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菊芋类金属硫蛋白基因htMT2的克隆及其表达特征分析(英文)

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Acta Botanica Sinica 2002年第10期44卷 1188-1188页

作者：常团结陈蕾路子显陈宛新刘翔朱祯中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100101

从菊芋 (HelianthustuberosusL .)块茎cDNA文库中得到了一个新的植物类金属硫蛋白基因htMT2的cDNA序列 ,全长 5 0 9bp ,包括 2 4 0bp的开放阅读框、6 2bp的 5′端非翻译区、2 0 7bp的 3′端非翻译区。通过PCR获得了 2个htMT2编码区的部... 详细信息

从菊芋 (HelianthustuberosusL .)块茎cDNA文库中得到了一个新的植物类金属硫蛋白基因htMT2的cDNA序列 ,全长 5 0 9bp ,包括 2 4 0bp的开放阅读框、6 2bp的 5′端非翻译区、2 0 7bp的 3′端非翻译区。通过PCR获得了 2个htMT2编码区的部分基因组片段htMTG_1及htMTG_2 ,长度分别为 986bp和 982bp。分析表明两个基因组片段均包含 3个外显子及 2个内含子 ,编码一个由 79个氨基酸残基组成的多肽 ,与从htMT2推测的多肽完全一致 ,该多肽具有植物类金属硫蛋白的典型结构特征 ,N端及C端结构域富含Cys ,分别具有 8个和 7个Cys残基 ,上述两个结构域被一个无Cys的中间区分开。Southern杂交结果表明 ,htMT2在菊芋基因组中以小基因家族的形式存在。Northern杂交结果表明htMT2在叶片、叶柄、茎及块茎中均有表达 ,在茎中有较高水平的表达 ,但在根中未检测到杂交信号。经Cu2 + 处理后 ,htMT2在茎中的表达量显著降低。与其他 2型金属硫蛋白的序列同源性比较及htMT2对金属离子处理的反应均表明 ,htMT2是一种新的植物类金属硫蛋白基因。

关键词：菊芋类金属硫蛋白基因 htMT2 克隆表达特征 cDNA序列基因表达内含子

棉铃虫幼虫中肠类胰蛋白酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

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动物学报 2002年第6期48卷 790-796页

作者：常团结陈蕾路子显陈宛新孟昆朱祯中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100101

根据昆虫类胰蛋白酶序列的保守性设计了一对引物 ,以棉铃虫 (Helicoverpaarmigera)幼虫中肠总RNA反转录出cDNA第一链作为模板 ,利用RT PCR ,分离出了一种棉铃虫类胰蛋白酶 (HaT)基因的cDNA序列。分析表明该cDNA序列的开放阅读框为 6 96b... 详细信息

根据昆虫类胰蛋白酶序列的保守性设计了一对引物 ,以棉铃虫 (Helicoverpaarmigera)幼虫中肠总RNA反转录出cDNA第一链作为模板 ,利用RT PCR ,分离出了一种棉铃虫类胰蛋白酶 (HaT)基因的cDNA序列。分析表明该cDNA序列的开放阅读框为 6 96bp ,编码一个由 2 31个氨基酸残基组成的多肽 ,推测的氨基酸序列具有His57、Asp10 2 、Ser192 组成的电荷中继网 ,决定胰蛋白酶底物专一性的Asp189,底物结合部位的Gly2 16和Gly2 2 6残基 ,及其它胰蛋白酶结构上的保守区域。氨基酸序列同源性比较表明 :HaT同其它鳞翅目昆虫类胰蛋白酶有较高的同源性 ,同源性在 4 4 %～ 79%之间。为研究棉铃虫类胰蛋白酶基因 (hat)编码产物的活性 ,将其插入原核表达载体 pGEX4T 3和 pET2 3b中 ,并在大肠杆菌中进行了诱导表达 ,结果表明 ,GST HaT融合蛋白在大肠杆菌中进行了特异表达 ,非融合形式的表达产物HaT具有胰蛋白酶催化活性。

关键词：棉铃虫幼虫中肠类胰蛋白酶基因表达酶活性基因克隆

C—N轴手性化合物的不对称催化合成研究进展

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有机化学 2024年第2期44卷 349-377页

作者：陈宛婷钟雄威邢佳乐吴昌书高杨广东工业大学轻工化工学院广州510006

C—N轴手性化合物在天然产物、手性药物以及手性配体等诸多领域有着广泛应用,通过不对称催化高效构建C—N轴手性受到越来越广泛的关注.此文旨在综述近年国内外在C—N轴手性化合物不对称催化合成方面取得的研究进展,主要从前手性分子的... 详细信息

C—N轴手性化合物在天然产物、手性药物以及手性配体等诸多领域有着广泛应用,通过不对称催化高效构建C—N轴手性受到越来越广泛的关注.此文旨在综述近年国内外在C—N轴手性化合物不对称催化合成方面取得的研究进展,主要从前手性分子的去对称化或外消旋体的动力学拆分、C—N轴的阻旋选择性官能团化以及阻旋选择性C—N偶联等三方面进行讨论.重点关注不对称催化体系的发展以及控制对映选择性的关键因素,并对该领域存在的问题和未来发展方向进行讨论.

关键词： C—N轴手性化合物不对称催化阻旋选择性去对称化

修饰的cpti基因在转基因棉花后代中的表达及其抗虫性分析

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高技术通讯 2002年第6期12卷 21-25页

作者：陈宛新王伟吴茜常团结朱祯中国科学院遗传研究所北京100101

对转修饰cpti基因 (即sck基因 )的抗虫棉T3 代进行了分子检测和抗虫性检测。PCR ,Southern杂交证明外源基因已稳定遗传给后代植株。抑制剂活性检测表明转sck基因后代比转未修饰cpti基因后代具有更强的胰蛋白酶抑制剂活性。抗虫性分析表... 详细信息

对转修饰cpti基因 (即sck基因 )的抗虫棉T3 代进行了分子检测和抗虫性检测。PCR ,Southern杂交证明外源基因已稳定遗传给后代植株。抑制剂活性检测表明转sck基因后代比转未修饰cpti基因后代具有更强的胰蛋白酶抑制剂活性。抗虫性分析表明 ,转基因后代对棉铃虫的生长发育具有明显的抑制作用。结果进步说明 ,将外源蛋白细胞内靶向定位的策略应用于棉花抗虫基因工程 ,可以提高外源蛋白在细胞内的积累量。

关键词： cpti基因转基因棉花修饰基因豇豆蛋白酶抑制剂抗虫棉陆地棉抗虫性分析基因表达

骨髓增生异常综合征并发医院感染危险因素及其预测模型评价

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中华医院感染学杂志 2024年 1663-1667页

作者：王舒王娟刘冰陈宛丽杨莹南阳市第二人民医院血液淋巴瘤科河南省南阳市内乡县人民医院肿瘤科

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)并发医院感染危险因素及其预测模型评价。方法收集2021年4月—2023年2月南阳市第二人民医院收治的548例MDS患者为研究对象,根据患者医院感染情况分为感染组(102例)和未感染组(446例);分析MDS患者医院... 详细信息

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)并发医院感染危险因素及其预测模型评价。方法收集2021年4月—2023年2月南阳市第二人民医院收治的548例MDS患者为研究对象,根据患者医院感染情况分为感染组(102例)和未感染组(446例);分析MDS患者医院感染现况、临床资料,通过Logistic回归分析法归纳MDS患者医院感染的危险因素,构建列线图预测模型、Logistic回归模型,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析其对MDS并发医院感染的预测价值。结果侵入性操作、抗菌药物使用时间、染色体核型是MDS患者医院感染的危险因素(P0.176时,曲线下面积(AUC)为0.911,诊断敏感性为83.33%、特异性为85.65%。结论 MDS患者医院感染与多种因素密切相关,构建预测模型预测MDS患者医院感染发生的价值较高,可早期筛查高危患者,并进行预防性干预。

关键词：骨髓增生异常综合征医院感染现况危险因素模型预测价值

中职生生涯阻碍知觉与专业承诺的关系:一个有调节的中介模型

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职业技术教育 2024年第2期45卷 62-67页

作者：陈宛玉黄华娟广西师范大学教育学部桂林541004 广西体育高等专科学校

专业承诺是衡量个体学习积极性的重要指标。为探求中职生生涯阻碍知觉与专业承诺的关系,将生涯决策自我效能作为中介变量,学校参与作为调节变量,引入到生涯阻碍知觉与专业承诺的作用机制中,构建有调节的中介效应模型并加以检验。通过中... 详细信息

专业承诺是衡量个体学习积极性的重要指标。为探求中职生生涯阻碍知觉与专业承诺的关系,将生涯决策自我效能作为中介变量,学校参与作为调节变量,引入到生涯阻碍知觉与专业承诺的作用机制中,构建有调节的中介效应模型并加以检验。通过中职生生涯阻碍知觉量表、生涯决策自我效能量表、学校参与量表和专业承诺量表对广西2037名中职生进行测量,研究发现:生涯阻碍知觉负向预测专业承诺;生涯决策自我效能在生涯阻碍知觉与专业承诺之间起部分中介作用;学校参与能有效调节“生涯阻碍知觉—生涯决策自我效能—专业承诺”中介模型的后半段路径。据此提出,要通过减少学业阻碍、提升生涯决策自我效能、提高学校参与度等策略来提高中职生的专业承诺,以实现中职教育高质量发展。

关键词：中职生生涯阻碍知觉专业承诺生涯决策自我效能学校参与

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肥胖也是一种病

人人健康 2024年第8期 13-14页

作者：陈宛广州市越秀区妇幼保健院

随着人们生活水平的不断提高，饮食结构发生了重大改变，导致越来越多人的体重超重甚至肥胖。根据临床数据统计，目前我国约30%以上的人群出现了肥胖或体重超重的情况，困扰着大家。本文就针对肥胖这种疾病进行相关科普。

关键词：

植物选择标记基因hpt在大肠杆菌中的融合表达、纯化及活性测定

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高技术通讯 2003年第6期13卷 30-36页

作者：杨丽琛常团结蔡华雅陈宛新杨晓光朱祯中国科学院遗传研究所植物遗传分子操作开放实验室北京100101 中国疾病预防控制中心营养与食品安全研究所卫生部微量元素营养重点实验室北京100050

为对hpt基因编码蛋白进行的安全性评价,建立一种简便、高效的体外微生物表达体系,以获得大量的HPT蛋白,将用于植物转化的hpt基因的全编码序列克隆到原核表达载体pGEX4T-3上,在*** BL21中进行诱导表达,所得融合蛋白主要以包涵体的形式存... 详细信息

为对hpt基因编码蛋白进行的安全性评价,建立一种简便、高效的体外微生物表达体系,以获得大量的HPT蛋白,将用于植物转化的hpt基因的全编码序列克隆到原核表达载体pGEX4T-3上,在*** BL21中进行诱导表达,所得融合蛋白主要以包涵体的形式存在,且与Glutathione Sephrose 4B纯化介质的结合率不高。后经优化诱导表达的各种条件,成功地获得了可溶性的融合蛋白,该蛋白具有明显的生物活性。经Glutathione Sephrose 4B亲和层析,所得蛋白纯度>95％。动物实验显示,融合蛋白还具有良好的免疫原性,免疫家兔后可诱导产生高滴度的抗体(>1:10000)。ELISA及Western blotting检测进一步证实了所获纯化蛋白及其抗体的特性。这为深入进行HPT蛋白的安全性评价打下了良好的基础。

关键词：植物选择标记基因大肠杆菌融合表达纯化生物活性 HPT蛋白包涵体可溶性免疫原性

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统合“人事”与“大势”下的教材教学新思考

中学历史教学 2024年第7期 35-37页

作者：陈宛蓉邓攀舟山中学宁波市北仑区顾国和外国语学校

宏大叙事与历史细节间的张力,在新教材《中外历史纲要》中有所凸显。如何克服这一张力是一线教师面临的共同挑战。教师应在唯物史观的指引下,透过短时段激情波涛式的人物情节推进到中时段暗流涌动的制度,把握长时段下历史长河的大趋势... 详细信息

宏大叙事与历史细节间的张力,在新教材《中外历史纲要》中有所凸显。如何克服这一张力是一线教师面临的共同挑战。教师应在唯物史观的指引下,透过短时段激情波涛式的人物情节推进到中时段暗流涌动的制度,把握长时段下历史长河的大趋势。统合“人”“制度”与“趋势”,构建血肉丰满的历史课堂。

关键词：人事大势唯物史观

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