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肝癌缺血再灌注损伤的基础研究

肝癌缺血再灌注损伤的基础研究

作者：陈洪茂第四军医大学

学位级别：硕士

缺血再灌注损伤是血管病变、体外循环、心胸外科手术、组织或器官的移植和再植等创伤及外科手术过程常见的病理改变。研究表明，缺血再灌注损伤的机制与自由基改变、钙超载、炎症反应及细胞凋亡等因素有关。此外还发现，缺血再灌注对肿... 详细信息

缺血再灌注损伤是血管病变、体外循环、心胸外科手术、组织或器官的移植和再植等创伤及外科手术过程常见的病理改变。研究表明，缺血再灌注损伤的机制与自由基改变、钙超载、炎症反应及细胞凋亡等因素有关。此外还发现，缺血再灌注对肿瘤组织有明显的杀伤和抑制作用，其中氧化损伤和凋亡则是杀伤肿瘤细胞的重要因素，但目前相关研究不多，详细机制并不清楚。因此，缺血再灌注对肿瘤组织的杀伤和对正常组织的影响及其机制如何，以及是否可利用缺血再灌注对肝癌进行治疗，是值得研究的内容。所以我们利用移植性肝癌动物模型，给予缺血再灌注损伤，探讨缺血再灌注对肿瘤组织的影响和机制，以便于为特殊性肝癌的治疗建立新方法打下基础。目的：通过测定分析肝癌缺血再灌注后正常肝脏组织和肿瘤组织中一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量改变，研究氧自由基的改变和损伤;通过苏木素伊红染色（HE）和荧光法脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）对凋亡细胞进行形态学观察和定量分析，探讨缺血再灌注损伤对肿瘤组织的影响及其意义。方法：通过超声引导将VX2肿瘤组织混悬液穿刺注射到新西兰兔肝脏左中第四军医大学硕士学位论文叶，建立肝癌模型，用无损伤血管钳阻断肿瘤所在肝叶的肝动脉分支60 min，然后去除血管阻断恢复血流，建立肝癌缺血再灌注损伤模型，并随机将模型动物分为缺血再灌注前（对照）、缺血再灌注后0 min、lh、ld、3d、7d六个时间组，取肝脏组织和肿瘤组织，分别测定分析NO、NOS、iNOS、SOD 和MDA含量改变，同时将其依次经福尔马林固定、石蜡包埋、切片、HE 染色和TUNEL试验，对比分析研究正常肝脏组织和肿瘤组织中细胞凋亡情况。结果:（1）肝脏组织中的NO含量除缺血再灌注后lh升高外，其余各时间点均低于缺血再灌注前水平，变化幅度较小;肿瘤组织的NO含量于缺血再灌注后0 min开始下降，lh降到最低（只0.01），随后又有所升高，但至 7d时仍明显低于缺血再灌注前水平（只0.01）:缺血再灌注后肝脏组织和肿瘤组织中的NO含量随时间的改变差异非常显著（只0.01）。（2）缺血再灌注后肝脏组织的总NOS含量于0 min时有所降低，但随后恢复，变化幅度较小，而iNOS含量0 min至ld明显下降（只0.01），其后有所恢复，但仍未达缺血再灌注前水平;缺血再灌注后肿瘤组织的总NOS含量0 min开始下降，0 min至lh低于正常水平，随后开始升高，1一7d明显高于血再灌注前（只0、01），其中iNOS含量持续上升，至7d明显高于血再灌注前水平（只0.01）;缺血再灌注后肝脏组织和肿瘤组织中的总NOS和iNOS含量随时间的改变差异非常显著（只0.01）。（3）肝脏组织中的SOD含量于缺血再灌注后迅速下降，随后有所升高，至7d时仍明显低于缺血再灌注前水平，各组与对照组对比差异非常显著（只0.01）:肿瘤组织的SOD含量变化趋势除了1h达最低点外其余皆与肝脏组织相似，各组与对照组对比差异非常显著（只0.01）:而缺血再灌注后肝脏组织和肿瘤组织中的SOD含量随时间的改变相对比差异非常显著（只0.01）。（4）缺血再灌注后肝脏组织的MDA 含量于omin时升至最高，随后开始下降，至7d时仍高于缺血再灌注前水平，第四军医大学硕士学位论文各组与对照组对比差异非常显著（只0.01）;而肿瘤组织的MDA含量于1h 降至最低，随后有所升高，但至7d时仍明显低于缺血再灌注前水平，各组与对照组比较差异非常显著（只0.01）;缺血再灌注后肝脏组织和肿瘤组织中MDA含量随时间的改变相对比差异非常显著（只0.01）。（5） HE染色结果示:缺血再灌注前，肿瘤组织凋亡细胞率略低于肝脏组织，但缺血再灌注后，肿瘤组织凋亡细胞率迅速增多，变化幅度较大，同一组中肝脏组织和肿瘤组织凋亡细胞率差异非常显著（只0.01 vs.the same group of the liver tissu

关键词：肝癌模型再灌注损伤凋亡一氧化氮一氧化氮合酶超氧化物歧化酶氧自由基

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回乡

快乐青春（经典阅读）（中学生必读） 2009年第4期 28-29页

作者：陈洪茂

离乡背井、作客他乡的游子，怀乡思亲、念家想友是他们亲切而深厚的感情，归乡则是他们心中强烈的愿望。如屈原的《丸章·哀郢》：“鸟飞反故乡兮，狐死必首丘。”《乐府诗集·乌孙公主歌》：“居常思土兮心内伤，愿为黄鹄兮归故乡。”

关键词：中学课外阅读《回乡》陈洪茂

一氧化氮合酶在肝癌缺血再灌注后细胞凋亡中的作用

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中华实验外科杂志 2004年第12期21卷 1441-1442页

作者：赵佐庆陈洪茂刘福兰第四军医大学唐都医院实验外科西安710038

目的　研究缺血再灌注后肝癌组织中一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶 (NOS)在细胞凋亡中的作用。方法　建立肝脏肿瘤和缺血再灌注模型 ,除测定NO和NOS含量外 ,并以荧光脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)观察其细胞凋亡... 详细信息

目的　研究缺血再灌注后肝癌组织中一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶 (NOS)在细胞凋亡中的作用。方法　建立肝脏肿瘤和缺血再灌注模型 ,除测定NO和NOS含量外 ,并以荧光脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)观察其细胞凋亡情况。结果　缺血再灌注后 ,两种组织中的NO均呈下降趋势 ,而总一氧化氮合酶 (NOS)明显升高 (P <0 .0 1) ,肝脏组织中的诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)含量明显降低 ,但肝癌组织中iNOS含量明显升高 (P <0 .0 5 )。肝癌组织的凋亡细胞明显多于肝脏组织 (P <0 .0 1)。结论　缺血再灌注后肝脏组织和肝癌组织的NO、iNOS的改变是造成细胞凋亡的重要因素且对肝癌组织的影响更为显著。

关键词：肝癌组织缺血再灌注细胞凋亡 NOS含量一氧化氮合酶(NOS) 升高肝脏组织凋亡细胞核苷酸荧光

健康成年新西兰兔肺动脉、肺静脉血流频谱分析及右心系统压力检测

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中国医学影像技术 2013年第4期29卷 489-492页

作者：孙丹丹段云友袁丽君陈洪茂梁宁南第四军医大学唐都医院超声科陕西西安710038 吉林医药学院口腔影像系吉林吉林132013

目的利用超声心动图及右心导管测量新西兰兔肺动脉、肺静脉频谱指标及右心系统压力指标,了解其频谱特点及右心系统压力的正常值范围。方法选择健康成年新西兰兔24只,用彩色多普勒超声诊断系统测量其肺动脉、肺静脉频谱,并同步记录心电... 详细信息

目的利用超声心动图及右心导管测量新西兰兔肺动脉、肺静脉频谱指标及右心系统压力指标,了解其频谱特点及右心系统压力的正常值范围。方法选择健康成年新西兰兔24只,用彩色多普勒超声诊断系统测量其肺动脉、肺静脉频谱,并同步记录心电图及呼吸曲线。通过右心导管记录并测量其右心房、右心室、肺动脉的收缩压及舒张压。结果频谱多普勒结果显示新西兰兔肺静脉频谱的峰值血流速度吸气相与呼气相的差异均无统计学意义(P均>0.05),肺动脉频谱峰值血流速度吸气相高于呼气相,差异有统计学意义(P<0.001)。右心导管压力测值结果显示新西兰兔肺动脉收缩压范围为16.07～23.99mmHg、肺动脉舒张压为11.18～19.22mmHg。结论超声心动图可清晰显示新西兰兔肺动脉、肺静脉血流;其肺动脉血流频谱随呼吸周期呈规律性变化。

关键词：超声心动描记术肺动脉肺静脉兔

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颈动脉体瘤的彩色多普勒超声表现

中华超声影像学杂志 2015年第4期24卷 366-367页

作者：郭宗正陈洪茂郝向军夏国昌山东省潍坊市中医院超声科 261041 解放军第四零一医院特检科

颈动脉体瘤是一种较为少见的起源于神经脊副神经节细胞的化学感受器肿瘤，又名副神经节瘤，位于颈内外动脉分叉处。本研究旨在探讨颈动脉体瘤患者的彩色多普勒超声特征。

关键词：彩色多普勒超声特征颈动脉体瘤超声表现化学感受器肿瘤神经节细胞副神经节瘤动脉分叉

缺血再灌注后不同时间正常肝组织和肿瘤组织超氧化物歧化酶和丙二醛含量变化(英文)

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中国临床康复 2004年第5期8卷 986-988页

作者：陈洪茂赵佐庆吕发勤刘福兰张玲张彩燕解放军第四军医大学唐都医院实验外科陕西省西安市710038 解放军第四军医大学唐都医院超声科陕西省西安市710038 解放军第四军医大学唐都医院急诊科陕西省西安市710038

背景:缺血再灌注对正常组织具有损伤作用,但是它对于肿瘤组织的影响以及在肿瘤患者术后康复中的作用还不清楚。目的:探讨缺血再灌注对肿瘤组织的影响及其在肿瘤患者术后康复中的意义。设计:采用完全随机对照研究。地点和对象:实验在第... 详细信息

背景:缺血再灌注对正常组织具有损伤作用,但是它对于肿瘤组织的影响以及在肿瘤患者术后康复中的作用还不清楚。目的:探讨缺血再灌注对肿瘤组织的影响及其在肿瘤患者术后康复中的意义。设计:采用完全随机对照研究。地点和对象:实验在第四军医大学唐都医院实验外科进行,参加人员为本科全体医护人员。实验动物为第四军医大学动物实验中心提供的36只成年新西兰白兔(雌雄不拘)。干预:通过超声引导将VX2肿瘤组织混悬液穿刺注射到新西兰兔肝脏左中叶,建立肝脏肿瘤模型,用无损伤血管钳阻断肿瘤所在肝叶的肝动脉分支60min后去除血管阻断恢复血流,造成肝脏肿瘤的缺血再灌注损伤模型。主要观察指标:各组实验动物的肝脏组织和肿瘤组织的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。结果:肝脏组织中的SOD含量于缺血再灌注后迅速下降,至0min达最低点,随后有所升高,至7d时仍明显低于缺血再灌注前水平,各组与对照组对比差异显著(t=24.83～65.01,P<0.01),而肿瘤组织的SOD含量变化趋势除了1h达最低点外其余皆与肝脏组织相似,各组与对照组对比差异显著(t=4.68～12.42,P<0.01);肝脏组织的MDA含量于0min时升至最高,随后开始下降,至7d时仍高于缺血再灌注前水平,各组与对照组对比差异显著(t=7.39～42.05,P<0.01),而肿瘤组织的MDA?

关键词：肝缺血再灌注损伤超氧化物歧化酶丙二醛肝组织肿瘤组织肝脏肿瘤

超声引导下兔急性肺动脉高压模型的建立及其意义

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中国超声医学杂志 2007年第1期23卷 12-14页

作者：陈洪茂段云友李娟周宁曹铁生杨玉辉解放军第四军医大学唐都医院超声诊断科解放军第四军医大学唐都医院心内科

目的探讨超声引导下肺栓塞所致兔急性肺动脉高压动物模型的建立及其意义。方法模拟人体血栓栓子脱落造成急性肺动脉栓塞的过程,采用超声引导下股静脉穿刺右心导管肺动脉放置以及压力检测,同步经对侧股静脉穿刺推注自体血栓,建立兔急性... 详细信息

目的探讨超声引导下肺栓塞所致兔急性肺动脉高压动物模型的建立及其意义。方法模拟人体血栓栓子脱落造成急性肺动脉栓塞的过程,采用超声引导下股静脉穿刺右心导管肺动脉放置以及压力检测,同步经对侧股静脉穿刺推注自体血栓,建立兔急性肺动脉高压模型。结果实验用新西兰兔30只,成功建立急性肺动脉高压模型25只,另5只发生急性右心衰竭死亡,模型成功率83%;超声检测栓塞后即刻出现三尖瓣反流,估测肺动脉收缩压与右心导管测定值高度相关(r=0.765,P=0.002)。结论采用超声引导下建立肺动脉血栓栓塞所致兔急性肺动脉高压模型的方法简单易行,成功率高,为急性肺动脉高压的基础和临床研究提供了一个良好的动物模型平台。

关键词：栓塞肺动脉高压动物模型