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基于微滴式数字PCR检测牛病毒性腹泻病毒方法的建立及初步应用

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农业生物技术学报 2025年第1期33卷 190-199页

作者：刘芯怡李丹秦刚陈俊贞付强史慧君新疆农业大学动物医学学院新疆草食动物新药研究与创制重点实验室天康生物制药有限公司新疆巴楚县畜牧兽医站中国农业科学院西部农业研究中心

牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)是引起犊牛(Bos sp.)病毒性腹泻的主要病原之一，导致犊牛免疫力降低，患病率和死亡率升高。目前对BVDV常用的检测方法存在灵敏度较低、容易出现假阳性等状况。本研究基于微滴式数... 详细信息

牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)是引起犊牛(Bos sp.)病毒性腹泻的主要病原之一，导致犊牛免疫力降低，患病率和死亡率升高。目前对BVDV常用的检测方法存在灵敏度较低、容易出现假阳性等状况。本研究基于微滴式数字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)技术，建立BVDV精准检测技术。首先针对BVDV 5'UTR基因保守序列区域设计引物和探针，合成BVDV 5'UTR基因并构建质粒标准品。使用BVDV质粒标准品分别建立实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, qPCR)和ddPCR检测方法，并优化其反应参数和条件，分析其灵敏度、特异性和重复性，并进行了临床应用。结果显示，本研究建立的qPCR方法中，最佳引物和探针浓度分别为300和500 nmol/L，标准曲线呈良好的线性关系，最低检测下限为1×10～4 copies/μL，具有良好的特异性和重复性。建立的ddPCR方法中，最低检测下限为0.64 copies/μL，比qPCR灵敏性高15 625倍，该方法具有良好的特异性和重复性。临床检测了82份样品，ddPCR检出率为15.58%,qPCR检出率为14.63%。本研究建立的ddPCR方法比qPCR方法更加灵敏、高效、特异且重复性良好，为BVDV鉴别诊断提供了技术支持。

关键词：牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 微滴式数字PCR(ddPCR) 实时荧光定量PCR(qPCR) 灵敏性特异性重复性

基于聚类分析的农村女性孕期自我管理类型及特征研究

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中国全科医学 2025年

作者：陈俊屿韩广莉李春宏陈衣迪杨娜娜罗小茜哈尔滨医科大学(大庆)护理学院黑龙江省大庆市红岗人民医院妇产科黑龙江省绥化市安达市妇幼保健院妇产科吉林大学中日联谊医院妇产科

背景农村孕期女性自我管理水平较低且存在个体差异，应进一步针对其自我管理行为特征进行群组划分。目的从农村孕期女性自我管理角度分析其类型及特征，为提出针对性的管理策略提供参考。方法于2023年1—8月，采取便利抽样方法选取黑... 详细信息

背景农村孕期女性自我管理水平较低且存在个体差异，应进一步针对其自我管理行为特征进行群组划分。目的从农村孕期女性自我管理角度分析其类型及特征，为提出针对性的管理策略提供参考。方法于2023年1—8月，采取便利抽样方法选取黑龙江省绥化市、黑龙江省大庆市和吉林省长春市农村孕期女性470例作为调查对象，采用一般资料调查表、孕妇自我管理量表、一般自我效能量表、内部动机量表、孕期保健知识量表对其进行调查，采用SPSS 25.0的聚类分析方法进行分类，比较不同类型农村孕期女性的一般特征。结果被调查的农村孕期女性自我管理行为总分为（70.2±16.4）分；最佳聚类为4种类型，分别为Ⅰ类低认知不参与型（n=119,25.32%）、Ⅱ类指导合作型（n=138,29.36%）、Ⅲ类监督引导型（n=88,18.72%）、Ⅳ类主动参与型（n=125,26.60%）。4种类型的农村孕期女性在教育程度、职业、年收入情况、孕次、孕周、是否计划内怀孕、有无慢性病史以及有无妊娠合并症方面比较，差异均有统计学意义（P<0.05）;4种类型在自我管理各维度得分的比较中，遵医行为维度和胎儿监护行为管理维度差异具有统计学意义（P<0.05）。结论基于聚类分析确定的4种农村孕期女性自我管理类型间具有较高的异质性，可根据不同类型制定针对性的干预措施，以进一步提升农村孕期女性自我管理能力，优化孕期保健服务。

关键词：孕期自我管理孕期管理农村聚类分析

江苏省特色产业集群对中小企业ESG表现的影响研究

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知识经济 2025年第3期 15-17页

作者：陈帅苗润青张若晗尤嘉琪郭轩羽王雨恬南京审计大学内部审计学院江苏南京211815

特色产业集群给中小企业ESG发展带来了新的机遇和挑战。文章研究发现:特色产业集群为中小企业ESG发展提供政策保障、市场资源、技术支持,但是仍然存在主导产业优势不突出、配套支持机制不健全、区域资源配置不平衡,以及数字化、绿色化... 详细信息

特色产业集群给中小企业ESG发展带来了新的机遇和挑战。文章研究发现:特色产业集群为中小企业ESG发展提供政策保障、市场资源、技术支持,但是仍然存在主导产业优势不突出、配套支持机制不健全、区域资源配置不平衡,以及数字化、绿色化发展转型进程缓慢等问题。文章将从培育主导产业、完善发展机制、平衡资源配置、加快数字化转型四个维度对中小企业ESG发展路径进行研究,以期在推进中小企业特色产业集群发展进程的同时助力ESG发展。

关键词：特色产业集群中小企业 ESG(环境、社会和公司治理)

基于Infoworks ICM模型改进的监利市内涝灾害风险评估体系研究

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水利规划与设计 2025年第1期 34-39,45页

作者：邵俊晏传杰张梦超邱幸勃唐晓恬武汉科技大学城市建设学院湖北武汉430072

为评估湖北省监利市中心城区的内涝风险,结合层次分析法与指标体系法构建内涝灾害风险评估模型,针对积水指标,运用Infoworks ICM软件构建一维二维耦合水力模型,通过暴雨模拟评估管网排水能力并得到详实的积水数据。结果表明:研究区西南... 详细信息

为评估湖北省监利市中心城区的内涝风险,结合层次分析法与指标体系法构建内涝灾害风险评估模型,针对积水指标,运用Infoworks ICM软件构建一维二维耦合水力模型,通过暴雨模拟评估管网排水能力并得到详实的积水数据。结果表明:研究区西南地块老城区内涝风险性最高,向四周逐渐降低;易涝点位主要分布于老城区部分道路沿线。研究结果为监利市内涝防控提供指导,弥补了传统指标体系法对于数据利用不充分的缺陷。

关键词：内涝风险评估 Infoworks ICM GIS空间分析一维二维耦合水力模型层次分析

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《水利工程生态评价标准》解读及应用

水利技术监督 2025年第1期 3-6+105页

作者：王英丽陈俊昂刘海洋广东省水利电力勘测设计研究院有限公司广东省水利水电技术中心

广东省水利学会团体标准T/GDHES 002—2023《水利工程生态评价标准》(以下简称《标准》)于2023年7月18日正式实施。为准确理解和应用该《标准》,文章就《标准》编制的背景、思路和主要内容进行解读,依据《标准》要求及规定对广东省内2... 详细信息

广东省水利学会团体标准T/GDHES 002—2023《水利工程生态评价标准》(以下简称《标准》)于2023年7月18日正式实施。为准确理解和应用该《标准》,文章就《标准》编制的背景、思路和主要内容进行解读,依据《标准》要求及规定对广东省内2个水利工程进行生态评价,以期为《标准》的推广及应用提供参考与借鉴。

关键词：标准水利工程生态评价指标体系应用案例

养殖高体(鱼师)不同部位营养成分及嘌呤含量

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广东海洋大学学报 2025年

作者：谢松珍张雅洁陈俊斌王敏杰钟赛意洪鹏志朱春华刘寿春广东海洋大学食品科技学院/广东省水产品加工与安全重点实验室/广东省海洋食品工程技术研究中心/广东省水产预制食品加工与品质控制工程技术研究中心/广东省现代农业科技创新中心南方海洋科学与工程广东省实验室(湛江) 广东海洋大学水产学院

【目的】研究高体(鱼师)鱼头、鱼尾、鱼皮、背肉、腹肉及鱼骨等6部位的营养成分、嘌呤分布及其呈味特性的差异，为高体(鱼师)原料精深加工及高值化利用提供参考。【方法】采用国标规定方法测定高体(鱼师)各部位的蛋白质、氨基酸、矿物... 详细信息

【目的】研究高体(鱼师)鱼头、鱼尾、鱼皮、背肉、腹肉及鱼骨等6部位的营养成分、嘌呤分布及其呈味特性的差异，为高体(鱼师)原料精深加工及高值化利用提供参考。【方法】采用国标规定方法测定高体(鱼师)各部位的蛋白质、氨基酸、矿物质等营养成分，并通过反相高效液相色谱（RP-HPLC）测定核苷酸及嘌呤含量。【结果】高体(鱼师)6部位中鱼骨脂肪质量分数最高（21.41%），其他部位介于2.02%～15.26%；鱼皮蛋白质质量分数最高（23.30%），其次是背肉（20.22%），其余部位介于16.90%～19.41%。6部位矿物质元素含量丰富，鱼头、鱼尾和鱼骨的Ca(26.344、38.772、54.580 g/kg)、Na(1.551、1.981、1.504 g/kg)、Mg(518.0、688.7、777.0 mg/kg)质量分数较高，背肉及腹肉K质量分数较高，分别为4.176 3、4.002 7 g/kg，鱼骨Mn质量分数最高（2.56 mg/kg），鱼皮Zn质量分数最高（43.97 mg/kg），鱼尾Fe、Cu质量分数较高（41.04、0.63 mg/kg）。高体(鱼师)6部位富含18种氨基酸，必需氨基酸占总氨基酸比例（质量分数，下同）为34.60%～54.14%；鲜、甜味氨基酸占总氨基酸的31.75%～55.13%，其中鱼头的鲜味氨基酸含量最高。背肉及腹肉的呈鲜味核苷酸总量（腺嘌呤核苷酸+次黄嘌呤核苷酸+鸟嘌呤核苷酸，分别为727.56、713.25 mg/kg）及其等效鲜味浓度（分别为148.1、142.4 g/kg）值显著高于其他部位（P <0.05），有强烈的鲜味特征。高体(鱼师)各部位嘌呤质量分数（mg/kg）依次为鱼皮（2 246.2）、背肉（768.2）、鱼头（732.3）、鱼尾（525.1）、腹肉（522.1）、鱼骨（162.1）(P <0.05)，除鱼皮外，其他部位嘌呤总量均在低嘌呤范围；高产尿酸嘌呤（腺嘌呤+次黄嘌呤）含量最高的是背肉和腹肉，质量分数分别为728.0、651.7 mg/kg。【结论】高体(鱼师)各部位营养丰富，富含鲜味氨基酸及呈鲜味核苷酸，除鱼皮外，属于低嘌呤食材。不同部位的营养成分、嘌呤和呈味物质存在显著差异。

关键词：高体(鱼师) 氨基酸嘌呤核苷酸等效鲜味浓度

鳖蛋黄血管紧张素转化酶抑制肽分离纯化及活性分析

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食品科学 2025年第1期46卷 40-48页

作者：刘华宇廖彭莹张天丰张新锐邓纭宁李耀华韦金锐陈俊广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西中医药大学广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室中药学国家级实验教学示范中心广西南宁530200 广西中医药大学教学实验实训中心广西南宁530200 广西中医药大学广西中医药科学实验中心广西南宁530200

为从鳖蛋黄酶解物中筛选具有血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性的肽段,以ACE抑制活性为评价指标,采用超滤和凝胶过滤色谱技术进行分离纯化。采用液相色谱-串联质谱技术对活性组分进行肽段鉴定,借助生物信息... 详细信息

为从鳖蛋黄酶解物中筛选具有血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性的肽段,以ACE抑制活性为评价指标,采用超滤和凝胶过滤色谱技术进行分离纯化。采用液相色谱-串联质谱技术对活性组分进行肽段鉴定,借助生物信息学工具进行活性评估。优选预测活性较高的肽段进行合成和活性验证,并用分子对接工具分析活性肽与ACE的相互作用。结果表明,鳖蛋黄菠萝蛋白酶酶解物的水解度为(17.70±0.34)%,抑制ACE的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))值为(0.210±0.019)mg/mL。对酶解产物进行分离纯化,从活性组分F3中鉴定出36条肽段,选择6条活性评分较高的肽段进行合成,其中肽段YNGIWPRD和ASDILPKK的IC_(50)值分别为(0.019 00±0.000 36)、(0.170 0±0.001 3)mg/mL。分子对接结果表明,二者均通过多条氢键与ACE紧密结合。综上,从鳖蛋黄中筛选出2条新的ACE抑制活性肽。

关键词：鳖蛋黄血管紧张素转化酶抑制肽分离纯化生物信息学分子对接

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电针对运动大鼠腓肠肌组织代谢酶及自噬基因表达的影响

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中国组织工程研究 2025年第6期29卷 1127-1136页

作者：郑荣发莫伟彬黄鹏陈俊吉梁婷资方宇李国峰广西师范大学体育与健康学院广西壮族自治区桂林市541006 药用资源化学与药物分子工程教育部重点实验室广西壮族自治区桂林市541004 桂林医学院广西壮族自治区桂林市541199 桂林学院体育与健康学院广西壮族自治区桂林市541006

背景:急性运动易引起机体内骨骼肌组织损伤和体内脂代谢紊乱,但急性运动联合电针调控机体内代谢和自噬通路的机制尚不明确。目的:观察电针“足三里”和“环跳”穴对急性运动大鼠骨骼肌代谢酶及自噬水平的变化。方法:将50只雄性SD大鼠随... 详细信息

背景:急性运动易引起机体内骨骼肌组织损伤和体内脂代谢紊乱,但急性运动联合电针调控机体内代谢和自噬通路的机制尚不明确。目的:观察电针“足三里”和“环跳”穴对急性运动大鼠骨骼肌代谢酶及自噬水平的变化。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为安静对照组(10只)、模型组(20只)、逆电针组(20只),后两组设2个时相点,即运动后即刻和运动后3 h组,每个时相点10只大鼠。后两组进行适应性跑台运动训练后,进行急性运动训练,逆电针组大鼠于每天跑台训练前先介入电针治疗(参数为电针大鼠两侧“足三里”和“环跳”穴,连续波、频率2 Hz、强度2 mA、留针30 min、1次/d、连续7 d),电针后休息10 min再进行急性运动。分别于运动后即刻和运动后3 h麻醉取大鼠双侧腓肠肌组织,苏木精-伊红染色观察大鼠骨骼肌组织病理学变化;ELISA法检测大鼠骨骼肌组织肝脂酶、脂肪酸合成酶、激素敏感脂肪酶、肉碱棕榈酰转移酶1活性;免疫组织化学和Western Blot法检测自噬基因表达变化。结果与结论:①苏木精-伊红染色后模型组大鼠运动后即刻和运动后3 h腓肠肌纤维排列出现紊乱、肿胀、破裂;逆电针组大鼠运动后即刻和运动后3 h腓肠肌纤维排列紧密,肿胀和破裂的细胞大为减少,与安静对照组比较无明显性差异;②模型组和逆电针组运动后3 h的肝脂酶和脂肪酸合成酶活性均低于安静对照组(P<0.05或P<0.01);模型组和逆电针组大鼠运动后3 h的脂蛋白酯酶、激素敏感脂肪酶和肉碱棕榈酰转移酶1活性高于安静对照组(P<0.05或P<0.01),激素敏感脂肪酶和肉碱棕榈酰转移酶1活性在逆电针组运动后即刻高于模型组同期(P<0.05);与模型组运动后3 h相比,逆电针组运动后3 h脂蛋白酯酶活性升高(P<0.05),激素敏感脂肪酶活性降低(P<0.01);③免疫组织化学结果显示,P62、自噬相关基因5和自噬相关基因7表达在模型组大鼠运动后即刻和运动后3 h及逆电针组运动后即刻均高于安静对照组(P<0.05或P<0.01),其中运动后即刻和运动后3 h逆电针组大鼠P62及自噬相关基因7表达均低于模型组(P<0.05);④Western Blot结果显示,运动后即刻逆电针组大鼠P62和自噬相关基因7蛋白表达均低于模型组(P<0.05);Parkin蛋白表达在模型组大鼠运动后即刻和运动后3 h均高于安静对照组(P<0.05),逆电针组大鼠运动后即刻和运动后3 h均低于模型组(P<0.05);⑤提示急性运动引起大鼠腓肠肌纤维排列出现紊乱、肿胀、破裂,电针两侧“足三里”和“环跳”穴可改善大鼠骨骼肌脂代谢水平及调控自噬细胞,防止急性运动引起大鼠机体内脂代谢紊乱和腓肠肌组织的损伤,其机制可能与调控自噬相关因子P62、自噬相关基因5、自噬相关基因7、Parkin蛋白表达来促进大鼠骨骼肌细胞自噬的发生或调节细胞自噬通路密切相关。

关键词：电针急性运动腓肠肌组织代谢酶自噬基因

不同材料种植体修复单颗上前牙缺失的三维有限元分析

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中国组织工程研究 2025年第22期29卷 4687-4693页

作者：夏昭鑫高亦辰邓雨瑶王霞兰小蓉何芸陈俊良西南医科大学附属口腔医院口腔颌面外科四川省泸州市646000 口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川省泸州市646000

背景:种植修复已成为治疗前牙缺失的重要手段,选取合适的种植修复材料尤为重要,但目前临床应用的种植体材料均存在一定的不足,研究者们一直在探索合适的种植体材料。目的:对比不同材料种植体修复单颗上前牙缺失的生物力学特征。方法:将... 详细信息

背景:种植修复已成为治疗前牙缺失的重要手段,选取合适的种植修复材料尤为重要,但目前临床应用的种植体材料均存在一定的不足,研究者们一直在探索合适的种植体材料。目的:对比不同材料种植体修复单颗上前牙缺失的生物力学特征。方法:将1例单颗上颌中切牙缺失患者的锥形束CT数据导入3-matic软件建立单颗上前牙缺失的三维有限元分析模型,将模型导入Marc Mentat中,根据不同的种植体材料(聚醚醚酮、钛锆合金、钛合金和氧化锆,4种材料的弹性模量依次升高)及松质骨密度(高密度、低密度)共设计8组种植体修复模型,模拟正中咬合时上前牙受力情况,比较分析种植体位移、应力以及骨皮质应力和骨松质应变。结果与结论:(1)随着种植体材料弹性模量的增加,种植体的最大位移逐渐降低,聚醚醚酮组种植体最大位移数值超过了10μm;模型中种植体应力集中于唇侧颈部,随着种植体材料弹性模量的增加,种植体最大应力逐渐增大,其中氧化锆-低密度骨质组模型种植体应力最高,达21.31 MPa;所有模型的皮质骨应力均集中于与种植体交界的唇侧皮质骨,聚醚醚酮-低密度骨质组皮质骨应力最高,为29.90 MPa。(2)从生物力学角度来看,钛锆合金、钛合金、氧化锆均可用作修复单颗上前牙缺失的种植体材料,但单纯聚醚醚酮材料在上前牙区种植修复时可能会引起种植体位移过大,导致种植失败。

关键词：三维有限元分析上前牙缺失种植体钛钛锆合金氧化锆聚醚醚酮