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鸡IL-2基因的克隆及序列测定

中国兽医杂志 2000年第4期26卷 11-13页

作者：陈奖励王欢宋英晖宋秀龙陈红岩姜永厚卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家兽医生物技术重点实验室黑龙江哈尔滨150001 首都医科大学神经科学研究所北京丰台100054

应用逆转录多聚酶链反应 (RT- PCR)技术 ,参照 Sundick发表的鸡白细胞介素 2 (IL- 2 ) c DNA基因序列 ,利用自行设计合成的 1对引物 ,从 Con A活化的 5周龄 HWL - SPF鸡脾细胞中 ,扩增出长 4 4 5bp的鸡IL- 2 c DNA基因 ,以 p UC119为载... 详细信息

应用逆转录多聚酶链反应 (RT- PCR)技术 ,参照 Sundick发表的鸡白细胞介素 2 (IL- 2 ) c DNA基因序列 ,利用自行设计合成的 1对引物 ,从 Con A活化的 5周龄 HWL - SPF鸡脾细胞中 ,扩增出长 4 4 5bp的鸡IL- 2 c DNA基因 ,以 p UC119为载体 ,克隆了扩增片段 ,经酶切鉴定及 DNA序列测定 ,确认为鸡 IL- 2基因 ,该序列与 Sundick报道的结果一致。对氨基酸的比较发现 ,鸡 IL - 2与牛 IL - 2和 IL - 15之间分别存在着 2 4 %及4 4 %的同源性 ,该基因系国内首次获得经序列测定证实的鸡 IL- 2 c DNA基因 ,这为今后进一步进行鸡 IL-

关键词：鸡IL-2 分子克隆 RT-PCR 免疫传剂预防接种

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猪的消化系统疾病

中国兽医杂志 1998年第12期24卷 44-46页

作者：章金钢宋秀龙李万猛谢显泰陈奖励中国人民解放军农牧大学兽医学院有限公司中国农科院哈尔滨兽医研究所

第五讲其它疾病１真菌性疾病某些真菌类微生物能寄生于猪的消化系统，导致消化功能障碍，这类真菌具有耐热的特性，能在３７℃的环境中生长。已发现的有猪的毛霉病、假丝酵母病和藻菌病。１．１毛霉病猪的毛霉病是由毛霉科毛霉目真菌中... 详细信息

第五讲其它疾病１真菌性疾病某些真菌类微生物能寄生于猪的消化系统，导致消化功能障碍，这类真菌具有耐热的特性，能在３７℃的环境中生长。已发现的有猪的毛霉病、假丝酵母病和藻菌病。１．１毛霉病猪的毛霉病是由毛霉科毛霉目真菌中的根霉，犁头霉、毛霉菌属引起的感染...

关键词：猪消化系统疾病真菌性疾病

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新城疫病毒F基因疫苗接种剂量的研究

黑龙江畜牧兽医 2000年第5期 4-5页

作者：姜永厚陈奖励宋秀龙童光志刘忠贵卢景良东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

以新城疫病毒F基因的cDNA与真核表达载体pcDNA3重组 ,构建了新城疫病毒F基因疫苗。采用不同剂量接种SPF鸡后 ,通过抗体监测和强毒攻击试验 ,分析了其诱导的体液免疫应答及免疫保护作用。结果表明 ,接种剂量为1 0 0 ,2 0 0ug时 ,试验鸡... 详细信息

以新城疫病毒F基因的cDNA与真核表达载体pcDNA3重组 ,构建了新城疫病毒F基因疫苗。采用不同剂量接种SPF鸡后 ,通过抗体监测和强毒攻击试验 ,分析了其诱导的体液免疫应答及免疫保护作用。结果表明 ,接种剂量为1 0 0 ,2 0 0ug时 ,试验鸡在免疫后第 2周出现较明显的抗体反应 ,接种剂量为 1 0ug时抗体变化不明显。以标准强毒F4 8E9攻击后 ,空白对照组及接种剂量为 1 0 ,1 0 0ug组的鸡只全部发病死亡 ,未获得免疫保护 ;而 2 0 0ug组鸡只 30 %存活 ,获得部分免疫保护。

关键词：鸡新城疫F基因基因免疫免疫剂量

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鸡贫血病毒DNA的PCR扩增及其分子克隆

中国兽医学报 1997年第5期17卷 417-419页

作者：陈奖励周方红辛九庆杨雨辉陈红岩刘滨东卢景良章金钢殷震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所解放军农牧大学军事兽医研究所

用ＰＣＲ方法扩增了国内分离的鸡贫血病毒（ＣＡＶ）ＳＪ１株的含ＶＰ２、ＶＰ３以及部分ＶＰ１的１５００ｂｐＤＮＡ片段。经限制性内切酶酶切分析，该片段与Ｃｕｘ－１株的酶谱相似。同时，以ｐＵＣ１１９质粒载体克隆了这一ＤＮＡ片段。

关键词：鸡贫血病毒聚合酶链反应基因克隆

鸡传染性支气管炎病毒S1基因免疫对鸡的保护作用

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中国预防兽医学报 1999年第4期21卷 250-253页

作者：陈洪岩江国托杨奇伟陈奖励张宝山刘胜旺卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

将鸡传染性支气管炎病毒肾型Ｔ株Ｓ１基因ｃＤＮＡ连接于ｐｃＤＮＡ３的ＨｉｎｄＩＩＩ与ＢａｍＨＩ位点之间构建含有ＣＭＶ启动子及ＢＧＨｐｏｌｙＡ信号序列的鸡传染性支气管炎病毒Ｓ１蛋白真核表... 详细信息

将鸡传染性支气管炎病毒肾型Ｔ株Ｓ１基因ｃＤＮＡ连接于ｐｃＤＮＡ３的ＨｉｎｄＩＩＩ与ＢａｍＨＩ位点之间构建含有ＣＭＶ启动子及ＢＧＨｐｏｌｙＡ信号序列的鸡传染性支气管炎病毒Ｓ１蛋白真核表达质粒。实验证明，ＳＰＦ鸡肌注免疫后血清ＩｇＧ抗体逐渐升高，至第３５日龄左右达到高峰，攻毒后血清ＩｇＧ抗体先下降而后升高，血清ＩｇＧ抗体升高幅度不及ＩＢ油苗免疫组。质粒ＤＮＡ免疫鸡攻毒后有４０％的鸡可耐过强毒的攻击，说明Ｓ１基因在体内获得了表达并使鸡产生了一定的免疫力。

关键词： S1基因基因免疫传染性支气管炎 IBV 鸡

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鸡贫血病毒山东分离株全基因克隆

中国预防兽医学报 1999年第5期21卷 335-338页

作者：陈奖励辛九庆宋秀龙周方红杨雨辉章金刚 王祯修 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

设计了ＣＡ５、ＣＡ６和ＣＡ７、ＣＡ８两对引物，分别扩增鸡贫血病毒（ＣＡＶ）山东分离株ＳＪ１的１５Ｋｂ和０８ＫｂＤＮＡ片段。并将这两个片段分别克隆至ｐＵＣ１１９和ｐＢｌｕｅｓｃｒｉ... 详细信息

设计了ＣＡ５、ＣＡ６和ＣＡ７、ＣＡ８两对引物，分别扩增鸡贫血病毒（ＣＡＶ）山东分离株ＳＪ１的１５Ｋｂ和０８ＫｂＤＮＡ片段。并将这两个片段分别克隆至ｐＵＣ１１９和ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ（ＳＫ＋）载体质粒，最后一起克隆到ｐＱＥ３２载体质粒上，使两个片段前后连接成一个全长的病毒ＤＮＡ。用该质粒转染ＭＤＣＣ ＭＳＢ１细胞，经免疫荧光抗体法和ＥＬＩＳＡ检测到ＣＡＶ病毒，结果证明我们得到了一个ＣＡＶ感染性全基因克隆。

关键词： CAV PCR 克隆转染