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加味夏枯草汤治疗H型高血压（肝火亢盛型）的临床研究

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加味夏枯草汤治疗H型高血压（肝火亢盛型）的临床研究

作者：王巧云河北北方学院

学位级别：硕士

目的:本课题旨在观察加味夏枯草汤联合马来酸依那普利叶酸片治疗H型高血压(肝火亢盛型)患者的临床有效性,为进一步临床推广使用提供相关依据。方法:入选病例均为2020年12月至2021年11月石家庄市中医院心病一科门诊及住院病房的患者,根... 详细信息

目的:本课题旨在观察加味夏枯草汤联合马来酸依那普利叶酸片治疗H型高血压(肝火亢盛型)患者的临床有效性,为进一步临床推广使用提供相关依据。方法:入选病例均为2020年12月至2021年11月石家庄市中医院心病一科门诊及住院病房的患者,根据纳入标准共收集68例患者,随机分为对照组34例,给予马来酸依那普利叶酸片治疗;治疗组34例,给予马来酸依那普利叶酸片联合中药加味夏枯草汤治疗。治疗周期为4周,对肝功能及肾功能进行监测和比较,同时统计脱落、不良事件和不良反应发生的情况。通过SPSS26.0统计软件对两组人员的治疗前与后的24小时动态血压监测(24-hour ambulatory blood pressure monitoring,ABPM)、血浆同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)、血浆一氧化氮(Nitric Oxide,NO)、血浆内皮素1(Endothelin-1,ET-1)的水平及中医证候积分变化情况进行统计学分析,从而判定两组疗效。结果:(1)在ABPM方面:治疗后,两组24小时收缩压平均值(24hours mean systolic blood pressure,24h SBP)、24小时舒张压平均值(24hours mean diastolic blood pressure,24h DBP)、白昼平均收缩压(Daytime systolic blood pressure,d SBP)、白昼平均舒张压(Daytime diastolic blood pressure,d DBP)、夜间平均收缩压(Nightime systolic blood pressure,n SBP)及夜间平均舒张压(Nightime diastolic blood pressure,n DBP)较治疗前均有明显下降(P0.05)。在中医证候总积分方面:两组治疗后中医证候总积分均低于治疗前,统计学差异显著(P<0.01),治疗组在降低总积分上与对照组相比更低,有统计学差异(P<0.05)。(7)在中医证候疗效方面,治疗组有效率(90.9%)明显高于对照组有效率(73.5%)统计学差异显著(P<0.01)。结论:加味夏枯草汤联合马来酸依那普利叶酸片治疗H型高血压(肝火亢盛型)患者可降低血压水平、降低Hcy水平、提高NO水平、降低ET-1水平及改善中医证候。优于单纯应用马来酸依那普利叶酸片。在治疗过程中,没有出现肝、肾功能的损伤,没有出现副作用,值得临床推广。

关键词： H型高血压肝火亢盛型加味夏枯草汤同型半胱氨酸动态血压监测

飞秒激光白内障手术对视盘区血流密度和神经纤维层厚度的影响

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飞秒激光白内障手术对视盘区血流密度和神经纤维层厚度的影响

作者：赖梦云南昌大学

学位级别：硕士

目的:运用光学相干断层扫描血管成像（OCTA）技术探讨飞秒激光白内障手术（FLACS）和普通白内障超声乳化术（CPCS）短期内对视盘区血流密度、视盘区神经纤维层厚度（RNFL）的影响以及两者间的比较。方法:采用回顾性病例对照研究,收集202... 详细信息

目的:运用光学相干断层扫描血管成像（OCTA）技术探讨飞秒激光白内障手术（FLACS）和普通白内障超声乳化术（CPCS）短期内对视盘区血流密度、视盘区神经纤维层厚度（RNFL）的影响以及两者间的比较。方法:采用回顾性病例对照研究,收集2020年12月—2021年12月确诊为年龄相关性白内障患者共69人77眼,其中行FLACS的患者33人37眼;行CPCS的患者36人40眼。比较两组术前、术后第1天,第7天、1个月及3个月时的最佳矫正视力（BCVA）、眼内压（IOP）、视盘区血流密度及视盘周围RNFL厚度的变化,并记录两组术中的有效超声乳化时间（EPT）、术后第1天角膜水肿情况及FLACS组术中IOP。评估飞秒激光预处理时眼压升高是否对视盘区血流密度、视盘周围RNFL厚度产生影响。结果:两组手术方式术后第1天视力均明显提高,FLACS组提高到（0.140±0.087）Log MAR,CPCS组提高到（0.1547±0.077）Log MAR,两组术后第1天、7天、1个月、3个月的组间视力比较无明显特殊差异（P＞0.05）;术后第1天FLACS组的角膜水肿较CPCS组轻;两组术后第1天、第7天、1个月、3个月眼压比较无统计学差异（P＞0.05）。FLACS组在负压装置撤离后IOP升高约2.44mm Hg（P＜0.05）;FLACS组超乳时间为（1.05±0.54）s,CPCS组超乳时间为（2.37±0.82）s,FLACS组有效超声乳化时间明显小于CPCS组（P＜0.05）;FLACS组和CPCS组术前视盘旁血流密度分别为（50.05±2.28）%、（49.48±2.34）%,视盘内血流密度分别为（48.93±2.79）%、（48.88±3.10）%;FLACS组和CPCS组术前视盘周围RNFL厚度分别为（104.11±12.16）um、（103.80±11.89）um,术后第1天两组视盘区血流密度均降低（P＜0.05）,视盘周围RNFL厚度略增加（P＜0.05）,但术后第1天、第7天、1个月、3个月两组间视盘区血流密度、视盘周围RNFL厚度的比较均无明显差异（P＞0.05）。结论:飞秒激光白内障手术有较多优势,其主要不足是负压吸引装置引起眼压短暂升高,其结果对视盘血流密度和神经纤维层厚度厚度变化无影响,手术安全。

关键词：飞秒激光白内障超声乳化视盘血流密度

基于microRNA探讨半夏白术天麻汤改善痰湿壅盛型高血压的机制研究

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基于microRNA探讨半夏白术天麻汤改善痰湿壅盛型高血压的机制研究

作者：胡国云山东中医药大学

学位级别：硕士

目的:以半夏白术天麻汤为研究对象,利用CRISPR/Cas9技术,构建了miR-217基因敲除的小鼠并进行基因组测序,观察基因敲除后的生理指标和行为学变化。通过对比观察半夏白术天麻汤灌胃高脂饮食诱导的痰湿壅盛型高血压小鼠和miR-217基因敲除小... 详细信息

目的:以半夏白术天麻汤为研究对象,利用CRISPR/Cas9技术,构建了miR-217基因敲除的小鼠并进行基因组测序,观察基因敲除后的生理指标和行为学变化。通过对比观察半夏白术天麻汤灌胃高脂饮食诱导的痰湿壅盛型高血压小鼠和miR-217基因敲除小鼠,探讨半夏白术天麻汤化痰祛湿的药理机制,进一步明确半夏白术天麻汤通过激活miR-217抑制JAK2/STAT3信号通路的过程。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建miR-217基因敲除小鼠,并通过转录组测序评价miR-217敲除对小鼠主动脉的在体影响;PCR法断尾鉴定小鼠基因型;对miR-217基因敲除小鼠和C57BL/6J野生型小鼠进行行为学实验:糖水实验、水迷宫实验、转棒跑步实验;通过液相色谱/电喷雾质谱(LC/ESI/MS)对miR-217基因敲除小鼠和野生型小鼠的脑中神经递质水平进行检测;而后取16只miR-217基因敲除小鼠和16只C57BL/6J小鼠喂养高脂饲料12周诱导痰湿壅盛型高血压小鼠模型,随机分为药物组(miR-217-/-+HFD+半夏白术天麻汤(BBTD))、HFD((高脂饲料诱导)+BBTD)和模型组(miR-217-/-+HFD、HFD),药物组灌胃半夏白术天麻汤8周,以喂普通饲料的8只C57BL/6J小鼠为正常对照组(NC)(n=8)。通过酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中IL-1β(白细胞介素1β)、IL-6(白细胞介素-6)、TNF-α(肿瘤坏死因子α)、MCP-1(单核细胞趋化蛋白-1)炎症水平;免疫组化染色观察主动脉IL-6ST(白细胞介素6信号转导因子)、Irak1(白细胞介素-1受体相关激酶)、Sirt1(沉默信息调节因子1)分布情况;HE染色观察主动脉形态,观察脑、胰腺、肝脏组织的病理情况;蛋白免疫印记法(Western Blot)测定主动脉的JAK2/STAT3、NF-κB p65信号通路中关键蛋白的表达水平。结果:成功构建miR-217小鼠模型;miR-217敲除纯合子小鼠体重较野生型增加了 20-30%;转棒跑步实验中跑步时间相比于野生型小鼠显著降低,提示小鼠出现严重的运动协调异常。血压正常;糖水偏好率、Morris水迷宫实验无统计学差异;神经递质水平显示miR-217基因敲除小鼠脑中乙酰胆碱、3-甲氧基酪胺、酪胺、血清素、谷氨酸大幅度下降(依次下降了 53.67%、89.13%、50.05%、27.85%、17.29%),肾上腺素升高了16.4%;转录组测序结果提示,miR-217敲除后,小鼠主动脉出现166个mRNA表达上调,86个mRNA表达下调(fold change>2.0,P<0.05);高脂饲料饲养小鼠12周后成功建立痰湿壅盛型高血压小鼠模型,半夏白术天麻汤给药8周后,小鼠的状态有不同程度的改善,血清IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1下降;主动脉炎症状态减轻(IL-6ST、Irak1分布减少)、衰老程度改善(Sirt1增加);主动脉HE染色显示改善了血管平滑肌层增生肥大;脑、胰腺、肝脏组织病理均有不同程度的改善;主动脉中JAK2/STAT3通路的活性受到抑制,其药物作用因miR-217敲除而显著降低。但半夏白术天麻汤药效并未因miR-217敲除而完全阻断,并表现出一定的“多靶点效应”。结果证实半夏白术天麻汤靶向激活miR-217抑制JAK2/STAT3信号通路,发挥祛痰利湿作用。结论:miR-217及其下游基因是半夏白术天麻汤体内的主要作用靶点之一。

关键词：半夏白术天麻汤痰湿壅盛证 microRNA-217 主动脉

转录因子FOXM1抑制核酸酶DIS3的DNase酶活性及其生物学作用

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转录因子FOXM1抑制核酸酶DIS3的DNase酶活性及其生物学作用

作者：赵小云湖南大学

学位级别：硕士

Forkhead box M1(FOXM1)是FOX转录因子家族的组成成员,与多种细胞生物学效应密切相关,如:增殖、DNA损伤修复、细胞凋亡和氧化还原信号转导。除了对细胞的正常功能有益外,FOXM1在多种肿瘤中异常高表达,能够促进肿瘤细胞的生长和侵袭转移... 详细信息

Forkhead box M1(FOXM1)是FOX转录因子家族的组成成员,与多种细胞生物学效应密切相关,如:增殖、DNA损伤修复、细胞凋亡和氧化还原信号转导。除了对细胞的正常功能有益外,FOXM1在多种肿瘤中异常高表达,能够促进肿瘤细胞的生长和侵袭转移等,并且也与不良预后有关。FOXM1作为转录因子类的DNA结合蛋白,主要定位于细胞核中,发挥调控基因表达的功能。为了进一步拓展对FOXM1蛋白功能的认识,我们前期利用FOXM1的pulldown结果进行质谱鉴定,发现了一个潜在的FOXM1互作蛋白DIS3(外泌体复合体核酸外切酶Rrp44)。DIS3是外泌体复合体催化亚基中的一员,具有3’-5’核酸外切酶和内切酶活性,主要定位于细胞核内,参与多种类型核酸的加工和降解等。在多种临床肿瘤中存在DIS3突变或表达缺失。因此,我们推测FOXM1与DIS3的结合可能与DNA的损失有关。本论文从以下四个方面开展了相关的工作,首先确认FOXM1与DIS3蛋白的相互作用关系。运用双分子荧光互补、细胞免疫荧光染色、蛋白质免疫共沉淀和pulldown等方法确认了转录因子FOXM1能够与核酸酶DIS3蛋白相互作用。其次证明DIS3具有DNA酶的活性;运用GFP-Trap,His-pulldown方法纯化真核和原核的DIS3蛋白,在不同温度、p H值、离子等条件下证明了蛋白DIS3具有DNA核酸酶的活性。再次证明FOXM1能够抑制DIS3蛋白的DNase酶活性。利用真核表达与原核表达FOXM1蛋白与原核表达的DIS3蛋白进行核酸降解实验,证明FOXM1蛋白能够抑制DIS3降解DNA的能力。最后利用细胞免疫荧光和Western blotting等方法证明DIS3蛋白可以增强DNA损伤修复应答。利用Western blotting探讨了FOXM1可能具有通过DIS3参与修复DNA损失的功能。综上,本论文的实验结果显示转录因子FOXM1能够与核酸酶DIS3蛋白相互作用。核酸酶DIS3具有DNA降解活性。FOXM1与DIS3蛋白的互作不利于DNA的损失修复。本论文的研究结果为拓展转录因子FOXM1在细胞核内的分子功能提供了新的方向。

关键词：核酸酶DIS3 转录因子FOXM1 蛋白表达和纯化 DNA降解 DNA损伤修复应答

日粮添加槲皮素对早期断奶仔猪腹泻和肠道微生物的影响

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日粮添加槲皮素对早期断奶仔猪腹泻和肠道微生物的影响

作者：徐云政华中农业大学

学位级别：硕士

仔猪早期断奶是提高现代生猪养殖系统效率的关键策略,但早期断奶应激会导致仔猪生长性能下降甚至死亡。肠道氧化应激是导致早期断奶仔猪肠道损伤、肠道微生物紊乱、腹泻、厌食和生长停滞的主要因素之一。槲皮素作为一种类黄酮多酚分子,... 详细信息

仔猪早期断奶是提高现代生猪养殖系统效率的关键策略,但早期断奶应激会导致仔猪生长性能下降甚至死亡。肠道氧化应激是导致早期断奶仔猪肠道损伤、肠道微生物紊乱、腹泻、厌食和生长停滞的主要因素之一。槲皮素作为一种类黄酮多酚分子,常见于蔬菜、水果和中草药中,具有较强的抗氧化能力。本研究通过在早期断奶仔猪日粮中添加0.1%槲皮素,同时将它们的粪便微生物移植到FMT受体仔猪肠道内,以研究槲皮素缓解早期断奶仔猪腹泻、肠道损伤和氧化应激的效果以及肠道微生物在其中的作用。我们选择63头21日龄断奶仔猪（杜×长×大）随机分为三个处理组,每个处理21头仔猪（每个处理分三栏,每栏7头仔猪）。三个处理组分别为:对照组（Ctrl）、槲皮素组（QT）和粪便微生物移植组（FQT）。Ctrl组与FQT组在仔猪断奶后喂食仔猪基础日粮,QT组饲喂添加0.1%槲皮素的基础日粮（槲皮素的剂量是基于Ader的研究结果来添加的）。在仔猪断奶后第2天至第10天间隔天早8点进食后对FQT组仔猪灌喂采自QT组的2 m L粪菌悬液,Ctrl组与QT组灌喂2 m L生理盐水。在断奶后第14天,随机选择20头仔猪（Ctrl组6头;QT组7头;FQT组7头）进行屠宰采样。主要结果如下:（1）日粮添加槲皮素和FMT可减轻断奶仔猪的腹泻,提高其生长性能。与Ctrl组相比,QT组与FQT组仔猪断奶后第7-14天的ADFI（P＜0.05）和ADG（P＜0.01）增加,并且第7天（P＜0.01）和第14天（P＜0.05）的粪便评分下降。（2）日粮添加槲皮素和FMT可改善断奶仔猪的肠道形态和肠道屏障功能,缓解肠道氧化应激。与Ctrl组相比,QT组与FQT组的空肠形态得到明显改善,空肠组织的绒毛高度（P＜0.05）和绒毛高度/隐窝深度比（P＜0.001）增加;而且QT组和FQT组的空肠组织中紧密连接蛋白Occludin的表达量增加（P＜0.05）。空肠组织抗氧化能力分析表明:与Ctrl组相比,QT组与FQT组的T-AOC（P＜0.05）、CAT（P＜0.01）和GSH/GSSG（P＜0.01）等抗氧化指标上升,且空肠组织中的氧化代谢物MDA水平下降（P＜0.01）。（3）日粮添加槲皮素和FMT改善了断奶仔猪肠道微生物的结构和多样性。16S r DNA扩增子测序分析表明,组间Beta多样性（PC1和PC2解释了48.85%的变异）表明QT组（P＜0.01）和FQT组（P＜0.05）分别形成了与Ctrl组差异显著的肠道微生物结构。与Ctrl组相比,QT组的Alpha多样性指数Observed species（P＜0.01）、Chao1（P＜0.05）、ACE（P＜0.05）和PD＿whole＿tree（P＜0.01）显著增加,FQT组的ACE（P＜0.05）显著降低。（4）日粮添加槲皮素和FMT改变了断奶仔猪肠道微生物组成和代谢表型。与Ctrl组相比,QT组的Fibrobacteres（P＜0.05）、Akkermansia muciniphila（P＜0.01）、Clostridium butyricum（P＜0.01）、Clostridium celatum（P＜0.01）和Prevotella copri（P＜0.05）的相对丰度增加,Proteobacteria（P＜0.01）、Lactobacillus coleohominis（P＜0.01）和Ruminococcus bromii（P＜0.05）的相对丰度降低;FQT组Akkermansia muciniphila的相对丰度增加（P＜0.05）,但Proteobacteria的相对丰度降低（P＜0.05）。另外Bug Base预测结果表明,QT组和FQT组肠道微生物的厌氧性状相对丰度分别与Ctrl组差异显著（Ctrl vs.QT,P＜0.01;Ctrl vs.FQT,P＜0.05）。（5）日粮添加槲皮素和FMT改变了断奶仔猪肠道微生物的功能和代谢产物。PICRUSt2功能预测结果表明,与Ctrl组相比,QT组和FQT组肠道微生物的碳水化合物代谢、膜转运、翻译及核苷酸代谢等功能提高,Global and overview maps、辅助因子和维生素代谢以及能量代谢等功能下降。与Ctrl组相比,QT组和FQT组结肠内容物和空肠内容物中的短链脂肪酸（Short-chain fatty acids,SCFAs）（丙酸,P＜0.01;丁酸,P＜0.05）浓度增加。（6）日粮添加槲皮素和FMT诱导的差异肠道微生物及代谢产物与仔猪抗氧化能力和肠道完整性指标显著相关。采用斯皮尔曼等级相关性分析和显著性检验发现,鉴定出的差异菌和升高的SCFAs浓度与抗氧化能力和肠道完整性的指标呈显著正相关。综上所述:日粮中添加槲皮素缓解了早期断奶仔猪氧化应激、腹泻和肠道损伤,同时改善了早期断奶仔猪的肠道微生物多样性和功能。FMT进一步证明肠道微生物参与槲皮素对仔猪早期断奶

关键词：仔猪早期断奶应激槲皮素肠道微生物粪便微生物移植

SARS-CoV-2重组S1和S蛋白疫苗诱导保护性免疫的研究

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SARS-CoV-2重组S1和S蛋白疫苗诱导保护性免疫的研究

作者：钱曼云山西医科大学

学位级别：硕士

目的:新型冠状病毒(SARS-Co V-2)重组蛋白疫苗是一类预防2019新型冠状病毒肺炎的重要疫苗之一,SARS-Co V-2 S1蛋白和S蛋白作为致病性关键蛋白,在疫苗的研发设计中有重要作用。本研究通过体外构建SARS-Co V-2重组S1蛋白和S蛋白免疫动物,... 详细信息

目的:新型冠状病毒(SARS-Co V-2)重组蛋白疫苗是一类预防2019新型冠状病毒肺炎的重要疫苗之一,SARS-Co V-2 S1蛋白和S蛋白作为致病性关键蛋白,在疫苗的研发设计中有重要作用。本研究通过体外构建SARS-Co V-2重组S1蛋白和S蛋白免疫动物,探讨SARS-Co V-2重组S1蛋白和S蛋白疫苗对SARS-Co V-2的免疫保护效果。方法:1.实验动物免疫45只BALB/c纯系健康雌性小鼠随机分9组分别为空白对照组、S1-Al(OH)-0.1μg组、S1-Al(OH)-1μg组、S1-Al(OH)-5μg组、S1-Al(OH)-10μg组、S-Al(OH)-0.1μg组、S-Al(OH)-1μg、S-Al(OH)-5μg和S-Al(OH)-10μg组,将SARS-Co V-2重组S1蛋白和S蛋白分别联合氢氧化铝佐剂以0.1μg、1μg、5μg、10μg/只不同剂量对各组小鼠进行免疫。免疫程序分别为0和14天两次免疫。2.小鼠脾细胞分离试验第二次免疫后的第17天对每组小鼠进行眼球采血和脾细胞分离。先进行小鼠眼球采血,收集的血液经离心得到血清,将血清低温储存以备后续用于酶联免疫吸附试验和假病毒中和试验。将采血后的小鼠处死,通过解剖、取脾、研磨、过滤、裂解、润洗、重悬、脾细胞计数和单个核细胞(PBMCs)稀释用于酶联免疫斑点试验。3.酶联免疫吸附试验通过酶联免疫吸附试验检测免疫小鼠血清中Ig G抗体效价,按照小鼠新型冠状病毒S1(Ig G)检测试剂盒和小鼠新型冠状病毒S(Ig G)检测试剂盒操作说明书检测各组免疫小鼠血清Ig G抗体滴度。4.假病毒中和试验通过假病毒中和试验检测免疫小鼠血清对SARS-CoV-2野生型株(WT)、英国株(B.1.1.7)、巴西株(P.1)、印度株(B.1.617.2)、Mu毒株(B.1.621)和南非株(501Y.V2-1)六种假病毒毒株中和活性效价。5.酶联免疫斑点试验将小鼠脾细胞分离试验得到的脾细胞进行酶联免疫斑点试验,通过酶联斑点图像分析系统进行斑点计数,根据各组斑点数的多少反应各组小鼠的细胞免疫水平。结果:1.45只BALB/c纯系健康雌性小鼠在饲养期间均健康,除去空白对照组,其他各组均按时按量接种对应疫苗。2.各组小鼠均完成眼球采血实验,每只全血采血量均不少于600μl。各组小鼠也均在无菌条件下完成脾细胞的分离试验。3.SARS-Co V-2重组S和S1蛋白都能诱导小鼠产生较强的Ig G抗体水平。SARS-Co V-2 S蛋白诱导Ig G抗体效价强于S1蛋白,并且高剂量(5μg、10μg)组S和S1蛋白疫苗诱导小鼠产生的Ig G抗体水平强于低剂量(0.1μg、1μg)组。4.免疫S1蛋白的小鼠血清对SARS-Co V-2野生型株、英国株、巴西株有明显的中和活性,免疫S蛋白的小鼠血清除了对SARS-Co V-2野生型株、英国株、巴西株有明显中和活性之外,对印度株也有明显的中和活性,两种蛋白免疫的小鼠血清均对野生型株中和效果最强。SARS-Co V-2 S蛋白诱导中和抗体效价强于S1蛋白。5.S蛋白免疫的小鼠脾细胞能够显著诱导出干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)的产生。SARS-Co V-2 S蛋白诱导细胞免疫反应强于S1蛋白。结论:SARS-Co V-2重组S1蛋白和S蛋白疫苗高剂量(5μg、10μg)组比低剂量(0.1μg、1μg)组诱导产生更强的保护性免疫应答。S蛋白诱导产生的Ig G抗体、中和抗体、细胞免疫水平均高于S1。因此SARS-Co V-2重组S蛋白疫苗能够诱导产生较强的保护性免疫应答。

关键词：新型冠状病毒 S蛋白 S1蛋白新型冠状病毒突变株保护性免疫应答

Rosa26-LSL-IE2/Cre小鼠模型的建立以及IE2对海马认知功能的影响

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Rosa26-LSL-IE2/Cre小鼠模型的建立以及IE2对海马认知功能的影响

作者：牛俊云青岛大学

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目的:通过使用首次建立的Rosa26-LSL-IE2/Cre小鼠模型,进行HCMV IE2对大脑海马组织认知功能和相关NMDARs/Ca MKIIα/CREB信号通路影响的研究。该模型小鼠的建立突破了使用鼠巨细胞病毒(MCMV)作为HCMV感染模型的传统做法,克服了HCMV的物... 详细信息

目的:通过使用首次建立的Rosa26-LSL-IE2/Cre小鼠模型,进行HCMV IE2对大脑海马组织认知功能和相关NMDARs/Ca MKIIα/CREB信号通路影响的研究。该模型小鼠的建立突破了使用鼠巨细胞病毒(MCMV)作为HCMV感染模型的传统做法,克服了HCMV的物种限制性,为阐明HCMV引起神经系统发育畸形的致病机制奠定了理论基础。方法:通过Rosa26-LSL-IE2(IE2/Cre)转基因小鼠与Ca MKII-Cre(IE2/Cre)小鼠交配繁殖得到实验小鼠Rosa26-LSL-IE2/Cre(IE2/Cre)。将鼠尾DNA通过PCR技术进行IE2基因型的鉴定。根据PCR的结果将扩增出IE2和Cre基因的小鼠即Rosa26-LSL-IE2/Cre(IE2/Cre)小鼠作为实验组,野生小鼠作为对照组。通过Western Blot和IHC实验技术检测小鼠大脑中海马组织IE2蛋白的表达情况,使用HE染色技术分析小鼠海马组织的整体结构变化以及神经元细胞的状况。通过新物体识别和水迷宫测试对两组小鼠进行认知能力的检测。通过q PCR检测两组小鼠海马组织中Glu N1、Glu N2A、Glu N2B和BDNF的m RNA表达水平,并通过Western Blot检测Glu N1、Glu N2A和Glu N2B的蛋白表达水平以及Ca MKIIα和CREB的磷酸化水平。结果:1、Rosa26-LSL-IE2/Cre小鼠模型构建成功,HCMV IE2蛋白在大脑海马组织内稳定遗传和表达。2、HE的染色结果显示实验组小鼠海马组织内神经元细胞层排列紊乱且细胞数量减少。3、行为学相关结果表示新物体识别测试中实验组小鼠识别新物体C的识别指数(RI)明显小于对照组;水迷宫结果则显示在训练阶段实验组小鼠找寻并登上平台的时间长于对照组,在测试阶段实验组小鼠穿过目的平台的次数以及在平台所在象限游动的时间百分比均少于对照组。4、q PCR结果显示实验组小鼠中Glu N1、Glu N2A、Glu N2B和BDNF的m RNA表达水平均降低,Western Blot结果显示Glu N1、Glu N2A、Glu N2B的表达水平以及Ca MKIIα和CREB的磷酸化水平在实验组小鼠中减少。以上结果均具有统计学意义。结论:Rosa26-LSL-IE2/Cre小鼠模型的成功构建帮助实现HCMV IE2的稳定表达与遗传。HCMV IE2损伤模型小鼠的海马结构,影响NMDARs/Ca MKIIα/CREB信号通路的表达水平,这是HCMV IE2导致认知能力下降的机制之一。

关键词： HCMV IE2 先天性感染认知能力 NMDARs

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唱响经典音乐演绎精彩课堂

中学政治教学参考 2023年第17期 44-45页

作者：黄云雄广东省珠海市斗门区和风中学 519110

传统经典音乐作品是中华优秀传统文化的重要组成部分。音乐不仅具有娱乐价值,给人美的享受,还具备人文教育功能,让人的精神品质、道德修养、审美能力得到全面提升。思政课堂引入传统经典音乐,不但可以改变学生精神状态、激发学生思维潜... 详细信息

传统经典音乐作品是中华优秀传统文化的重要组成部分。音乐不仅具有娱乐价值,给人美的享受,还具备人文教育功能,让人的精神品质、道德修养、审美能力得到全面提升。思政课堂引入传统经典音乐,不但可以改变学生精神状态、激发学生思维潜能、提升学生精神境界,而且对活跃课堂、丰富教学内容、转变教学理念等具有积极意义。

关键词：传统经典音乐思想政治教育实践模式

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扎实推动共同富裕的价值引领

社会主义核心价值观研究 2022年第5期8卷 16-23页

作者：杜帮云云南大学马克思主义学院

共同富裕是中国特色社会主义的本质要求,是中国式现代化的重要特征。社会主义核心价值观是全面建设社会主义现代化国家的价值引领。在社会主义现代化国家建设的新征程上扎实推动共同富裕,无论是擘画共同富裕的善美蓝图,还是做大做好、... 详细信息

共同富裕是中国特色社会主义的本质要求,是中国式现代化的重要特征。社会主义核心价值观是全面建设社会主义现代化国家的价值引领。在社会主义现代化国家建设的新征程上扎实推动共同富裕,无论是擘画共同富裕的善美蓝图,还是做大做好、切好分好共同富裕的“蛋糕”,都要将社会主义核心价值观贯穿于实现共同富裕的全方面和全过程。

关键词：中国式现代化社会主义核心价值观共同富裕