检索结果-南通市图书馆

未能把握历史赋予机遇的司马炎

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文史天地 2024年第5期 65-69页

作者：陈忠海不详

西晋建立之初出现了“太康之治”,与西汉初年的“文景之治”唐朝初年的“贞观之治”齐名,都是历史上著名的治世。然而西晋政权只存续了51年,没能造就一个盛世。历史赋予晋武帝司马炎成为一代名君的机遇,他却未能把握住。

关键词：司马炎文景之治贞观之治太康之治晋武帝西汉初年机遇

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漫话古代的“学区房”

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文史天地 2024年第3期 4-7页

作者：陈忠海瞭望智库

中国古代虽然没有现代意义上的“学区房”,但也存在着为读书、借书方便而“择房”的现象。不仅学宫、国子监等近旁的房产成为读书人向往的“学区房”,一些学者和藏书家私宅附近也出现了“学区房”,甚至由此拉升了周边的房价。

关键词：学区房国子监藏书家读书人古代

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蜀汉落幕：后诸葛亮时代

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廉政瞭望 2024年第8期 34-37页

作者：陈忠海

后主刘禅建兴十二年（234年）八月，蜀汉丞相诸葛亮积劳成疾病逝于五丈原军中，蜀汉政权进入后诸葛亮时代。有人认为蜀汉后期人才凋零，所谓“蜀中无大将，廖化作先锋”；有人以此非议诸葛亮的用人策略与人才培养工作。其实，这些都是...

后主刘禅建兴十二年（234年）八月，蜀汉丞相诸葛亮积劳成疾病逝于五丈原军中，蜀汉政权进入后诸葛亮时代。有人认为蜀汉后期人才凋零，所谓“蜀中无大将，廖化作先锋”；有人以此非议诸葛亮的用人策略与人才培养工作。其实，这些都是对真实历史的误读，蜀汉后期依然人才济济，群星闪耀。志虑忠纯：忠实践行丞相遗志诸葛亮去世后，蜀汉不再设丞相。后主刘禅下诏，任命丞相留府长史蒋琬为尚书令，“总统国事”。次年，蒋琬升任大将军，录尚书事，兼益州刺史。

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青藏高原水毛茛查尔酮合成酶（CHS）基因家族鉴定及表达载体构建

青藏高原水毛茛查尔酮合成酶（CHS）基因家族鉴定及表达载体构建

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作者：陈忠海西藏大学

学位级别：硕士

植物为适应青藏高原极端环境,演化出复杂的适应机制,较陆生植物而言,高原水生植物的适应性机制研究尚不清楚。水毛茛(Batrachium bungei)是毛茛科水毛茛属的代表物种,为多年生沉水草本植物,在青藏高原广泛分布,是青藏高原水生植被类群... 详细信息

植物为适应青藏高原极端环境,演化出复杂的适应机制,较陆生植物而言,高原水生植物的适应性机制研究尚不清楚。水毛茛(Batrachium bungei)是毛茛科水毛茛属的代表物种,为多年生沉水草本植物,在青藏高原广泛分布,是青藏高原水生植被类群的重要组成成分,具有防止水体污染,净化水质作用,常作为湿地水质监测的指示植物,是探究水生植物适应高原极端环境的理想材料。查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)超基因家族又称植物类型III聚酮合酶超基因家族,是合成黄酮类物质的第一个限速酶,在植物生长发育和适应环境的过程中扮演着重要角色。目前,有关CHS基因的研究大多集中在陆生植物,有关水生植物CHS基因的特征、功能及其进化等依然不清楚,需进一步的探究。前期转录组学研究显示,水毛茛类黄酮代谢途径在高原环境下得到显著富集,且部分CHS基因的表达量随海拔升高而增高,从分子层面上验证了CHS基因参与了水毛茛适应高原多样的极端环境调控。本研究以采集于青藏高原的水毛茛为研究对象,基于前期水毛茛转录组数据,对水毛茛查尔酮合成酶基因家族成员进行鉴定分析,并克隆到水毛茛的Bb CHS4基因,分析其序列特征、蛋白结构与功能,构建了植物过表达载体及原核表达载体,获得转水毛茛Bb CHS4基因拟南芥,主要结果如下:1.Bb CHS基因家族的鉴定及分析基于水毛茛转录组数据,利用生物信息学的方法鉴定到6条水毛茛CHS基因家族基因Bb CHS1～Bb CHS6。理化性质分析表明,CDS长度在1140～1191 bp,氨基酸数目介于380～396 aa,蛋白分子量在40～43 KD,等电点介于5.50～6.04,各成员间氨基酸序列一致性在38%～85%之间。Bb CHS1～Bb CHS6蛋白三级结构模型比较分析发现,Bb CHS1～5结构相似性较高,Bb CHS6明显缺失部分螺旋卷曲结构。共识别到10个保守基序,Bb CHS1缺失了motif10,Bb CHS6蛋白的motif1、7、10均发生了缺失。对6条序列构建系统进化树,Bb CHS2、Bb CHS3、Bb CHS4、Bb CHS5聚为一支,Bb CHS1及Bb CHS6则单独分支,与结构上的分析结果一致,表明水毛茛CHS基因家族成员间结构上高度保守,同时也具有较低的变异性。对9个物种,121条CHS序列,构建系统进化树,水毛茛CHS分布在四个亚类中,Bb CHS3和Bb CHS4与毛茛科植物独叶草聚为一支,表明在进化过程中较为保守,同源性较高。2.Bb CHS4基因的克隆与同源性分析设计特异性引物,从水毛茛c DNA中分离克隆到Bb CHS4基因,该基因具有Chal＿sti＿synt＿N和Chal＿sti＿synt＿C家族特征结构域。运用NCBI在线blast功能,对Bb CHS4的核苷酸、氨基酸序列进行同源性检索分析,结果显示Bb CHS4基因在核苷酸及氨基酸水平上都与毛茛科毛茛属植物花毛茛的CHS基因同源性最高,达90%以上。3.Bb CHS4基因编码蛋白的结构特征与功能相关性Bb CHS4基因CDS全长序列1182 bp,编码393个氨基酸,蛋白分子质量为42.87 Ku,理论p I为5.92,不稳定性指数为39.29,属于稳定蛋白质,亲疏水性分析结果偏向为亲水蛋白。二级结构结果表明Bb CHS4蛋白α-螺旋占比最高,达43.51%。推测到Bb CHS4蛋白没有信号肽,属于非分泌蛋白。三级结构预测结果表明Bb CHS4蛋白能够形成同源二聚体,且催化腔位于外侧,与拟南芥At CHS-A的chain A进行单体模型比对,其多肽链空间结构高度重叠,表明Bb CHS4与At CHS蛋白结构上的高度相似性及功能保守性。水毛茛Bb CHS4与同源物种进行氨基酸序列比对,发现Bb CHS4保留了CHS蛋白催化中心的Cys-His-Asn催化三元组活性位点,CHS氨基酸活性功能部位“RLMMYQQGCFAGGTVLR”,特征序列“GVLFGFGPGL”及苯丙氨基酸残基(Phe215和Phe265)底物特异性结合位点。4.Bb CHS4基因拟南芥遗传转化及原核表达采用无缝克隆法,将Bb CHS4基因插入植物过表达载体p BI121-EGFP及原核表达载体p ET-32a中,通过农杆菌介导的花序浸染法将植物过表达重组质粒转入野生型拟南芥中,并通过抗性筛选、荧光标记、g DNA水平鉴定、RNA水平鉴定,共获得T代p BI121-EGFP-Bb CHS4转基因株系20个,T代纯合过表达株系5个。烟草亚细胞定位结果显示Bb CHS4基因定位在细胞质上。对T代过表达Bb CHS4基因拟南芥及野生型拟南芥进行黄酮含量比较测定,过表达Bb CHS4基因拟南芥较野生型黄酮含量降低,分析可能与同源基因间的相互抑制作用有关,需进一步分析验证。将p ET-32a-Bb CHS4重组质粒转入大肠杆菌BL21中进行诱导表达,B

关键词：青藏高原水毛茛查尔酮合成酶基因克隆遗传转化

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