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幽门螺杆菌阿莫西林稳定耐药克隆的筛选及其基因突变的检测

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安徽医科大学学报 2024年第1期59卷 39-44页

作者：陆秋丹糜孟衡崔古贞张峥嵘吴晓娟陈峥宏贵州医科大学基础医学院贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵阳550025 黔东南州人民医院检验科凯里556000 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室(贵州省医学分子生物学重点实验室) 贵阳550004

目的探讨阿莫西林(AMX)不稳定耐药的幽门螺杆菌(Hp)演化成AMX稳定高水平耐药的表型及其突变基因的检测。方法以冻存后的Hp菌株H390作为出发菌株,在不断增加AMX浓度的培养基上连续传代,筛选对AMX耐药的克隆,检测耐药克隆的最小抑菌浓度(M... 详细信息

目的探讨阿莫西林(AMX)不稳定耐药的幽门螺杆菌(Hp)演化成AMX稳定高水平耐药的表型及其突变基因的检测。方法以冻存后的Hp菌株H390作为出发菌株,在不断增加AMX浓度的培养基上连续传代,筛选对AMX耐药的克隆,检测耐药克隆的最小抑菌浓度(MIC),置于-80℃冻存3个月后再复苏,根据冻存后MIC下降情况判断其耐药性是否稳定。对获得的AMX最高MIC值的克隆H390r和出发菌株H390进行基因组测序分析和外排泵抑制试验,检测并鉴定与H390r获得的AMX高水平耐药性相关的基因突变。结果通过AMX筛选获得4个AMX高水平耐药克隆,MIC分别为12、32、64和≥256 mg/L,经-80℃冻存后,MIC均未发生改变。相比于亲本菌株H390,AMX稳定耐药克隆H390r存在多个基因的突变,包括与AMX耐药性相关的编码RND外排系统的hefC、编码孔蛋白的hopB与hopC和编码青霉素结合蛋白的ftsI。H390r在有外排泵抑制剂存在时对AMX的MIC大幅降低。结论AMX能够在不稳定耐药的Hp中筛选出稳定耐药的克隆;H390r存在与AMX耐药相关的hefC、hopB、hopC和ftsI基因突变。这些突变可能是H390r获得AMX稳定高水平耐药的主要原因。

关键词：幽门螺杆菌阿莫西林不稳定耐药稳定耐药

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黔南州和贵阳市幽门螺杆菌临床菌株的耐药性、基因多样性及其与疾病的关系

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中国人兽共患病学报 2024年第1期40卷 46-55页

作者：张远远潘科糜孟衡管玉祝陆秋丹郑娟张晋王天姝刘琦陈峥宏贵州医科大学附属医院消化内科贵阳550004 贵州医科大学基础医学院微生物教研室/贵州省普通高校病原生物学特色重点实验室贵阳561113 黔南州人民医院黔南558000

目的了解贵州省贵阳市和黔南州少数民族地区幽门螺杆菌的耐药性、基因多样性及其与临床疾病的关系。方法通过内窥镜采集样本分离培养幽门螺杆菌,测定耐药性和基因型特征,比较不同地区、疾病类型的差异,分析幽门螺杆菌结构特点及黔南州... 详细信息

目的了解贵州省贵阳市和黔南州少数民族地区幽门螺杆菌的耐药性、基因多样性及其与临床疾病的关系。方法通过内窥镜采集样本分离培养幽门螺杆菌,测定耐药性和基因型特征,比较不同地区、疾病类型的差异,分析幽门螺杆菌结构特点及黔南州幽门螺杆菌不同菌型混合感染情况。结果两地区cagA可变区EPYIA分型构成比差异有统计学意义(P=0.012),vacA基因型构成比差异有统计学意义(P=0.000);MLST方法得到两地区幽门螺杆菌菌株94.6%(53/56)新的序列型。黔南州幽门螺杆菌不同菌型菌株混合感染率为44.4%,不同临床疾病的幽门螺杆菌不同菌型混合感染构成比差异无统计学意义(P=0.349)。结论黔南州和贵阳市两地区幽门螺杆菌cagA可变区EPIYA分型和vacA基因型构成比存在差异。

关键词：幽门螺杆菌黔南州贵阳市基因多态性混合感染

基于基因组和转录组研究幽门螺杆菌对阿莫西林耐药与持留的机制

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基于基因组和转录组研究幽门螺杆菌对阿莫西林耐药与持留的机制

作者：陆秋丹贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:了解幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株是否存在阿莫西林(Amoxicillin,AMX)持留菌;了解抗生素持留性在Hp耐药演化中的作用;探究Hp AMX不稳定耐药表型演化为稳定耐药表型的可能机制。方法:*** AMX持留菌株的筛选和验证用... 详细信息

目的:了解幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株是否存在阿莫西林(Amoxicillin,AMX)持留菌;了解抗生素持留性在Hp耐药演化中的作用;探究Hp AMX不稳定耐药表型演化为稳定耐药表型的可能机制。方法:*** AMX持留菌株的筛选和验证用改良琼脂稀释法(Modified Agar Dilution Method,MADM)从临床分离的Hp中筛选AMX持留菌,通过检测时间-杀菌曲线来确定其持留性。2.持留性在Hp对AMX耐药演化中的作用分别以相同AMX最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)的持留菌H443和敏感菌H568为亲本菌株,经体外11次不断增加浓度的AMX接触后,再次检测AMX的MIC。对获得的耐药克隆H443R与亲本菌株H443进行全基因组和转录组测序,并且通过vac A,atp D,hop B,hop C,met Q的RT-q PCR和检测细菌细胞内的ATP的含量验证转录组测序的结果,分析H443R菌株耐药性增加的原因。*** AMX稳定高水平耐药表型的演化及其基因突变的检测和分析以Hp经-80℃冻存后对AMX的MIC不同程度下降(不稳定耐药)的4株Hp菌株作为出发菌株,在不断增加AMX浓度的培养基上传代20～55代,筛选AMX稳定的高水平耐药克隆,检测耐药克隆的MIC,置于-80℃冻存3个月后再复苏,根据冻存后MIC是否下降判断其耐药性是否稳定。对AMX稳定耐药的克隆H390r和出发菌株H390进行基因组测序和分析。最后用外排泵抑制试验检测H390r和H390在含外排泵抑制剂时对AMX的MIC。结果:*** AMX持留菌株的筛选和验证用MADM从Hp临床菌株中筛选出1株AMX-持留菌(H443),该菌株杀菌曲线具有双峰杀菌特征,证实了H443为持留菌。2.持留性在Hp对AMX耐药演化中的作用以AMX-敏感菌H568为亲本菌株,在含AMX浓度不断增加的琼脂平板上连续传11代,第11代获得H568S(MIC 0.016mg/L)克隆,其敏感性与亲本菌株H568相似。然而,与以H568具有相同MIC的AMX-持留菌H443为亲本菌株,在含AMX浓度不断增加的琼脂平板上连续传11代,耐药性快速增加,第11代演化出低水平耐药菌株H443R(MIC 0.5mg/L),其AMX MIC高于亲本菌株的31倍以上。通过基因分析,与亲本菌株H443相比,H443R共有涉及16个基因的28个突变,其中包括与AMX耐药性相关基因pbp1a、fts I、hef C和hof H,基因表达高频可逆ON/OFF开关mod基因的突变。转录组结果显示,H443R与H443在多个KEGG富集途径上存在显著差异,其中H443R下调的基因显著富集于氧化磷酸化(与ATP产生有关)和核糖体,而H443R上调的基因显著富集于鞭毛组装、ABC转运、同源重组和错配修复,其中后两者涉及DNA错配修复程序。通过RT-q PCR验证vac A,atp D,hop B,hop C,met Q基因在H443R的表达均下调,与转录组测序结果一致。H443R细胞内的ATP水平显著低于H443。*** AMX稳定高水平耐药表型的演化及其基因突变的检测和分析对4株AMX不稳定耐药的菌株通过AMX筛选获得4株对AMX稳定高水平耐药(MIC 12～256mg/L)的Hp克隆,分别记为H390r、H443r、H574r、H576r。H390r相比于亲本菌株H390存在多个基因的突变,包括与AMX耐药性相关的基因hef C、hop B、hop C和fts I。在不添加外排泵抑制剂时,H390r对AMX的MIC为≥256mg/L,在添加外排泵抑制剂时其MIC下降至12mg/L。而H390在有无外排泵抑制剂时对AMX的MIC均为0.5mg/L。结论:Hp临床菌株中存在AMX-持留菌;Hp持留性不是耐药性,但其可以通过体外连续的AMX接触较快的演化出AMX的耐药性,涉及的耐药突变基因与临床分离菌株获得的耐药突变基因相似;Hp AMX不稳定耐药表型通过在体外连续的AMX接触能演化出稳定高水平耐药表型,机制主要涉及药物外排。

关键词：幽门螺杆菌阿莫西林耐药持留 ATP耗竭外排泵

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行政法视角下的食品安全风险监测与评估研究

食品科学 2024年

作者：陆丹陆维福中共淮南市委党校中国科学技术大学公共事务学院

我国已经初步建立了食品安全风险监测与评估相关的法律制度，国家食品安全风险监测网也已经建成。该法律制度是属于行政法范畴，具有行政法的属性。从行政法的视野来分析，现行风险监测与评估机制在信息共享、风险预警、联合执法等方面... 详细信息

我国已经初步建立了食品安全风险监测与评估相关的法律制度，国家食品安全风险监测网也已经建成。该法律制度是属于行政法范畴，具有行政法的属性。从行政法的视野来分析，现行风险监测与评估机制在信息共享、风险预警、联合执法等方面还存在一些问题。为能够更好地保障食品安全，应该重构风险监测与评估法律制度，强化风险意识，改进程序设定，不断完善监测网络，促进食品安全风险监测和食品安全监督抽检系统并轨。科学高效的风险监测与评估将及时发现食品安全风险，引导制定食品安全标准，帮助监管部门对于食品安全进行分级管理，从而进一步规范我国的食品市场秩序，为人们提供放心满意的食品。

关键词：食品安全风险监测与评估法律制度重构

媒介/环境视域下的“楚原+古龙”电影布景研究

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电影艺术 2024年第4期 100-107页

作者：陆丹琦香港大学中文学院中国香港

楚原于20世纪70年代拍摄了一系列古龙小说改编的电影,其布景、美术别具“邵氏”片场特色。片中印有书画诗词的屏面高频复现,其对空间似隔非隔、似断非断的重构及半透明屏面所产生的引导观看模式的效果,显示出“影中屏”在视觉建构、意... 详细信息

楚原于20世纪70年代拍摄了一系列古龙小说改编的电影,其布景、美术别具“邵氏”片场特色。片中印有书画诗词的屏面高频复现,其对空间似隔非隔、似断非断的重构及半透明屏面所产生的引导观看模式的效果,显示出“影中屏”在视觉建构、意境营造与“情动力”塑造等多方面的潜能。此类布景装置不仅服务于香港地区影像“武托邦”的呈现,也为在“媒介/环境”视域中重新理解布景团队配合、设计思维及影像视觉表达提供了重要视角。

关键词：楚原古龙邵氏布景美术片场制香港电影

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立足本土,求真创新——李昆声先生的铜鼓研究之路

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民族艺术 2024年第3期 5-11页

作者：陆秋燕广西民族博物馆民族历史研究部中国古代铜鼓研究会

李昆声先生(1944—2023),长期致力于云南和东南亚地区考古学研究,在铜鼓学研究等多个领域建树颇多。先生早年参与了云南楚雄万家坝墓地的挖掘工作,很快确立了以“早期铜鼓”作为自己的研究方向。先生于1980年提出、1990年再次重申的“... 详细信息

李昆声先生(1944—2023),长期致力于云南和东南亚地区考古学研究,在铜鼓学研究等多个领域建树颇多。先生早年参与了云南楚雄万家坝墓地的挖掘工作,很快确立了以“早期铜鼓”作为自己的研究方向。先生于1980年提出、1990年再次重申的“铜鼓滇中偏西起源论”,逐渐被越来越多人所接受,成为学界关于“铜鼓起源”的主流观点。在此基础上,先生继续探讨早期铜鼓的源流关系,指出起源于云南的万家坝型铜鼓,其后续类型是石寨山式铜鼓、文山式铜鼓和东山式铜鼓,后三式铜鼓在传播演变的过程中发展出了冷水冲型铜鼓。先生基于艺术考古学所进行的铜鼓研究,也为早期铜鼓研究开启了多样化视角。先生为铜鼓起源研究做出的杰出贡献,以及他立足本土、开拓创新的研究风范,值得后来学者缅怀和学习。

关键词：李昆声云南考古学铜鼓研究铜鼓起源

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遵循多边主义和全球共治原则完善创新国际税收治理理念和规则研究

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国际税收 2021年第1期 27-31页

作者：陆秋丹冯涛南通市国际税收研究会

近年来,我国坚持以税收治理现代化为目标,以多边主义和全球共治原则为基本准则,积极参与多边国际税收治理体系改革。本文通过分析国际税收治理体系的发展脉络及面临的现实挑战,探讨完善创新国际税收治理的理念和规则,建议按照《中共中... 详细信息

近年来,我国坚持以税收治理现代化为目标,以多边主义和全球共治原则为基本准则,积极参与多边国际税收治理体系改革。本文通过分析国际税收治理体系的发展脉络及面临的现实挑战,探讨完善创新国际税收治理的理念和规则,建议按照《中共中央关于制定国民经济和社会发展第十四个五年规划和二O三五年远景目标的建议》中"积极参与全球经济治理体系改革"的要求,明确与大国地位相匹配的目标定位,推动与对外开放相统一的国际合作,建立与国际形势相适应的法规体系,完善与税收改革相配套的管理机制,优化与时代发展相结合的征管手段,加强与中心工作相促进的组织保障。

关键词：多边主义全球共治国际税收治理税收现代化

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行政法视角下的食品安全风险监测与评估

食品科学 2024年第14期45卷 366-373页

作者：陆丹陆维福中共淮南市委党校安徽淮南232000 中国科学技术大学公共事务学院安徽合肥230000

我国已经初步建立了食品安全风险监测与评估相关的法律制度,国家食品安全风险监测网也已经建成。该法律制度属于行政法范畴,具有行政法的属性。从行政法的视角分析,现行风险监测与评估机制在信息共享、风险预警、联合执法等方面还存在... 详细信息

我国已经初步建立了食品安全风险监测与评估相关的法律制度,国家食品安全风险监测网也已经建成。该法律制度属于行政法范畴,具有行政法的属性。从行政法的视角分析,现行风险监测与评估机制在信息共享、风险预警、联合执法等方面还存在一些问题。为能够更好地保障食品安全,应该重构风险监测与评估法律制度,强化风险意识,改进程序设定,不断完善监测网络,促进食品安全风险监测和食品安全监督抽检系统并轨。科学高效的风险监测与评估有利于及时发现食品安全风险,引导制定食品安全标准,帮助监管部门对于食品安全进行分级管理,从而进一步规范我国的食品市场秩序,为人们提供放心满意的食品。

关键词：食品安全风险监测与评估法律制度重构

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数字化红色资源融入高校思政课的路径探赜

学校党建与思想教育 2024年第16期 54-56页

作者：陆丹薇苏州科技大学机械工程学院江苏苏州215009

数字技术的快速发展助力红色资源打破时空限制,以更直观鲜活的数字化形式呈现,从而为红色资源育人提供了新的机遇。将数字化红色资源融入高校思政课,对增强高校思政课教学资源的丰富性、教学方式的创新性、教学内容的精准性等具有重要... 详细信息

数字技术的快速发展助力红色资源打破时空限制,以更直观鲜活的数字化形式呈现,从而为红色资源育人提供了新的机遇。将数字化红色资源融入高校思政课,对增强高校思政课教学资源的丰富性、教学方式的创新性、教学内容的精准性等具有重要价值。新时代新征程,高校思政课建设需顺应数字化发展浪潮,通过搭建数字化红色资源教学共享平台、提升高校思政课教师的数字胜任力、优化高校思政课教学的数字工具箱等方式,推进数字化红色资源融入高校思政课。

关键词：数字化红色资源高校思政课