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玉米黑粉菌DNA载体的构建和它的原生质球的转化和再生

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真菌学报 1993年第2期12卷 145-151页

作者：邓大纶田波陆师义中国科学院微生物研究所北京100080

我们用玉米黑粉菌(Ustilago maydis)热休克基因(Heat shock gene,hsp 70)的启动子和终止子与新霉素磷酸转移酶基因相连,构建成了有效的双功能质粒pDL1(在E。coli中用Amp作为选择标记,在玉米黑粉菌中用新霉素作为选择标记)。以分离的一... 详细信息

我们用玉米黑粉菌(Ustilago maydis)热休克基因(Heat shock gene,hsp 70)的启动子和终止子与新霉素磷酸转移酶基因相连,构建成了有效的双功能质粒pDL1(在E。coli中用Amp作为选择标记,在玉米黑粉菌中用新霉素作为选择标记)。以分离的一株新霉素敏感的玉米黑粉菌作为受体菌,用构建的pDL1质粒作为供体DNA,对影响受体菌原生质球的形成条件(培养基、菌龄、各种酶、酶的浓度、作用时间和渗透压稳定剂)、再生条件和DNA转化条件进行了初步研究。对数前中期收集的菌体,以5mg/ml真菌溶壁酶处理30分钟左右,90%都形成原生质球,其再生率为60—80%,转化率为300—1000转化子/μg DNA。随机选出25个转化子,DNA杂交都为阳性。分析dot-blot和Southern blot DNA杂交结果,发现质粒在细胞中以整合形式存在,一个细胞可以有多拷贝的整合质粒,质粒可能以非完全同源性的重组形式,参入性地整合进染色体中。

关键词：原生质球玉米黑粉菌属 DNA

玉米黑粉菌mt DNA的研究 Ⅰ.DNA克隆和基因图谱

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Acta Genetica Sinica 1991年第4期18卷 378-384页

作者：冯国宏程文陆师义中国科学院微生物所北京100080

本文对玉米黑粉菌mtDNA进行了如下研究:(1)将mt DNA的Bam HⅠ和Pss Ⅰ两套酶切片段分别克隆到pBR322的相应位点上,共克隆到占其基因组总长度89.3%的序列。(2)以植物或真菌来源的线粒体基因作探针,用低严紧度DNA分子杂交法鉴定出了玉米... 详细信息

本文对玉米黑粉菌mtDNA进行了如下研究:(1)将mt DNA的Bam HⅠ和Pss Ⅰ两套酶切片段分别克隆到pBR322的相应位点上,共克隆到占其基因组总长度89.3%的序列。(2)以植物或真菌来源的线粒体基因作探针,用低严紧度DNA分子杂交法鉴定出了玉米黑粉菌线粒体中的7个基因,并对照另文发表的限制性内切酶图谱,初步得出了这些基因在mt DNA上排列分布的基因图谱。它们排列的次序为:—COB—OⅫ—S—rRNA—OⅩⅢ—L—rRNA—ATPase6—OⅪ—。(3)对已鉴定出的3个含线粒体基因的克隆质粒,用***极大细胞系统作了表达研究,但没见到线粒体基因的编码产物。

关键词：玉米黑粉菌 mtDNA 脱氧核糖核酸

玉米黑粉菌mtDNA的研究 Ⅱ.限制性内切酶酶切图谱

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Acta Genetica Sinica 1991年第5期18卷 475-480页

作者：冯国宏程文陆师义中国科学院微生物所北京100080 中国科学院遗传研究所

本文报道玉米黑粉菌mtDNA的限制性内切酶酶切图谱。分别将mtDNA的Bam HI各片段制成探针,与mtDNA分别用8种酶酶切后的Southern膜进行杂交,用片段重叠法得出各套片段的排列次序,再将克隆化的Bam HI片段进行第二酶切,按分子量拼排出各酶酶... 详细信息

本文报道玉米黑粉菌mtDNA的限制性内切酶酶切图谱。分别将mtDNA的Bam HI各片段制成探针,与mtDNA分别用8种酶酶切后的Southern膜进行杂交,用片段重叠法得出各套片段的排列次序,再将克隆化的Bam HI片段进行第二酶切,按分子量拼排出各酶酶切位点在mtDNA上分布的图谱。此外,片段重叠分析时,还发现玉米黑粉菌mtDNA为环状结构;杂交分析时还发现mtDNA内没有明显的重复序列。DNA总长60.7kb。

关键词：玉米黑粉菌 mtDNA 限制图谱

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食用菌生产率研究

中国生物工程杂志 1990年第4期 31-32页

作者：陆师义 ,崔红军

利用微生物的巨大潜力提高蛋白质的生产率即——把农、林业废料木质纤维素通过微生物降解后培养富含生物蛋白的食用菌,并利用菌渣(含45％生物蛋白)作饲料添加剂从而取得很高的经济效益的良性循环的生产模式应当引起重视。我国每年可供... 详细信息

利用微生物的巨大潜力提高蛋白质的生产率即——把农、林业废料木质纤维素通过微生物降解后培养富含生物蛋白的食用菌,并利用菌渣(含45％生物蛋白)作饲料添加剂从而取得很高的经济效益的良性循环的生产模式应当引起重视。我国每年可供利用的食用、药用菌的培养基—农、林业木质纤维废料估计最少为200亿斤,如充份加以利用可以取得良性循环的效果。

关键词：微生物降解木质纤维林业木材纤维菇类生产率

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植物病害的化学防治

植物保护 1963年第1期 40-41页

作者：陆师义

植物病害的化学防治有着悠久的历史。早在公元前1,200年即有记载用硫、粪、尿、灰、泥及植物煎汁防治植物病害。合理地进行化学防治是在病原物被清楚了解后开始的。1,700—1,900年间已较多地应用硫、酸硫铜、甲醛及鋅防治白粉病、霜霉... 详细信息

植物病害的化学防治有着悠久的历史。早在公元前1,200年即有记载用硫、粪、尿、灰、泥及植物煎汁防治植物病害。合理地进行化学防治是在病原物被清楚了解后开始的。1,700—1,900年间已较多地应用硫、酸硫铜、甲醛及鋅防治白粉病、霜霉病、小麦腥黑穗病和静多果树病害。近50年来化学防治的发展已达到相当高的水平,喷布茎叶及处理种子

关键词：植物病害病虫害化学防治寄主植物

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纤维素利用的生物工程

过程工程学报 1988年第1期 90-94页

作者：陆师义中国科学院微生物研究所

地球上绿色植物每年通过光合作用合成的有机化合物中仅碳素就有2×10;吨,但其中大多数是高等动物不能直接利用的粗纤维素即木质纤维素（包括木质素和半纤维素）。我国每年粗纤维产景是1145×10;吨,其中农业下脚料和废物525×10;吨,畜禽... 详细信息

地球上绿色植物每年通过光合作用合成的有机化合物中仅碳素就有2×10;吨,但其中大多数是高等动物不能直接利用的粗纤维素即木质纤维素（包括木质素和半纤维素）。我国每年粗纤维产景是1145×10;吨,其中农业下脚料和废物525×10;吨,畜禽粪便250×10;吨,工业废物50×10;吨。长期以来,如何开发利用地球上这类取之不尽,用之不竭的可再生资源,一直是许多科学工作者从事的研究课题。由表1可知,纤维素在粗纤维素中的含量通常占千重的35—45%,而半纤维素和木质素分别占20—40%和15—35%。

关键词：生物工程纤维素利用

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访美见闻

中国生物工程杂志 1982年第1期 14-16页

作者：陆师义中国科学院微生物研究所研究员

去年应美方邀请,又通过科协和微生物学会的支持和联系,有机会赴美进行了五个月的学术交流和访问。在美期间由于美国科学院和美中学术交流委员会(CSCPRC)的支持和协助,访问了30多个城市,20多所大学和研究所,并参加了美国植物病理学会的年... 详细信息

去年应美方邀请,又通过科协和微生物学会的支持和联系,有机会赴美进行了五个月的学术交流和访问。在美期间由于美国科学院和美中学术交流委员会(CSCPRC)的支持和协助,访问了30多个城市,20多所大学和研究所,并参加了美国植物病理学会的年会,又能在明州大学植物病理系和美国农业部的禾谷类锈病实验室进行了一些研究工

关键词：植物遗传工程植物病理学电镜技术遗传结构冷泉港实验室 DNA 易位子豆科植物分子生物学

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祝贺《生物工程进展》的诞生

中国生物工程杂志 1986年第2期 3-4页

作者：陆师义中国科学院微生物所研究员

《生物工程进展》出版了,我衷心祝贺它的诞生。生物工程是现代新技术应用于生物体系,在工农医各方面发挥重大作用的新领域。它包括细胞工程、发酵工程、酶工程和基因工程等方面,因而是多学科的应用科学。由于它对人类幸福的重大意义而... 详细信息

《生物工程进展》出版了,我衷心祝贺它的诞生。生物工程是现代新技术应用于生物体系,在工农医各方面发挥重大作用的新领域。它包括细胞工程、发酵工程、酶工程和基因工程等方面,因而是多学科的应用科学。由于它对人类幸福的重大意义而受到广泛重视,近年来发展迅速。遗传工程的发展已能在细菌中产生胰岛素、人生长激素、凝

关键词：生物工程出版生物学固定化酶复合酶

噬菌体T4脱氧胞苷酸羟甲基化酶基因与免疫基因在大肠杆菌“极大细胞”中的表达

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Journal of Genetics and Genomics 1983年第5期 341-346页

作者：江宁陆师义中国科学院微生物研究所北京中国科学院微生物研究所

本文用“极大细胞”的方法研究噬菌体T4脱氧胞苷酸羟甲基化酶基因(基因42)与免疫基因(基因imm)的表达。从无性繁殖系CC20中提取带有噬菌体T4基因42和基因imm的重组质粒pHC20,转化到大肠杆菌CSR603(recA~-、uvrA~-、phr-1~-)中。转化于... 详细信息

本文用“极大细胞”的方法研究噬菌体T4脱氧胞苷酸羟甲基化酶基因(基因42)与免疫基因(基因imm)的表达。从无性繁殖系CC20中提取带有噬菌体T4基因42和基因imm的重组质粒pHC20,转化到大肠杆菌CSR603(recA~-、uvrA~-、phr-1~-)中。转化于经紫外光照射后继续培养,使细胞在染色体降解的同时扩增了质粒DNA。用S标记质粒编码的蛋白质,通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影鉴别噬菌体T4基因42与imm的产物,其分子量分别为25,500和38,500道尔顿。实验结果表明噬菌体T4基因42与imm在大肠杆菌“极大细胞”中表达。在一定条件下,“极大细胞”是研究基因表达的一个比较方便的体系。

关键词：基因表达酶基因羟甲基化 T4 重组质粒噬菌体无细胞体系大肠杆菌大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属脱氧胞苷酸细胞免疫基因