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作者：陈和美复旦大学

学位级别：硕士

在过去的十几年中,蛋白质组学虽然获得了快速的发展,但仍然处于组学研究工作的初期,因为蛋白组样品的的复杂性和蛋白丰度的极大差别远远超过目前任何分析平台的鉴定能力。对样品进行预处理以降低它的复杂性是获得良好质谱鉴定结果的有... 详细信息

在过去的十几年中,蛋白质组学虽然获得了快速的发展,但仍然处于组学研究工作的初期,因为蛋白组样品的的复杂性和蛋白丰度的极大差别远远超过目前任何分析平台的鉴定能力。对样品进行预处理以降低它的复杂性是获得良好质谱鉴定结果的有效途径,尤其是对于那些丰度很低,却可能在临床诊断上很有意义的蛋白／肽段。因此,发展新型的低丰度蛋白／肽段富集技术和内源性肽选择分离技术成为了当前蛋白组学研究的热点。另一方面,随着生物医学和生物工程相关领域研究的发展,功能化磁性微球越来越受到人们的广泛关注。探索磁性微球的功能化、智能化以及将这些微球应用于药物释放、生物大分子分离、生物传感器和固定化酶等方面是磁性微球一个重要的研究方向。本论文针对蛋白质组学研究中低丰度蛋白／肽段富集和内源性肽选择性分离方面的热点难点问题,开发了一系列新型功能磁性微纳米材料,并将它们与蛋白组低丰度富集研究结合,发展了以功能化磁性微纳米材料为基础的蛋白质组学低丰度富集和肽组学富集分析新技术新方法,并进行了实际生物样品的应用研究,取得了一些创新性的研究结果。本论文围绕功能化磁性微纳米材料为基础的蛋白质组学低丰度富集和肽组学富集分析这一主题,共分五章,主要内容如下：第一章介绍了蛋白质组学研究背景和技术的发展,蛋白／肽段的低丰度富集在这蓬勃发展的蛋白组和肽组分析领域的重要性;就目前生物样品预处理技术,以及固相微萃取富集技术的发展进行了综述,而磁性材料则因为其简便有效的操作性而在蛋白组学的应用中受到越来越多的人的关注;概述了功能化磁性微球及其在蛋白组学分析中的应用;最后提出了本论文选题的目的和意义。第二章探索线性疏水基作为亲和配体的磁性微纳米材料的合成,并将它们用于低丰度肽段的富集研究。一、通过一锅法(one-pot method)合成粒径仅约1511m的油酸修饰的磁性纳米粒子,这些粒子比表面积大,分散性好,具有超顺磁性和磁响应性,对肽段的富集容量大,被用于富集标准肽段、标准蛋白酶解液和人血清样品中的低丰度肽段。这是首次将合成如此简便的油酸修饰的纳米粒子用于低丰度蛋白或肽段的富集研究。二、为克服线性疏水基的材料存在的常见缺点——水中分散性差,我们合成了C8修饰的磁性聚合碳微球。该微球通过三步简单的反应合成。首先制得Fe304磁性核,然后在核外包覆聚合碳层。由于聚合碳层上含有大量易于修饰的羟基、醛基、羧基等,随后易于修饰上C8。该微球表面既含有疏水C8链,又含有大量未被修饰的亲水官能团,所以能很好地分散在水中,具有良好的生物样品相容性。用该材料富集肽段后可以不经过洗脱步骤,将富集到的肽段连同材料点到靶板上进行MALDI-TOF MS分析。最后材料还被用于实际蛋白组分析,即从胶上酶解蛋白提取液中富集肽段。这两种材料合成简单,磁响应性良好,富集过程简单,富集后的肽段用MALDI-TOF MS进行鉴定,结果显示富集效果良好。两种材料都在实际蛋白质组研究中得到应用,结果显示这种磁性富集方法对实际样品表现出了极好的可行性。第三章基于C60与肽段／蛋白之间的独特相互作用,合成了C60修饰的磁性硅球,并用于低丰度肽段／蛋白的富集研究。先在四氧化三铁磁球表面包覆硅层,然后再在磁性硅球表面键合C60。采用傅立叶变换红外光谱仪等对产物进行了表征,确认C60已被成功修饰到磁性硅球上。用C60修饰的磁性硅球富集低丰度蛋白／肽段,优化富集条件,对浓度低至1nM的肽段水溶液依然具有良好的富集效果,富集后肽段信噪比能提高10。左右。然后将这一优化之后的条件应用到未经过任何预分离处理的人尿液中,富集之后,直接进行基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析,检测出了十条左右的尿液肽段。整个分析过程快速简便。这一结果证明了磁性材料低丰度富集技术的巨大潜力,该技术大大增进了蛋白质组学的通量性,降低了检测限,预示了其在临床诊断应用上的前景。第四章进一步改进磁性材料表面的功能修饰物,发展了磁性聚合物富集分离蛋白／肽段的新方法,在磁性硅球表面修饰上聚甲基丙烯酸甲酯(Poly(methyl methacrylate) (PMMA))。PMMA修饰的磁性硅球合成工艺简单,比表面积大,在蛋白／肽段富集和质谱分析过程中具有许多独特的优势。首先,该材料在水体中分散性好,伸展的线性PMMA链对目标蛋白／肽段具有很好的捕获性能;其次,材料具有顺磁性,在磁体帮助下富集分离操作简便;此外,因为PMMA与极性分子作用很小,材料富集肽段／蛋白时无机盐不会被载带下来;最后,由于PMMA固定于无机核上,蛋白／肽段不能进入材料深处,在使用MALDI-TOF MS分析时便于蛋白／肽段的激发,也减少了PMMA片段的干扰峰。该磁性PMMA微球在蛋白／肽段低丰度富

关键词：蛋白质组学肽组学内源性肽低丰度富集功能化磁性材料

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家庭插花

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1986年

作者：余益强陈和美

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磁性微纳米材料在蛋白质组学中的应用

磁性微纳米材料在蛋白质组学中的应用

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丛书名：上海高校服务国家重大战略出版工程

2017年

作者：邓春晖陈和美

磁性纳米材料具有诸多如:光学、磁学、电学等具有强烈的尺寸依赖性的特性,将功能化磁性纳米材料应用于蛋白质组学研究具有重要的意义。从目前研究来看,磁性微纳米材料已在复杂的蛋白组学研究中显示了巨大应用潜力。本书着重阐述了磁性... 详细信息

ISBN: (数字)9787309132694

ISBN: (纸本)9787309132694

磁性纳米材料具有诸多如:光学、磁学、电学等具有强烈的尺寸依赖性的特性,将功能化磁性纳米材料应用于蛋白质组学研究具有重要的意义。从目前研究来看,磁性微纳米材料已在复杂的蛋白组学研究中显示了巨大应用潜力。本书着重阐述了磁性微纳米材料在蛋白组学研究前沿中的应用,详细介绍了目前应用于蛋白组学研究的各个分支的功能磁性微纳米材料的合成方法、性能、应用原理及应用效果,具有较好的科学研究和应用价值。

关键词：磁性材料纳米材料应用蛋白质基因组研究

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早园竹栽培技术应用与推广改进措施分析

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中国农业文摘（农业工程） 2017年第6期29卷 75-76页

作者：陈和美江苏南京市高淳区农业局林业站江苏南京211300

我国是四大文明古国之一,更是竹文化的发源地。竹的栽培不仅仅具有景观价值,同时也具有极高的使用价值等。为此,文章以"早园竹"为主要研究对象,在对其栽培技术进行概述的基础上,就其应用与推广改进提出切实可行的建议与对策,以供大家借... 详细信息

我国是四大文明古国之一,更是竹文化的发源地。竹的栽培不仅仅具有景观价值,同时也具有极高的使用价值等。为此,文章以"早园竹"为主要研究对象,在对其栽培技术进行概述的基础上,就其应用与推广改进提出切实可行的建议与对策,以供大家借鉴和参考。

关键词：早园竹栽培技术推广

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翠冠梨种植管理应注意的技术措施

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中国农业文摘（农业工程） 2017年第4期29卷 75-76页

作者：陈和美江苏南京市高淳区农业局林业站江苏南京211300

文章以"翠冠梨的种植与管理"为主要研究对象,在对其生长发育特性进行概述的基础上,就如何做好翠冠梨的种植管理提出切实可行的建议与对策,希望能为进一步实现翠冠梨栽培的良好经济收益提供有力的依据和参考。

关键词：翠冠梨种植管理技术措施

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饮食店用具和工作人员手带菌的调查

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消毒与灭菌 1989年第4期6卷 209-211页

作者：赵显伦王大珍李秀安陈和美李洪四川省重庆市卫生防疫站

人们近年来对饮食店用具的消毒评价,作了不少工作,但还未见有对其逐月自然带菌情况的连续观察。我站于1987年8月至1988年7月,选择了不同类型的饮食店,每月对用具进行一次带菌检查,每季对工作人员的手进行一次带菌检查。现将结果报告如下。

关键词：饮食店用具工作人员带菌调查手

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介孔层包覆的磁性微球应用于鼠脑内源性肽分离分析

介孔层包覆的磁性微球应用于鼠脑内源性肽分离分析

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全国生物医药色谱学术交流会

作者：陈和美邓春晖张祥民复旦大学化学系

本文介绍了一种用介孔层包覆的磁性微球分离分析鼠脑内源性肽的新方法。该介孔层包覆的磁性微球具有超顺磁性的FeO核心;中间是结构紧密的SiO层;最外层是孔径约2nm,厚约70nm的介孔SiO层。材料经过N保护下煅烧,表面大量Si-OH转化成Si-O-S...

本文介绍了一种用介孔层包覆的磁性微球分离分析鼠脑内源性肽的新方法。该介孔层包覆的磁性微球具有超顺磁性的FeO核心;中间是结构紧密的SiO层;最外层是孔径约2nm,厚约70nm的介孔SiO层。材料经过N保护下煅烧,表面大量Si-OH转化成Si-O-Si桥键(合成见图1a)。该微球被用于探索肽组学研究的新技术新方法,并在鼠脑内源性肽的分离分析研究表现出了许多优越性,图1b为该分离过程示意图。首先该介孔微球的孔径约2nm,可以选择性允许分子量相对较小的内源性肽进入孔内,而分子量相对较大的蛋白则被排阻在孔道之外;其次,该微球比表面积大,经过煅烧增强了SiO表面疏水性,同时也增强了内源性肽与表面的弱疏水相互作用;该材料分散性好与样品相容性好,在中间紧密的SiO层保护下,材料在酸性环境中也适用;超顺磁性的FeO核心,使得该微球在富集过程中可以在磁体作用下快速方便地从溶液中分离出来。富集后的内源性肽经过溶剂洗脱和LC-MS分析,共检测出60条不同的鼠脑肽段。总之,该介孔层包覆的磁性微球分离分析内源性肽段新方法简便有效,适用于复杂的生物样品中低分子量化合物的选择性分离分析,为肽组学研究提供了一种简便的分析手段。示意图1、a)介孔层包覆的磁性微球的合成过程;b)材料对鼠脑内源性肽的选择性分离分析过程。

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来源： cnki会议评论