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不同型别埃博拉病毒的宿主细胞嗜性差异及GP关键影响位点的研究

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不同型别埃博拉病毒的宿主细胞嗜性差异及GP关键影响位点的研究

作者：程诗诗河北大学

学位级别：硕士

目的:埃博拉病毒能够引起一种严重的高病死率疾病,即埃博拉出血热。埃博拉疫情通常从人畜共患传播病例开始,随后可通过直接接触或间接接触受感染的体液或受污染的污染物在人际间传播。多项研究表明,埃博拉病毒具有广泛的跨物种细胞嗜性... 详细信息

目的:埃博拉病毒能够引起一种严重的高病死率疾病,即埃博拉出血热。埃博拉疫情通常从人畜共患传播病例开始,随后可通过直接接触或间接接触受感染的体液或受污染的污染物在人际间传播。多项研究表明,埃博拉病毒具有广泛的跨物种细胞嗜性,果蝠可能是埃博拉病毒的天然宿主,非人类灵长类动物和猪等动物是埃博拉病毒的中间宿主,具体还有哪些潜在的中间宿主有待研究。埃博拉病毒的外膜糖蛋白(GP)是存在于病毒体表面的糖蛋白,其功能主要是介导病毒和细胞受体的结合与膜融合,使病毒进入细胞。有研究表明位于GP蛋白受体结合区内或临近区域的氨基酸突变对埃博拉病毒的感染力和细胞嗜性影响较大。埃博拉病毒有五种主要的型别,了解不同型别埃博拉病毒的宿主范围和影响其宿主范围的GP的关键氨基酸位点对于长期防控埃博拉疫情至关重要。方法:本研究使用细胞培养方法研究携带来自五种型别埃博拉病毒糖蛋白(GP)的两种包装体系(HIV体系及VSV体系)假病毒在15种不同细胞系中的感染性。五种型别的病毒分别为扎伊尔型埃博拉病毒(EBOV)、本迪布焦型埃博拉病毒(BDBV)、雷斯顿型埃博拉病毒(RESTV)、苏丹型埃博拉病毒(SUDV)和塔伊森林型埃博拉病毒(原科特迪瓦病毒,TAFV)。将制备好的假病毒经超速离心后取底层假病毒颗粒,利用免疫印迹法(Western blot,WB)检测GP蛋白进行验证;两种体系的假病毒分别经HIV1-p24酶联免疫吸附试验和荧光定量PCR(q PCR)相对定量后,进行感染性分析,利用单因素方差分析及Tukey事后检验以及SPASS等软件进行统计学分析。为探究EBOV与其它三种型别埃博拉病毒(RESTV、SUDV、TAFV)感染性不同的原因,本研究通过比较EBOV与RESTV、SUDV和TAFV之间的GP氨基酸序列差异,结合不同型别假病毒在不同细胞系上的感染性差异,并进行氨基酸突变,验证突变前后感染性的变化。结果:HIV及VSV两种体系的假病毒感染实验结果均显示,与其它四种病毒相比,BDBV在多个细胞系中的感染性较弱,HIV体系及VSV体系中BDBV在NIH/3T3中RLU均值仅为2319.84及721.06。RESTV、SUDV和TAFV对仓鼠细胞(BHK-21和CHO)、猴细胞(Vero)、猪细胞(PK15和ST)和犬细胞(Cf2TH)的感染能力较强,但EBOV在这些细胞系中的感染能力较弱,表明这三种型别的埃博拉病毒感染模式与EBOV的感染模式不同;而与其它四种型别埃博拉病毒相比,EBOV在包括293T、Huh-7和Hep G2在内的大多数人类细胞系中显示出类似或略高的传染性。由于使用的两种体系方法的结果都较一致,证明本实验的可重复性。通过EBOV与RESTV、SUDV和TAFV之间的GP氨基酸序列比对,发现有23个氨基酸位点在RESTV、SUDV和TAFV中相同而与EBOV不同。EBOV GP不同突变位点假病毒体外感染实验结果显示I129V、A148P、D552N突变显著增强了EBOV假病毒对仓鼠细胞(BHK-21和CHO)、猴细胞(Vero)、猪细胞(PK15和ST)和犬细胞(Cf2TH)的感染性,使其与RESTV、SUDV和TAFV的感染性相似。然而,再进行反向突变进行验证,发现TAFV的N552D和P148A反向突变感染性降低,与EBOV有相似的感染性模式。RESTV和SUDV假病毒中的所有三个反向突变位点都没有显著改变所有细胞系的感染性。又通过体外感染实验发现了EBOV GP N514D和T544I突变的假病毒感染性增高,对应为RESTV GP的D515N和I545T反向突变,发现只有544位反向突变的假病毒感染性降低。结论:综上所述,体外细胞感染实验表明五种型别埃博拉假病毒对人、猴子、仓鼠、小鼠、犬、猪和猫七个物种的各种细胞系都能感染,表明在各种动物中都有传播的风险;不同型别的埃博拉病毒对不同物种细胞的感染性有一定差异:BDBV在各个细胞中感染力最低,五种型别假毒均在小鼠(NIH/3T3)细胞中感染力最低,EBOV在大多数人类细胞系中显示出类似或略高的感染性,SUDV、RESTV和TAFV对仓鼠细胞(BHK-21和CHO)、猴细胞(Vero)、猪细胞(PK15和ST)和犬细胞(Cf2TH)的感染能力较强。GP中,GP1受体结合域的第148位氨基酸和GP2融合环中552和544位氨基酸的替换对病毒的感染性有明显影响。

关键词：埃博拉病毒糖蛋白感染性细胞嗜性 D552N A148P T544I

抗苗勒管激素在IVF/ICSI女性中预测价值及其影响因素的研究进展

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中华生殖与避孕杂志 2024年第6期44卷 646-651页

作者：徐诗榕王颖北京大学医学部基础医学院北京100191 北京大学第三医院妇产科北京100191

抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)作为转化生长因子-β超家族的一员,对接受体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)女性卵巢储备及卵巢反应性评估、选择合适促排卵方案以及提高临床累积活产... 详细信息

抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)作为转化生长因子-β超家族的一员,对接受体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)女性卵巢储备及卵巢反应性评估、选择合适促排卵方案以及提高临床累积活产率有着重要指导价值。本文通过总结AMH影响卵母细胞发育及卵泡闭锁的可能机制,探讨AMH在卵巢中发挥的生理作用及可能影响AMH在血清及卵泡液中浓度的因素,从而阐明AMH用于预测及改善IVF结局潜在的临床价值,重新全面评估AMH尤其是超生理剂量的AMH在女性生殖、多囊卵巢综合征患者以及IVF/卵胞质内单精子注射中的重要地位,并探讨了AMH在女性生殖中的临床治疗作用。

关键词：抗苗勒管激素受精,体外卵母细胞妊娠结局卵巢生理

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科马克·麦卡锡小说的暴力审美与治疗

东北师大学报（哲学社会科学版） 2024年第4期 138-145页

作者：刘曼诗吉林大学外国语学院吉林长春130012

科马克·麦卡锡的小说浓墨重彩地书写暴力,但麦卡锡并非暴力展示狂。麦卡锡的小说不仅书写自然暴力、动物暴力,还书写人类对自然的暴力与人类世界中的暴力。麦卡锡以极具美学张力的手法书写自然暴力,展现自然之美与崇高,书写人类暴力,... 详细信息

科马克·麦卡锡的小说浓墨重彩地书写暴力,但麦卡锡并非暴力展示狂。麦卡锡的小说不仅书写自然暴力、动物暴力,还书写人类对自然的暴力与人类世界中的暴力。麦卡锡以极具美学张力的手法书写自然暴力,展现自然之美与崇高,书写人类暴力,揭示人类暴力对自然崇高与美的侵蚀,以及人类暴力带来的灾难与死亡的悲剧性后果。麦卡锡在小说中通过书写自然暴力展现自然之美与崇高,唤起人类对自然与生命的敬畏之情,消解人类中心主义的自大与傲慢;通过呈现人类暴力给自然和人类带来的灾难与死亡,警示人类暴力产生的悲剧性后果,以此净化人、教化人,起到文学艺术的治疗作用,从而更好地防范暴力、减少暴力,甚至放弃暴力。

关键词：科马克·麦卡锡小说暴力审美治疗

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扫描近场光学显微术的研究进展

光学学报 2024年

作者：陈宇昕李志远华南理工大学物理与光电学院

扫描近场光学显微镜(Scanning Near-field Optical Microscopy, SNOM)因其具有可达10nm量级的超高光学分辨率与光谱分析能力，为物理、化学、材料科学和生命科学等领域的若干重要前沿基础科学问题提供了强有力的高时空分辨的光学表征工... 详细信息

扫描近场光学显微镜(Scanning Near-field Optical Microscopy, SNOM)因其具有可达10nm量级的超高光学分辨率与光谱分析能力，为物理、化学、材料科学和生命科学等领域的若干重要前沿基础科学问题提供了强有力的高时空分辨的光学表征工具。本文聚焦高分辨SNOM技术近期的研究进展，首先回顾了SNOM成像技术的基本原理和SNOM探针的历史进展。接着重点介绍将SNOM成像技术应用于研究微纳尺度上光和原子、分子、二维材料、生物大分子、非线性结构等物质相互作用的时空细节，并阐述所揭示的微纳尺度上光和物质相互作用的深层次物理、化学和生物学一系列新现象和新规律。最后针对SNOM技术未来的发展趋势，以及可重点关注及进一步研究的关键性科学问题进行了分析和展望。

关键词：扫描近场光学显微镜高时空分辨光谱分析光与物质相互作用

不同复合菌酶添加对中药渣青贮饲料的营养价值及发酵品质的影响

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草业学报 2024年第10期33卷 194-202页

作者：郭田心阮诗诗郭香詹佳琦梁秋雨陈晓阳周玮张庆华南农业大学林学与风景园林学院广东木本饲料工程技术研究中心广东省森林植物种质创新与利用重点实验室亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室

为了探究不同酶制剂和植物乳杆菌（LP）复合添加对中药渣青贮发酵品质动态变化的影响，以中药渣（黄芪、山药、茯苓与柴胡）为原料，LP与酶[纤维素酶（CE）、果胶酶（PE）、木聚糖酶（XY）]分别组合添加处理，并设置空白对照（CK），青... 详细信息

为了探究不同酶制剂和植物乳杆菌（LP）复合添加对中药渣青贮发酵品质动态变化的影响，以中药渣（黄芪、山药、茯苓与柴胡）为原料，LP与酶[纤维素酶（CE）、果胶酶（PE）、木聚糖酶（XY）]分别组合添加处理，并设置空白对照（CK），青贮3、7、15、34 d后分析其青贮发酵品质。结果表明：所有处理组在青贮34 d后，pH值、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维相比对照组均显著降低（P<0.05），可溶性碳水化合物含量相比对照组显著提高（P<0.05）。综上所述，添加菌酶复合添加剂可显著降低中药渣青贮后中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量。随着青贮时间的延长，LP+CE处理组能够增加可溶性碳水化合物含量，且LP+CE和LP+PE处理组能够减少氨态氮含量，有效减少蛋白降解，使中药渣青贮品质得到有效改善。

关键词：中药渣青贮资源利用青贮添加剂发酵品质

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长沙市冬季人行道PM_(2.5)污染特征及影响因素

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中国环境监测 2024年第3期40卷 107-114页

作者：陈宇何韶瑶蔡妍湖南城市学院建筑与城市规划学院湖南益阳413000 湖南大学建筑与规划学院湖南长沙410000 湖南城市学院人文学院湖南益阳413000 数字化城乡空间规划关键技术湖南省重点实验室湖南益阳413000

了解不同气象条件下城市人行道细颗粒物(PM_(2.5))时空分布特征对于指导城市环境评价及街道空间规划布局具有重要意义。选取长沙市车流量及人流量较大的4条道路旁0、5、10 m处的人行道,在冬季晴天、阴天和大风天开展PM_(2.5)质量浓度、... 详细信息

了解不同气象条件下城市人行道细颗粒物(PM_(2.5))时空分布特征对于指导城市环境评价及街道空间规划布局具有重要意义。选取长沙市车流量及人流量较大的4条道路旁0、5、10 m处的人行道,在冬季晴天、阴天和大风天开展PM_(2.5)质量浓度、风速、温度及相对湿度监测,探讨PM_(2.5)分布特征与气象因子的关系。结果表明:冬季晴天、阴天及大风天的人行道PM_(2.5)质量浓度变化呈现双峰双谷特征,峰值均出现在06:00—08:00,其次为18:00—20:00,谷值出现在14:00—16:00及22:00—24:00;距离机动车道10m处的人行道PM_(2.5)含量低于机动车道旁(即距离机动车道0 m)的人行道PM_(2.5)含量,这种差异在大风天气下更为显著;人行道PM_(2.5)质量浓度与温度、风速呈显著负相关关系,与空气湿度呈显著正相关关系,低温不利于PM_(2.5)扩散,但在大风天温度对PM_(2.5)的影响极小,风对PM_(2.5)含量的变化影响极大,在远离机动车道的人行道更为显著,而高湿度天气有利于PM_(2.5)的凝结。低温、高湿天气下06:00—08:00、18:00—20:00人行道PM_(2.5)质量浓度较高,大风对PM_(2.5)质量浓度具有一定削减作用,早晚高峰减少人行道洒水以降低空气湿度,有利于PM_(2.5)质量浓度的降低,减少PM_(2.5)积累。

关键词： PM_(2.5) 气象条件质量浓度人行道

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养殖网箱破损网衣力学特性分析

养殖网箱破损网衣力学特性分析

作者：林诗诗集美大学

学位级别：硕士

在深海养殖行业中,网衣的完整性对保障养殖活动的安全与效率至关重要。面对海洋环境的复杂挑战,网衣需要承受强水流、风暴、海洋生物干扰等多种复杂挑战。网衣由网片和网纲组成,网衣一旦受损,会提高养殖鱼类逃逸的风险,直接导致经济上... 详细信息

在深海养殖行业中,网衣的完整性对保障养殖活动的安全与效率至关重要。面对海洋环境的复杂挑战,网衣需要承受强水流、风暴、海洋生物干扰等多种复杂挑战。网衣由网片和网纲组成,网衣一旦受损,会提高养殖鱼类逃逸的风险,直接导致经济上的损失。因此,对破损网衣的力学特性进行研究,有利于及时识别、修复破损区域,有效减少损失、保障养殖活动的安全。本文基于牛顿第二定律构建了网衣控制方程,通过集中质量模型对网衣结构所受的重力、浮力、网线张力和水动力进行分析,并建立网衣运动方程。通过试验对比对数值模拟方法进行了准确性验证。在特定环境条件下,首先研究无破损状态下网纲的力学特性,其次研究网线破损对网纲受力的影响,并与无破损状态下网纲张力进行对比,揭示网线破损对网纲张力大小及分布形式的影响,再次研究网纲破损对网纲受力的影响,并与无破损状态下网纲张力进行对比,揭示网纲破损对网纲张力大小及分布形式的影响、网纲端部剩余张力和破断点距端部支座距离的关系,最后在网纲破断模型的基础上,对纯流、纯波、波流三种作用下网纲受力进行分析,揭示网纲张力和流速、流向的关系。研究表明:(1)无破损网衣的力学特征:网纲张力分布呈现“凸”字形趋势,养殖网中间区域网纲张力较高,边缘区域网纲张力较低。网纲长度影响网纲张力的重要因素,长度短的网纲张力更大。网衣在9.5m巨浪下的最大位移为0.267m,占网箱宽度41m的0.6%。(2)网线破损的力学特性:网线破损后的网纲张力与无破损状态下的网纲张力表现出高度一致,认为网线破损不改变网纲张力的分布特征和大小。(3)网纲破断的力学特性:出现破断点的网纲,其张力迅速下降,该网纲端部剩余张力与破断点距端部支座的距离成正比。与破断网纲平行且相邻的网纲张力大幅增加,对破断网纲相垂直的网纲张力影响较小。竖纲较短,竖纲断裂的张力变化幅值大于横纲断裂。(4)波流条件对破断网纲力学特性的影响:纯流作用,网纲张力随流速增加而增大,且直接面对水流时张力更高;网纲端部最大张力与流速成二次函数关系。在纯波作用下,网纲张力随波高增加而提高,且波浪垂直入射时对网纲端部张力的影响更大;网纲端部最大张力与波高成线性关系。由于竖纲短于横纲,在波流共同作用下,网纲张力变化显著。

关键词：网衣破损集中质量法力学特性

高效液相色谱指纹图谱结合多元数据分析用于佛手与枸橼的鉴别

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中国药学杂志 2024年第16期 1504-1512页

作者：吴笛蔺晓源刘凯陈宇航湖南中医药大学第一附属医院中医内科重大疾病防治研究及转化教育部重点实验室区域特色中药资源与生态农业湖南省普通高等学校重点实验室湖南中医药大学药学院

目的探讨采用高效液相色谱指纹图谱结合多元数据分析对佛手与枸橼进行品种鉴别的可行性。方法采用高效液相色谱法分别建立佛手与枸橼的指纹图谱，采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)”分别对12批佛手、10批枸橼进行相似... 详细信息

目的探讨采用高效液相色谱指纹图谱结合多元数据分析对佛手与枸橼进行品种鉴别的可行性。方法采用高效液相色谱法分别建立佛手与枸橼的指纹图谱，采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)”分别对12批佛手、10批枸橼进行相似度评价，并结合系统聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析进行考察。结果分别建立了佛手与枸橼的高效液相色谱指纹图谱，12批佛手、10批枸橼与各自对照指纹图谱的相似度均>0.9,12批佛手与枸橼对照指纹图谱的相似度、10批枸橼与佛手对照指纹图谱的相似度均<0.9,表明佛手与枸橼的化学成分存在显著的差异；系统聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析均将22批样品分为两类，与品种区分一致；正交偏最小二乘判别分析筛选得到3个差异标志物，经与对照品比对，确认其中2个差异性成分分别为5,7-二甲氧基香豆素、橙皮苷；统计分析提示根据橙皮苷与5,7-二甲氧基香豆素的绝对峰面积的比值可简便而准确地区分佛手与枸橼。结论高效液相色谱指纹图谱结合多元数据分析可用于佛手与枸橼的鉴别。

关键词：佛手枸橼高效液相色谱指纹图谱系统聚类分析主成分分析正交偏最小二乘判别分析品种鉴别

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核心素养视域下的高中语文单元作业设计研究

核心素养视域下的高中语文单元作业设计研究

作者：叶诗诗贵州师范大学

学位级别：硕士

作业设计是教学过程中重要的一部分,不过在传统的语文教学过程中语文老师都是重课堂教学,轻作业设计。大多数任教的高中语文老师布置的语文作业都是围绕文本进行一些简单的思考或者是机械性、重复性的摘抄。这样的作业设计趣味性不强,... 详细信息

作业设计是教学过程中重要的一部分,不过在传统的语文教学过程中语文老师都是重课堂教学,轻作业设计。大多数任教的高中语文老师布置的语文作业都是围绕文本进行一些简单的思考或者是机械性、重复性的摘抄。这样的作业设计趣味性不强,对培养学生的综合素质没有产生显著的成效,渐渐成为了“无效作业”。随着新课改的产生,教育背景发生转变,这样的作业设计就不再适用于当下的高中生。新的统编版教材采用“双线组元”的编排模式,这为我们的作业设计提供了更加有力的方向。与传统语文作业不同的是,新教材打破了一课一业的设计模式,以单元主题为出发点,旨在提升学生的思维、审美能力,丰富学生的语言,提升学生的文化素养。由此,笔者以培养学生核心素养为背景,以高中语文单元作业设计为研究对象来进行研究,以探索出适应高中统编版语文教材的作业设计,为一些一线语文老师提供单元作业设计的方法和思路。本论文共分为四个部分,第一部分是对语文学科核心素养、单元作业设计等相关概念和课程标准等理论基础进行阐述,探究高考对高中语文单元作业设计的启示;第二部分是梳理语文单元,对高中语文单元作业设计现状与原因作出分析;第三部分是从围绕单元教学目标、整合单元教学内容、革新作业设计形式、优化作业评价方式四个角度入手,梳理了核心素养下高中语文单元作业设计的策略;第四部分是本论文的重点,笔者以现行统编版高中语文教材为背景,以必修上册第三、五、八单元、古诗词诵读部分为例,以培养学生核心素养为目的来设计单元作业,做出单元作业设计案例,并通过作业实践效果做出教学反思,以供一线语文老师参考。

关键词：单元作业设计核心素养高中语文