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扩展青霉脂肪酶的定点突变及随机突变

扩展青霉脂肪酶的定点突变及随机突变

作者：陈国仁福建师范大学

学位级别：硕士

本研究利用定点突变和随机突变的技术手段。对扩展青霉脂肪酶(Penicillium expansum lipase,PEL)进行了最适作用温度、高温稳定性及低温适应性的蛋白质工程改造,结果如下: 1、PEL基因的定点突变采用重叠延伸PCR的方法对PEL基因进行了E... 详细信息

本研究利用定点突变和随机突变的技术手段。对扩展青霉脂肪酶(Penicillium expansum lipase,PEL)进行了最适作用温度、高温稳定性及低温适应性的蛋白质工程改造,结果如下: 1、PEL基因的定点突变采用重叠延伸PCR的方法对PEL基因进行了E83V、T88P、K226R、E54P的定点突变,利用大引物PCR的方法进行了E214P的突变。突变基因在毕赤酵母GS115中表达,对突变体的最适作用温度和热稳定性的研究结果表明:突变体PEL-E83V-GS的最适作用温度提高了5.0℃,其比活约为野生型的2倍,热稳定性略有下降。说明了突变后疏水性较强的氨基酸Val可能增加了酶分子的表面疏水性,从而提高酶分子的疏水性包装效率;突变体PEL-E214P-GS的最适作用温度比野生型提高了7.5℃,热稳定性也提高了2.4℃,体现了Pro对热稳定性的特殊贡献:突变体PEL-T88P-GS的最适作用温度比野生型提高了2.5℃,但热稳定性无明显变化,而点E54P突变后则完全失去酶活:突变体PEL-K226R-GS的最适作用温度比野生型提高了5.0℃,但热稳定性和酶活有所下降。说明了Arg替换Lys后,脂肪酶与底物可能形成了额外的氢键,但同时也可能形成了空间位阻。 2、PEL基因的随机突变用易错PCR的定向进化技术手段对PEL基因进行了随机突变,PCR产物与载体pPIC3.5K构建重组表达质粒,转化大肠杆菌构建突变文库。突变文库的混合质粒电转化毕赤酵母,通过对7000个重组菌的筛选,第一轮筛选出60个克隆子。然后进行第二轮摇瓶发酵复筛,得到一株低温适应性的突变体ep33,其最适作用温度为30.0℃,下降了10.0℃,其热稳定性也表现出低温酶的特性。核苷酸序列分析结果表明:601位的C突变为G,603位的C突变为G,即PEL基因163位的Pro(CCC)突变为Ala(GCG)。

关键词：扩展青霉脂肪酶定点突变随机突变最适作用温度热稳定性

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物流输送系统的智能控制与调度研究

物流输送系统的智能控制与调度研究

作者：陈国仁机械科学研究院

学位级别：硕士

基于现代物流技术的应用和发展要求，介绍自动化立体仓库系统(Automated Storage／Retrieval System，***／RS)的应用及其功能和作用，结合现代科技的发展，着重研究自动化立体仓库输送系统的控制技术。课题主要包含以下内容： 1．... 详细信息

基于现代物流技术的应用和发展要求，介绍自动化立体仓库系统(Automated Storage／Retrieval System，***／RS)的应用及其功能和作用，结合现代科技的发展，着重研究自动化立体仓库输送系统的控制技术。课题主要包含以下内容： 1．以现代物流为背景，介绍一些概念，阐述自动化立体仓库与现代物流的关系，介绍自动化立体仓库发展历史以及趋势，及自动化立体仓库在现代物流系统中的作用、功能，提出基于现代物流的自动化立体仓库规划、设计的基本要求。 2．重点研究自动化立体仓库物流输送系统的控制原理，围绕提高自动化立体仓库的控制技术水平，结合现代计算机及其相关技术的发展，提出新的控制算法及程序设计原理，为指导实际应用提供理论依据。 3．提出自动化立体仓库系统运行的若干控制形式和实现控制技术方法以及人工智能等新技术的应用。在分析仓库各种复杂出入库系统的基础上，根据贝尔曼的最优化原理，提出堆垛机运行作业的优化控制模型，使其运行路径最短。着重分析了机上拣选作业路径调度，提出了以吞吐量为目标的解决方案。在比较了多种算法之后，设计一种新型的启发式算法——聪明蚁群算法来进行作业路径调度。 4．在仓储输送系统中，针对柔性智能输送设备——自动导引车(AGV)，应用启发式算法对AGV进行路径规划研究，给出路径解决方案。 5．结合立体仓库结构特点，分析立体仓库故障机理，构建立体仓库故障自诊断系统的总体框架，并在分析研究其数据采集处理系统、实时监控系统以及自诊断专家系统的基础上，实现立体仓库的输送设备故障自诊断功能。

关键词：物流自动化立体仓库智能控制调度故障自诊断系统专家系统

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浅评8K型电力机车电子柜的结构特点

机车电传动 1989年第4期 30-36页

作者：姜志新陈国仁株洲电力机车研究所

本文从电子机械工程的热设计及结构设计两方面,对8K机车电子柜的结构特点作了介绍和评述。着重阐述了电子柜热设计中的缝隙气流及短路气流对产品性能的影响;在结构设计方面,从实用观点出发主要介绍了电子柜的三层次结构、标准化程度、... 详细信息

本文从电子机械工程的热设计及结构设计两方面,对8K机车电子柜的结构特点作了介绍和评述。着重阐述了电子柜热设计中的缝隙气流及短路气流对产品性能的影响;在结构设计方面,从实用观点出发主要介绍了电子柜的三层次结构、标准化程度、互连技术、阻燃措施。并通过与国产机车电子柜的比较,说明这些结构设计特点是值得我们借鉴的。

关键词：电力机车电子柜通风散热

E83V对扩展青霉脂肪酶最适作用温度的影响

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微生物学通报 2005年第1期32卷 85-89页

作者：陈国仁林琳福建师范大学生物工程学院福州350007

利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因作了体外定点突变,获得了最适作用温度有所提高的突变体。含突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-E83V在PichiapastorisGS115中表达。对突变体表达产物PEL-E83V-GS与野生型表达产物PELGS作... 详细信息

利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因作了体外定点突变,获得了最适作用温度有所提高的突变体。含突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-E83V在PichiapastorisGS115中表达。对突变体表达产物PEL-E83V-GS与野生型表达产物PELGS作了比较:前者最适作用温度为45℃,比野生型提高了5℃;其热稳定性基本不变;突变体在37℃下的表达量为188U/mL,约为野生型的80%。最适作用温度的提高可能是由于83位亲水性的Glu用疏水性的Val取代,增加了脂肪酶表面的疏水作用,使其在高温下更适于与底物的结合。

关键词：扩展青霉碱性脂肪酶定点突变最适作用温度

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汪福明科学养兔效益好

中国畜牧杂志 2000年第2期36卷 62-63页

作者：陈国仁蒋百龙浙江省上虞市畜牧兽医总站 312300

汪福明是浙江省上虞市小越镇小金星村人,现年48岁.他自1984年起饲养西德长毛兔,开始养20只左右,到1987年已发展到存栏兔200多只.1994年他又征地0.17公顷,投资20万元,进行了大发展.新建三层楼式免舍两排,仓库一排,共计400米2建筑面积的... 详细信息

汪福明是浙江省上虞市小越镇小金星村人,现年48岁.他自1984年起饲养西德长毛兔,开始养20只左右,到1987年已发展到存栏兔200多只.1994年他又征地0.17公顷,投资20万元,进行了大发展.新建三层楼式免舍两排,仓库一排,共计400米2建筑面积的新兔场.

关键词：兔饲养管理优良品种饲料病虫害防治

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人造板分裁的优化设计

木材工业 1993年第1期7卷 38-40,44页

作者：王兆伍陈国仁南京林业大学南京210037

本文利用无尺寸表示矩阵、尺寸向量矩阵建立了人造板分裁的数学模型,在考虑人造板分裁的工艺要求下,建立了人造板分裁的优化目标函数和约束函数,其目标函数以最小的下脚料面积为目标函数,从而获得最低的生产成本。该优化方法简单可行,... 详细信息

本文利用无尺寸表示矩阵、尺寸向量矩阵建立了人造板分裁的数学模型,在考虑人造板分裁的工艺要求下,建立了人造板分裁的优化目标函数和约束函数,其目标函数以最小的下脚料面积为目标函数,从而获得最低的生产成本。该优化方法简单可行,在家具生产中有着普遍的实用价值。

关键词：木质板分裁图优化设计

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竹材展开机框架的优化设计

南京林业大学学报（自然科学版） 1989年第3期13卷 80-85页

作者：冷正明陈国仁南京林业大学林机系

本文用序列无约束极小化方法(SUMT)中的外点罚函数方法对竹材展开机框架进行优化设计。这种框架不仅能满足强度、刚度及几何尺寸的要求,而且可得到良好的经济效益,为使用微机提高框架设计水平提供了新的途径。

关键词：竹材展开机框架设计竹材加工机

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福建:顺昌芦柑在“绿博会”获金奖

中国果业信息 2019年第1期36卷 52-53页

作者：陈国仁不详

1月10日,福建省南平市农业农村局绿色食品办公室郑国荣主任专程亲临顺昌金水农场有限公司,将第十九届中国绿色食品博览会获奖证书和奖牌授予该公司,为公司送来喜讯,该公司选送的长富牌芦柑在厦门第十九届中国绿色食品博览会上荣获金奖。... 详细信息

1月10日,福建省南平市农业农村局绿色食品办公室郑国荣主任专程亲临顺昌金水农场有限公司,将第十九届中国绿色食品博览会获奖证书和奖牌授予该公司,为公司送来喜讯,该公司选送的长富牌芦柑在厦门第十九届中国绿色食品博览会上荣获金奖。2018年12月7日,第十九届中国绿色食品博览会暨第十二届中国国际有机食品博览会在福建省厦门市开幕。本届博览会以“绿色生产、绿色消费、绿色发展”为主题,全面展示党的“十九大”以来我国绿色食品、有机农产品发展成果。

关键词：福建省芦柑食品博览会绿色食品绿色生产绿色消费绿色发展产品发展