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兔出血症病毒NSP1的原核表达及亚细胞定位

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中国兽医科学 2014年第2期44卷 124-128页

作者：缪秋红朱杰李传峰梁瑞英陈宗艳孟春春刘光清中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

为了研究兔出血症病毒非结构蛋白1(nonstructural protein 1,NSP1)的生物学特性,构建了含有NSP1基因的原核重组表达质粒pGEX-NSP1和与增强型绿色荧光蛋白融合表达的真核重组表达质粒pEGFP-NSP1;原核诱导表达NSP1蛋白,并对其进行纯化;同... 详细信息

为了研究兔出血症病毒非结构蛋白1(nonstructural protein 1,NSP1)的生物学特性,构建了含有NSP1基因的原核重组表达质粒pGEX-NSP1和与增强型绿色荧光蛋白融合表达的真核重组表达质粒pEGFP-NSP1;原核诱导表达NSP1蛋白,并对其进行纯化;同时利用脂质体介导方法将真核重组表达质粒瞬时转染兔肾细胞系,4,6-二脒基-2-苯基吲哚染细胞核后激光共聚焦观察NSP1在细胞内的表达和亚细胞定位情况。结果显示,原核诱导表达了含有GST标签的GST-NSP1蛋白,形成包涵体,大小约42ku;并且NSP1与增强型绿色荧光蛋白融合的蛋白定位于细胞质内。试验结果为深入探讨NSP1的生物学功能奠定了基础。

关键词：兔出血症病毒 NSP1 原核表达亚细胞定位

铝合金管螺旋筋海水海砂混凝土短柱轴压性能及承载力计算

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建筑结构学报 2024年第2期45卷 136-147页

作者：陈宗平宋春梅莫琳琳周济广西大学土木建筑工程学院广西南宁530004 南宁学院土木与建筑工程学院广西南宁530200 广西大学工程防灾与结构安全教育部重点实验室广西南宁530004

为研究铝合金管螺旋筋海水海砂混凝土组合短柱的轴压性能,以螺旋筋与纵筋截面配筋率之比(0.55、1.02、2.20、4.01)、螺旋筋直径(6、8、10 mm)与间距(40~210 mm)、纵筋数量(2、4、6、8)与直径(6、8、10、14 mm)为变化参数,对16根该类组... 详细信息

为研究铝合金管螺旋筋海水海砂混凝土组合短柱的轴压性能,以螺旋筋与纵筋截面配筋率之比(0.55、1.02、2.20、4.01)、螺旋筋直径(6、8、10 mm)与间距(40~210 mm)、纵筋数量(2、4、6、8)与直径(6、8、10、14 mm)为变化参数,对16根该类组合短柱和1根铝合金管海水海砂混凝土短柱进行轴心受压试验,观察其受力破坏过程及形态,获取荷载-位移曲线和性能特征点,分析各变化参数对组合短柱承载力、轴压延性和耗能能力的影响。结果表明:构件的破坏过程相似且均为剪切破坏,但组合短柱的轴压承载能力和变形能力更优;在相同钢筋含量下,组合短柱的承载力、轴压延性和耗能能力随螺旋筋与纵筋截面配筋率之比增大呈先增大后减小的趋势;螺旋筋与纵筋截面配筋率之比为2.2时构件的轴压性能最优,其中,螺旋筋“细且密”或纵筋“少且粗”的构件拥有更高的承载力、轴压延性和耗能能力,建议通过调整螺旋筋直径与间距获取理想的轴压性能。针对铝合金管螺旋筋海水海砂混凝土组合短柱推导了轴压承载力计算式,其平均计算误差仅为1%。

关键词：铝合金管螺旋筋海水海砂混凝土静力试验轴压性能承载力计算

犬细小病毒SH14株的分离鉴定及其VP2基因的序列分析

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中国兽医科学 2015年第11期45卷 1153-1158页

作者：唐井玉李传峰戚伟强贾仿阔陈宗艳王权王桂军刘光清安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 甘肃农业大学甘肃兰州730070 上海维康宠物诊疗有限公司上海201107

为分离犬细小病毒(canine parvovirus,CPV),用疑似犬CPV感染的病犬肠组织研磨液接种猫肾细胞(CRFK),进行病毒分离,并利用常规病毒学和分子生物学方法以及动物回归试验鉴定分离的病毒,并对其VP2基因序列进行测定及分析。结果显示,该病毒... 详细信息

为分离犬细小病毒(canine parvovirus,CPV),用疑似犬CPV感染的病犬肠组织研磨液接种猫肾细胞(CRFK),进行病毒分离,并利用常规病毒学和分子生物学方法以及动物回归试验鉴定分离的病毒,并对其VP2基因序列进行测定及分析。结果显示,该病毒能在CRFK细胞上良好生长并产生细胞变圆、脱落等特征性细胞病变;细胞培养物能扩增出CPV的特异性基因组;对病毒的VP2基因序列和推导的氨基酸序列进行分析,结果表明,本研究的分离毒株属于New CPV-2a型,与CPV SH-2/2011株的亲缘关系最近,其核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为99.83%和100%。上述结果表明,成功分离到1株New CPV-2a型犬细小病毒,将其暂命名为SH14株。本研究结果为进一步研究我国犬细小病毒的进化和变异,以及疫苗的研制奠定了物质基础。

关键词：犬细小病毒 VP2基因鉴定序列分析

第5版WHO高级别甲状腺滤泡源性癌病理诊断标准及特征解读

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中华医学杂志 2024年第18期104卷 1578-1583页

作者：周隽刘志艳上海交通大学医学院附属第六人民医院病理科上海

第5版WHO甲状腺肿瘤分类提出高级别非间变性甲状腺滤泡源性癌, 包括传统甲状腺低分化癌(PDTC)和高级别分化型甲状腺癌(DHGTC), 预后介于高分化甲状腺癌和间变性甲状腺癌(ATC)之间, 其中约50%患者放射性碘不摄取, 因而该分类具有重要临... 详细信息

第5版WHO甲状腺肿瘤分类提出高级别非间变性甲状腺滤泡源性癌, 包括传统甲状腺低分化癌(PDTC)和高级别分化型甲状腺癌(DHGTC), 预后介于高分化甲状腺癌和间变性甲状腺癌(ATC)之间, 其中约50%患者放射性碘不摄取, 因而该分类具有重要临床意义。本文对第5版WHO高级别非间变性甲状腺滤泡源性癌病理诊断标准及其分子特征进行解读, 并与ATC进行比较。

关键词：甲状腺肿瘤高级别非间变性甲状腺滤泡源性癌甲状腺低分化癌高级别分化型甲状腺癌间变性甲状腺癌

鸭乙型肝炎病毒PCR检测方法的建立及初步应用

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中国兽医杂志 2007年第6期43卷 8-10页

作者：徐大为程安春汪铭书陈宗艳郭宇飞陈孝跃四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心四川雅安625014 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川雅安625014

鸭乙型肝炎病毒(Duck hepatitis B virus,DHBV)是禽嗜肝DNA病毒科禽嗜肝DNA病毒属(Avihepadnavirus)的代表种,其形态结构、核酸组成、生物学特性、发病机理和相对嗜肝性等与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)很相似,感染鸭后也可引... 详细信息

鸭乙型肝炎病毒(Duck hepatitis B virus,DHBV)是禽嗜肝DNA病毒科禽嗜肝DNA病毒属(Avihepadnavirus)的代表种,其形态结构、核酸组成、生物学特性、发病机理和相对嗜肝性等与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)很相似,感染鸭后也可引起急、慢性肝炎及肝硬化等[1,2].

关键词：乙型肝炎病毒 PCR检测方法 DNA病毒应用鸭生物学特性形态结构

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犬瘟热病毒H基因的序列分析

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2017年第2期45卷 31-36页

作者：李丹丹戚伟强李传峰刘柱陈宗艳张淼涛刘光清西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

【目的】探索犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)基因的遗传变异情况,为CDV的防控提供理论依据。【方法】收集2014-2015年流行于上海和安徽两地的CDV野毒株,用RT-PCR方法克隆其血球凝集素蛋白基因(H),从分子水平上讨论CDV H基因的... 详细信息

【目的】探索犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)基因的遗传变异情况,为CDV的防控提供理论依据。【方法】收集2014-2015年流行于上海和安徽两地的CDV野毒株,用RT-PCR方法克隆其血球凝集素蛋白基因(H),从分子水平上讨论CDV H基因的流行规律、遗传进化特性和变异情况。【结果】分离的5株CDV之间H基因核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97.5%~99.9%和97.5%~99.2%,其与CDV疫苗株CDV3和Onderstepoort H基因核苷酸的同源性为90.9%~99.9%,氨基酸的同源性为90.4%~99.6%。进化树分析结果表明,分离到的5株CDV野毒株均属于亚洲Ⅰ型,与大部分的亚洲Ⅰ型处于同一分支。CDV H基因有9处潜在的天冬氨酸糖基化位点;H基因整体的同义突变概率与非同义突变概率的比例,即ds/dn=5.887 0。【结论】选择压力并未作用于分离到的CDV毒株,而是在中性选择作用下进化的。

关键词：犬瘟热 H基因同源性进化方式天冬酰胺糖基化位点

珊瑚海砂海水混凝土中CFRP-钢复合筋搭接性能

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复合材料学报 2024年第5期41卷 2645-2661页

作者：周济陈宗平徐炜圣覃伟恒刘丁瑗广西大学土木建筑工程学院南宁530004 南宁学院土木与建筑工程学院南宁530200 广西大学工程防灾与结构安全教育部重点实验室南宁530004

为研究珊瑚海砂海水混凝土(CSSC)中碳纤维增强复合材料(CFRP)-钢复合筋(简称“复合筋”)搭接连接受力性能,合理确定CSSC中复合筋的搭接长度,以复合筋直径、搭接长度、保护层厚度、混凝土强度、搭接净距、配箍率、混凝土及筋材种类为试... 详细信息

为研究珊瑚海砂海水混凝土(CSSC)中碳纤维增强复合材料(CFRP)-钢复合筋(简称“复合筋”)搭接连接受力性能,合理确定CSSC中复合筋的搭接长度,以复合筋直径、搭接长度、保护层厚度、混凝土强度、搭接净距、配箍率、混凝土及筋材种类为试验参数,对27组共81个搭接连接试件进行了对拉试验,获得了各试验参数对CSSC中复合筋搭接连接性能的影响规律。结果表明:当搭接长度小于17倍复合筋直径(d_(c))时,试件发生拔出-劈裂破坏,反之则发生拉断破坏。发生拔出-劈裂破坏时,复合筋表面出现严重的剪切损伤;当搭接长度小于14dc时,试件的搭接强度约为7.2 MPa,当搭接长度大于14d_(c)时,试件的搭接强度随搭接长度的增大逐渐减小;保护层厚度大于4d_(c)或CSSC轴心抗压强度大于30 MPa后,试件搭接强度的变化基本上可以忽略;增大配箍率,搭接强度逐渐增大,且劈裂裂缝的宽度显著减小;与钢筋试件相比,复合筋试件搭接强度的降幅超过25%。基于试验结果,建立了CSSC中复合筋搭接强度及搭接长度计算公式,计算结果与试验结果相符,并参考《混凝土结构设计规范》简化了搭接长度的计算公式。

关键词：珊瑚海砂海水混凝土 CFRP-钢复合筋搭接强度临界搭接长度简化公式

双抗夹心ELISA检测兔出血症病毒抗原方法的建立及初步评估

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中国动物传染病学报 2016年第2期24卷 20-24页

作者：郭慧敏谭永贵缪秋红朱杰刘腾陈宗艳李传峰刘光清中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

为建立一种快速、特异性强的用于检测兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)抗原的双抗夹心ELISA方法,本研究通过抗体配对实验,确定以抗兔出血症病毒结构蛋白VP60单克隆抗体9H9为捕获抗体,辣根过氧化物酶标记的9H9为检... 详细信息

为建立一种快速、特异性强的用于检测兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)抗原的双抗夹心ELISA方法,本研究通过抗体配对实验,确定以抗兔出血症病毒结构蛋白VP60单克隆抗体9H9为捕获抗体,辣根过氧化物酶标记的9H9为检测抗体建立双抗夹心ELISA方法。通过优化,确定最佳条件为:0.5μg/m L稀释后的9H9作为捕获抗体,底物显色液37℃包被2 h 4℃过夜,1%明胶溶液37℃封闭2 h,用含10%胎牛血清的PBST按5μg/m L稀释后的辣根过氧化物酶标记的9H9作为检测抗体,37℃作用15 min。建立的ELISA方法与杯状病毒科其他病毒无交叉反应,应用本方法和RT-PCR方法对85份兔肝脏样品进行检测,证明双抗夹心ELISA方法具有良好的特异性和敏感性,有望作为临床快速检测的一种简便方法。

关键词：兔出血症病毒单克隆抗体双抗夹心ELISA

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鸭短喙-侏儒综合征病原的初步鉴定

中国动物传染病学报 2015年第6期23卷 1-6页

作者：李传峰李琦陈宗艳唐井玉刘光清中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

2014年下半年以来,在我国华东地区商品肉鸭养殖地区暴发了一种以生长迟缓、鸭喙变短、舌头外露下垂、跛行、瘫痪、拉稀以及翅腿易折断为主要临床特征的传染性疾病,暂命名为鸭短喙-侏儒综合征。剖检时可见发病鸭胰腺、肺脏和胸腺等组织... 详细信息

2014年下半年以来,在我国华东地区商品肉鸭养殖地区暴发了一种以生长迟缓、鸭喙变短、舌头外露下垂、跛行、瘫痪、拉稀以及翅腿易折断为主要临床特征的传染性疾病,暂命名为鸭短喙-侏儒综合征。剖检时可见发病鸭胰腺、肺脏和胸腺等组织出血。组织病理学变化主要表现为心脏、胰腺、肾脏、肺脏和肝脏等组织细胞变性、坏死以及充血、出血。RT-PCR/PCR检测结果显示,在患鸭组织中存在类似鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)的特异性核酸,未见其他水禽病毒核酸。系统进化树分析显示本病病原与经典GPV密切相关。免疫组化进一步检测发现,患鸭组织中存在GPV特异性的抗原。鉴于本病与经典水禽细小病毒病的临床表征、剖检及组织病理学变化的差异性,我们初步确定鸭短喙-侏儒综合征病原为一种与GPV密切相关的新型鸭细小病毒(Novel duck parvovirus,NDPV)。

关键词：鸭短喙侏儒综合征鹅细小病毒免疫组化 PCR