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高压水动力法建立表面抗原表达缺失的乙型肝炎转染小鼠模型及初步评估

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肝脏 2017年第10期22卷 894-898页

作者：张毅陈捷亮方钟徐国光李军南京医科大学 210029 上海市公共卫生临床中心肝病一科复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫计委重点实验室南京医科大学第一附属医院感染病科

目的探讨HBsAg在小鼠体内模型中对宿主免疫应答调节及病毒感染慢性化中的作用。方法在已有高压水动力法转染pAAV-HBV1.2质粒建立乙肝小鼠模型的基础上,通过点突变技术引入终止密码子至pAAV-HBV1.2质粒上的HBsAg读码框,构建HBsAg无法转... 详细信息

目的探讨HBsAg在小鼠体内模型中对宿主免疫应答调节及病毒感染慢性化中的作用。方法在已有高压水动力法转染pAAV-HBV1.2质粒建立乙肝小鼠模型的基础上,通过点突变技术引入终止密码子至pAAV-HBV1.2质粒上的HBsAg读码框,构建HBsAg无法转录的突变质粒,再利用该质粒构建HBsAg表达缺失的乙肝小鼠模型。通过比较原始质粒建立的乙肝模型小鼠,检测分析外周血中HBV抗原与DNA等病毒感染指标,比较肝脏病变和免疫细胞浸润情况。结果成功构建了HBsAg缺失的乙肝模型小鼠:在乙肝模型小鼠和HBsAg缺失突变的模型小鼠外周血中均能检测到4 COI/mL水平的HBeAg,两组小鼠没有差异,但只有乙肝小鼠体内能检测到102 COI/mL以上的HBsAg和103至106拷贝/mL的HBV DNA,HBsAg缺失的小鼠中无法检测到HBsAg和HBV DNA;动态监测显示HBeAg在乙肝和HBsAg缺失突变的两组小鼠中的阳性率均逐步降低,在HBsAg缺失突变组中降低的更明显,第8周时仅有20%的小鼠为HBeAg阳性,而此时未突变乙肝组的阳性率为60%;免疫组织化学结果显示:在阴性对照小鼠的肝脏结构较完整,未见聚集的浸润免疫细胞,而乙肝和HBsAg缺失的乙肝小鼠肝小叶结构均松散,乙肝小鼠肝脏中有聚集的浸润性免疫细胞,HBsAg缺失的小鼠肝脏缺少免疫细胞的聚集,却存在严重的肝细胞毛玻璃样变性。结论成功构建了HBsAg缺失的乙肝转染小鼠模型;并发现HBsAg在HBV完整病毒颗粒包装和出胞,以及肝脏病变和免疫细胞浸润过程中发挥了重要的作用。

关键词：慢性乙型肝炎乙肝病毒乙肝表面抗原高压水动力法毛玻璃样病变免疫细胞浸润

不同来源人肝细胞系β干扰素诱生及其信号通路的比较

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微生物与感染 2009年第2期4卷 81-87页

作者：陈辉邬敏于士颜陈捷亮袁正宏复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心上海201508

β干扰素(IFN-β)是一种在抗病毒固有免疫应答过程中具有重要作用的细胞因子,而肝细胞作为肝炎病毒的宿主细胞被认为具有IFN-β诱生的能力,但目前尚未建立合适的体外人肝细胞模型用以研究乙型肝炎病毒(HBV)与肝细胞干扰素系统的相互作... 详细信息

β干扰素(IFN-β)是一种在抗病毒固有免疫应答过程中具有重要作用的细胞因子,而肝细胞作为肝炎病毒的宿主细胞被认为具有IFN-β诱生的能力,但目前尚未建立合适的体外人肝细胞模型用以研究乙型肝炎病毒(HBV)与肝细胞干扰素系统的相互作用。为此,本研究选取了3株人肝细胞系PH5CH8、Huh7、HepG2作为研究对象,以IFN-β诱生剂新城疫病毒(NDV)与多聚次黄苷酸-胞苷酸〔poly(I∶C)〕处理细胞,从转录、蛋白水平及功能学角度检测产生IFN-β的能力。结果显示,与Huh7和HepG2细胞相比,PH5CH8细胞经NDV与poly(I∶C)诱导可产生高水平的IFN-β。进一步利用蛋白免疫印迹法比较3株细胞系内IFN-β诱生信号通路相关蛋白的表达水平,结果显示,与PH5CH8细胞相比,Huh7和HepG2细胞内多种信号蛋白的表达水平偏低。本研究结果为选择合适肝细胞系用于HBV与干扰素系统作用的研究提供了实验依据,并为重建IFN诱生系统选择性缺陷的肝细胞系提供了理论基础。

关键词：肝细胞 β干扰素诱生信号通路 β干扰素诱生剂

两种抽提乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA方法的效果比较

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微生物与感染 2021年第5期16卷 313-321页

作者：胡孔颖金宇焘叶建宇宰文静王洋李雨檬陈捷亮复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系医学分子病毒学教育部/卫健委重点实验室上海200032

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)作为一种嗜肝DNA病毒,在感染肝细胞后会在细胞核中形成病毒转录复制的模板和基因储存库——共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),其持续存在是乙型肝炎慢性化和难以治愈的核心... 详细信息

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)作为一种嗜肝DNA病毒,在感染肝细胞后会在细胞核中形成病毒转录复制的模板和基因储存库——共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),其持续存在是乙型肝炎慢性化和难以治愈的核心,也是此研究领域内的重点。从细胞样品中稳定抽提获取cccDNA对于保证cccDNA检测的准确性至关重要。Hirt法是一种抽提真核细胞染色体外DNA的方法,被用于HBV cccDNA的抽提,但存在操作复杂和耗时长等问题。为简化操作,有研究对Hirt法进行改良,结合硅胶膜离心柱来抽提染色体外DNA,但尚不清楚该法用于HBV cccDNA抽提与传统Hirt法的效果差异。本研究基于HBV cccDNA细胞转染系统、HBV复制细胞系及感染系统,以DNA印迹(Southern blot)和定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)作为检测评价手段,平行比较了传统Hirt-酚/氯仿法与改良Hirt-过柱法抽提HBV cccDNA的效果。结果表明,两种方法具有相当的抽提效率和抽提特异性,而改良Hirt-过柱法耗时更短,提示在进行细胞HBV cccDNA抽提时可选择改良Hirt-过柱法以提高实验效率。

关键词：乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA 抽提方法 Hirt法硅胶膜离心柱

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新冠病毒为何会变异

老年教育（长者家园版） 2021年第4期 56-56页

作者：陈捷亮复旦大学基础医学院病原生物学系

前段时间,英国、法国、日本等一些国家相继发现变异新冠病毒感染者,让人们再次产生担心和困惑:新冠病毒为什么会变异?变异后的毒株会不会是新冠病毒的'加强版'呢?其实早在2020年3月,欧洲就出现了新冠病毒变异株——D614G的大规模流行,...

前段时间,英国、法国、日本等一些国家相继发现变异新冠病毒感染者,让人们再次产生担心和困惑:新冠病毒为什么会变异?变异后的毒株会不会是新冠病毒的'加强版'呢?其实早在2020年3月,欧洲就出现了新冠病毒变异株——D614G的大规模流行,与后来英国暴发的名为'B.1.1.7'的新变种病毒株N501Y相类似,均是病毒刺突蛋白发生突变.这种蛋白就如同一把钥匙,能打开进入细胞的'门锁'.突变后的病毒,'开锁能力'变强了,传播性也更强了.

关键词：

来源：评论

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因果中介分析的理论进展及其应用

数量经济技术经济研究 2025年

作者：赵西亮厦门大学宏观经济研究中心厦门大学经济学院和王亚南经济研究院

最近二十多年来，因果中介分析方法作为一种重要的机制分析工具取得了重要的发展，它完善了传统的中介分析方法，使机制分析更加可信。然而，国内鲜有文献介绍因果中介分析，本文试图将这一重要方法介绍给国内用户。本文首先简单介绍传... 详细信息

最近二十多年来，因果中介分析方法作为一种重要的机制分析工具取得了重要的发展，它完善了传统的中介分析方法，使机制分析更加可信。然而，国内鲜有文献介绍因果中介分析，本文试图将这一重要方法介绍给国内用户。本文首先简单介绍传统中介分析方法并讨论其局限；然后定义主要的目标参数——自然间接效应和自然直接效应，讨论识别中介效应的关键识别条件——序贯可忽略性假设，并介绍中介效应的估计方法，以及违反基本识别条件时的处理方法；最后，利用因果中介方法评估了2018年我国城镇居民教育通过职业渠道影响收入的程度，发现大学教育可以通过职业渠道显著提升收入，职业渠道可以解释大学教育回报的45%左右，而对仅完成高中教育的个体，职业渠道对收入的影响较小，仅11%左右。利用配偶教育、父母职业分别作教育和职业的工具变量处理干预和中介变量的内生性问题，得到的结果基本一致。

关键词：因果中介分析自然间接效应自然直接效应序贯可忽略性

腹部超声在炎症性肠病患儿诊断及治疗后活动性评估中的应用

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中国医学创新 2025年第1期22卷 134-139页

作者：陈捷吴蔚郑巍江西省儿童医院超声科江西南昌330006 江西省儿童医院消化科江西南昌330006 江西省儿童医院影像科江西南昌330006

目的:探究腹部超声在炎症性肠病(IBD)患儿诊断及治疗后活动性评估中的应用价值。方法:选择2021年1月—2023年1月于江西省儿童医院就诊的82例疑似IBD患儿,以结肠镜检查及组织活检结果为金标准,最终77例确诊IBD(纳入IBD组),其中克罗恩病(C... 详细信息

目的:探究腹部超声在炎症性肠病(IBD)患儿诊断及治疗后活动性评估中的应用价值。方法:选择2021年1月—2023年1月于江西省儿童医院就诊的82例疑似IBD患儿,以结肠镜检查及组织活检结果为金标准,最终77例确诊IBD(纳入IBD组),其中克罗恩病(CD)37例(纳入CD组)、溃疡性结肠炎40例(纳入UC组);另选择于本院体检的50例健康儿童纳入健康组。计算腹部超声诊断IBD的敏感度、特异度、准确率;比较IBD组、健康组的肠壁厚度、动脉阻力指数(RI)及血流状态;比较CD组和UC组的超声检查图像指标、病变定位符合率及活动期和缓解期的肠壁厚度、动脉RI及血流状态。结果:腹部超声诊断IBD的敏感度、特异度、准确率分别为92.21%、60.00%、90.24%;IBD组肠壁厚度高于健康组,动脉RI低于健康组,血流分级差于健康组(P<0.05);CD组正常结构消失、肠间淋巴结肿大、肠间积液、炎性包块发生率均高于UC组(P<0.05);CD组超声诊断病变定位符合率为94.59%,UC组超声诊断病变定位符合率为90.00%;活动期、缓解期,CD组肠壁厚度均高于UC组,差异均有统计学意义(P<0.05);活动期,两组肠壁厚度高于缓解期,动脉RI低于缓解期,差异均有统计学意义(P<0.05)。缓解期,两组肠壁血流分级情况优于活动期,差异有统计学意义(P<0.05);活动期、缓解期,两组肠壁血流分级情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。肠壁厚度、动脉RI诊断CD活动期的AUC分别为0.790、0.741,诊断UC活动期的AUC分别0.668、0.714。结论:腹部超声对IBD具有较高诊断价值,能够相对准确地定位病变位置,减少误诊,且可预判患儿治疗后活动性。

关键词：超声炎症性肠病诊断

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王蒙与“人文精神讨论”

当代文坛 2025年第1期 134-139页

作者：郭宝亮广州华商学院文学院

主流文化、精英文化、大众文化三足鼎立的局面与激进主义和保守主义的论争,构成1990年代初期“人文精神讨论”的文化语境。王蒙作为论争中重要的当事方参与论争,论争虽然由“王朔现象”引发的文化商业化消费主义而起,但论争的实质是不... 详细信息

主流文化、精英文化、大众文化三足鼎立的局面与激进主义和保守主义的论争,构成1990年代初期“人文精神讨论”的文化语境。王蒙作为论争中重要的当事方参与论争,论争虽然由“王朔现象”引发的文化商业化消费主义而起,但论争的实质是不同的价值观和思维方式之争。王蒙并不反对“人文精神”本身,而是反思性地批判了启蒙知识分子“激进的保守主义”的“二极对立”思维方式,王蒙站在“自由的保守主义”价值立场,倡扬一种包容多元的立体复合式的辩证思维方式。

关键词：王蒙人文精神讨论思维方式 “二极对立” 辩证

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以习近平文化思想为指引推进文化自信自强

广东社会科学 2025年

作者：李凤亮华南农业大学乡村振兴研究院

习近平总书记关于文化自信的理论创新一以贯之，反复强调文化自信自强对于民族复兴的重大意义。在百年未有之大变局下，以习近平文化思想为指引推进文化自信自强，旨在赓续文脉、礼敬文明，创造属于新时代的新文化，创造人类文明新形态... 详细信息

习近平总书记关于文化自信的理论创新一以贯之，反复强调文化自信自强对于民族复兴的重大意义。在百年未有之大变局下，以习近平文化思想为指引推进文化自信自强，旨在赓续文脉、礼敬文明，创造属于新时代的新文化，创造人类文明新形态。具体到文化治理与实践层面，一是要以人为本，满足人民日益增长的精神文化需求，激发全民族文化创新创造活力；二是要守正创新，善用“两个结合”关键法宝，焕发中华优秀传统文化新的时代光华；三是要走向世界，推动构建人类命运共同体，提升全球文明交流互鉴合作效能。

关键词：习近平文化思想文化自信自强以人为本守正创新文明互鉴

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制造毒品行为的涵义界定与司法处理

法律适用 2025年

作者：姜远亮最高人民法院刑事审判第五庭

实践中制造毒品的内涵与外延并非一成不变，其经历了由无规定到有规定，由两种方法到三种方法，由单向规定到正反双向界定的演变，总体呈现扩张趋势。对制造毒品的三种方法应当正确理解，把握核心要义，精准把握“毒品原植物”“化学反... 详细信息

实践中制造毒品的内涵与外延并非一成不变，其经历了由无规定到有规定，由两种方法到三种方法，由单向规定到正反双向界定的演变，总体呈现扩张趋势。对制造毒品的三种方法应当正确理解，把握核心要义，精准把握“毒品原植物”“化学反应”“改变毒品的成分和效用”意旨，准确界定各种方法外延。物理方法制毒既不传统，也不典型，对其认定要做到四个“把握好”，对于不能认定为制造毒品的加工、配制行为，应优先在刑法内部寻求处理路径，以相关贩卖毒品等犯罪的共犯论处或量刑情节考虑。办理制毒案件，要严格认定制毒阶段及制出物性质，精准确定制毒数量，综合考虑各被告人在制毒原料采购、制毒资金来源、制毒场所选定、制毒技术提供、制毒行为指挥等行为中的地位作用等予以处理。在死刑适用上，根据制出物为成品、半成品及粗制毒品的不同，准确适用不同的死刑裁判规则，确保对制毒犯罪分子精准打击和公正处理。

关键词：制造毒品物理方法毒品数量死刑适用