3个新avenin-like,GenBank登录号分别为GQ903577、GQ903578和GQ903579。序列分析表明,其中GQ903579为假基因,利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,实现了对登录号为GQ903578的基因在原核系统的特异性表达。【结论】新型avenin-like的克隆及原核表达的成功,为小麦品质改良提供了研究基础。

关键词： avenin-like 基因克隆载体构建融合蛋白原核表达

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优质糯玉米新品种宿糯3号的选育及栽培要点

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安徽农学通报 2015年第15期21卷 31-32页

作者：张建付华陈瑞佶刘兴舟陈现平李猛宿州市农业科学院安徽宿州234000

该文重点介绍了宿糯3号的育种思路、亲本及杂交种的选育过程、历年试验结果、主要特征及栽培技术要点。主要包括:合理密植、隔离种植、短期采收等。

关键词：糯玉米宿糯3号品种选育栽培要点

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安徽省玉米种植密度现状及调控对策

安徽省玉米种植密度现状及调控对策

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第十五届全国玉米栽培学术研讨会

作者：刘兴舟张建王五洲陈瑞佶付华李猛宿州市农业科学院灵璧县农委

【研究背景】安徽省作为黄淮南部玉米主产区,位于黄淮海生态区南部,玉米主要种植区是宿州、阜阳、亳州、淮北、蚌埠、滁州等6市,沿江及皖南也有一定分布,生态条件较适宜夏玉米的生长发育,具有高产的生产潜力,近年来,安徽省玉米种植面积... 详细信息

【研究背景】安徽省作为黄淮南部玉米主产区,位于黄淮海生态区南部,玉米主要种植区是宿州、阜阳、亳州、淮北、蚌埠、滁州等6市,沿江及皖南也有一定分布,生态条件较适宜夏玉米的生长发育,具有高产的生产潜力,近年来,安徽省玉米种植面积逐年扩大,据农业部门监测,2016年安徽省玉米种植面积已达1426.54万亩。但关于安徽省玉米种植密度的现状情况却鲜有报道,为有效提高安徽省玉米栽培技术水平,探讨可能的增产

关键词：玉米密度产量株距行距

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密度对玉米新品种皖玉708产量及其构成因子的影响

密度对玉米新品种皖玉708产量及其构成因子的影响

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第十五届全国玉米栽培学术研讨会

作者：刘兴舟张建王五洲陈瑞佶付华窦乐李猛宿州市农业科学院宿州市农委

【研究背景】安徽省作为黄淮南部重要的玉米产出省份,2016年玉米种植面积已达1426.54万亩,因此,开展安徽省玉米新品种高产适宜密度研究,对提高玉米新品种玉米单产,进而提高安徽玉米单产水平具有重要意义。玉米生产是群体条件下的生产,... 详细信息

【研究背景】安徽省作为黄淮南部重要的玉米产出省份,2016年玉米种植面积已达1426.54万亩,因此,开展安徽省玉米新品种高产适宜密度研究,对提高玉米新品种玉米单产,进而提高安徽玉米单产水平具有重要意义。玉米生产是群体条件下的生产,前人研究认为密度是影响玉米籽粒产量的重要因素之一,合理增加密度是获得群体高产的关键措施,

关键词：玉米密度产量皖玉708

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