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第三方骨髓来源间充质干细胞治疗异基因造血干细胞移植后难治性迟发性出血性膀胱炎20例临床研究

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中华血液学杂志 2022年第6期43卷 488-493页

作者：赵珂黄芬陈小湧昌媛许娜史鹏程刘慧孙竞项鹏刘启发范志平南方医科大学南方医院血液科广州510515 中山大学干细胞与组织工程研究中心广州510120

目的观察第三方骨髓来源间充质干细胞(MSC)治疗异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后难治性迟发性出血性膀胱炎(LOHC)的疗效和安全性.方法回顾性分析2018年7月至2020年6月allo-HSCT后发生难治性LOHC 20例患者在常规治疗基础上联合第三方... 详细信息

目的观察第三方骨髓来源间充质干细胞(MSC)治疗异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后难治性迟发性出血性膀胱炎(LOHC)的疗效和安全性.方法回顾性分析2018年7月至2020年6月allo-HSCT后发生难治性LOHC 20例患者在常规治疗基础上联合第三方骨髓来源MSC治疗.MSC以每次1×10^(6)/kg、每周1次输注,直至症状改善或连用4次无效停用.在MSC治疗前及治疗后第8周应用定量PCR法检测患者尿液标本中BK病毒(BKV)、JC病毒(JCV)、巨细胞病毒(CMV).结果①20例难治性LOHC患者中,男15例、女5例,中位年龄35(15~56)岁;急性淋巴细胞白血病(ALL)5例,急性髓系白血病(AML)9例,骨髓增生异常综合征(MDS)5例,母细胞性浆细胞样树突细胞瘤(BPDCN)l例;HLA全相合移植4例,HLA不全相合移植16例.②MSC输注中位次数为3(2~8)次.17例患者获得完全缓解,1例获得部分缓解,总缓解率为90.0%.移植后中位随访397.5(39~937)d,13例存活、7例死亡,死亡原因包括急性GVHD 1例、感染5例、血栓性微血管病(TMA)1例.③MSC输注后第8周尿BKV-DNA及CMV-DNA拷贝数较治疗前显著降低(11342.1×10^(8)拷贝/L对5.2×10^(8)拷贝/L,P=0.016;3170.0×10^(4)拷贝/L对0.2×10^(4)拷贝/L,P=0.006),而JCV-DNA与治疗前相比无明显改变(P=0.106).④未发生MSC输注相关不良反应.结论第三方骨髓来源MSC对allo-HSCT后难治性LOHC具有显著疗效且安全性良好.

关键词：难治性迟发性出血性膀胱炎异基因造血干细胞移植间充质干细胞

基于学生视角的教学设计推进病理生理学课程教与学共鸣

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基础医学教育 2023年第12期25卷 1033-1037页

作者：陈小湧谭红梅中山大学中山医学院病理生理学教研室广州510080 中山大学医学院病理生理学教研室

病理生理学是研究疾病发生发展过程中功能和代谢改变规律及其机制的学科,作为桥梁学科连接了基础医学与临床医学,因涉及学科多、逻辑性强、抽象难懂等特点,容易造成教与学存在差距,严重影响教学质量。从学生角度出发是教育的核心理念,... 详细信息

病理生理学是研究疾病发生发展过程中功能和代谢改变规律及其机制的学科,作为桥梁学科连接了基础医学与临床医学,因涉及学科多、逻辑性强、抽象难懂等特点,容易造成教与学存在差距,严重影响教学质量。从学生角度出发是教育的核心理念,注重学情分析,立足于学生视角,反向设计教学,是实现教与学共鸣的根本路径。文章以病理生理学为例,立足学生已有知识版图,由浅入深、从已知探索未知,推进知识融会贯通并激发学习潜力;利用学生已有的生活经验,联系临床情景与生活实际,促进知识情感交融并唤起学习动力;充分考虑学生的领悟能力,适当借助信息科学技术再现疾病发生发展演变过程,实现知识可视化且提升学习效率;多管齐下、有的放矢,提供可知、可感、可视的沉浸式学习之旅,实现病理生理学课程教与学共鸣,助力新医科背景下的课程改革。

关键词：病理生理学临床融合课程改革学生视角教学共鸣知识拓展

基于转化医学理念与临床深度融合的病理生理学教学改革

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基础医学教育 2022年第5期24卷 315-318页

作者：陆立鹤王蔚东陈小湧张小敏中山大学中山医学院病理生理学教研室广州510080

中山医学院病理生理学教研室基于转化医学理念,从“请进来”与“走出去”两方面在五年制医学本科生中开展基础与临床深度融合教学模式的实践,在培养医学生转化医学意识,有效地运用所学知识解决问题的能力,提升团队协作能力和批判性思维... 详细信息

中山医学院病理生理学教研室基于转化医学理念,从“请进来”与“走出去”两方面在五年制医学本科生中开展基础与临床深度融合教学模式的实践,在培养医学生转化医学意识,有效地运用所学知识解决问题的能力,提升团队协作能力和批判性思维能力以及社会责任感方面取得良好效果。

关键词：病理生理学转化医学教学改革

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间充质干细胞临床转化:进展与挑战

中国细胞生物学学报 2018年第S1期40卷 2226-2236页

作者：黄里陈小湧项鹏中山大学附属第三医院生物治疗中心广州510630 中山大学干细胞与组织工程研究中心干细胞与组织工程教育部重点实验室广州510080

近年来,干细胞研究的兴起为各种难治性疾病的治愈带来了新的希望,标志着医学已步入"再生医学"的新时代。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是干细胞临床转化的典型代表之一,具有来源广泛、易于分离和扩增、免疫原性低等特点,同... 详细信息

近年来,干细胞研究的兴起为各种难治性疾病的治愈带来了新的希望,标志着医学已步入"再生医学"的新时代。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是干细胞临床转化的典型代表之一,具有来源广泛、易于分离和扩增、免疫原性低等特点,同时拥有旁分泌和免疫调节的作用,在细胞治疗和组织工程等方面应用前景非常广阔。前期大量的临床前研究和临床试验已经证实,MSC治疗移植排斥、自身免疫性疾病、终末期肝病等方面的安全性和有效性,但临床实践中也发现了一系列亟待解决的问题。在这里,我们系统回顾MSC临床转化的现状与挑战,供同行参考。

关键词：间充质干细胞临床转化

聚焦前沿,交叉融通——病理生理学硕士研究生课程改革实践

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解剖学研究 2023年第5期45卷 488-490页

作者：陆立鹤王蔚东陈小湧李春凌张小敏黄潋滟赵萌徐春亮中山大学中山医学院病理生理学教研室广东广州510080

中山医学院病理生理学教研室充分利用病理生理学的桥梁学科特点,通过聚焦前沿,独辟蹊径的教学设计和共性导向,交叉融通的教学内容,将硕士研究生的病理生理学学位课程打造为开发启迪学生科研思维的方法课,旨在通过有限的课堂教学时间让... 详细信息

中山医学院病理生理学教研室充分利用病理生理学的桥梁学科特点,通过聚焦前沿,独辟蹊径的教学设计和共性导向,交叉融通的教学内容,将硕士研究生的病理生理学学位课程打造为开发启迪学生科研思维的方法课,旨在通过有限的课堂教学时间让学生接受到学术思维、科研能力和研究方法的教育,提高分析和解决问题的能力,并实现基础和临床研究的有机融合。

关键词：研究生学位课程病理生理学研究生教育学术型硕士

CD8^＋CD28^-T淋巴细胞在骨髓间充质干细胞治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中的免疫调

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中华物理医学与康复杂志 2016年第9期38卷 641-646页

作者：郑海清陈壮桂刘秋莉陈小湧彭延文胡昔权中山大学附属第三医院康复医学科广州510630 中山大学附属第三医院儿科广州510630 中山大学附属第三医院生物治疗中心广州510630 中山大学干细胞与组织工程中心

目的探讨CD8^＋CD28^-T淋巴细胞在骨髓间充质干细胞（MSCs）治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中的免疫调节作用。方法采用6~8周、体重16~20g的C57 BL/6雌性小鼠28只，MOG35-55作为免疫诱导剂，构建实验性自身免疫性小鼠模型（EAE）。... 详细信息

目的探讨CD8^＋CD28^-T淋巴细胞在骨髓间充质干细胞（MSCs）治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中的免疫调节作用。方法采用6~8周、体重16~20g的C57 BL/6雌性小鼠28只，MOG35-55作为免疫诱导剂，构建实验性自身免疫性小鼠模型（EAE）。将28只EAE小鼠随机分成4组：PBS治疗组、MSC低剂量治疗组（2×105个/只）、MSC中剂量治疗组（1×106个/只）、MSC高剂量治疗组（5×106个/只），每组7只。各治疗组均于建模后第15天经尾静脉注射健康人来源的MSCs，对照组注射磷酸盐缓冲液（PBS）。随后每日进行神经功能评分及测量体重，于治疗30d后处理动物，取材进行相关神经病理学及细胞免疫学分析。结果不同剂量的MSCs均较PBS能有效地促进EAE小鼠神经功能的恢复（P〈0.05），且MSCs中剂量治疗更能显著促进EAE小鼠神经功能的恢复。各MSCs治疗组小鼠脾脏细胞中CD8^＋CD28^-调节性T细胞的数量均较PBS治疗组的表达有所增加，但其分泌的IL-10水平较PBS治疗组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论CD8^＋CD28^-调节性T细胞可能不是MSCs促进EAE小鼠神经功能恢复的主要效应细胞，可能只是起到协同治疗作用。

关键词：多发性硬化间充质干细胞 CD8^+CD28^-调节性T细胞

基础与临床深度融合的病理生理学多维教学模式的改革与实践

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高校医学教学研究（电子版） 2023年第5期13卷 28-33页

作者：陈小湧庄晓东邢象斌谭卫平蒋兰萍王蔚东谭红梅中山大学中山医学院广州510080 中山大学附属第一医院广州510080 中山大学医学院深圳518107

以临床胜任力为导向、推动基础与临床深度融合的医学教学模式是培养卓越医学人才的重要保障。病理生理学作为联系基础医学和临床医学的“桥梁学科”,不仅是推动基础与临床深度融合的重要切入点,更是医学教育发展赋予的使命担当。为了构... 详细信息

以临床胜任力为导向、推动基础与临床深度融合的医学教学模式是培养卓越医学人才的重要保障。病理生理学作为联系基础医学和临床医学的“桥梁学科”,不仅是推动基础与临床深度融合的重要切入点,更是医学教育发展赋予的使命担当。为了构建适合“新医科”背景下的卓越医学人才培养体系,中山大学中山医学院病理生理学教研室以“基础与临床深度融合”为切入点,探索了卓越医学人才培养的新模式:加强与临床相关科室合作,组建了基础与临床融合的教学团队,打牢基础与临床融合的根基;进一步结合病理生理学课程特点,优化课程体系建设,构建基于基础与临床深度融合的多维教学模式,即以临床胜任力为导向、以临床病例为载体、以学生团队为主体、以情景模拟为基础的多种教学形式结合的教学新模式。此模式在多年的教学实践中取得了良好成效,深受学生的喜爱,为培养卓越医学人才综合素质提供了新思路,也为“新医科”背景下的卓越医学人才培养体系的建立奠定了基础。

关键词：多维教学模式综合素质 CBL TBL 情景模拟

骨髓、脾脏、淋巴结来源间质干细胞免疫调节作用的比较

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热带医学杂志 2020年第5期20卷 609-614,629页

作者：黄里陈小湧项鹏中山大学附属第三医院生物治疗中心广东广州510630 中山大学干细胞与组织工程研究中心广东广州510080

目的探讨骨髓、脾脏和淋巴结来源间质干细胞(MSC)免疫调节能力的差异,筛选更适合治疗免疫相关疾病的MSC来源。方法分离同一供者来源的脾脏、骨髓、淋巴结的MSC,利用诱导分化体系验证其成骨成脂成软骨分化潜能,通过流式细胞术检测表面标... 详细信息

目的探讨骨髓、脾脏和淋巴结来源间质干细胞(MSC)免疫调节能力的差异,筛选更适合治疗免疫相关疾病的MSC来源。方法分离同一供者来源的脾脏、骨髓、淋巴结的MSC,利用诱导分化体系验证其成骨成脂成软骨分化潜能,通过流式细胞术检测表面标记物;同时构建MSC与T细胞共培养体系,并检测MSC的免疫调节能力。结果成功分离并培养了骨髓、脾脏和淋巴结来源的MSC,3种MSC均为成纤维样细胞形态,贴壁生长,流式检测发现3种MSC均高表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166(均>98%),不表达CD34、CD45(均<1%);在体外特定诱导条件下3种MSC均具有成骨成脂成软骨分化潜能。通过与T淋巴细胞共培养实验发现脾脏来源的MSC(SP⁃MSC)、淋巴结来源的MSC(LN⁃MSC)及骨髓来源的MSC(BM⁃MSC)均能有效抑制T细胞增殖,CD4+T细胞增殖的比例分别为:单独T细胞:(53.69±2.96)%,BM⁃MSC:(35.62±2.61)%,SP⁃MSC:(23.54±2.35)%,LN⁃MSC:(2.92±0.35)%,也能抑制T细胞分泌炎性因子,肿瘤坏死因子-α(TNF⁃α)分泌水平分别下降为:单独T细胞:(57.57±1.71)%,BM⁃MSC:(22.88±1.37)%,SP⁃MSC:(14.85±1.37)%,LN⁃MSC:(12.67±1.37)%;干扰素⁃γ(IFN⁃γ)分泌水平分别下降为:单独T细胞:(15.42±1.09)%,BM⁃MSC:(9.49±0.28)%,SP⁃MSC:(2.59±0.28)%,LN⁃MSC:(2.05±0.28)%,且SP⁃MSC和LN⁃MSC的抑制效果均优于BM⁃MSC。结论成功分离脾脏、淋巴结、骨髓的MSC,且脾脏、淋巴结来源的MSC的免疫调节能力优于骨髓来源的MSC,有望为免疫相关疾病的治疗提供更合适的MSC。

关键词：间质干细胞骨髓脾脏淋巴结免疫调节

间充质干细胞对B细胞增殖及免疫调节功能的影响

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中山大学学报（医学版） 2019年第2期40卷 195-203页

作者：刘秋莉肖崇珺黄牡丹黄里陈小湧郑海清中山大学附属第三医院生物治疗中心广东广州510630 中山大学附属第三医院岭南医院康复医学科广东广州510700 中山大学中山医学院干细胞中心广东广州510080

【目的】研究观察间充质干细胞(MSC)在体外培养体系对B细胞增殖和免疫调节作用的影响。【方法】采用密度梯度离心法分离健康捐献者来源的骨髓30 mL。用含100 mmol/L胎牛血清的L-DMEM培养基对分离出的MSC进行贴壁培养。培养至第6代时,进... 详细信息

【目的】研究观察间充质干细胞(MSC)在体外培养体系对B细胞增殖和免疫调节作用的影响。【方法】采用密度梯度离心法分离健康捐献者来源的骨髓30 mL。用含100 mmol/L胎牛血清的L-DMEM培养基对分离出的MSC进行贴壁培养。培养至第6代时,进行多向分化和细胞表型鉴定。获取健康供者外周血单个核细胞,并通过流式细胞仪分选出CD19^+B细胞,进行荧光染料CFSE标记,然后分成单独培养组(CD19^+B细胞)和共培养组(按CD19^+B∶MSC:=5∶1的比例共培养),两组均采用CpG+CD40L刺激,96 h后检测B细胞的增殖情况,并通过流式细胞荧光分选技术(FACS)检测CD19^+CD5^+B细胞的百分比及其分泌的IL-10水平;进一步观察单独培养组和共培养组的CD19^+B细胞对CD4^+T细胞增殖以及分泌IFN-γ的影响,最后加入IL-10中和抗体,再次验证B细胞对CD4^+T细胞增殖以及分泌IFN-γ的影响。【结果】健康捐献者来源的MSC具有多向分化能力,并表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166,不表达CD45和CD34。与单独培养组比较,共培养组中的CD19^+B细胞与MSC在体外共培养3 d后,CD19^+B细胞增殖比例明显提高,并显著抑制CD4^+T细胞分泌IFN-γ的功能。进一步分析CD19^+B细胞的亚群,发现与单独培养组比较,共培养组中的CD5^+B细胞数量的百分比由(21.31±1.22)%增加至(31.27±0.92)%(P=0.014);而且其IL-10的分泌水平由(1.09±0.08)%增加至(2.44±0.06)%(P<0.001)。当在共培养组中加入IL-10中和抗体后,发现与MSC共培养的B细胞抑制CD4^+T细胞增殖和分泌IFN-γ的功能的能力明显减弱。【结论】MSC能促进CD19^+B细胞的增殖,同时具有增强CD19^+B细胞抑制CD4^+T细胞分泌IFN-γ,这可能与分泌IL-10的CD19^+CD5^+B细胞的表达增加相关。

关键词：间充质干细胞 B淋巴细胞免疫调节