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广西蔗区甘蔗白条病菌的鉴定与致病力分析

植物病理学报 2022年第1期52卷 9-16页

作者：吴广悦李奕莎李美霖张桂英陈保善张木清广西甘蔗生物学重点实验室蔗糖产业省部共建协同创新中心广西大学南宁530005

甘蔗白条病是一种检疫性病害,在我国多个蔗区均有报道,严重威胁我国甘蔗生产。本研究对采自广西蔗区不同品种(系)的病原菌进行分离、鉴定、保存,并选取其中40份白条黄单胞菌分离物进行遗传多样性分析与接种试验,评价其致病性。根据三磷... 详细信息

甘蔗白条病是一种检疫性病害,在我国多个蔗区均有报道,严重威胁我国甘蔗生产。本研究对采自广西蔗区不同品种(系)的病原菌进行分离、鉴定、保存,并选取其中40份白条黄单胞菌分离物进行遗传多样性分析与接种试验,评价其致病性。根据三磷酸腺苷结合盒转运蛋白等管家基因和IV型分泌系统virB基因的序列差异和进化树分析,将40个菌株分为两个类型;调查分析接种植株发病症状及病情指数,确定40份病原菌的致病力存在明显差异,致病力强的菌株有5个,中等4个,其他31个菌株表现弱致病力。

关键词： Xanthomonas albilineans 浸渍接种 PCR检测致病力

The FsBmh1-interacting GPI-anchored Cell Wall Protein FsEcm33 is a Negative Regulator of Virulence in Fusarium sacchari

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The FsBmh1-interacting GPI-anchored Cell Wall Protein FsEcm3...

应用二温式PCR检测家蚕核型多角体病毒的方法

中国植物病理学会2023年学术年会

作者：陈悦佳 ZHAO Lixian 邹承武陈保善 College of Life Science and Technology Guangxi University State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources Guangxi Key laboratory of Sugarcane Biology

Fusarium sacchari is one of the most important sugarcane pathogens that causes Pokkah boeng disease in China.Two 14-3-3 proteins,FsBmh1 and FsBmh2 in F.sacchari were identified and they were used as baits to fish the interacting proteins by yeast two-hybridization against the cDNA library of F.sacchari.A protein that encodes GPI-anchored cell wall protein,designated as FsEcm33 was found to specifically interact with FsBmhl.Deletion of FsEcm33 did not alter the morphology but increased the sensitivity of the fungus to Congo red,a cell wall-damaging agent.Deletion of FsEcm33 significantly enhanced the virulence and over-expression of FsEcm33 reduced virulence of the fungus.Since deletion of FsBmhl also resulted in reduced virulence,it may likely that FsBmhl suppresses the activity of FsEcm33 to maintain the virulence in F.sacchari.

关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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蚕业科学 2015年第3期41卷 565-570页

作者：覃玥陈保善河池学院化学与生物工程学院广西宜州546300 广西大学生命科学与技术学院南宁530004 广西亚热带生物资源保护利用重点实验室南宁530004

为了简便、快速、准确地检测家蚕核型多角体病毒(Bm NPV),以Bm NPV广西分离株的多角体蛋白基因(polh)序列(Gen Bank登录号:JQ991011.1)设计引物,以感染Bm NPV(广西宜州分离株)2 h的5龄家蚕幼虫中肠组织提取的DNA为模板,建立二温式PCR检... 详细信息

为了简便、快速、准确地检测家蚕核型多角体病毒(Bm NPV),以Bm NPV广西分离株的多角体蛋白基因(polh)序列(Gen Bank登录号:JQ991011.1)设计引物,以感染Bm NPV(广西宜州分离株)2 h的5龄家蚕幼虫中肠组织提取的DNA为模板,建立二温式PCR检测Bm NPV的方法,最终确定的最佳反应体系为:10×PCR buffer 1.5μL,5 mmol/L Mg Cl22μL,2.5mmol/L d NTP 0.5μL,10μmol/L上、下游引物各1μL,5 U/μL Taq DNA聚合酶0.1μL,18 ng/μL模板DNA 1μL,加水至总体积15μL。确定的最佳反应条件为:94℃预变性3 min;95℃15 s,延伸和退火温度合并为62℃30 s,共25个循环。按上述条件PCR扩增得到大小约309 bp的特异性片段,测序结果与已知polh基因序列的相似度为100%。与普通PCR检测方法比较,采用二温式PCR方法对样本的检测时间节省1.5 h,反应特异性强,灵敏度高(能被检测的最小感病组织基因组DNA的质量浓度为1.8 pg/μL),并且选择最初2 h感病的幼虫中肠组织为检测材料,因而可用于家蚕血液型脓病的早期诊断。

关键词：家蚕核型多角体病毒多角体蛋白基因二温式PCR 反应条件

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番茄叶片cDNA文库的构建及质量评价

分子植物育种 2014年第2期12卷 342-348页

作者：曾泉宁小清潘瑞兰蒙姣荣陈保善广西大学生命科学与技术学院南宁530005 广西大学农学院南宁530005 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530005

黄瓜花叶病毒（Cueutubermosaicvirus，CMV）是番茄病毒病的主要病原之一。为了研究CMV与番茄相互作用的分子机制，本研究以受CMV侵染的番茄叶片为材料，构建了番茄的cDNA文库。文库总库容量为2．346×10^6cfu，其中0．5～1kb片段文库... 详细信息

黄瓜花叶病毒（Cueutubermosaicvirus，CMV）是番茄病毒病的主要病原之一。为了研究CMV与番茄相互作用的分子机制，本研究以受CMV侵染的番茄叶片为材料，构建了番茄的cDNA文库。文库总库容量为2．346×10^6cfu，其中0．5～1kb片段文库库容量为1．02×10^6cfu；1～2kb片段文库库容量为8．56×10^5cfu；大于2kb片段文库库容量为4．7×10^5 cfu。三个子文库各检测20个克隆，重组率为100％。随机挑取30个克隆进行测序，获得29条有效序列，有23条序列包含完整的开放阅读框，表明获得的文库质量较高。高质量番茄cDNA文库的获得，为研究CMV一番茄相互作用奠定了基础。

关键词：黄瓜花叶病毒番茄 cDNA文库

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宜州市蚕病发生现状及防治对策

安徽农业科学 2008年第27期36卷 11826-11829页

作者：覃玥李楠陈保善广西大学生命科学与技术学院河池学院化学与生命科学系广西宜州546300 河池学院化学与生命科学系广西亚热带生物资源保护利用重点实验室广西南宁530004

分析了当前宜州市蚕病发生的状况及原因,提出了综合防治对策。

关键词：宜州市蚕病防控对策

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苯酚降解菌F5-2的分离鉴定及其降解特性

高校化学工程学报 2012年第6期26卷 1001-1008页

作者：何熙璞刘鸿杰张敏梁锦添李俊芳陈保善广西大学化学化工学院广西南宁530004 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西南宁530004 广西大学生命科学与技术学院广西南宁530004

采用逐量分批驯化方法，从某造纸厂的废水中分离得到一株能够以苯酚为唯一碳源生长、可高效降解苯酚的菌株F5-2。通过形态学、生理生化特征和16SrDNA序列分析，F5-2鉴定为节杆菌（Arthrobactersp．）。该菌株的细胞生长与苯酚降解能力... 详细信息

采用逐量分批驯化方法，从某造纸厂的废水中分离得到一株能够以苯酚为唯一碳源生长、可高效降解苯酚的菌株F5-2。通过形态学、生理生化特征和16SrDNA序列分析，F5-2鉴定为节杆菌（Arthrobactersp．）。该菌株的细胞生长与苯酚降解能力呈同步趋势，苯酚降解主要发生在生长对数期。该菌株最高可耐受1500mg．L-1的苯酚，在温度20--40℃、pH5．0-9．0、摇床转速200r．min-1、盐度0-40g．L-1范围内，F5-2菌株均能保持对苯酚良好的降解能力。菌种接种量在2％时苯酚降解率达到最大：反应57h后，可使800mg．L-1的苯酚降解率达96．13％。F5-2菌株降解苯酚的功能酶是邻苯二酚2，3-双加氧酶，该酶为胞内酶，其表达受苯酚诱导，通过间位开环降解苯酚。

关键词：苯酚 16S rDNA生物降解邻苯二酚2 3-双加氧酶节杆菌

甘蔗梢腐病菌Fusarium sacchari的生物学特性及防治药剂筛选

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分子植物育种 2023年第24期21卷 8275-8289页

作者：梁浩铭黄海娟李界秋黄芸旦玉权黄振鑫陈保善蒙姣荣广西大学农学院广西甘蔗生物学重点实验室南宁530004 广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530004 广西大学农牧发展研究院南宁530004

为明确甘蔗镰刀菌(Fusarium sacchari)的生物学特性并筛选出有效防治甘蔗梢腐病的药剂,本研究测定了温度、pH、碳源、氮源和光照对甘蔗镰刀菌菌丝生长速率和分生孢子萌发的影响,采用菌丝生长速率法测定了8种杀菌剂的毒力作用并进行田间... 详细信息

为明确甘蔗镰刀菌(Fusarium sacchari)的生物学特性并筛选出有效防治甘蔗梢腐病的药剂,本研究测定了温度、pH、碳源、氮源和光照对甘蔗镰刀菌菌丝生长速率和分生孢子萌发的影响,采用菌丝生长速率法测定了8种杀菌剂的毒力作用并进行田间防治试验。研究结果表明,甘蔗镰刀菌的菌丝在光暗交替条件下生长差异不明显,最适宜菌丝生长和孢子萌发温度均为28℃,分生孢子的致死温度为63℃;最适菌丝生长和分生孢子萌发的pH均为8。在供试碳源和氮源中,最适合甘蔗镰刀菌菌丝生长的碳源和氮源分别为麦芽糖和酵母粉;最适合分生孢子萌发的碳源和氮源则分别为蔗糖和硝酸钠。在室内毒力测定的8种供试杀菌剂中,50%咪鲜胺锰盐、25%氰烯菌酯和50%多菌灵对甘蔗梢腐病菌具有强的毒力,其EC50依次为0.083、0.271和0.380 mg/L;田间防治试验结果显示,25%氰烯菌酯1 200倍液和50%多菌灵可湿性粉剂500倍液、12%中生菌素、70%恶霉灵和20%粉锈宁等药剂的800倍液均梢腐病能较好地控制病害的发展,防治效果均为96.00%,具有较好的推广应用潜力。本研究为进一步防控甘蔗梢腐病提供一定的参考。

关键词：甘蔗梢腐病甘蔗镰刀菌生物学特性毒力测定化学防治

野油菜黄单胞菌野油菜致病变种一个新的致病相关基因的克隆和鉴定

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浙江农业大学学报 2003年第6期29卷 591-598页

作者：陆光涛唐纪良何勇强陈保善危广宁浙江大学植物保护系浙江杭州310029 广西大学分子遗传研究所广西南宁530005

野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xcc)是十字花科植物重要的病原菌,能引起十字花科作物发生黑腐病。本课题组采用转座子Tn5gusA5对Xcc野生型菌株8004诱变,获得17280株Tn5gusA5突变体,并从中筛选到一批致病缺陷突变体,采用TAIL-PCR对致病... 详细信息

野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xcc)是十字花科植物重要的病原菌,能引起十字花科作物发生黑腐病。本课题组采用转座子Tn5gusA5对Xcc野生型菌株8004诱变,获得17280株Tn5gusA5突变体,并从中筛选到一批致病缺陷突变体,采用TAIL-PCR对致病缺陷突变体的Tn5gusA5插入位点进行定位,发现5株突变体的Tn5gusA5插在8004菌株的基因组ORF1857内(未发表资料),该ORF功能尚未见报道。序列分析表明,ORF1857演绎的编码产物与铜绿假单胞菌(Pseudomonaseaeruginosa)的wbpL基因演绎的编码产物具有33%的一致性和45%的相似性,并具有第4家族的糖基转移酶功能域,因此本文暂将ORF1857命名为wbxL基因。对wbxL基因进行缺失,获得的缺失突变体用剪叶法接种到寄主萝卜叶片时,缺失突变体完全丧失致病性,一段PCR合成的包含wbxL基因的DNA片段能互补缺失突变体,恢复缺失突变体的致病性。这证实wbxL基因是Xcc的一个新的致病相关基因。

关键词：野油菜黄单胞菌野油菜致病变种 wbxL基因致病相关基因缺失突变体致病性克隆鉴定

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高效甘蔗黑穗病菌原生质体的制备

基因组学与应用生物学 2016年第7期35卷 1750-1755页

作者：阎维巍李茹陈保善广西大学生命科学与技术学院南宁530004 广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530004

原生质体质量是丝状真菌遗传转化成功的关键。本研究以甘蔗黑穗病菌为试验材料,对其原生质制备和再生的条件进行研究。结果表明,将甘蔗黑穗病菌单倍体菌株JG36摇床培养24 h,然后加入5 mg/m L溶壁酶、30 mg/m L纤维素酶和30 mg/m L蜗牛... 详细信息

原生质体质量是丝状真菌遗传转化成功的关键。本研究以甘蔗黑穗病菌为试验材料,对其原生质制备和再生的条件进行研究。结果表明,将甘蔗黑穗病菌单倍体菌株JG36摇床培养24 h,然后加入5 mg/m L溶壁酶、30 mg/m L纤维素酶和30 mg/m L蜗牛酶的混合酶液,28℃160 r/min摇床上酶解3 h。1.2 M/L Mg SO_4作为原生质体制备时的渗透压稳定剂。在此条件下,制备原生质体得率最高达86.86%,原生质体再生率达到63.26%。

关键词：甘蔗黑穗病菌原生质体制备再生