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重组人G-CSF构象异构体的分离与鉴定

军事医学科学院院刊 2000年第4期24卷 241-243页

作者：张军权陈惠鹏王清明陈吉中范国才军事医学科学院放射医学研究所北京100850

目的 :探索原核基因工程产品质量控制的指标。方法 :以重组粒细胞集落刺激因子(G CSF)为模型 ,将其中构象不均一组分进行分离 ,并对每个成分进行鉴定。结果 :重组人G CSF在大肠杆菌中以包涵体形式表达 ,经纯化和复性后 ,SDS PAGE鉴定为... 详细信息

目的 :探索原核基因工程产品质量控制的指标。方法 :以重组粒细胞集落刺激因子(G CSF)为模型 ,将其中构象不均一组分进行分离 ,并对每个成分进行鉴定。结果 :重组人G CSF在大肠杆菌中以包涵体形式表达 ,经纯化和复性后 ,SDS PAGE鉴定为单一蛋白带 ,但在非变性PAGE中出现 3条带 ,继而采用制备型非变性PAGE成功地将 3种成分分离。 3种成分在同样的缓冲体系中分别存放 3个月 ,仍未见互变异构现象。经激光解析飞行时间质谱检测 ,3种成分相对分子质量相同 ,测序表明 ,N端连续的 5个氨基酸残基排列完全相同。结论 :3种成分为重组蛋白的不均一折叠形成的构象异构体。

关键词：粒细胞集落刺激因子 G-CSF 构象异构体分离鉴定

基于肖特基势垒调控的低能耗高识别精度的有机突触晶体管

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Science China Materials 2023年第11期66卷 4453-4463页

作者：陈天健俞衽坚高昌松陈振家陈惠鹏郭太良陈伟 Institute of Optoelectronic Display National&Local United Engineering Lab of Flat Panel Display TechnologyFuzhou UniversityFuzhou 350002China Fujian Science&Technology Innovation Laboratory for Optoelectronic Information of China Fuzhou 350100China Joint School of National University of Singapore and Tianjin University International Campus of Tianjin UniversityFuzhou 350207China Department of Chemistry National University of SingaporeSingapore 117543Singapore Department of Physics National University of SingaporeSingapore 117543Singapore

为了构建类脑神经形态计算网络,单一的人工突触器件应该表现出极低的能量消耗,达到飞焦耳级别.然而,大多数现有的基于欧姆接触的低能耗突触器件实施方案,要么结构复杂,要么需要特定材料,这些因素都阻碍了人工神经网络的进一步发展.本文... 详细信息

为了构建类脑神经形态计算网络,单一的人工突触器件应该表现出极低的能量消耗,达到飞焦耳级别.然而,大多数现有的基于欧姆接触的低能耗突触器件实施方案,要么结构复杂,要么需要特定材料,这些因素都阻碍了人工神经网络的进一步发展.本文报告了一种肖特基势垒调控的有机突触晶体管(SBROST).通过在源电极和半导体之间的接触界面引入肖特基势垒,显著降低了单个突触事件的能耗,与使用欧姆接触的传统有机突触晶体管相比,SBROST的性能得到了改善.SBROST不仅可在低工作电压和电流下运行,还具有可适用于不同有机突触器件的简单结构.此外,SBROST可以实现低能耗下的高识别精度.经过100个周期,基于SBROST的手写人工神经网络表现出卓越的识别精度(93.53%),接近理想精度(95.62%).将肖特基势垒引入突触晶体管的方案为构建类脑神经计算网络提供了新的视角.

关键词： synaptic plasticity low energy consumption Schottky barrier high recognition accuracy artificial neural network

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睫状神经营养因子突变体的设计及活性分析

生物化学与生物物理进展 2007年第4期34卷 408-411页

作者：毕华岳俊杰袁力勇饶春明陈惠鹏王军志中国药品生物制品检定所生化室北京100050 军事医学科学院生物工程研究所北京100071

利用计算机分子模拟系统模建了CNTFRα的三维结构,并对CNTF与CNTFRα结合的关键部位进行分析,同时综合了同源比较的结果及CNTF分子自身的特点,设计了2个CNTF的突变体A和B.表达纯化后得到目的蛋白,TF-1细胞增殖实验的结果表明,2个突变体... 详细信息

利用计算机分子模拟系统模建了CNTFRα的三维结构,并对CNTF与CNTFRα结合的关键部位进行分析,同时综合了同源比较的结果及CNTF分子自身的特点,设计了2个CNTF的突变体A和B.表达纯化后得到目的蛋白,TF-1细胞增殖实验的结果表明,2个突变体蛋白的比活性均达到106U/mg的水平,且A的活性大于B的活性.上述结果初步表明设计的合理性,为其进一步的开发和应用奠定了基础.

关键词：计算机分子模拟表达纯化睫状神经营养因子突变体

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通过RNA干涉沉默SARS病毒的研究前景

生物技术通讯 2003年第3期14卷 252-253页

作者：吴峰陈惠鹏放射医学研究所北京100850 生物工程研究所北京100071

RNA干涉(RNAi)是双链RNA介导的转录后基因沉默作用的重要机制之一。RNAi在后基因组时代的基因功能研究和药物开发中具有广阔应用前景。本文综述了RNAi在抗SARS病毒药物研究中的应用前景。

关键词： RNA干涉 SARS病毒基因沉默药物

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人脑神经特异性烯醇化酶的纯化及其性质研究

生物化学杂志 1989年第5期5卷 423-427页

作者：孙志贤党进军陈惠鹏姜国芝军事医学科学院放射医学研究所

本研究设计了利用DEAE-52离子交换层析、Sephadex G-150凝胶过滤、以及经Ultrogel和DEAE-Sepharose CL-6B柱进一步层析分离获得高纯度人脑神经特异性烯醇化酶(NSE)的纯化方案。纯化的酶经SDS电泳鉴定为单一亚基区带,其亚基分子量约为45,... 详细信息

本研究设计了利用DEAE-52离子交换层析、Sephadex G-150凝胶过滤、以及经Ultrogel和DEAE-Sepharose CL-6B柱进一步层析分离获得高纯度人脑神经特异性烯醇化酶(NSE)的纯化方案。纯化的酶经SDS电泳鉴定为单一亚基区带,其亚基分子量约为45,000。NSE的等电点约为4.7。该酶作用2-磷酸甘油酸的km值为0.7mmol/L,对Mg^++的km值为0.7mmol/L。Mg^++为烯醇化酶必不可少的辅助因子。在50℃以下,NSE具有一定的热稳定性。

关键词：脑神经烯醇化酶柱层析

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亲和色谱法的进展

色谱 1999年第3期17卷 253-256页

作者：张津辉蒋中华陈惠鹏马立人军事医学科学院放射医学研究所北京100850

概述了亲和色谱法分离机理、色谱填料及其应用的新进展，着重介绍了亲和固定相中配基发掘的新途径。全文包括66篇文献。

关键词：亲和色谱法配基分离纯化填料固定相

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美国、欧盟和中国生物技术药物的比较

中国生物工程杂志 2005年第2期25卷 82-94页

作者：胡显文陈惠鹏汤仲明马清钧军事医学科学院生物工程研究所北京100071 军事医学科学院放射医学研究所北京100850

按照相同表达系统表达的相同氨基酸序列的产品视为同种产品,而不同表达系统表达的相同氨基酸序列的产品视为不同产品的原则,归纳总结了美国、欧盟和中国已批准上市的生物技术药物。美国FDA批准的以基因工程产品、抗体工程产品和细胞工... 详细信息

按照相同表达系统表达的相同氨基酸序列的产品视为同种产品,而不同表达系统表达的相同氨基酸序列的产品视为不同产品的原则,归纳总结了美国、欧盟和中国已批准上市的生物技术药物。美国FDA批准的以基因工程产品、抗体工程产品和细胞工程产品为主要代表的生物技术药物共79种(18种为大肠杆菌表达,8种为酵母表达,53种为哺乳动物细胞培养生产),其中基因重组蛋白质药物为64种。欧盟批准了49种基因重组酶、激素或细胞因子,11种基因重组治疗性抗体和5种基因重组疫苗。在欧美60％-70％的产品由哺乳动物细胞表达。中国批准了27种生物技术药物。比较了美国、欧盟和中国生物制药的特点。

关键词：生物技术药物批准基因重组蛋白白质大肠杆菌表达酵母表达抗体工程中国产品欧盟

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冠状病毒感染细胞的受体结合机制

生物技术通讯 2003年第3期14卷 249-251页

作者：刘刚陈惠鹏放射医学研究所北京100850 生物工程研究所北京100071

病毒感染宿主细胞是病毒致病的关键所在,病毒感染细胞需要与其受体相结合,介导其与细胞的膜融合反应。本文综述了冠状病毒受体结合机制的研究进展,以及其在SARS病毒致病机制中可能的作用。

关键词：冠状病毒感染细胞受体结合机制致病机制细胞粘附分子癌胚抗原家族蛋白氨基肽酶N 凹陷蛋白

抗血管生成活性的重组人proEMAPⅡ/p43蛋白缺失突变体的构建和筛选(英文)

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生物化学与生物物理进展 2014年第6期41卷 567-574页

作者：邢玉华刘大涛谭俊杰胡立德刘刚付学奇陈惠鹏军事医学科学院生物工程研究所北京100071 吉林大学生命科学学院长春130012 上药集团信谊药厂上海201206

proEMAPⅡ（又称p43蛋白）是哺乳动物氨酰tRNA合成酶的辅助因子，近年来发现，p43具有细胞因子活性以及抗新生血管生成的作用，具有潜在的抗肿瘤疗效．p43的C端结构域即为EMAPⅡ，其结构和功能都已知，具有细胞因子和抗血管生成的双重... 详细信息

proEMAPⅡ（又称p43蛋白）是哺乳动物氨酰tRNA合成酶的辅助因子，近年来发现，p43具有细胞因子活性以及抗新生血管生成的作用，具有潜在的抗肿瘤疗效．p43的C端结构域即为EMAPⅡ，其结构和功能都已知，具有细胞因子和抗血管生成的双重功能．但是N端的结构还不清楚，研究表明全长的p43比EMAPⅡ具有更高的生物学活性，但是p43的结构和作用机制尚不明确．此外，作为蛋白质药物，更小的分子能够减少免疫原性和副作用，从而发挥更好的活性．本文利用生物信息学方法，对p43 N端的二级结构进行预测，并且在不破坏二级结构的前提下，构建了10个p43的缺失突变体，在体外对10个缺失突变体与全长的p43蛋白进行抗新生血管生成活性验证比较，最终我们获得了3个活性高的p43缺失突变体，并且发现N端的1～16，1～79位氨基酸和C端的264～312位氨基酸不是p43发挥抗血管生成功能所必需的，而且它们的删除使得活性位点更好地呈现并发挥活性．通过我们的研究，有助于揭示p43蛋白结构和功能的关系以及其作用机制，同时为临床筛选肿瘤治疗候选药物奠定基础．

关键词： proEMAPⅡ p43 缺失突变体抗血管生成剂内皮细胞迁移管腔形成