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禾本科植物叶绿体基因组结构的系统进化研究

中国农学通报 2011年第30期27卷 171-176页

作者：唐萍阮秋燕彭程连云港师范高等专科学校/连云港市应用生物技术重点实验室江苏连云港222006 南京大学生命科学学院南京210093

为了探讨叶绿体基因组结构变化与系统发生的关系,以烟草为参照,系统比较了禾本科植物叶绿体基因组结构的进化。结果发现:(1)大单拷贝序列上产生3个倒置;(2)3个基因accD、ycf1、ycf2退化;(3)clpP、rpoC1内含子序列丢失;(4)IR与SC的边界变... 详细信息

为了探讨叶绿体基因组结构变化与系统发生的关系,以烟草为参照,系统比较了禾本科植物叶绿体基因组结构的进化。结果发现:(1)大单拷贝序列上产生3个倒置;(2)3个基因accD、ycf1、ycf2退化;(3)clpP、rpoC1内含子序列丢失;(4)IR与SC的边界变化,大都发生于科的水平,但也存在一定的层次性。结构变化的系统发生与叶绿体基因内含子构建的系统进化树相一致。叶绿体基因组的结构变化可以用于构建相关植物的系统发生。

关键词：叶绿体基因组结构变化系统进化

地方戏曲元素融入小学美术教学的实践探究——以庐剧的服饰与道具为例

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教育实践与研究 2024年第28期 39-42页

作者：阮秋燕长丰县岗集镇中心学校安徽合肥231137

庐剧是安徽省主要的地方声腔剧种之一,也是国家级非物质文化遗产的瑰宝。庐剧服饰与道具体现了安徽的独特魅力和深厚的文化底蕴,具有极高的审美价值,也为美术教育提供了丰富的素材和灵感来源。将庐剧服饰与道具引入小学美术课堂,不仅可... 详细信息

庐剧是安徽省主要的地方声腔剧种之一,也是国家级非物质文化遗产的瑰宝。庐剧服饰与道具体现了安徽的独特魅力和深厚的文化底蕴,具有极高的审美价值,也为美术教育提供了丰富的素材和灵感来源。将庐剧服饰与道具引入小学美术课堂,不仅可以丰富教学内容,激发学习兴趣,还能培养学生的审美能力、创造力和跨学科综合能力,有助于传承和弘扬民族传统文化,增强学生的文化自信和民族自豪感。

关键词：小学美术庐剧戏曲服饰戏曲道具

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水牛胎儿成纤维细胞电转染条件的优化

中国生物工程杂志 2013年第9期33卷 59-65页

作者：罗婵任艳萍龚云杨素芳阮秋燕管晓梅蒋建荣石德顺广西大学动物繁殖研究所亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530004

高活力的转基因细胞的制备是转基因克隆动物研究的关键环节。为了高效制备转基因细胞,外源基因转入水牛胎儿成纤维细胞的条件需要优化。采用组织块贴壁法分离获得水牛胎儿成纤维细胞,经染色体核型分析表明获得的细胞具有正常的生物学功... 详细信息

高活力的转基因细胞的制备是转基因克隆动物研究的关键环节。为了高效制备转基因细胞,外源基因转入水牛胎儿成纤维细胞的条件需要优化。采用组织块贴壁法分离获得水牛胎儿成纤维细胞,经染色体核型分析表明获得的细胞具有正常的生物学功能,可用于细胞转染。采用电穿孔法将载体EGFP-N1导入水牛胎儿成纤维细胞,分别比较不同电压(200V,250V,300V,350V)、不同电击时间(5ms,10ms,15ms)和不同细胞代数(第3代、第5代、第10代)的转染效率,并利用优化的电转染条件将乳腺特异性表达的水牛促乳素(PRL)基因导入水牛胎儿成纤维细胞,G418筛选获单克隆并进行鉴定。结果发现电压为300 V,脉冲时间为10 ms时,细胞GFP阳性率为35.5%,转染效率较高。随传代次数的增加,细胞的转染效率下降;传至第10代的细胞转染效率显著低于第3代的水牛胎儿成纤维细胞(30%VS 35.5%,P<0.05)。运用优化条件转染、筛选可获得转PRL单克隆细胞,转染效率为2.1×10-5(84/4×106)。挑取单克隆细胞扩大培养,经PCR鉴定和核型分析,证实单克隆稳定整合促乳素基因,并且核型分析正常,可作为核供体,用于生产水牛转基因克隆胚胎。为采用体细胞克隆技术生产水牛转基因胚胎奠定了基础。

关键词：水牛胎儿成纤维细胞电穿孔转染效率促乳素基因转基因细胞

未见原核和单原核受精卵来源囊胚解冻移植的临床研究

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中国现代医学杂志 2016年第19期26卷 132-134页

作者：伍玲园黄华莫似恩陈自洪阮秋燕孙燕萍乃东红牛向丽广西壮族自治区卫生计生委生殖中心生殖科广西南宁530021

目的探讨受精卵在观察原核时期消失,以及部分消失单原核受精卵最终发育成囊胚的临床应用价值。方法选取2013年1月-2015年7月于该中心进行体外受精-胚胎移植治疗的19例患者,其中未见原核(0PN)而最终发育成囊胚进行冻融移植患者17例,单原... 详细信息

目的探讨受精卵在观察原核时期消失,以及部分消失单原核受精卵最终发育成囊胚的临床应用价值。方法选取2013年1月-2015年7月于该中心进行体外受精-胚胎移植治疗的19例患者,其中未见原核(0PN)而最终发育成囊胚进行冻融移植患者17例,单原核受精卵(1PN)最终发育成囊胚进行冻融移植患者2例,解冻后观察胚胎的复苏质量,移植后对患者的临床妊娠情况进行随访。结果 17例0PN来源囊胚的解冻移植周期中临床妊娠6例,其中4例足月活产(3男1女),1例早停育,1例早期流产;解冻1PN囊胚的2例临床随访结果阴性。结论 0PN来源的囊胚解冻移植可获得一定的临床妊娠率,在无双原核受精卵来源胚胎下,可作为正常胚胎移植。

关键词：未见原核单原核受精卵囊胚解冻移植妊娠

水牛脑源性神经营养因子基因克隆、序列分析及其在不同组织中的表达研究

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中国畜牧兽医 2015年第4期42卷 830-837页

作者：杜凤娇刘晓淋吴柱连李小楷屈春凤赵鑫雷钏阮秋燕陆凤花石德顺广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530004

本研究克隆了水牛脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因序列,并运用生物信息学方法对序列的同源性、生物进化树、蛋白的理化性质及二、三级结构等进行了分析预测,同时利用QRT-PCR方法研究了BDNF mRNA在胎儿... 详细信息

本研究克隆了水牛脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因序列,并运用生物信息学方法对序列的同源性、生物进化树、蛋白的理化性质及二、三级结构等进行了分析预测,同时利用QRT-PCR方法研究了BDNF mRNA在胎儿水牛及成年水牛不同组织中的表达情况。结果表明,应用RT-PCR技术克隆获得了长800bp水牛BDNF基因序列,其中编码区全长753bp,编码250个氨基酸。多重序列比对分析显示,水牛BDNF核苷酸序列与黄牛、野猪、犬、人、马、小鼠同源性分别为99%、94%、93%、90%、90%和89%;生物进化树分析显示,BDNF基因在不同物种进化过程中具有较高的保守性;BDNF蛋白理论分子质量28 173.36u,等电点9.12;蛋白二级结构由多个α-螺旋、β-折叠、T-转角及无规则卷曲组成,三级结构由多个α-螺旋、3对反向平行的β-折叠结构等构成活性中心(即NGF功能结构域)。QRT-PCR结果显示,BDNF mRNA在胎儿水牛及成年水牛的心脏、肺脏、肾脏、大脑、肌肉、卵巢、睾丸组织中都有表达,且成年水牛的表达量高于胎儿水牛。

关键词：水牛 BDNF 克隆分析表达模式

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核转染技术转染水牛细胞的初步研究

基因组学与应用生物学 2014年第5期33卷 1092-1097页

作者：罗婵阮秋燕雷钏徐永茹陆凤花蒋建荣石德顺亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室、广西大学动物繁殖研究所南宁530004

本研究旨在获得一种高效转染水牛细胞的方法。本研究首先以水牛胎儿成纤维细胞(BFF)为研究对象,建立、优化核转染法;随后,比较核转染法、脂质体法、电穿孔法转染BFF的效率;最后选用较优的方法,探讨转染水牛原代骨髓间充质干细胞和类胚... 详细信息

本研究旨在获得一种高效转染水牛细胞的方法。本研究首先以水牛胎儿成纤维细胞(BFF)为研究对象,建立、优化核转染法;随后,比较核转染法、脂质体法、电穿孔法转染BFF的效率;最后选用较优的方法,探讨转染水牛原代骨髓间充质干细胞和类胚胎干细胞的可行性。结果发现随电压的增加,核转染BFF的效率升高;核转染电压为225V,脉冲时间为10ms时,细胞EGFP阳性率为(83.1±1.4)%,转染效率显著高于脂质体法((11.7±1.2)%)和电穿孔法((35.5±2.0)%)。运用优化的核转染条件可以成功将外源基因导入水牛原代骨髓间充质干细胞和类胚胎干细胞,且不影响其细胞生物学特性。本研究为以多能干细胞介导的水牛转基因克隆胚胎的生产奠定了基础。

关键词：核转染转染效率水牛胎儿成纤维细胞骨髓间充质干细胞类胚胎干细胞

卵裂期无优质胚胎周期影响因素的分析和进一步治疗策略的探讨

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中国生育健康杂志 2024年第4期35卷 355-360页

作者：阮秋燕龙家敏公方强施丽牛向丽莫似恩广西壮族自治区生殖医院生殖医学科南宁500218

目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕过程中,卵裂期无优质胚胎周期的影响因素和行囊胚培养未形成可用囊胚的影响因素,探讨该部分患者适宜的进一步治疗策略。方法回顾性分析广西壮族自治区生殖医院2017年7月—2020年10月行IVF-ET且卵... 详细信息

目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕过程中,卵裂期无优质胚胎周期的影响因素和行囊胚培养未形成可用囊胚的影响因素,探讨该部分患者适宜的进一步治疗策略。方法回顾性分析广西壮族自治区生殖医院2017年7月—2020年10月行IVF-ET且卵裂期无优质胚胎病例1623例,依据病例在卵裂期是否有可用胚胎分为无可用胚胎组(119例)和有可用胚胎组(1504例),将有可用胚胎组中行囊胚培养的1309例分为无可用囊胚形成组(558例)和有可用囊胚形成组(751例),进行基线资料分析,比较无可用胚胎组和有可用胚胎组、无可用囊胚形成组和有可用囊胚形成组患者的年龄、体重指数(BMI)、基础卵泡刺激素(bFSH)、基础黄体生成素(bLH)、基础雌二醇(bE_(2)),不孕年限,促性腺激素(Gn)用量,Gn使用天数,hCG日LH,hCG日E_(2),hCG日孕酮(P)、获卵数是否有差异,进一步分析影响患者卵裂期有无可用胚胎和行囊胚培养未形成可用囊胚的关键因素,分析进一步治疗方式对患者临床结局的影响。结果对于卵裂期无优质胚胎的患者,无可用胚胎组的bFSH、bFSH/bLH显著高于有可用胚胎组(P<0.05);有可用胚胎组的bLH、hCG日E_(2)、获卵数显著高于无可用胚胎组(P<0.05);bFSH/bLH以及获卵数是有可用胚胎形成的关键因素。无可用囊胚形成组的年龄、bFSH、bFSH/bLH、不孕年限、Gn用量,hCG日LH显著高于有可用囊胚形成组(P<0.05),有可用囊胚形成组hCG日E_(2)、hCG日P和获卵数显著高于无可用囊胚形成组(P<0.05);年龄、不孕年限以及获卵数是行囊胚培养有可用囊胚形成的关键因素。冻融囊胚移植临床妊娠率(47.5%)显著高于卵裂期(14.8%,P<0.05)以及新鲜囊胚移植的临床妊娠率(31.4%,P<0.05)。结论卵巢功能储备低下是助孕患者卵裂期无优质胚胎的主要原因,若该部分患者年龄较轻、获卵数较多,且不孕年限较短,延长培养时间若形成可用囊胚进行冻融囊胚移植,能够改善这部分患者的妊娠结局。

关键词：卵裂期无优质胚胎囊胚培养相关因素治疗策略

冻融移植胚胎培养第7天囊胚成功获得活产1例

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广西医学 2020年第1期42卷 93-94,98页

作者：阮秋燕唐秀法公方强方伟芬乃东红牛向丽广西壮族自治区计划生育研究中心生殖医学科

目的探讨冻融移植胚胎培养第7天囊胚的移植效果及妊娠结局。方法回顾性分析1例行第2周期体外受精胚胎移植术患者的临床资料,总结其治疗过程,并分析其移植效果及妊娠结局。结果于单精子卵胞浆注射后第3天获得9枚优质胚胎(包括10CG21枚,7C... 详细信息

目的探讨冻融移植胚胎培养第7天囊胚的移植效果及妊娠结局。方法回顾性分析1例行第2周期体外受精胚胎移植术患者的临床资料,总结其治疗过程,并分析其移植效果及妊娠结局。结果于单精子卵胞浆注射后第3天获得9枚优质胚胎(包括10CG21枚,7CG11枚,7CG23枚,6CG24枚),均进行囊胚培养;胚胎培养第5天胚胎为卵裂期样胚胎,第6天形成2枚融合期胚胎,第7天形成2枚3BC囊胚,进行胚胎冷冻;女方内膜准备好后,经胚胎复苏,顺利移植,最终成功获双胎妊娠,母婴结局均良好。结论患者进行囊胚培养时,在第5~6天未形成囊胚,可视胚胎情况将胚胎延长培养至第7天,若发育成可用囊胚则可进行冻融移植,能够获得一定概率的妊娠和活产。

关键词：冻融囊胚移植囊胚培养第7天囊胚活产病例报告

低氧分压通过低氧诱导因子(HIF)影响卵母细胞的体外成熟和早期胚胎的发育

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中国畜牧兽医 2015年第6期42卷 1559-1565页

作者：刘晓淋杜凤娇雷钏阮秋燕吴柱连孙洪亮赵鑫邓彦飞陆凤花石德顺广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530004

卵母细胞和早期胚胎的体外培养(IVC)是哺乳动物胚胎工程的一项关键技术,是生殖生物学和转基因与克隆技术等生物技术研究的基础。影响卵母细胞和早期胚胎体外培养的因素包括培养液组成成分、离子浓度和渗透压,培养环境气相组成和温度等... 详细信息

卵母细胞和早期胚胎的体外培养(IVC)是哺乳动物胚胎工程的一项关键技术,是生殖生物学和转基因与克隆技术等生物技术研究的基础。影响卵母细胞和早期胚胎体外培养的因素包括培养液组成成分、离子浓度和渗透压,培养环境气相组成和温度等。最近研究表明,培养系统中的氧分压可以显著影响胚胎的发育,而这种影响主要由低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)进行调控。作者综述了氧分压及HIF对卵母细胞和早期胚胎体外发育的影响,并对HIF的结构及调控机制进行讨论,为研究低氧培养技术在卵母细胞和早期胚胎体外培养中的应用提供依据。

关键词：低氧诱导因子氧分压卵母细胞早期胚胎