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中国棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒的复制与宿主细胞核骨架相互关系的研究

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中国棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒的复制与宿主细胞核骨架相互关...

作者：陈巨星华中师范大学

学位级别：硕士

以中国棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒（HaSNPV）-Hz细胞为实验系统，用细胞的选择性分级抽提方法、整装细胞电镜技术首先证明了Hz细胞中也存在一个精细的核骨架网络体系。同时用HaSNPV感染Hz细胞，抽提其核骨架，发现感染早期病毒的复... 详细信息

以中国棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒（HaSNPV）-Hz细胞为实验系统，用细胞的选择性分级抽提方法、整装细胞电镜技术首先证明了Hz细胞中也存在一个精细的核骨架网络体系。同时用HaSNPV感染Hz细胞，抽提其核骨架，发现感染早期病毒的复制过程未对宿主细胞核骨架的形态结构产生明显的影响，而感染晚期多角体在核骨架网络中进行装配，但是在核骨架网络中没有观察到病毒粒子等超微结构。于是进一步采用常规树脂包埋切片技术观察经选择性分级抽提的HaSNPV感染96h的细胞核骨架结构体系，发现：病毒发生基质出现在核骨架网络中，在病毒发生基质内有大量核衣壳，在其外部的环带区，有许多病毒粒子和已装配成熟的多角体。由此可以证明多角体和病毒粒子的装配过程都利用了核骨架这个结构体系。用细胞的选择性分级抽提方法抽提正常Hz细胞，以及感染不同时间的Hz细胞的核骨架蛋白，进行SDS-PAGE，银染，结果显示，在感染48h以后的Hz细胞核骨架蛋白中，大约32KD、30KD、29KD分子量处开始出现增强的蛋白带，由于病毒粒子的衣壳蛋白和另一种结构蛋白的分子量正好也分别是32KD、30KD，于是制备HaSNPV多角体来源型病毒（PDV）的抗体，并用硫酸铵盐析分离法进行初步提纯，用此初步提纯的抗体对感染不同时间的细胞核骨架蛋白进行Western blot检测，发现感染48h以后的细胞核骨架上结合了的病毒粒子的衣壳蛋白和另一种结构蛋白。而核骨架上是否结合多角体蛋白，还需要通过免疫学方法和Western blot方法进一步证实。我们通过间接免疫电镜胶体金标记技术对正常Hz细胞进行标记（一抗为：anti-actin，二抗为：HRP-IgG），经透射电镜观察发现：对照无胶体金颗粒，而处理样品则发现很多胶体金颗粒，其排布无明显规律。这说明细胞核骨架上确实存在肌动蛋白成分。此外，对正常Hz细胞和感染不同时间的Hz细胞的核骨架蛋白用一抗anti-actin、二抗HRP-IgG进行Western blot分析，进一步证明Hz细胞核骨架上存在肌动蛋白成IZWepe叫丽＋堂付个十ti弓自目／三J－j（一丁／匕人＼—、。、－八lAS工日RS丁H百三7〔分，而且随着感染时间的延长，核骨架上肌动蛋白的含量似乎逐渐减少。我们通过HaSNPV感染Hi细胞的上清液得到了HaSNPV出芽型病毒（BV人通过碱解多角体得到了多角体来源型病毒（PDV）和核衣壳（NC）。对这三种成分（BV、PDV、NC）进行 SDS－PAGE，Western blot 分析（一抗为 anti刁ctin ＝抗为 HRI，JgGL 结果显示，除了对照为阳性反应外，其它的均为阴性反应，证明无论是由HaSNPV感染Hi细胞所获得病毒粒子（BV人还是由虫体扩增得到的HaSNPV多角体经碱解得到的病毒粒子oDV）和核衣壳（NC）可能都没有结合上肌动蛋白成分。9

关键词：中国棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒核骨架病毒装配 Western blo 间接免疫电镜胶体金标记技术

乳酸对海水鱼类细胞系CHSE生长和代谢的影响

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华东理工大学学报（自然科学版） 2005年第3期31卷 290-295页

作者：陈巨星孙祥明张元兴华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

在鲑鱼胚胎细胞(CHSE)培养中,低乳酸浓度(1.1～6.14mmol/L,相应渗透压为644～673kPa)对细胞生长无明显影响,主要的代谢特征基本不变;在高乳酸浓度(13.1～41.58mmol/L,相应渗透压为701～944kPa)下培养,细胞生长受到抑制,代谢发生明显变... 详细信息

在鲑鱼胚胎细胞(CHSE)培养中,低乳酸浓度(1.1～6.14mmol/L,相应渗透压为644～673kPa)对细胞生长无明显影响,主要的代谢特征基本不变;在高乳酸浓度(13.1～41.58mmol/L,相应渗透压为701～944kPa)下培养,细胞生长受到抑制,代谢发生明显变化。乳酸对CHSE细胞生长的抑制作用主要由乳酸导致培养基pH下降和渗透压增加引起。在CHSE细胞批培养中,维持正常的pH,7mmol/L的乳酸浓度,不会明显抑制CHSE细胞的生长。

关键词： CHSE细胞乳酸渗透压代谢动物细胞培养

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关于技术创新对石化工业重要性的思考和认识

金山企业管理 2000年第3期 31-33页

作者：陈巨星上海石化炼化部

随着全球经济一体化的出现和我国加入 WTO的临近,全球经济一体化的气息越来越浓,这对正处于一个新的历史发展时期的石油化工行业来说,既是机遇,又是巨大的挑战。也就是说在市场竞争日趋激烈和知识经济大潮扑面而来的情况下,石化行业能... 详细信息

随着全球经济一体化的出现和我国加入 WTO的临近,全球经济一体化的气息越来越浓,这对正处于一个新的历史发展时期的石油化工行业来说,既是机遇,又是巨大的挑战。也就是说在市场竞争日趋激烈和知识经济大潮扑面而来的情况下,石化行业能否保持、发展技术优势已成为企业生存发展和赢得竞争优势的最重要因素。

关键词：石化工业技术创新石化企业组织结构经济效益

碳酸司维拉姆治疗老年慢性肾脏病5期合并CKD-MBD的疗效

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中国老年学杂志 2023年第6期43卷 1351-1354页

作者：林蓉宇陈巨星曾东兰陈文海南省肿瘤医院肾内科海南海口570100

目的探究碳酸司维拉姆治疗老年慢性肾脏病(CKD)5期合并慢性肾脏病-矿物质和骨异常(CKD-MBD)的疗效及对骨代谢和炎症因子的影响。方法选取104例老年CKD5期合并CKD-MBD患者为研究对象,按随机数字表法分为对照组和观察组各52例。对照组... 详细信息

目的探究碳酸司维拉姆治疗老年慢性肾脏病(CKD)5期合并慢性肾脏病-矿物质和骨异常(CKD-MBD)的疗效及对骨代谢和炎症因子的影响。方法选取104例老年CKD5期合并CKD-MBD患者为研究对象,按随机数字表法分为对照组和观察组各52例。对照组予以常规对症治疗(如血液透析、降糖、降脂等),观察组在对照组基础上增加碳酸司维拉姆治疗。比较两组临床疗效及治疗前后血钙、磷、全段甲状旁腺激素(iPTH)、碱性磷酸酶(ALP)、25-羟基维生素D[(25(OH)D)]、 C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。结果观察组临床总有效率明显高于对照组(P0.05)。观察组治疗后血清ALP、CRP、IL-6、TNF-α水平均明显低于对照组,25(OH)D水平显著高于对照组(P<0.05)。结论碳酸司维拉姆治疗CKD5期合并CKD-MBD老年患者疗效显著,可有效降低患者血磷水平且不增加钙水平,并可改善骨代谢、减轻炎症。

关键词：碳酸司维拉姆慢性肾脏病-矿物质和骨异常慢性肾脏病5期骨代谢炎症因子

优化裂解常压柴油AGO的分子反应动力学模型参数

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石油化工 2005年第z1期34卷 122-124页

作者：吴德荣何琨陈巨星张怡辉马紫峰中国石化集团上海工程有限公司上海200120 上海交通大学化学工程系上海200240 中国石化上海石油化工股份有限公司炼油化工部上海200540 上海交通大学化学工程系上海200240 上海交通大学化学工程系上海200240

应用分子反应动力学模型在乙烯装置SRT-Ⅲ型裂解炉中对常压柴油进行裂解模拟计算,通过优化模型参数使结果与实际值更加吻合,乙烯、丙烯、丁二烯等主要产物的计算误差由原来的30%以下减少到修改后的6%以下.该优化的模型参数可应用到现有S... 详细信息

应用分子反应动力学模型在乙烯装置SRT-Ⅲ型裂解炉中对常压柴油进行裂解模拟计算,通过优化模型参数使结果与实际值更加吻合,乙烯、丙烯、丁二烯等主要产物的计算误差由原来的30%以下减少到修改后的6%以下.该优化的模型参数可应用到现有SRT-Ⅲ型裂解炉的操作改进和技术改造之中.

关键词：常压柴油裂解乙烯分子反应动力学模型参数 SRT-Ⅲ型炉模拟计算和优化

谷氨酰胺对鲑鱼胚胎(CHSE)细胞生长和代谢的影响

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应用与环境生物学报 2004年第4期10卷 442-445页

作者：陈巨星孙祥明张元兴华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

鉴于鱼类和哺乳动物的谷氨酰胺代谢途径有所不同 ,为了优化CHSE细胞的培养基和大量培养的过程控制 ,考察了谷氨酰胺对CHSE细胞生长和代谢的影响 .在CHSE细胞批培养中 ,无谷氨酰胺的M199培养基可以支持CHSE细胞的生长 ,当初始谷氨酰胺浓... 详细信息

鉴于鱼类和哺乳动物的谷氨酰胺代谢途径有所不同 ,为了优化CHSE细胞的培养基和大量培养的过程控制 ,考察了谷氨酰胺对CHSE细胞生长和代谢的影响 .在CHSE细胞批培养中 ,无谷氨酰胺的M199培养基可以支持CHSE细胞的生长 ,当初始谷氨酰胺浓度c =0 .5 4mmolL-1时 ,细胞可达到最高密度nmax/ 10 5mL-1=16 .19;而更高浓度的谷氨酰胺 (c =1.76～ 5 .6 2mmolL-1)对细胞生长有抑制作用 .在c=0～ 5 .6 2mmolL-1初始谷氨酰胺浓度的批培养中 ,葡萄糖的利用和乳酸的生成基本一致 ,随谷氨酰胺浓度的升高 ,Qglc和Qlac增加 ,Yn/ glc降低 .另外 ,随着初始谷氨酰胺浓度的增加 (c=0～ 3.33mmolL-1) ,谷氨酰胺的消耗增加 ,Yn/ gln和Yammo/ gln分别下降 5 8%和 5 0 % ;当初始谷氨酰胺浓度继续增加时 ,谷氨酰胺的消耗、Yn/gln和Yammo/gln基本不变 .此外 ,当初始谷氨酰胺浓度为 0时 ,丙氨酸成为消耗性的氨基酸 ;Yala/gln先随初始谷氨酰胺浓度的增加 (c=0 .5 4～ 1.76mmolL-1)而增加 ,而后又随初始谷氨酰胺浓度的增加 (c=1.76～ 3.33mmolL-1)而降低 ,最后维持不变 .图 4表 3参

关键词： CHSE细胞谷氨酰胺代谢细胞培养鲑鱼胚胎生长代谢

催化裂化汽油选择性加氢脱硫技术(RSDS)工业应用试验

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石油炼制与化工 2005年第12期36卷 6-10页

作者：朱渝王一冠陈巨星王佩琳中国石化上海石油化工股份有限公司上海200540

催化裂化汽油选择性加氢脱硫技术(简称RSDS技术)在上海石油化工股份有限公司进行了首次工业应用。标定结果表明,在催化裂化汽油烯烃体积分数约50%的情况下,RSDS汽油产品脱硫率为79.7%时,RON损失0.9个单位;脱硫率为91.8%时,RON损失1.9个... 详细信息

催化裂化汽油选择性加氢脱硫技术(简称RSDS技术)在上海石油化工股份有限公司进行了首次工业应用。标定结果表明,在催化裂化汽油烯烃体积分数约50%的情况下,RSDS汽油产品脱硫率为79.7%时,RON损失0.9个单位;脱硫率为91.8%时,RON损失1.9个单位。说明RSDS技术具有较好的脱硫能力和较高的选择性,是生产低硫清洁汽油的重要技术。

关键词：催化裂化汽油料选择加氢脱硫工业规模

分泌型TAT蛋白转导结构域基因通用真核表达载体的构建及表达

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第4期21卷 435-436,441页

作者：王锦之陈巨星杨忠周宇荀马昱澍魏东芝华东理工大学生物反应器国家重点实验室上海200237

目的:构建一个全新的分泌型TAT蛋白转导结构域基因哺乳动物细胞融合表达载体并对融合蛋白的表达进行分析。方法:依照编码TATPTD11肽及所引入的BamHI酶识别序列和增强性绿色荧光蛋白N端7个氨基酸的碱基序列合成了3条引物,以egfp基因为模... 详细信息

目的:构建一个全新的分泌型TAT蛋白转导结构域基因哺乳动物细胞融合表达载体并对融合蛋白的表达进行分析。方法:依照编码TATPTD11肽及所引入的BamHI酶识别序列和增强性绿色荧光蛋白N端7个氨基酸的碱基序列合成了3条引物,以egfp基因为模板通过依次3轮PCR扩增得到tategfp融合基因,该基因片段以SfiI和HindⅢ双酶切后插入哺乳动物细胞表达载体pSectagA,构建成重组载体pSecTATmegfp,BamHI单酶切后该载体自连,即得到可通用的真核表达载体pSecTATm,重组质粒pSecTATmegfp转染HEK293细胞,融合蛋白的表达用Westernblot分析。结果:酶切及测序证实表达载体pSecTATm构建成功,Westernblot表明TATEGFP融合蛋白在HEK293细胞中获得表达并分泌到细胞培养液中。结论:成功地构建了分泌型TAT蛋白转导结构域基因的哺乳动物细胞融合表达载体,为更充分发挥TAT蛋白转导结构域在蛋白质功能及疾病治疗研究中的应用打下了基础。

关键词： TAT蛋白转导结构域载体构建增强性绿色荧光蛋白 Westem blot

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无铅高辛烷值车用汽油的调合

上海化工 1999年第21期24卷 18-21页

作者：李贵勤陈巨星李鸿根上海石化股份有限公司炼油化工部上海200540

简述了国内外无铅高辛烷值车用汽油的发展概况,对4种高辛烷值车用汽油调合组分的调合效应进行了实验考察。根据考察结果提出了’97车用汽油生产的调合方案,并根据此方案进行了’97车用汽油的调合。调合油的检验结果表明:所生产的车用汽... 详细信息

简述了国内外无铅高辛烷值车用汽油的发展概况,对4种高辛烷值车用汽油调合组分的调合效应进行了实验考察。根据考察结果提出了’97车用汽油生产的调合方案,并根据此方案进行了’97车用汽油的调合。调合油的检验结果表明:所生产的车用汽油完全符合’97车用汽油的标准。

关键词：无铅汽油高辛烷值车用汽油调合