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黑豆盐溶球蛋白的研究

西北植物学报 2003年第4期23卷 581-585页

作者：阮禹松赵文明西安交通大学生命科学与技术学院信息中心西安710049

对经凝胶过滤后的黑豆盐溶球蛋白进行Native-PAGE及双向SDS-PAGE电泳分析,结果表明黑豆7S球蛋白是由3个以非共价键相结合的亚基 MW:84.7kD,72.6kD和49.2kD 连接而成;黑豆11S球蛋白中则含有以共价键相结合的亚基,同时也可能存在非共价键... 详细信息

对经凝胶过滤后的黑豆盐溶球蛋白进行Native-PAGE及双向SDS-PAGE电泳分析,结果表明黑豆7S球蛋白是由3个以非共价键相结合的亚基 MW:84.7kD,72.6kD和49.2kD 连接而成;黑豆11S球蛋白中则含有以共价键相结合的亚基,同时也可能存在非共价键结合的亚基.其在还原条件下,可分解出5个肽链 MW:38.4kD,35.4kD,34.5kD,21kD和20.6kD ,且在电泳图片上明显分为两个区域.

关键词：黑豆盐溶球蛋白电泳亚基共价键

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三羟基异黄酮抑制乳腺癌细胞生长的质谱研究

西安交通大学学报（医学版） 2009年第4期30卷 435-441页

作者：阮禹松万明习李晓华西安交通大学生命科学与技术学院生物信息学研究中心西安交通大学生命科学与技术学院生物医学工程系陕西西安710049 第四军医大学西京医院消化内科陕西西安710032

目的初步研究低浓度的三羟异黄酮对人乳腺癌细胞系MCF-7的生长抑制作用,并通过蛋白质组学方法探讨其分子机制。方法MCF-7细胞在含25μmol/L三羟异黄酮的培养液中分别培养1～7d后,进行MTT实验,测得生长曲线;采用顺序抽提的方法将细胞总... 详细信息

目的初步研究低浓度的三羟异黄酮对人乳腺癌细胞系MCF-7的生长抑制作用,并通过蛋白质组学方法探讨其分子机制。方法MCF-7细胞在含25μmol/L三羟异黄酮的培养液中分别培养1～7d后,进行MTT实验,测得生长曲线;采用顺序抽提的方法将细胞总蛋白分级为水溶性和疏水性两个组分,并应用双向电泳方法对其进行分离,以获取蛋白质的表达谱;通过软件分析,找出表达量存在显著差异的蛋白质点;再应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)与生物信息学相结合的方法对差异表达蛋白点进行分析鉴定。结果25μmol/L的三羟异黄酮对MCF-7细胞具有明显的抑制作用,并在4d后观察到细胞凋亡现象的出现;双向电泳图谱分析表明无论是水溶性蛋白质还是疏水性蛋白都取得了很好的分离,并成功鉴定出24种差异表达蛋白,其中5种下调,19种上调。结论这些蛋白质的功能涉及了细胞的生长调节、应激反应、形态和凋亡等多个方面。

关键词：乳腺癌蛋白质组学顺序抽提双向电泳基质辅助激光解吸离子化电离飞行时间质谱三羟基异黄酮

静压力作用下人牙周膜细胞差异表达蛋白质的质谱分析

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上海口腔医学 2009年第1期18卷 56-60页

作者：安源远周洪阮禹松饶国洲西安交通大学医学院附属口腔医院正畸科陕西西安710004 西安交通大学生命科学与技术学院陕西西安710049 西安交通大学附属口腔医院口腔医学研究中心陕西西安710004

目的:观察人牙周膜细胞静压力下细胞内蛋白质表达的变化,为进一步探讨静压力与人牙周膜细胞代谢之间的关系奠定基础。方法:采用固相pH梯度/SDS-PAGE双向电泳和质谱分析技术,对人牙周膜细胞静压力干预组和未加力组细胞胞内总蛋白质进行分... 详细信息

目的:观察人牙周膜细胞静压力下细胞内蛋白质表达的变化,为进一步探讨静压力与人牙周膜细胞代谢之间的关系奠定基础。方法:采用固相pH梯度/SDS-PAGE双向电泳和质谱分析技术,对人牙周膜细胞静压力干预组和未加力组细胞胞内总蛋白质进行分析,应用Image Master 2D Platinum Software 5.0分析软件,鉴定2组细胞的双向电泳图谱,差异表达的蛋白质点为30个,选择其中5个新出现的差异点进行质谱分析和数据库检索。结果:第3和第5个蛋白质点得到了鉴定,分别为早老蛋白(presenilin 2)和儿茶酚胺-O-甲基转移酶(catechol O-methyltransferase),2种蛋白质在加力组中新表达。结论:早老蛋白与Notch蛋白具有相关性,而Notch通路可能是参与牙周膜细胞生物力学改建的一条信号传导途径;儿茶酚胺-O-甲基转移酶与降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)有关,而CGRP在骨代谢中发挥重要作用。

关键词：人牙周膜细胞静压力双向电泳质谱分析早老蛋白儿茶酚胺-O-甲基转移酶

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小麦低分子量麦谷蛋白亚基组成研究

西北植物学报 2005年第4期25卷 719-722页

作者：段淑娥阮禹松赵文明王波西安交通大学生命科学与技术学院生物信息中心西安文理学院化学与生命科学系西安710065

利用改良的两步一向SDS-PAGE two-step one-dimensional SDS-PAGE 分析了几种小麦低分子量麦谷蛋白亚基 L MW-GS 组成. 70 %热乙醇提取总谷蛋白,1 1 %分离胶进行第一步SDS-PAGE分离,电泳1 h后切取顶端1 cm胶条并置于巯基乙醇溶液进行... 详细信息

利用改良的两步一向SDS-PAGE two-step one-dimensional SDS-PAGE 分析了几种小麦低分子量麦谷蛋白亚基 L MW-GS 组成. 70 %热乙醇提取总谷蛋白,1 1 %分离胶进行第一步SDS-PAGE分离,电泳1 h后切取顶端1 cm胶条并置于巯基乙醇溶液进行还原,还原后的胶条于1 1 %～1 6.5%的梯度胶进行第二步SDS-PAGE分离.结果显示,两步一向SDS-PAGE可以彻底除去清蛋白、球蛋白和醇溶蛋白对L MW-GS分离的背景干扰,提高L MW-GS的分辨率.对几种小麦低分子量麦谷蛋白亚基分析表明:L MW-GS组合比HMW-GS更为丰富,每种小麦含有2～5种B亚基,2～4种C亚基,B。

关键词：两步一向SDS—PAGE 麦谷蛋白 LMW—GS 梯度胶

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种子蛋白质亚基结构快速测定双向电泳法

西北植物学报 2001年第1期21卷 175-179页

作者：阮禹松段淑娥赵文明西安交通大学生物工程研究所西安710049

介绍了还原条件与非还原条件双向电泳法 ,并应用此方法研究了种子蛋白质亚基结构。实验结果表明 ,这种双向电泳法能快速而准确地测定种子蛋白质的亚基结构。

关键词：双向电泳亚基结构种子蛋白质

人肺腺癌细胞系A549细胞双向电泳-飞行时间质谱研究

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西安交通大学学报（医学版） 2007年第4期28卷 422-426页

作者：杨拴盈田应选南岩东卜丽娜霍树芬阮禹松西安交通大学医学院第二附属医院呼吸科陕西西安710004 西安交通大学生命科学与技术学院陕西西安710049

目的初步分析人肺腺癌细胞系A549细胞蛋白质表达情况,从蛋白组水平探讨肺腺癌发病的分子机制。方法应用2-DE技术对人肺腺癌细胞系A549细胞总蛋白进行分离,获得蛋白质表达谱;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)结合生... 详细信息

目的初步分析人肺腺癌细胞系A549细胞蛋白质表达情况,从蛋白组水平探讨肺腺癌发病的分子机制。方法应用2-DE技术对人肺腺癌细胞系A549细胞总蛋白进行分离,获得蛋白质表达谱;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)结合生物信息学进行蛋白质鉴定。结果3块胶平均蛋白斑点数为1 138±49,平均匹配点数为986±32,匹配率为85.8%。随机选取背景清晰、分辨清楚、蛋白含量较高的20个斑点进行MALDI-TOF-MS分析,共获得了18个肽质量指纹图谱(PMF)。将PMFs质量数据通过Aldente软件查询SWISS-PROT数据库,根据匹配片段及氨基酸序列覆盖率等,初步鉴定出15种蛋白质。根据功能,这些蛋白质可分为:①基本代谢相关的酶类:果糖2-磷酸醛缩酶、视网醛脱氢酶1(RALDH1)、吡多醛激酶;②细胞骨架类:蛋白细胞角蛋白8(CK8)、-β2链微管蛋白;③应激相关蛋白:蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3);④信号转导分子:膜联蛋白1(ANX1)、膜联蛋白4(ANX4);⑤分子伴侣:热休克蛋白60(HSP60)、热休克蛋白-β1、抑制素(PHB);⑥转录及翻译相关蛋白:不均一性核糖核蛋白H(hnRNP H);⑦杂类:Rgr protein、NPM、PCBP1。结论应用2-DE/MALDI-MS方法获得了较为理想的人肺腺癌细胞系A549细胞2-DE蛋白质表达谱,初步鉴定了15种蛋白质。

关键词：人肺腺癌细胞系蛋白质组学双向电泳基质辅助激光解吸离子化电离飞行时间质谱肽指纹图谱

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干扰条件下无人艇编队有限时间同步控制

自动化学报 2024年第5期50卷 1047-1058页

作者：王端松李东禹梁晓玲皖西学院电气与光电工程学院六安237012 北京航空航天大学网络空间安全学院北京100191 大连海事大学轮机工程学院大连116026

针对有限时间控制中各状态分量收敛时间不同问题,提出一种无人艇编队有限时间同步控制框架,在此框架下设计的有限时间同步编队控制方法可巧妙地达到无人艇所有自由度编队误差在同一时刻收敛到平衡点.首先,针对现有干扰观测器与时间同步... 详细信息

针对有限时间控制中各状态分量收敛时间不同问题,提出一种无人艇编队有限时间同步控制框架,在此框架下设计的有限时间同步编队控制方法可巧妙地达到无人艇所有自由度编队误差在同一时刻收敛到平衡点.首先,针对现有干扰观测器与时间同步稳定框架不兼容问题,设计有限时间同步干扰观测器;然后,利用比例保持特性设计有限时间同步编队控制器,并验证了所提控制方法的稳定性;最后,通过3艘无人艇编队进行仿真实验,实验结果验证了所提控制方法的有效性和优越性.所提控制方法对有限时间同步控制需求的航海、航空航天和工业领域具有现实意义.

关键词：时间同步控制无人艇编队有限时间控制干扰观测器

小细胞肺癌及其配对的正常肺组织差异表达蛋白质的双相电泳-飞行时间质谱研究

同方期刊数据库

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西安交通大学学报（医学版） 2006年第6期27卷 533-537页

作者：杨拴盈张王刚张潍周斌田应选南岩东卜丽娜阮禹松孙秀珍杨德昌西安交通大学医学院第二附属医院呼吸内科陕西西安710004 西安交通大学医学院第二附属医院血液科陕西西安710004 西安交通大学医学院第二附属医院胸外科陕西西安710004 西安交通大学生命科学与技术学院信息中心陕西西安710049

目的应用比较蛋白质组学方法分析小细胞肺癌(SCLC)与其配对的正常肺组织差异表达蛋白质,为阐明SCLC发病机制、筛选其早期诊断标志物提供有益的思路。方法应用双相电泳(2-DE)分离6例SCLC及其配对的正常肺组织可溶性总蛋白;应用基质辅助... 详细信息

目的应用比较蛋白质组学方法分析小细胞肺癌(SCLC)与其配对的正常肺组织差异表达蛋白质,为阐明SCLC发病机制、筛选其早期诊断标志物提供有益的思路。方法应用双相电泳(2-DE)分离6例SCLC及其配对的正常肺组织可溶性总蛋白;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)获得差异蛋白点的肽质量指纹图谱(PMF);通过Mascot软件查询NCBI或SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质。结果每张图谱约检测到800多个蛋白质点。经匹配分析,肺癌组织之间和正常肺组织之间凝胶图像的匹配率分别为75.5%和78.2%;选择14个背景清晰、重复性及分辨率较好、蛋白表达差异明显的点进行质谱分析,结合表观分子量及等电点(pI),初步鉴定了11种(六类)蛋白质:①与蛋白质降解通路有关的蛋白质:蛋白酶体α亚单位3型、蛋白酶体β亚单位2型及β亚单位5型;②自由基/抗氧化剂类:锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和黄素还原酶(FR);③细胞骨架类:原肌球蛋白-3(Tpm-3);④与能量代谢有关的蛋白质:硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX1);⑤分子伴侣:抑制素(PHB),内质网蛋白ER29(Erp29);⑥其他:可溶性NSF黏附蛋白(alpha SNAP)。结论应用2-DE及MALDI-TOF-MS方法分离并初步鉴定了11种(六类)蛋白质;这些蛋白质与SCLC发生发展密切相关,部分可能成为SCLC诊断及治疗的分子靶点。

关键词：小细胞肺癌蛋白质组学双相电泳基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱肽质量指纹图谱

小细胞肺癌及其配对的正常肺组织差异表达蛋白质的双相电泳-飞行时间质谱研究

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