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CysLT1基因敲除小鼠模型和H99-GFP菌株的制备以及CysLT1受体在小鼠脑微血管和海马中的分布

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CysLT1基因敲除小鼠模型和H99-GFP菌株的制备以及CysLT1受体在小...

作者：陈清汾福建医科大学

学位级别：硕士

目的：1、制备CysLT1基因敲除小鼠模型及H99-GFP菌株;2、研究小鼠感染隐球菌H99后CysLT1受体在脑微血管及海马中的表达。方法：1、采用PCR，RT-PCR及Western-blot检测鉴定CysLT1基因敲除小鼠;2、基因枪轰击技术制备H99-GFP隐球菌菌株;3... 详细信息

目的：1、制备CysLT1基因敲除小鼠模型及H99-GFP菌株;2、研究小鼠感染隐球菌H99后CysLT1受体在脑微血管及海马中的表达。方法：1、采用PCR，RT-PCR及Western-blot检测鉴定CysLT1基因敲除小鼠;2、基因枪轰击技术制备H99-GFP隐球菌菌株;3、采用小鼠气管接种新生隐球菌H99建立实验性小鼠脑膜炎模型;4、免疫组化及免疫荧光方法检测CysLT1受体在脑组织中的表达。结果：1、本实验室构建的CysLT1基因敲除小鼠经在核酸及蛋白水平上检测鉴定，均不表达CysLT1受体;2、带有GFP的质粒通过基因枪轰击可整合入H99基因组内，筛选出的H99菌株可高水平稳定表达GFP;3、接种隐球菌后的野生型小鼠与假手术组小鼠相比，CysLT1受体在大脑皮层和海马神经元细胞中的表达明显增加，尤其在脑微血管中的表达显著升高。结论:1、成功制备CysLT1基因敲除小鼠模型及H99-GFP菌株，为探讨CysLT1受体在隐球菌H99侵入脑微血管的作用提供了有效的研究工具2、首次发现小鼠感染隐球菌后脑微血管内皮细胞CysLT1受体显著表达，脑皮层和海马神经元细胞CysLT1受体的表达也明显增加，上述研究为后续相关课题的开展打下了重要基础。

关键词： CysLT1基因基因敲除新生隐球菌脑微血管内皮细胞

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HCG日雌激素自然降低与促排卵结局的关系

现代妇产科进展 2017年第9期26卷 689-691页

作者：杜生荣陈永艳林运鸿林典梁陈清汾孙艳郑备红康跃凡福建医科大学附属福建省妇幼保健院福州350001

目的:探讨HCG日雌激素(E_2)降低对促排卵结局的影响。方法:回顾分析2010年1月至2016年4月在福建省妇幼保健院生殖中心因注射HCG日E_2上升者791例(上升组)和E_2自然下降者485例(下降组)。将E_2下降组(B组)分为三个亚组:020%。比较各组的... 详细信息

目的:探讨HCG日雌激素(E_2)降低对促排卵结局的影响。方法:回顾分析2010年1月至2016年4月在福建省妇幼保健院生殖中心因注射HCG日E_2上升者791例(上升组)和E_2自然下降者485例(下降组)。将E_2下降组(B组)分为三个亚组:020%。比较各组的卵子回收率、受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率及流产率。结果:下降组的卵子回收率、卵裂率、优质胚胎率均低于上升组(P<0.05),两组的临床妊娠率和流产率比较,差异无统计学意义。HCG日雌激素下降大于20%与低卵子回收率、低卵裂率、低优质胚胎率相关(P<0.05),但不影响临床妊娠率和流产率。结论:HCG日E_2自发下降大于20%影响控制性超排卵的结局。

关键词：雌激素下降卵子回收率卵裂率优质胚胎率

不同氧浓度进行培养液的平衡对辅助生殖临床结局的影响

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中国当代医药 2023年第21期30卷 76-79页

作者：林运鸿陈清汾陈钢鑫黄志清魏慧娟福建省妇幼保健院生殖医学中心福建福州350001

目的探讨不同氧浓度进行培养液的平衡对辅助生殖临床结局的影响。方法回顾性分析2020年3月至2021年9月在福建省妇幼保健院生殖医学中心进行辅助生殖的患者资料,符合纳入标准的周期数共401个取卵周期,根据使用不同氧气浓度的培养箱分为... 详细信息

目的探讨不同氧浓度进行培养液的平衡对辅助生殖临床结局的影响。方法回顾性分析2020年3月至2021年9月在福建省妇幼保健院生殖医学中心进行辅助生殖的患者资料,符合纳入标准的周期数共401个取卵周期,根据使用不同氧气浓度的培养箱分为大气氧平衡组和5%氧平衡组,其中大气氧平衡组有201个周期,5%氧平衡组有200个周期,比较分析两组患者的体外胚胎发育情况和临床结局。结果两组患者的基线资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。大气氧平衡组正常受精率、优质囊胚形成率均高于5%氧平衡组,差异有统计学意义(P0.05)。结论在常规体外授精和胚胎移植的周期中,使用大气氧浓度的普通培养箱进行培养液的平衡,可能有利于患者的正常受精和优质囊胚形成。

关键词：氧气浓度培养液平衡培养箱受精率囊胚形成率

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囊胚期胚胎嵌合发生主要影响因素分析

中华生殖与避孕杂志 2021年第11期41卷 986-990页

作者：杜生荣杨雷黄志清林运鸿陈清汾郑备红福建省妇幼保健院生殖医学中心福建医科大学附属医院福州350001

目的:分析染色体结构异常患者行卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后形成的囊胚发生嵌合的主要影响因素。方法:回顾性队列研究福建省妇幼保健院生殖医学中心从2018年1月至2019年12月期间进行针对染色体结构异... 详细信息

目的:分析染色体结构异常患者行卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后形成的囊胚发生嵌合的主要影响因素。方法:回顾性队列研究福建省妇幼保健院生殖医学中心从2018年1月至2019年12月期间进行针对染色体结构异常的胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing for chromosomal structural rearrangement,PGT-SR)周期94个和ICSI周期551个,采用SPSS21.0软件分析女方年龄、获卵数、平均每个卵子的促性腺激素(gonadotropin,Gn)量(Gn/卵)、囊胚分级,以及不同性别染色体携带者与胚胎染色体嵌合的关系。结果:PGT-SR周期中,单因素分析显示嵌合体胚胎与年龄和精子浓度有关(P=0.01,P=0.04),而多因素logistic回归分析显示,年龄(OR=3.41,95%CI=1.34~8.66,P=0.01)、精子浓度(OR=0.41,95%CI=0.17~0.96,P=0.04)和不同性别的染色体易位携带(OR=2.21,95%CI=1.04~4.70,P=0.04)是胚胎嵌合发生的主要影响因素。结论:PGT-SR患者体外形成的囊胚发生嵌合现象可能与女方年龄、精子浓度和相互易位患者性别有关,为选择性移植嵌合胚胎提供理论依据。

关键词：嵌合胚胎胚胎植入前遗传学检测高龄二代测序技术

人类白细胞抗原基因型的胚胎植入前遗传学诊断

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中华生殖与避孕杂志 2018年第8期38卷 677-681页

作者：杜生荣曾国英孙艳林运鸿林典梁陈清汾康跃凡福建省妇幼保健院福建医科大学附属医院福建省生殖医学中心福州350001

目的建立人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)基因配型,为开展HLA配型的胚胎植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)联合或不联合单基因病的临床工作提供技术支持。方法采用多重置换扩增(multiple displacem... 详细信息

目的建立人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)基因配型,为开展HLA配型的胚胎植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)联合或不联合单基因病的临床工作提供技术支持。方法采用多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA)的方法扩增3~5个滋养层细胞的全基因组,并用多重聚合酶链式反应(PCR)方法扩增多个短串联重复多态性(polymorphic short tandem repeat,STR)位点,通过毛细管电泳技术验证STR位点的特异性。结果微量细胞全基因组的扩增成功率为93.75%,筛选了HLA基因的5个杂合度高、特异性强的STR位点,等位基因脱扣(allele drop-out,ADO)率为10.34%。结论微量细胞MDA结合多重PCR的方法可以同时检测HLA-A、HLA-B、DRA、DQB位点,扩增成功率高,ADO率低,可以有效地筛选出相匹配的胚胎,为同胞患儿提供造血干细胞来源具有可行性。

关键词：胚胎植入前遗传学诊断(PGD) 人类白细胞抗原(HLA) 多重聚合酶链式反应(PCR)

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女方梅毒抗体阳性对辅助生殖助孕结局的影响

基层医学论坛 2019年第8期23卷 1065-1067页

作者：林运鸿杜生荣陈清汾陈素珠福建省妇幼保健院福建福州350001

目的探讨女方梅毒感染对辅助生殖助孕结局的影响。方法选取单独女方梅毒抗体阳性35例作为观察组,男女双方梅毒抗体阴性106例作为对照组。比较2组的D3优质胚胎率、囊胚形成率、可利用囊胚形成率、临床妊娠率和种植率。结果观察组与对照组... 详细信息

目的探讨女方梅毒感染对辅助生殖助孕结局的影响。方法选取单独女方梅毒抗体阳性35例作为观察组,男女双方梅毒抗体阴性106例作为对照组。比较2组的D3优质胚胎率、囊胚形成率、可利用囊胚形成率、临床妊娠率和种植率。结果观察组与对照组的D3优质胚胎率、临床妊娠率和种植率比较无统计学差异(47.3%vs 53.1%,53.3%vs 42.1%,36.7%vs 27.6%,P>0.05);观察组的囊胚形成率和可利用囊胚形成率显著低于对照组,差异有统计学意义(46.5%vs 63.7%,33.7%vs 45.6%,P<0.05)。结论单独女方梅毒抗体阳性会影响胚胎体外培养的发育潜能,导致囊胚形成率和可利用囊胚形成率降低,但不会影响临床妊娠率和种植率。

关键词：梅毒辅助生殖囊胚形成率临床妊娠率

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D5、D6优质囊胚移植和冷冻策略研究

陕西医学杂志 2019年第10期48卷 1263-1267,1396页

作者：陈清汾康跃凡林典梁杜生荣福建省妇幼保健院(福建医科大学附属医院)生殖医学中心

目的:比较冻融移植周期中不同发育速度(D5或D6)的优质囊胚的妊娠结局,探讨不同发育速度的优质囊胚的移植和冷冻策略。方法:收集行D5或D6冻融优质囊胚移植(≥1个)的周期1864个,女方取卵年龄均<38岁。根据移植囊胚数、囊胚等级和囊胚的发... 详细信息

目的:比较冻融移植周期中不同发育速度(D5或D6)的优质囊胚的妊娠结局,探讨不同发育速度的优质囊胚的移植和冷冻策略。方法:收集行D5或D6冻融优质囊胚移植(≥1个)的周期1864个,女方取卵年龄均<38岁。根据移植囊胚数、囊胚等级和囊胚的发育速度分为D5单优质囊胚组(D5-SHBT,822个移植周期)、D5双优质囊胚组(D5-DHBT,503个移植周期)、优和非优D5囊胚组(D5-H&PBT,116个移植周期)、D6单优质囊胚组(D6-SHBT,210个移植周期)、D6双优质囊胚组(D6-DHBT,94个移植周期)、优和非优D6囊胚组(D6-H&PBT,119个移植周期);比较D5各组冻融囊胚移植周期的妊娠结局、D6各组冻融囊胚移植周期的妊娠结局及D5和D6单、双优质冻融囊胚移植周期的妊娠结局。结果:在D5冻融囊胚移植周期中,各组间流产率比较差异无统计学意义;D5-DHBT临床妊娠率显著高于D5-SHBT,D5-H&PBT临床妊娠率与D5-DHBT、D5-SHBT比较差异均无统计学意义;D5-SHBT种植率显著高于D5-H&PBT,其余两组种植率比较差异均无统计学意义;D5-DHBT和D5-H&PBT多胎率均显著高于D5-SHBT,D5-DHBT和D5-H&PBT多胎率比较差异无统计学意义;D5-DHBT早产率均显著高于D5-H&PBT和D5-SHBT,D5-H&PBT和D5-SHBT早产率比较差异无统计学意义;D5-DHBT活产率显著高于D5-SHBT,其余两组组活产率比较差异无统计学意义。在D6冻融囊胚移植周期中,各组间种植率、流产率和早产率比较,差异均无统计学意义;临床妊娠率、多胎率和活产率组间比较,差异均具有统计学意义,其中D6-DHBT和D6-H&PBT的临床妊娠率、多胎率及活产率均显著高于D6-SHBT,D6-DHBT临床妊娠率、多胎率及活产率和D6-H&PBT比较差异均无统计学意义。D5和D6单、双优质冻融囊胚移植周期中,各组间流产率比较,差异无统计学意义;而种植率、临床妊娠率、多胎率、早产率和活产率组间比较,差异均具有统计学意义,其中D5-DHBT临床妊娠率和活产率均显著高于D6-SHBT和D6-DHBT;D5-SHBT临床妊娠率和活产率均显著高于D6-SHBT,但与D6-DHBT比较差异无统计学意义;D5组种植率均显著高于D6组;双优质囊胚移植组多胎率均显著高于单优质囊胚移植组,D5-DHBT多胎率显著高于D6-DHBT;D6-DHBT早产率显著高于D5-SHBT,D5-DHBT早产率显著高于D6-SHBT。结论:对女方年龄<38岁患者可建议冷冻1~2管形态学评分最高的D5单囊胚用于优先移植,其余囊胚行优和非优组合冷冻的策略,在改善妊娠结局的同时可减少患者的胚胎冷冻和保管费用并减少冷冻所需空间;鉴于D6-SHBT的妊娠结局并不理想,建议D6囊胚行双优质或优和非优组合冷冻及移植。

关键词： D5囊胚 D6囊胚妊娠结局冻融移植周期

女方年龄和体外受精方式对获单卵周期助孕结局的影响

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陕西医学杂志 2018年第12期47卷 1584-1587页

作者：陈清汾康跃凡杜生荣林典梁福建省妇幼保健院福建医科大学附属医院生殖医学中心福州350001

目的:比较女方年龄以及常规体外受精(IVF)和卵胞浆内单精子注射(ICSI)两受精方式对获单卵周期患者助孕结局的影响。方法:回顾分析IVF或ICSI助孕治疗获卵数仅为单个的患者的临床资料,分别比较不同年龄组(38岁组)以及常规IVF和ICSI组的受... 详细信息

目的:比较女方年龄以及常规体外受精(IVF)和卵胞浆内单精子注射(ICSI)两受精方式对获单卵周期患者助孕结局的影响。方法:回顾分析IVF或ICSI助孕治疗获卵数仅为单个的患者的临床资料,分别比较不同年龄组(38岁组)以及常规IVF和ICSI组的受精率、卵裂率、优质胚胎率、可用胚胎率、妊娠率、早期流产率、移植周期取消率等情况。结果:获单卵周期的不同年龄组患者的受精率、卵裂率、优质胚胎率、可用胚胎率、妊娠率、早期流产率、移植周期取消率比较差异无统计学意义(P>0.05),其胚胎冷冻率差异有统计学意义(P0.05);但常规IVF组的受精率和卵裂率均高于ICSI组,差异具有统计学意义(P<0.05);而IVF组的可用胚胎率要低于ICSI组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:对获单卵周期而言,女方年龄增加导致胚胎冷冻率升高,但并不影响胚胎质量;另外ICSI授精并不能改善获单卵周期的助孕结局,需根据处理后的精液情况优先选择常规IVF授精。

关键词：年龄因素体外受精卵子发生妊娠保持

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冻融周期非优质单囊胚移植妊娠结局的比较

国际生殖健康／计划生育杂志 2017年第4期36卷 283-286页

作者：陈清汾林典梁杜生荣福建省妇幼保健院福建医科大学附属医院福州350001

目的:比较D5和D6非优质单囊胚玻璃化冷冻复苏移植后的临床结局,优化非优质单囊胚的移植策略。方法:回顾性分析2013年1月-2016年12月在福建省妇幼保健院生殖中心施行冻融周期非优质单囊胚移植患者的临床资料230例,依据囊胚质量和囊胚发... 详细信息

目的:比较D5和D6非优质单囊胚玻璃化冷冻复苏移植后的临床结局,优化非优质单囊胚的移植策略。方法:回顾性分析2013年1月-2016年12月在福建省妇幼保健院生殖中心施行冻融周期非优质单囊胚移植患者的临床资料230例,依据囊胚质量和囊胚发育的天数将非优质单囊胚移植的患者分为4组,分别是D5的AC/BC组(内细胞团、滋养层评分为AC或BC,53个周期)、CA/CB组(51个周期)、D6的AC/BC组(65个周期),CA/CB组(61个周期),比较各组的临床妊娠率和早期流产率。结果:D5组非优质囊胚临床妊娠率高于D6组,且CA/CB(D5)组的临床妊娠率高于AC/BC(D6)组,差异有统计学意义(P<0.05)。AC/BC组的早期流产率高于CA/CB组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在非优质单囊胚移植周期中,优先考虑滋养外胚层评分高的D5囊胚,可提高妊娠率,降低早期流产率。

关键词：胚胎移植低温保存妊娠率流产,自然