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蓝舌病病毒10型和20型及23型多重RT-PCR检测方法的建立

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中国兽医科学 2018年第5期48卷 552-558页

作者：黄秋华聂福平周庆杨俊王昱艾军唐昌杰陈冉越李应国王国民胡世君西南大学荣昌校区重庆402460 重庆出入境检验检疫局牛病检测重点实验室重庆400020 云南出入境检验检疫局云南昆明650228

为建立可同时鉴别检测蓝舌病病毒（BTV）10型、20型及23型的方法,本研究针对这三型病毒VP2基因保守区,设计合成了3对特异性引物,经过条件优化,建立了单管同时鉴别BTV 10型、20型、23型的多重RT-PCR方法。结果显示,该方法可同时扩增出BTV... 详细信息

为建立可同时鉴别检测蓝舌病病毒（BTV）10型、20型及23型的方法,本研究针对这三型病毒VP2基因保守区,设计合成了3对特异性引物,经过条件优化,建立了单管同时鉴别BTV 10型、20型、23型的多重RT-PCR方法。结果显示,该方法可同时扩增出BTV 10型696 bp、BTV20型293 bp和BTV 23型356 bp三条特异性的片段,对BTV其他基因型以及小反刍兽疫病毒（PPRV）、口蹄疫病毒（FMDV）的核酸均无扩增;该方法最低可检测1.696×103copies/L的BTV10、1.375×103copies/L的BTV20和1.317×103copies/L的BTV23。利用建立的多重RT-PCR方法对67份临床样品进行检测,结果与OIE推荐的BTV套式RTPCR方法符合率为100%。本研究建立的多重RT-PCR检测方法特异性好,具有较强的检测敏感性,可用于蓝舌病病毒血清型的鉴别。

关键词：蓝舌病病毒多重RT-PCR 血清型鉴别

迟缓爱德华氏菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

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中国兽医科学 2018年第8期48卷 953-957页

作者：杨俊聂福平李应国张欢王昱刘生峰袁飞张雷吴蕊唐昌杰陈冉越王国民重庆出入境检验检疫局重庆市陆生动物疫病防控工程技术研究中心重庆400020 重庆玉成产品质量检测有限公司重庆400020 中国检验检疫科学研究院北京100176

为建立一种快速、敏感检测迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）的方法,本研究根据E.Tarda的促旋酶B亚单位基因（gyr B）保守区设计特异性引物和Taq Man探针,并优化检测反应条件,建立了E.tarda的Taq Man实时荧光PCR检测方法。结果显示... 详细信息

为建立一种快速、敏感检测迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）的方法,本研究根据E.Tarda的促旋酶B亚单位基因（gyr B）保守区设计特异性引物和Taq Man探针,并优化检测反应条件,建立了E.tarda的Taq Man实时荧光PCR检测方法。结果显示,该方法仅对E.tarda的靶基因扩增呈阳性,而对创伤弧菌、福氏志贺氏菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、单核增生性李斯特菌、肠炎沙门菌、溶藻弧菌、阪崎肠杆菌、大肠杆菌O157、温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、霍乱弧菌等相关致病菌检测结果均为阴性,特异性良好;该方法对E.tarda检测的灵敏度为20 CFU/m L;重复性试验表明,该方法的变异系数在0.95%~2.44%之间,具有良好的重复性。本研究结果表明,建立的E.tarda Taq Man实时荧光PCR方法灵敏、快速、特异性强、重复性好,适用于E.tarda检疫、疫情监测及流行病学调查。

关键词：迟缓爱德华氏菌实时荧光PCR gyr B基因

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智利进口种牛乳头瘤病毒的检测与分析

中国动物检疫 2017年第5期34卷 47-49,53页

作者：王昱唐昌杰肖红波聂福平马飞杨俊陈冉越吴蕊重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心重庆400044 武隆县畜牧兽医局重庆武隆408528 唐山出入境检验检疫局河北唐山063000

通过临床观察、采样、PCR检测、克隆和测序,对智利进口种牛进行了牛乳头瘤病毒(BPV)检测和基因分型。结果表明,智利进口牛的BPV总体感染率为0.4%,病毒亚型有BPV2和BPV13,其中以BPV2为主,BPV13的感染率仅为0.09%。L基因进化分析表明,BPV... 详细信息

通过临床观察、采样、PCR检测、克隆和测序,对智利进口种牛进行了牛乳头瘤病毒(BPV)检测和基因分型。结果表明,智利进口牛的BPV总体感染率为0.4%,病毒亚型有BPV2和BPV13,其中以BPV2为主,BPV13的感染率仅为0.09%。L基因进化分析表明,BPV智利株和我国BPV的感染情况显著不同,呈现明显的地域特征,两国的BPV2 L1基因具有较高的同源性。BPV阳性牛的治疗结果显示,75%左右的阳性牛经外科剪切、抗生素治疗后愈合良好,但仍有部分牛出现新的小疣。调查结果提示:BPV感染并非全为一过性感染;BPV13亚型仍为我国外来亚型,仍需进出口检验检疫部门加强对BPV的检疫。

关键词：牛乳头瘤病毒智利进口奶牛检测与分析

绵羊痘病毒和山羊痘病毒实时荧光重组酶聚合酶检测方法的建立

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中国兽医科学 2019年第5期49卷 544-550页

作者：杨俊聂福平周庆王昱史梅梅李贤良王国民吴蕊张欢陈冉越唐昌杰刘生峰李应国重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心国家牛病重点实验室重庆市进境陆生动物疫病防控研究工程中心重庆400020 重庆玉成产品质量检测有限公司重庆400020

为建立一种快速、敏感鉴别诊断绵羊痘病毒(SPPV)和山羊痘病毒(G TPV)的方法,本研究根据SPPV和GTPV基因组保守区,分别设计特异性引物和探针,建立了SPPV和GTPV实时荧光RPA (real-time fluorescent recombinase polymerase amplification)检测方法。结果显示,该方法仅对SPPV和GTPV的靶基因扩增呈阳性,而对牛结节性皮肤病病毒(LSDV)、传染性脓疱病毒(O RFV)、蓝舌病病毒(BTV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、水疱性口炎病毒(VSV)、A型口蹄疫病毒(FM DV type A)、O型口蹄疫病毒(FMDV type O)、亚洲1型口蹄疫病毒(FMDV Asia 1)等相关病毒检测结果均为阴性,特异性良好;对SPPV和GTPV检测的灵敏度分别为4.72×10~2copies/μL和4.35×10~2 copies/μL;利用该方法对临床样品进行检测,与OIE推荐的普通PCR检测结果符合率为100%。结果表明,建立的SPPV和GTPV实时荧光RPA方法灵敏、快速、特异性强,为SPPV和GTPV感染的早期诊断提供了技术支持,适用于SPPV和GTPV的检疫、疫情监测及流行病学调查,对疫情暴发后相应控制方案的制定具有重要意义。

关键词：绵羊痘病毒山羊痘病毒重组酶聚合酶扩增

6种肉类成分多重PCR鉴别方法的建立及应用

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食品安全质量检测学报 2019年第19期10卷 6661-6666页

作者：陈冉越周庆王昱聂福平唐昌杰杨俊吴蕊刘莲张欢李贤良李应国王国民重庆海关技术中心重庆市进境陆生动物疫病防控技术研究工程中心国家牛病检测重点实验室重庆400020 重庆玉成产品质量检测有限公司重庆400020

目的建立单管同步快速鉴别水牛、黄牛、牦牛、山羊、驴和鸭的物种成分的多重PCR鉴别方法。方法对水牛、黄牛、牦牛、山羊、驴和鸭的线粒体全基因组,采用Primer-blast在线软件,设计6对特异性引物,优化反应条件,建立PCR体系。结果该方法... 详细信息

目的建立单管同步快速鉴别水牛、黄牛、牦牛、山羊、驴和鸭的物种成分的多重PCR鉴别方法。方法对水牛、黄牛、牦牛、山羊、驴和鸭的线粒体全基因组,采用Primer-blast在线软件,设计6对特异性引物,优化反应条件,建立PCR体系。结果该方法仅对水牛、黄牛、牦牛、山羊、驴和鸭肉有特异性扩增,与其他动物的核酸无交叉反应;同时检测6种物种成分的检测低限为10-4 ng/μL。在鸭肉中分别模拟掺入牛肉、羊肉和驴肉成分,方法对鸭肉中掺入牛成分、羊成分和驴成分中的检出限均小于0.5%。结论该方法特异性好、敏感度高,可以被应用于水牛、牦牛、黄牛、山羊、驴和鸭的物种成分鉴别。

关键词：多重PCR 肉类掺假动物源成分

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深度伪造涉性信息的刑法规制

法学 2024年第3期 76-90页

作者：陈冉北京理工大学法学院

面对“深度伪造”技术在信息制作上高度的以假乱真可能以及在色情领域的广泛存在,有必要明确刑法在深度伪造涉性信息规制上的立足点,将深度伪造涉性信息规制定位在“真实的性隐私保护”而非对“虚假信息”的打击。在信息流动的产业化背... 详细信息

面对“深度伪造”技术在信息制作上高度的以假乱真可能以及在色情领域的广泛存在,有必要明确刑法在深度伪造涉性信息规制上的立足点,将深度伪造涉性信息规制定位在“真实的性隐私保护”而非对“虚假信息”的打击。在信息流动的产业化背景下,网络与信息所形成的新秩序对传统刑法在隐私保护上构成挑战,现行刑法过于倚重前端预防的打击不力。在深度伪造治理公、私法融合的趋势下,深度伪造涉性信息犯罪规制范式必须转型,要从性隐私保护和信息规制两个层面对涉性信息进行检视,彰显“性隐私”的独立保护地位,肯定现实与虚拟交互中“性”利益保护的适度远程化,以“场景化”构建个人信息违法行为的刑法规制路径。同时,在深度伪造涉性信息制作、传播主体刑事责任的认定上,考虑涉性信息参与各方的风险防御可能,在性隐私保护上应当合理对伪造者、网络服务提供者以及受害人进行风险分配,以“合规”划定网络服务提供者的刑事责任边界;考虑个人信息主体在隐私保护上的同意“受限”,立法和司法应当避免单纯根据受害人的同意和创作者的“标识”对涉性信息制作和传播者以及平台等风险创设者进行免责处理。

关键词：深度伪造涉性信息人格权性隐私规制范式

基于CRRA效用准则的两类索赔保险与再保险决策

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数学的实践与认识 2024年

作者：陈冉江五元杨佳悦湖南理工学院数学学院

研究了在两类风险索赔影响下保险人的稳健最优投资与再保险策略问题.保险人将盈余分别投资于无风险债券、股票以及期权,其目标是终端财富在幂效用(CRRA)下最大化.假设风险资产价格服从Heston随机波动率模型,此外保险人还可以购买比例再... 详细信息

研究了在两类风险索赔影响下保险人的稳健最优投资与再保险策略问题.保险人将盈余分别投资于无风险债券、股票以及期权,其目标是终端财富在幂效用(CRRA)下最大化.假设风险资产价格服从Heston随机波动率模型,此外保险人还可以购买比例再保险来分散投资风险.利用随机最优控制理论,得到了稳健最优再保险、投资策略以及值函数的解析表达式.最后,通过数值模拟分析了模型参数对最优策略的影响.

关键词：两类索赔 Heston模型期权模糊厌恶稳健策略

主题-引文融合视角下重要主题发现及知识流动路径研究

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数据分析与知识发现 2024年第2期8卷 99-113页

作者：梁爽刘小平柴文越中国科学院文献情报中心北京100190 中国科学院大学经济与管理学院信息资源管理系北京100190

【目的】理解与探究知识流动的内在机理与轨迹方向,为科技创新与发展、科学评价与决策提供参考。【方法】以主题作为研究视角,建立知识网络,综合主题影响因子与节点交叉度构建主题重要度指标。基于识别得到的重要主题,分别从知识流入与... 详细信息

【目的】理解与探究知识流动的内在机理与轨迹方向,为科技创新与发展、科学评价与决策提供参考。【方法】以主题作为研究视角,建立知识网络,综合主题影响因子与节点交叉度构建主题重要度指标。基于识别得到的重要主题,分别从知识流入与知识流出视角,利用最大路径搜索算法实现知识流动路径的构建。【结果】实证分析表明,所构建的指标能够对领域重要主题实现有效识别。在此基础上,构造知识流动路径,并得到具有最大知识传播量的领域路径。【局限】知识节点间的知识流动强度度量具有一定的局限性,未能全面考虑到引用行为发生的动机、引用类型等实际引用情况的多变性。【结论】综合分析两种视角下的流动路径可以发现,主题间具有较为普遍的双向知识流动,学科内部存在交流紧密的主题群,为从整体上把握研究主题的形成脉络与继承发展提供有益参考。

关键词：引文分析主题引用网络主题重要性知识流动路径分析

基于DJ-1/GPX4通路探讨加味二至丸对动脉粥样硬化巨噬细胞铁死亡的影响

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中国病理生理杂志 2024年第4期40卷 627-636页

作者：马贵萍陈冉肖稳康洪创雄北京中医药大学深圳医院(龙岗) 广东深圳518172 上海中医药大学附属龙华医院上海200032 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405

目的:探讨加味二至丸(MEP)对动脉粥样硬化(AS)巨噬细胞铁死亡的作用及机制。方法:(1)50只载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠构建AS模型,随机分为模型组,辛伐他汀组,以及低、中、高剂量MEP组,每组10只,以10只同背景的C57BL/6J为空白对... 详细信息

目的:探讨加味二至丸(MEP)对动脉粥样硬化(AS)巨噬细胞铁死亡的作用及机制。方法:(1)50只载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠构建AS模型,随机分为模型组,辛伐他汀组,以及低、中、高剂量MEP组,每组10只,以10只同背景的C57BL/6J为空白对照组。按照分组干预10周后,HE染色观察小鼠主动脉窦病理学改变,RT-qPCR法检测各组小鼠主动脉组织DJ-1和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA表达。(2)将40只SD大鼠随机分为空白对照组和MEP组,制备MEP含药血清。体外培养RAW264.7小鼠巨噬细胞,将细胞分为空白对照血清组、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的模型组、铁死亡抑制剂(ferrostatin-1)组、MEP含药血清组和MEP含药血清+铁死亡诱导剂(erastin)组共5组。MTT实验检测不同浓度MEP含药血清对细胞活力的影响,油红O染色观察各组细胞脂质沉积,ELISA检测各组细胞活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)及铁离子水平,透射电镜观察各组细胞线粒体结构和形态,RT-qPCR法和Western blot法分别检测检测各组细胞DJ-1、GPX4、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、铁蛋白重链1(FTH1)、p53、前列腺素-内过氧化物合酶2/环加氧酶2(PTGS2/COX2)和NADPH氧化酶1(NOX1)的mRNA和蛋白表达。结果:(1)动物实验结果提示,MEP可以减轻小鼠主动脉窦根部斑块形成,显著升高主动脉DJ-1和GPX4的mRNA表达。(2)细胞实验结果提示,ox-LDL诱导下的RAW264.7细胞脂质沉积显著增多,ROS、MDA和总SOD水平显著升高,GSH水平显著降低,p53、PTGS2/COX2和NOX1的mRNA及蛋白表达显著上调,DJ-1、GPX4、SLC7A11和FTH1的mRNA及蛋白表达显著下调;与ox-LDL组比较,MEP含药血清组细胞脂质沉积显著减少,ROS、MDA和总SOD水平显著降低,GSH水平显著升高,p53、PTGS2/COX2和NOX1的mRNA及蛋白表达显著下调,DJ-1、GPX4、SLC7A11和FTH1的mRNA及蛋白表达显著上调。结论:MEP可以抑制AS巨噬细胞铁死亡,从而延缓AS进展,其机制与DJ-1/GPX4信号通路有关。

关键词：加味二至丸动脉粥样硬化巨噬细胞铁死亡

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