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固定化D-氨基酸氧化酶转化头孢菌素C为戊二酰基-7-氨基头孢霉烷酸

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化学反应工程与工艺 2003年第3期19卷 242-247页

作者：陈少欣吴文琼刘晨史炳照上海医药工业研究院生物部上海200040

　部分纯化的变异三角酵母D-氨基酸氧化酶(DAO)在碱性条件下变性过氧化氢酶,再与大孔聚甲基丙烯酸缩水甘油酯高聚物共价交联。与游离酶相比,固定化酶的最适反应温度升高,最适pH范围变宽,对温度和pH的稳定性都有明显的提高。固定化DAO在... 详细信息

　部分纯化的变异三角酵母D-氨基酸氧化酶(DAO)在碱性条件下变性过氧化氢酶,再与大孔聚甲基丙烯酸缩水甘油酯高聚物共价交联。与游离酶相比,固定化酶的最适反应温度升高,最适pH范围变宽,对温度和pH的稳定性都有明显的提高。固定化DAO在搅拌反应器中催化头孢霉素C(CPC)转化为戊二酰基-7-氨基头孢霉烷酸(Gl-7-ACA)。以0.03g/mL的CPC为底物,在温度25℃、pH7.2条件下,产物的得率>93%,副产物得率<5%。经过110批反应后,固定化酶保持64%的初始活力。

关键词：固定化酶 D-氨基酸氧化酶转化酶头孢菌素C 戊二酰基-7-氨基头孢霉烷酸抗生素合成

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反胶团提取脂肪酶动力学研究(Ⅰ)萃取过程

华侨大学学报（自然科学版） 1999年第1期20卷 89-94页

作者：陈少欣林文銮华侨大学化工学院

采用ＡＯＴ／异辛烷反胶团溶液萃取脂肪酶．应用双膜理论，建立萃取动力学方程，此模型能较好地与实验数据相吻合．从模型方程中求取不同操作条件下的质量传递系数，通过计算传递阻力，确定提取过程的传递控制类型．结果表明，萃取过程... 详细信息

采用ＡＯＴ／异辛烷反胶团溶液萃取脂肪酶．应用双膜理论，建立萃取动力学方程，此模型能较好地与实验数据相吻合．从模型方程中求取不同操作条件下的质量传递系数，通过计算传递阻力，确定提取过程的传递控制类型．结果表明，萃取过程主要由主体扩散阻力控制．

关键词：动力学反胶团萃取脂肪酶提取

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原核生物细胞色素P450酶系及其应用

生命的化学 2011年第3期31卷 419-424页

作者：赵浩陈少欣上海医药工业研究院生物制药部上海200040

细胞色素P450酶系广泛分布于各种生物中,它们通常由一组基因超家族编码并含有血红素,能够催化一系列化学反应,具有多种生物学功能。特别是原核生物P450酶在催化内源性和外源性化合物的反应中具有重要的工业生产应用价值,成为近年来P450... 详细信息

细胞色素P450酶系广泛分布于各种生物中,它们通常由一组基因超家族编码并含有血红素,能够催化一系列化学反应,具有多种生物学功能。特别是原核生物P450酶在催化内源性和外源性化合物的反应中具有重要的工业生产应用价值,成为近年来P450酶系研究的热点。本文对近年来原核生物P450酶系的重组表达和生物催化领域的研究进展进行综述。

关键词：原核生物细胞色素P450 酶转化

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阳离子反胶团体系提取蛋白质

华侨大学学报（自然科学版） 1998年第3期19卷 304-307页

作者：陈少欣林文銮华侨大学化工与生化工程系

用阳离子反胶团体系（ＣＴＡＢ／正戊醇－正辛烷）分别对４种蛋白质进行反胶团提取的试验和考察，确定ｐＨ值、离子强度、表面活性剂浓度和助溶剂等影响提取的主要因素．实验结果表明，反胶团的提取过程与蛋白质本身的性质和反胶团体系... 详细信息

用阳离子反胶团体系（ＣＴＡＢ／正戊醇－正辛烷）分别对４种蛋白质进行反胶团提取的试验和考察，确定ｐＨ值、离子强度、表面活性剂浓度和助溶剂等影响提取的主要因素．实验结果表明，反胶团的提取过程与蛋白质本身的性质和反胶团体系有关，且静电作用在提取中起主要作用；利用阳离子体系提取蛋白质时，为了获得高的萃取率，应控制低盐深度和高的ｐＨ－ｐＩ值．

关键词：反胶团体系萃取蛋白质阳离子反胶团

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固定化嗜热脂肪芽孢杆菌合成低聚半乳糖

微生物学报 2001年第3期41卷 357-362页

作者：陈少欣魏东芝胡振华华东理工大学国家反应器工程重点实验室生物化学研究所上海200237

利用海藻酸钙、明胶和壳聚糖为固定化载体包埋嗜热脂肪芽孢杆菌细胞合成低聚半乳糖 (GOS)。通过比较三种方法的酶活力回收、最适反应条件、GOS的得率和和载体机械强度 ,选择明胶作为固定化细胞的载体。反应体系的温度、pH、乳糖浓度、... 详细信息

利用海藻酸钙、明胶和壳聚糖为固定化载体包埋嗜热脂肪芽孢杆菌细胞合成低聚半乳糖 (GOS)。通过比较三种方法的酶活力回收、最适反应条件、GOS的得率和和载体机械强度 ,选择明胶作为固定化细胞的载体。反应体系的温度、pH、乳糖浓度、乳糖的转化率和载体的传质阻力对GOS合成有明显影响。在CSTR反应器中水解 60 %乳糖 ,GOS最大得率为31 2 % ,经过 96h( 8批反应 ) ,产物得率为原来的 88%。在空速 0 0 9h- 1条件下 ,利用填充床反应器连续水解乳糖 ,GOS的得率和反应器生产能力分别为 31 5%和 1 7 4g (L·h) ,连续反应1 40h,GOS得率下降 2 0 %。产物经过活性炭柱层柱分离纯化 ,通过13C NMR鉴定四糖的化学结构为 β D Gal ( 1→ 3) D Gal ( 1→ 6) D G ( 1→ 4) D Glu。

关键词：固定化细胞嗜热脂肪芽孢杆菌低聚半乳糖合成

半合成糖肽类抗生素达巴万星前体A40926的生物合成

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中国医药工业杂志 2010年第2期41卷 141-147页

作者：沈晓放陈少欣上海医药工业研究院上海200040

综述了继替考拉宁之后的第二代半合成糖肽类抗生素达巴万星前体A40926的研究进展,包括其结构、发酵生产、生物合成以及结构修饰。重点阐述了A40926的生物合成基因簇以及合成途径。达巴万星是A40926的半合成化合物,目前处于Ⅲ期临床研究... 详细信息

综述了继替考拉宁之后的第二代半合成糖肽类抗生素达巴万星前体A40926的研究进展,包括其结构、发酵生产、生物合成以及结构修饰。重点阐述了A40926的生物合成基因簇以及合成途径。达巴万星是A40926的半合成化合物,目前处于Ⅲ期临床研究,它具有比万古霉素和替考拉宁更强的生物活性。

关键词： A40926 生物合成结构修饰达巴万星综述

一种具有立体选择性新酯酶的菌种筛选和基因克隆

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微生物学报 2007年第3期47卷 452-455页

作者：陈少欣史炳照上海医药工业研究院生物部上海200040

从土样分离到一株产生具有立体选择性酯水解酶的恶臭假单孢菌(Pseudomonas putida NH33)。构建*** NH33的基因组文库,并在***中进行酯酶活性筛选,得到一个含有4.7kb插入片段的阳性克隆。对这个克隆的DNA片段进行序列分析,表明它含有一个... 详细信息

从土样分离到一株产生具有立体选择性酯水解酶的恶臭假单孢菌(Pseudomonas putida NH33)。构建*** NH33的基因组文库,并在***中进行酯酶活性筛选,得到一个含有4.7kb插入片段的阳性克隆。对这个克隆的DNA片段进行序列分析,表明它含有一个1142个碱基的开放阅读框,为编码381个氨基酸的酯酶。推测的酯酶氨基酸序列与其它丝氨酸酯水解酶具有共同的保守基序GXSXG。把该蛋白在*** BL21(DE3)中进行表达,并用金属亲和层析纯化至单一条带。利用纯化的酶水解2-芳基丙酸乙酯制备2-芳基丙酸的S型异构体,产物的光学纯度eep>99%,说明此酶可8用于手性药物的合成。该酯酶是一个新酶,其基因序列已递交GenBank,登记号为AY896293。

关键词：酯酶 P. putida NH33 克隆序列

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甲基橙比色法测定发酵液中ε-聚赖氨酸含量

分析试验室 2008年第S1期27卷 302-304页

作者：孙湘婷王岩陈少欣上海医药工业研究院生物部上海200040

根据Itzhaki法的原理,对比色法测α-聚赖氨酸的方法进行改进。通过考查反应体系的pH、甲基橙浓度以及无机离子等条件对ε-聚赖氨酸测定的影响,建立了一种简便准确测定发酵液中ε-聚赖氨酸含量的方法。该方法的相关系数R2=0.9993,样品回... 详细信息

根据Itzhaki法的原理,对比色法测α-聚赖氨酸的方法进行改进。通过考查反应体系的pH、甲基橙浓度以及无机离子等条件对ε-聚赖氨酸测定的影响,建立了一种简便准确测定发酵液中ε-聚赖氨酸含量的方法。该方法的相关系数R2=0.9993,样品回收率达98.0%以上,相对标准偏差<2%。

关键词： ε-聚赖氨酸甲基橙分光光度法

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埃坡霉素高产菌株的选育及发酵培养基的优化

中国医药工业杂志 2011年第4期42卷 258-261页

作者：王向阳陈少欣上海医药工业研究院上海200040

以埃坡霉素产生菌粘细菌纤维堆囊菌为出发菌株,经亚硝基胍诱变处理后,在含有前体丙酸盐的平板中筛选抗性突变株,得到一株高产突变株N-19,埃坡霉素产量为18.5 mg/L,比出发菌株提高了69.7%。通过优化发酵培养基的碳、氮源组成,埃坡霉素产... 详细信息

以埃坡霉素产生菌粘细菌纤维堆囊菌为出发菌株,经亚硝基胍诱变处理后,在含有前体丙酸盐的平板中筛选抗性突变株,得到一株高产突变株N-19,埃坡霉素产量为18.5 mg/L,比出发菌株提高了69.7%。通过优化发酵培养基的碳、氮源组成,埃坡霉素产量达36.1 mg/L,此时埃坡霉素B和埃坡霉素A的比值为0.4;在摇瓶发酵过程中补加前体丙酸盐,埃坡霉素B和埃坡霉素A的比值增至2.1。

关键词：埃坡霉素粘细菌纤维堆囊菌菌种选育发酵