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肾癌组织的端粒酶活性和端粒长度的测定

白求恩医科大学学报 2001年第6期27卷 691-692页

作者：赵丽娟李军涛陈守义阮承迈长春职工医科大学病理生理学教研室吉林长春130051 军需大学基础部生化教研室

目的 :探讨肾癌组织端粒酶活性和端粒长度变化。方法 :分别用 TRAP- EL ISA及 Southernblot方法对 4 0例各型肾癌病理样本进行端粒酶活性和端粒长度的测定。结果 :肾癌组织样本中 90 %呈端粒酶阳性 ,癌旁组织中有部分样本 (2 / 2 2 )呈... 详细信息

目的 :探讨肾癌组织端粒酶活性和端粒长度变化。方法 :分别用 TRAP- EL ISA及 Southernblot方法对 4 0例各型肾癌病理样本进行端粒酶活性和端粒长度的测定。结果 :肾癌组织样本中 90 %呈端粒酶阳性 ,癌旁组织中有部分样本 (2 / 2 2 )呈弱阳性。结论 :端粒酶活性及端粒长度可能成为判定肾癌恶性程度或肿瘤易发性的检测指标。

关键词：肾癌端粒端粒酶测定

端粒酶活性检测方法的改进及dNTP浓度对端粒酶活性的影响

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中国兽医学报 2002年第6期22卷 585-586页

作者：吴东林张玉静李鹏陈守义阮承迈解放军军需大学基础部吉林长春130062

利用重新设计的引物和反应步骤 ,对检测端粒酶活性的 TRAP反应进行了改进。与原有方法相比 ,新方法在PCR扩增过程中不改变端粒酶产物的长度和比例 ,能更准确地反映端粒酶反应产物的性质。利用这个方法 ,考察了d NTP浓度对端粒酶的影响 ... 详细信息

利用重新设计的引物和反应步骤 ,对检测端粒酶活性的 TRAP反应进行了改进。与原有方法相比 ,新方法在PCR扩增过程中不改变端粒酶产物的长度和比例 ,能更准确地反映端粒酶反应产物的性质。利用这个方法 ,考察了d NTP浓度对端粒酶的影响 ,发现不同的脱氧核苷酸对端粒酶活性的影响有差异。

关键词：酶活性检测方法 dNTP浓度端粒酶进行性 TRAP反应改进方法

端粒酶／端粒在鸡马立克氏病肿瘤形成中的作用

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预防兽医学进展 2000年第4期2卷 39-41页

作者：陈守义阮承迈解放军军需大学动物科技系长春

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破伤风治疗进展

吉林畜牧兽医 1991年第1期3卷 34-36页

作者：阮承迈张玉生兽医大学

破伤风在兽医临床上是一常见的散发性传染病,以马、骡、猪最多见,危害严重。长期以来由于对此病的发病机理缺乏充分的认识,致使对症治疗缺乏目的性,治愈率(尤其在马属动物)较低。近十几年来,国外对此病的机理研究一直在进行着,取得了相... 详细信息

破伤风在兽医临床上是一常见的散发性传染病,以马、骡、猪最多见,危害严重。长期以来由于对此病的发病机理缺乏充分的认识,致使对症治疗缺乏目的性,治愈率(尤其在马属动物)较低。近十几年来,国外对此病的机理研究一直在进行着,取得了相当程度的进展,并相应提出了比较完整的防治措施。本文旨在通过对这些方面的研究成果的介绍,提高我国兽医工作者对此病的认识,加强对破伤风发病后的控制,提高治愈率。一。

关键词：破伤风发展

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鸡组织细胞端粒相关序列的克隆及序列分析

中国预防兽医学报 2003年第1期25卷 40-43页

作者：陈守义阮承迈李军涛马永红李鹏张玉静解放军军需大学吉林长春130062 长春市高等医学专科学校

根据真核细胞端粒DNA序列的共同特点 ,设计了一条引物 (TELO0 2 ) ( 2 4nt)。按照TaKala克隆试剂盒的介绍方法 ,染色体基因组DNA经 HaeⅢ 和 HinfⅠ 两种限制性内切酶酶切后 ,先进行初级PCR(C1和TELO0 2 )扩增 ,得到的产物为模板再经过... 详细信息

根据真核细胞端粒DNA序列的共同特点 ,设计了一条引物 (TELO0 2 ) ( 2 4nt)。按照TaKala克隆试剂盒的介绍方法 ,染色体基因组DNA经 HaeⅢ 和 HinfⅠ 两种限制性内切酶酶切后 ,先进行初级PCR(C1和TELO0 2 )扩增 ,得到的产物为模板再经过次级PCR(C2和TELO2 )扩增 ,得到的产物用试剂盒回收 ,并连接到PMD_1 8_T载体上 ,转化到JM1 0 9受体菌中。从阳性克隆中提取质粒DNA进行PCR和酶切鉴定 ,确认后进行序列测定 ,获得了一段 2 43sbp的鸡端粒相关序列。此序列与人第 7条染色体基因组末端序列的同源性为 63 .5 % ;与鼠端粒旁序列同源性为 63 .2 % ;而与MDV基因组序列的BamHⅠ酶切片段 76.6%同源。

关键词：组织细胞克隆序列分析端粒相关序列染色体鸡端粒DNA

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基因疗法在兽医治疗学中应用的前景

国外兽医学（畜禽疾病） 1995年第4期16卷 15-17页

作者：阮承迈杨永胜解放军农牧大学

基因疗法在兽医治疗学中应用的前景阮承迈，杨永胜（解放军农牧大学长春１３００６２）基因疗法是指利用一功能性基因片段来补偿机体缺失的基因。更广义地说是指把基因疗法看成是在体内插入一外源性基因来产生具有治疗作用的蛋白质。后... 详细信息

基因疗法在兽医治疗学中应用的前景阮承迈，杨永胜（解放军农牧大学长春１３００６２）基因疗法是指利用一功能性基因片段来补偿机体缺失的基因。更广义地说是指把基因疗法看成是在体内插入一外源性基因来产生具有治疗作用的蛋白质。后者包含基因疗法不仅能用于治疗先天性...

关键词：基因疗法兽医治疗学应用

抛物线拟合法研究氮酮(Azone)促进左旋咪唑透皮吸收的最佳浓度

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兽医大学学报 1992年第2期12卷 166-169页

作者：程远国王澜戴国华阮承迈王千张金子兽医大学

采用静态小室装置,以左旋咪唑(LMS)为模型药物,用离子对HPLC法测定LMS浓度.采用抛物线拟合法建立不同时间下氮酮(Azone)浓度对LMS透皮吸收率的数学模型.用此模型准确求得氮酮对LMS透皮吸收的最佳浓度是3.05±0.57%,同时证明氮酮对LMS有... 详细信息

采用静态小室装置,以左旋咪唑(LMS)为模型药物,用离子对HPLC法测定LMS浓度.采用抛物线拟合法建立不同时间下氮酮(Azone)浓度对LMS透皮吸收率的数学模型.用此模型准确求得氮酮对LMS透皮吸收的最佳浓度是3.05±0.57%,同时证明氮酮对LMS有显著的透皮吸收作用.

关键词：氮酮左旋咪唑抛物线拟合法

基于IRES序列的抗体定点整合载体构建和表达

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军事医学科学院院刊 2004年第5期28卷 427-429页

作者：阮承迈赵金红安小平李建民郝晓萌童贻刚陈薇王海涛军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

目的 :比较不同全功能抗体基因之间的表达量。方法 :构建了基于FLP IN/FRT pcDNA5和ECMV IRES的抗体双表达载体 ,把抗HBsAg抗体轻链、重链基因克隆到该表达载体上进行表达。结果与结论 :在CHO细胞中瞬时表达时没有检测到抗体表达 ,但在... 详细信息

目的 :比较不同全功能抗体基因之间的表达量。方法 :构建了基于FLP IN/FRT pcDNA5和ECMV IRES的抗体双表达载体 ,把抗HBsAg抗体轻链、重链基因克隆到该表达载体上进行表达。结果与结论 :在CHO细胞中瞬时表达时没有检测到抗体表达 ,但在用抗性筛选到的克隆中有稳定的表达 ,各克隆之间表达量差异小于 4 0 % ,为各种不同基因工程抗体表达量的筛选和优化提供了方法。

关键词： HBsAg抗体 CHO细胞定向整合

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端粒酶活性在哺乳动物细胞中的表达

中国兽医学报 2003年第1期23卷 66-68页

作者：阮承迈陈守义吴东林李鹏马鹤雯马永红张玉静解放军军需大学军事兽医系吉林长春130062

为研究端粒酶活性在哺乳动物细胞中的激活 ,构建了端粒酶催化亚基 (human telomerase reverse transcriptase,h TERT)和端粒酶 RNA组分 (h TR)基因的真核表达载体 ,分别在无端粒酶活性的 DK细胞株和人肝癌细胞中进行表达 ,以 TRAP-银染... 详细信息

为研究端粒酶活性在哺乳动物细胞中的激活 ,构建了端粒酶催化亚基 (human telomerase reverse transcriptase,h TERT)和端粒酶 RNA组分 (h TR)基因的真核表达载体 ,分别在无端粒酶活性的 DK细胞株和人肝癌细胞中进行表达 ,以 TRAP-银染和 TRAP- EL ISA定量方法测定转染细胞。结果显示 ,在人肝癌细胞株中仅 h TERT表达即可使端粒酶活性显著增加 ,而 DK细胞中 h TERT必须和 h TR同时转染才有端粒酶活性表达。这一结果表明 ,端粒酶活性表达主要和 h TERT/ h TR有关 ,采用人的端粒酶 h TERT/ h TR在其他哺乳动物细胞中表达端粒酶活性是可行的。

关键词：端粒酶活性哺乳动物细胞表达激活 DK细胞人肝癌细胞