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1株马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌致病性分析

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畜牧兽医学报 2024年第2期55卷 718-726页

作者：吴自豪蔡依龙陀海欣陈伟塔里木大学生命科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室阿拉尔843300 塔里木大学动物科学与技术学院阿拉尔843300

国内鲜有马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)相关报道,本研究对1株新疆马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌的致病性进行评估,以期为马乳源金黄色葡萄球菌的相关研究提供基础数据。使用选择性培养基从新疆健康马乳中分... 详细信息

国内鲜有马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)相关报道,本研究对1株新疆马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌的致病性进行评估,以期为马乳源金黄色葡萄球菌的相关研究提供基础数据。使用选择性培养基从新疆健康马乳中分离金黄色葡萄球菌,然后通过生化鉴定和分子鉴定方法对金黄色葡萄球菌进行鉴定。对所获得的金黄色葡萄球菌进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、spa分型、药物敏感性检测、生物被膜形成能力、溶血活性、毒力基因检测、小鼠皮肤脓肿和致病性试验。再对分离株进行小鼠细胞的黏附、侵袭和胞内增殖试验,以评估其致病性。结果显示,从马乳中分离得到1株PVL+ST22型金黄色葡萄球菌(1/65,1.5%),spa分型为t304。仅对青霉素耐药,无生物被膜形成能力,但携带9种毒力基因(sec、seg、seh、tsst-1、hla、hlb、clfA、clfB和cna),并且具有溶血活性。小鼠皮肤脓肿和致病性试验表明,其可导致小鼠形成皮肤脓肿,并且在高剂量感染时可导致小鼠死亡。ST22型金黄色葡萄球菌可在小鼠巨噬细胞中黏附(4.26%)、侵袭(6.45%)和胞内增殖,并可造成细胞凋亡。综上,马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌具有较强的致病力,可能在宿主致病和公共卫生安全等方面存在隐患。

关键词：马乳 PVL+ ST22型金黄色葡萄球菌致病性

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小海子垦区散养腹泻羔羊大肠杆菌的耐药性分析

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当代畜牧 2021年第9期50卷 38-39页

作者：贾春英曹阳文娜陀海欣王甜新疆生产建设兵团第三师畜牧兽医工作站新疆图木舒克843900 塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300

为了解小海子垦区羔羊大肠杆菌的耐药情况,笔者采集21份腹泻羔羊直肠拭子,采用细菌培养、光学显微镜观察和PCR扩增等方法鉴定出20株大肠杆菌。药敏试验结果显示,20株大肠杆菌对青霉素、克林霉素和头孢噻吩耐药率为100%,对诺氟沙星、庆... 详细信息

为了解小海子垦区羔羊大肠杆菌的耐药情况,笔者采集21份腹泻羔羊直肠拭子,采用细菌培养、光学显微镜观察和PCR扩增等方法鉴定出20株大肠杆菌。药敏试验结果显示,20株大肠杆菌对青霉素、克林霉素和头孢噻吩耐药率为100%,对诺氟沙星、庆大霉素和头孢哌酮敏感率为100%,对其他药物呈不同程度耐药性。本试验结果为小海子垦区羔羊大肠杆菌病的科学防治提供了参考依据。

关键词：大肠杆菌耐药性鉴定羔羊腹泻

脂多糖与钙离子共处理的牛乳腺上皮细胞miRNA表达谱的比较分析

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中国畜牧兽医 2024年第9期51卷 4066-4079页

作者：许浩天于月通李静马志远杨彬王泽坤陀海欣齐萌塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室阿拉尔843300

【目的】探索钙离子对牛乳腺上皮细胞炎症反应的调控作用,比较分析脂多糖与钙离子共处理的牛乳腺上皮细胞的miRNA表达谱。【方法】使用脂多糖处理牛乳腺上皮细胞构建炎症反应模型,检测不同浓度(0.5~6.6 mmol/L)钙离子和脂多糖(50μg/mL... 详细信息

【目的】探索钙离子对牛乳腺上皮细胞炎症反应的调控作用,比较分析脂多糖与钙离子共处理的牛乳腺上皮细胞的miRNA表达谱。【方法】使用脂多糖处理牛乳腺上皮细胞构建炎症反应模型,检测不同浓度(0.5~6.6 mmol/L)钙离子和脂多糖(50μg/mL)共处理的牛乳腺上皮细胞的炎症因子转录水平。提取正常、脂多糖处理、脂多糖与钙离子共处理牛乳腺上皮细胞样本中总RNA,每组各3个样本。对9个RNA样本进行质量评估,并对其开展miRNA测序和生物信息学分析,最后对3组共有差异表达miRNA进行实时荧光定量PCR验证。【结果】在牛乳腺上皮细胞炎症模型中,高浓度钙离子可抑制炎症因子的转录。9个样本的clean reads在raw reads中占比为93.86%~98.18%,序列分布长度均集中在21~24 nt之间。3组样本的组内相似性高,而组间差异度高。3组样本共鉴定出47个差异表达miRNA,共有差异表达miRNA分别为bta-miR-11980、bta-miR-1246和bta-miR-677。GO功能和KEGG通路富集分析显示,差异表达miRNA的靶基因显著富集于细胞通讯调节、信号调节、内膜系统、系统发育、细胞发育过程、细胞分化等GO条目,显著富集于HIF-1信号通路、ErbB信号通路、TNF信号通路、突触囊泡周期、肌醇磷酸代谢途径等通路。实时荧光定量PCR验证结果显示,3组样本共有差异表达miRNA(bta-miR-677和bta-miR-1246)表达趋势与转录组测序结果一致。【结论】钙离子通过调控牛乳腺上皮细胞内bta-miR-11980、bta-miR-1246和bta-miR-677等差异表达miRNA的表达模式,间接影响牛乳腺上皮细胞炎症反应进程。

关键词：脂多糖钙离子牛乳腺上皮细胞 miRNA表达谱

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新疆部分地区马粪源大肠杆菌的分离鉴定与耐药性及毒力基因检测

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中国兽医科学 2024年第5期54卷 658-665页

作者：李静刘鏊陀海欣于月通马志远王甜吴静张秀萍齐萌塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

为调查新疆4个地区马源大肠杆菌的携带情况,采集56份马粪便样本进行大肠杆菌分离鉴定,采用药敏纸片法和结晶紫微孔板法对分离株进行相关特性测定,并对其毒力基因和耐药基因进行检测。结果显示:从56份样本中分离到41株大肠杆菌,分离率为7... 详细信息

为调查新疆4个地区马源大肠杆菌的携带情况,采集56份马粪便样本进行大肠杆菌分离鉴定,采用药敏纸片法和结晶紫微孔板法对分离株进行相关特性测定,并对其毒力基因和耐药基因进行检测。结果显示:从56份样本中分离到41株大肠杆菌,分离率为73.2%(41/56);分离株对利福平(97.6%)、头孢噻吩(46.3%)、复方新诺明(29.3%)、四环素(24.4%)和氯霉素(19.5%)等表现出不同程度的耐药性;分离株中,生物被膜形成能力中等的有7株(17.1%,7/41),弱的有32株(78.0%,32/41),不形成的有2株(4.9%,2/41);从16种毒力基因中,共检出fim C(87.8%,36/41)、fyuA(58.5%,24/41)、irp2(41.5%,17/41)、sepA(36.6%,15/41)和hlyF(22.0%,9/41)5种毒力基因;从11种耐药基因中,共检出parC、gyrA和gyrB(100.0%,41/41),sul2(31.7%,13/41)、floR(22.0%,9/41)、blaTEM(22.0%,9/41)、blaCTX(12.2%,5/41)和aadA(2.4%,1/41)8种耐药基因。结果表明:新疆4个地区的马源大肠杆菌针对不同抗生素具有不同程度的耐药性,此外,这些菌株可形成生物被膜,并且携带有多种毒力基因和耐药基因。为新疆马源大肠杆菌病的临床用药和防治提供了试验数据。

关键词：大肠杆菌生物被膜形成毒力基因耐药基因马新疆

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一株马源宋内志贺菌的分离鉴定与耐药性分析

当代畜牧 2023年第11期 30-34页

作者：石帅锋陀海欣倪晓彤刘螯汽洪皓正朱婷婷李静齐萌塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

为鉴定马粪便中分离到的1株细菌种类,笔者结合形态学观察与序列分析鉴定细菌,采用PCR法检测分离其耐药基因,并使用药敏试验对分离菌进行耐药性分析。结果显示,分离菌株在MAC琼脂培养基和SS琼脂培养基上均呈半透明、光滑、边缘整齐的圆... 详细信息

为鉴定马粪便中分离到的1株细菌种类,笔者结合形态学观察与序列分析鉴定细菌,采用PCR法检测分离其耐药基因,并使用药敏试验对分离菌进行耐药性分析。结果显示,分离菌株在MAC琼脂培养基和SS琼脂培养基上均呈半透明、光滑、边缘整齐的圆形小菌落,镜检可见分离菌呈两端钝圆的革兰阴性短菌;基于16S rDNA基因位点,分离菌的序列经比对后,与英国人源宋内志贺菌的序列同源性为100%,结合形态学观察结果,鉴定为宋内志贺菌;采用PCR法检测10种耐药基因,发现分离菌株携带4种耐药基因,分别为parC、gyrA、gyrB和blaCTX;采用9种药物对分离菌株进行药敏试验,发现分离菌株对氨苄西林、红霉素、庆大霉素、四环素等药物耐药,呈现多重耐药性;对头孢西丁、阿米卡星敏感。研究结果为志贺菌病的防治提供了基础参考。

关键词：马宋内志贺菌分离鉴定

额敏县1株羊粪源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及其耐药性与致病性研究

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畜牧与饲料科学 2024年第4期45卷 103-109页

作者：苏政于月通朱婷婷陀海欣李静吴静刘鹏彭健齐萌新疆生产建设兵团第九师农业科学研究所(畜牧科学研究所) 新疆额敏834601 塔里木大学动物科学与技术学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

[目的]对羔羊腹泻粪便样本中的金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,了解其耐药性和致病性特征。[方法]从新疆维吾尔自治区塔城地区额敏县某养羊场采集腹泻羔羊肛拭子样本4份,使用高盐甘露醇培养基(MSA)选择性分离金黄色葡萄球菌;通过形态学观察... 详细信息

[目的]对羔羊腹泻粪便样本中的金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,了解其耐药性和致病性特征。[方法]从新疆维吾尔自治区塔城地区额敏县某养羊场采集腹泻羔羊肛拭子样本4份,使用高盐甘露醇培养基(MSA)选择性分离金黄色葡萄球菌;通过形态学观察和16S rDNA序列分析对分离菌株进行种属鉴定;采用纸片扩散法分析分离菌株对9类11种抗菌药物的敏感性;利用PCR法检测分离菌株毒力基因携带情况;建立昆明系小白鼠腹腔感染模型,开展分离菌株的致病性试验。[结果]从4份羔羊腹泻样本中分离到1株疑似金黄色葡萄球菌,该菌株在MSA培养基上形成有光泽、中度隆起、金黄色或柠檬色的菌落;革兰染色镜检可见分离菌株为革兰阳性,呈葡萄串状排列;16S rDNA序列分析显示,分离菌株的序列与我国湖南省长沙市猪肺源金黄色葡萄球菌分离株序列的相似性为100%;结合形态学观察和16S rDNA序列比对结果,鉴定该菌株为金黄色葡萄球菌。分离菌株对青霉素、克林霉素、头孢噻吩、利福平和红霉素耐药,对庆大霉素、阿奇霉素、氯霉素、诺氟沙星、头孢西丁和复方新诺明敏感。在检测的8类20种毒力基因中,该菌株携带sea、seg、sei、eta、clfA和clfB基因。该菌株对小鼠的半数致死量(LD_(50))为2.24×10^(8)CFU/mL,死亡小鼠脏器病理变化明显。[结论]从额敏县某养羊场羔羊腹泻样本中分离鉴定到1株金黄色葡萄球菌,该菌株具有多重耐药表型,携带多种毒力基因,具有一定致病性。研究结果为该地区羊金黄色葡萄球菌病的合理用药提供了参考。

关键词：羊金黄色葡萄球菌分离鉴定耐药性致病性

新疆维吾尔自治区阿拉尔市某规模化养殖场猪乳源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及其毒力、耐药性分析

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畜牧与饲料科学 2024年第1期45卷 114-119页

作者：陈俊凯于月通杨彬王泽坤李静陀海欣徐俊飞齐萌塔里木大学动物科学与技术学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

[目的]分离鉴定新疆维吾尔自治区阿拉尔市猪乳源金黄色葡萄球菌,了解其致病性和耐药性。[方法]从阿拉尔市某规模化养殖场收集6份新鲜猪乳样本,采用甘露醇高盐琼脂(MSA)培养基分离乳样中的金黄色葡萄球菌,利用表型鉴定方法及细菌16S rDN... 详细信息

[目的]分离鉴定新疆维吾尔自治区阿拉尔市猪乳源金黄色葡萄球菌,了解其致病性和耐药性。[方法]从阿拉尔市某规模化养殖场收集6份新鲜猪乳样本,采用甘露醇高盐琼脂(MSA)培养基分离乳样中的金黄色葡萄球菌,利用表型鉴定方法及细菌16S rDNA序列分析法对分离到的菌株进行鉴定,检测分离菌株的生物被膜形成能力,利用K-B纸片扩散法进行药物敏感性试验,利用PCR法检测毒力基因和耐药基因。[结果]经分离培养及分子生物学鉴定,从6份乳样中获得2株金黄色葡萄球菌,分离率为33.33%(2/6);2株金黄色葡萄球菌均具有强生物被膜形成能力(+++);2株金黄色葡萄球菌均对利福平敏感,均对青霉素、头孢西丁、四环素、红霉素、替米考星、克林霉素和磺胺甲噁唑耐药;在检测的5种耐药基因中,2株金黄色葡萄球菌均携带ant(4)基因和mecA基因;在检测的20种毒力基因中,共检测到6种毒力基因,其中,2株金黄色葡萄球菌均携带seg、sei、hlb、fnbA、clfA基因,有1株携带hla基因。[结论]该养殖场猪乳源金黄色葡萄球菌生物被膜形成能力强,携带多种毒力基因和耐药基因,表现为多重耐药性。

关键词：金黄色葡萄球菌分离鉴定致病性耐药性猪乳

新疆策勒县野生喜马拉雅旱獭毕氏肠微孢子虫分子检测与鉴定

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动物医学进展 2023年第3期44卷 136-139页

作者：陀海欣胡延波曹阳文娜啜力文周国庆沙木哈尔·努斯甫拜余复昌齐萌塔里木大学动物科学与技术学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

采集新疆策勒县野生喜马拉雅旱獭新鲜粪便样本50份,全部提取DNA后,基于毕氏肠微孢子虫内部转录间隔区(ITS)基因,用PCR法对DNA样本进行检测。发现27份样本呈毕氏肠微孢子虫PCR扩增阳性,阳性率为54.0%(27/50);27个阳性样本均测序成功,共... 详细信息

采集新疆策勒县野生喜马拉雅旱獭新鲜粪便样本50份,全部提取DNA后,基于毕氏肠微孢子虫内部转录间隔区(ITS)基因,用PCR法对DNA样本进行检测。发现27份样本呈毕氏肠微孢子虫PCR扩增阳性,阳性率为54.0%(27/50);27个阳性样本均测序成功,共鉴定出2种基因型,以已知基因型LQ10(n=26)为优势感染基因型,1个新基因型命名为XJHT1(n=1);基因型XJHT1序列与我国貉源毕氏肠微孢子虫基因型Peru8的序列存在3个碱基差异。构建遗传进化树显示,2个基因型均属组群1。研究结果为我国野生旱獭毕氏肠微孢子虫的流行情况提供参考。

关键词：毕氏肠微孢子虫喜马拉雅旱獭检测鉴定基因型

广州市某马术俱乐部马源大肠杆菌的分离鉴定、毒力基因检测及耐药性分析

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畜牧与饲料科学 2023年第3期44卷 109-115页

作者：刘鏊马丁允陀海欣李静王超男孙铭飞林栩慧齐萌塔里木大学动物科学与技术学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东广州510640

[目的]分离鉴定广州市某马术俱乐部赛马粪便中的大肠杆菌,检测其毒力基因,并进行耐药性分析。[方法]收集广州市某马术俱乐部20份成年赛马粪便样本,通过细菌培养、革兰染色镜检和细菌16S rDNA序列PCR法分离鉴定大肠杆菌,并对分离菌株进... 详细信息

[目的]分离鉴定广州市某马术俱乐部赛马粪便中的大肠杆菌,检测其毒力基因,并进行耐药性分析。[方法]收集广州市某马术俱乐部20份成年赛马粪便样本,通过细菌培养、革兰染色镜检和细菌16S rDNA序列PCR法分离鉴定大肠杆菌,并对分离菌株进行大肠杆菌系统发育群鉴定;采用PCR法检测10种毒力基因和11种耐药基因,应用K-B纸片法开展药物敏感性试验。[结果]经形态学观察和PCR检测,鉴定出13株大肠杆菌,分离率为65.00%(13/20);系统进化分群分别属于A群(23.07%,3/13)、B1群(61.54%,8/13)和D群(15.38%,2/13);共检出5种毒力基因,分别为fimC(61.54%,8/13)、fyuA(7.69%,1/13)、irp2(7.69%,1/13)、stx1(15.38%,2/13)和stx2(7.69%,1/13);共检出9种耐药基因,分别为parC(100%,13/13)、gyrA(100%,13/13)、gyrB(92.31%,12/13)、sul2(76.92%,10/13)、cmlA(30.77%,4/13)、aadA(23.07%,3/13)、tet(B)(15.38%,2/13)、blaTEM(7.69%,1/13)和blaCTX(7.69%,1/13);13株大肠杆菌分离株对头孢西丁、庆大霉素、环丙沙星敏感,对四环素的耐药率为38.46%,对头孢噻呋、阿米卡星、氨苄西林的耐药率均为30.77%,对氯霉素、甲氧苄啶/磺胺异噁唑和亚胺培南也呈现出不同程度的耐药性。[结论]广州市某马术俱乐部赛马源大肠杆菌种群具有多样性,携带多种毒力基因和耐药基因,呈现多重耐药性,提示临床上应加强马大肠杆菌病的防治。

关键词：大肠杆菌系统进化群毒力基因耐药基因马