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作者：阮增良第二军医大学

学位级别：硕士

水母是类生物总量非常庞大的海洋浮游动物。已有大量研究表明，水母体内富含多种生物活性物质，包括水母毒素蛋白和些活性强烈、具有良好开发前景的新功能蛋白。水母主要生存于4-6米深的海水表层环境，直接暴露于阳光紫外辐射之下。氧... 详细信息

水母是类生物总量非常庞大的海洋浮游动物。已有大量研究表明，水母体内富含多种生物活性物质，包括水母毒素蛋白和些活性强烈、具有良好开发前景的新功能蛋白。水母主要生存于4-6米深的海水表层环境，直接暴露于阳光紫外辐射之下。氧化损伤是紫外辐射造成机体损伤的重要机制之，已有研究表明，浮游生物为避免或减少紫外辐射造成的损害，经过长期适应性选择，在其机体内产生了种类繁多、结构特异、活性强烈的抗氧化活性物质。抗氧化物质可以清除自由基，具有明显的辐射防护作用。目前在国内外已经开展了不少针对水母抗氧化功能的研究，尽管如此，目前对水母体内抗氧化系统的组成、重要抗氧化酶类的序列信息、表达情况、抗氧化活性水平等情况尚未有系统的了解。研究目的：获得三种发形霞水母重要抗氧化活性蛋白，并明确其活性水平，为了解水母抗氧化系统的物质基础、充分利用其抗氧化活性组分提供科学依据。研究方法： 1、发形霞水母抗氧化活性蛋白序列的获取：构建发形霞水母触手组织cDNA文库，通过对该文库的克隆子进行序列测定和BLAST注释，从中获得个编码1型硫氧还蛋白、个编码4型过氧化物还原酶和个编码铜锌超氧化物歧化酶的全长核苷酸序列，分别命名为CcTrx1、CcPrx4与CcCuZnSOD。 2、生物信息学分析：利用多种生物信息学软件及在线工具，确定三序列的开放阅读框，开展其编码蛋白氨基酸组成、信号肽、结构域、理化性质，二级结构、亲疏水性等生物信息学分析，并进步进行多重序列比对、构建进化树、亚细胞定位及3D结构建模等分析。 3、蛋白的重组表达及分离纯化：通过设计三对带有特异性酶切位点的PCR引物，将编码上述三个蛋白（不含信号肽区域）的核苷酸序列从cDNA文库克隆子中扩增出来，并利用选择的酶切位点将编码序列连接到pET-24a载体中构建重组表达质粒，然后将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)或Rosetta (DE3) pLysS中进行诱导表达。通过诱导条件的摸索后，使三种重组蛋白最大限度地以可溶形式表达，再利用在重组蛋白N端加上的组氨酸标签，使用镍离子亲和层析柱进行分离纯化。 4、重组蛋白的活性检测：对纯化获得的重组蛋白开展多种活性检测（：1）rCcTrx1蛋白的二硫键还原能力检测：1mL反应体系（pH7.0）包含100mM PBS缓冲液，1.25mg/mL牛胰岛素，2mM EDTA，8μg/mL纯化rCcTrx1蛋白，或热失活的纯化rCcTrx1蛋白作阴性对照。往上述体系中加入2μL1M DTT启动反应，持续监测反应液在650nm波长下的光吸收值。（2）rCcPrx4蛋白对过氧化氢的清除能力检测：1mL反应体系包括50mM Hepes（pH7.0），5mM DTT和浓度分别为0,25,50,75,100μg/mL的rCcPrx4蛋白，或热失活后的rCcPrx4蛋白作为阴性对照组。混匀后室温放置10分钟再加入3‰(w/v) H2O2至终浓度为100μM使反应开始。室温下分别反应0,2.5,5,7.5,10min后加入100%(w/v)的三氯乙酸100μL并充分混匀以终止反应，立即加入200μL10mM Fe(NH4)2(SO4)2及100μL2.5M KSCN，混匀后测量OD475值，根据光吸收值随时间和重组蛋白浓度的变化，计算H2O2清除率并绘制反应曲线图。（3）rCcCuZnSOD蛋白对超氧阴离子自由基的抑制能力：使用Dojindo公司的超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒（WST－1法）开展检测，实验流程按产品说明书步骤进行。（4）rCcTrx1与rCcPrx4蛋白对超螺旋构象DNA保护效果：50μL反应体系（pH7.0）中含有50mM的Hepes-HCl、10mM DTT、35μM FeCl3、1μg以超螺旋构象为主的pET-24a质粒DNA及不同浓度的纯化蛋白;另外设置不加入重组蛋白的质粒、质粒与FeCl3、质粒与DTT、质粒与FeCl3及DTT四组对照。反应液在37℃孵育2小时后各取10μL通过琼脂糖电泳观察反应效果。实验结果：经过菌液PCR、质粒酶切及测序验证，证实三个发形霞水母抗氧化蛋白原核重组表达质粒正确构建。经过诱导条件的摸索后，均能以可溶形式表达。把离心收集的菌体重悬后进行超声裂解，取裂解液的离心上清通过镍离子亲和层析进行纯化，得到较为单的目的条带，分子量均与预测值致。活性检测结果：（1）纯化rCcTrx1蛋白具有较强的二硫键还原能力（。2）纯化rCcPrx4蛋白具有明显的H2O2清除能力，并且反应速度较快。（3）纯化rCcCuZnSOD蛋白对超氧阴离子自由基具有良好的抑制能力。（4）从加有纯化蛋白的各组可以观察到，随着纯化蛋白浓度的增加，质粒的超螺旋构象被保护得越来越好，直至与阴性对照组条带无明显差异。阴性对照组（质粒、质粒与FeCl3、质粒与DTT）以超螺旋构象存在为主;同时存在FeCl3及DTT的阳性对照组中质粒的超螺旋构象几乎被全部破坏，

关键词：水母抗氧化自由基硫氧还蛋白过氧化物还原酶超氧化物歧化酶

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水母毒素及水母来源新功能蛋白研究进展

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中国海洋药物 2013年第5期32卷 86-92页

作者：阮增良柳国艳温小娟张黎明第二军医大学海军医学系防化医学教研室上海200433

水母是海洋中一类数量庞大的浮游生物,其体内含有多种高效的生物活性成分,是一个潜在的海洋药物资源宝库。本文通过概述近年来水母毒素及水母来源新功能蛋白的研究进展,对水母生物活性物质的毒性、抗氧化、抗肿瘤和酶活性等作用特点及... 详细信息

水母是海洋中一类数量庞大的浮游生物,其体内含有多种高效的生物活性成分,是一个潜在的海洋药物资源宝库。本文通过概述近年来水母毒素及水母来源新功能蛋白的研究进展,对水母生物活性物质的毒性、抗氧化、抗肿瘤和酶活性等作用特点及机理进行了归纳,为开发新型海洋药物提供科学线索。

关键词：水母毒素生物活性物质

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高通量测序在海洋生物活性物质开发中的应用前景

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国际药学研究杂志 2013年第4期40卷 415-421页

作者：周永红柳国艳阮增良张黎明第二军医大学海医系海洋生物技术教研室上海200433

新一代测序仪以高通量、速度快、低成本为主要特征,在海洋生物活性物质基因资源挖掘中已显示出巨大潜力。高通量测序技术已成为高效、大规模和全面开发海洋生物资源的基础和重要手段。本文概述了新一代测序技术的基本原理、目前的应用... 详细信息

新一代测序仪以高通量、速度快、低成本为主要特征,在海洋生物活性物质基因资源挖掘中已显示出巨大潜力。高通量测序技术已成为高效、大规模和全面开发海洋生物资源的基础和重要手段。本文概述了新一代测序技术的基本原理、目前的应用现状及其优势,分析了海洋生物活性物质的研究现状和基于新一代高通量测序技术在海洋生物"组学"研究、海洋生物活性物质基因挖掘中的应用情况和应用前景。

关键词：高通量测序海洋生物活性物质海洋生物毒素活性相关基因

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阮海良:投递“向上的力量”

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中国共青团 2024年第7期 56-58页

作者：于丹阮海良不详中国邮政集团有限公司绍兴市分公司皋埠特快揽投部

加入中国邮政集团有限公司绍兴市分公司皋埠特快揽投部成为揽投员之前,阮海良在武警江苏总队南京支队服役了5年。退役后,阮海良做过车间工人、辅警……一名“90后”青年在现实的驱使下拓展着人生的体验感,在迷茫中尝试着丈量人生的宽度... 详细信息

加入中国邮政集团有限公司绍兴市分公司皋埠特快揽投部成为揽投员之前,阮海良在武警江苏总队南京支队服役了5年。退役后,阮海良做过车间工人、辅警……一名“90后”青年在现实的驱使下拓展着人生的体验感,在迷茫中尝试着丈量人生的宽度。年轻人,谁没换过几份工作呢?2016年3月,阮海良选择穿上了“邮政绿”工装。

关键词：车间工人 90后投递体验感中国邮政集团江苏总队揽投员绍兴市

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把握机会窗口期减缓气候变化对中国居民健康影响

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科学通报 2023年第15期68卷 1899-1905页

作者：蔡闻佳张弛张诗卉艾思奇白玉琪鲍俊哲常楠陈彬陈慧琪程亮亮崔学勤戴瀚程 Bawuerjiang Danna 底骞董伟董文轩窦德景范维澄范星房小怡高仝高源耿阳关大博郭亚菲 Ian Hamilton 胡艺馨华峻翊黄存瑞黄弘黄建斌蒋俏蕾姜晓朋柯丕煜 Gregor Kiesewetter Pete Lampard 李传玺李瑞奇李双利梁璐林波荣林华亮刘欢刘起勇刘小波刘心远刘昱甫刘钊刘竹楼书含鲁晨曦罗勇罗震宇马伟 Alice McGushin 牛彦麟任超阮增良 Wolfgang Schöpp 单钰理苏婧孙韬淳王灿王琼文三妹谢杨熊辉徐冰徐朦颜钰杨军杨廉平杨秀俞乐岳玉娟曾仪娉张镜张少辉张曜张仲宸赵继尧赵亮赵梦真赵琦赵哲周景博朱征宏陈冯富珍宫鹏清华大学地球系统科学系北京100084 北京理工大学管理与经济学院北京100081 中山大学公共卫生学院广州510080 郑州大学公共卫生学院郑州450001 南京医科大学公共卫生学院南京211166 北京师范大学环境学院北京100875 北京大学环境工程学院北京100871 清华大学新闻与传播学院北京100084 清华大学万科公共卫生学院北京100084 浙江大学地球科学学院杭州310058 清华大学公共安全研究所北京100084 清华大学工程物理系北京100084 百度研究院北京100091 山东师范大学环境与生态研究院济南250013 中国气象科学研究院气象影响与风险研究中心北京100086 山东师范大学商学院济南250013 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 清华大学建筑学院北京100084 中国疾病预防控制中心环境与人群健康重点实验室环境与健康相关产品安全所北京102206 Energy Institute University College LondonLondon WC1E 6BTUK 南方科技大学统计与数据科学系深圳518055 香港大学建筑学院中国香港999077 世界卫生组织驻华代表处北京100600 Pollution Management Research Group EnergyClimateand Environment ProgramInternational Institute for Applied Systems Analysis(IIASA)Schlossplatz 1-A-2361 LaxenburgAustria Department of Health Sciences University of YorkYork YO105DDCanada 山东大学齐鲁医学院公共卫生学院流行病学系济南250002 中国科学技术大学计算机科学与技术学院合肥230027 Department of Geography and the Environment University of North TexasDenton TX 76203-5017USA 清华大学环境学院北京100084 Geography College of Life and Environmental SciencesUniversity of ExeterExeter EX12LUUK 山东大学气候变化与健康研究中心济南250002 Institute for Global Health University College LondonLondon WC1H 0ALUK School of Geography Earth and Environmental SciencesUniversity of BirminghamBirmingham B152TTUK 清华大学人文学院北京100084 北京航空航天大学经济与管理学院北京100083 香港科技大学(广州)信息枢纽人工智能学域广州511443 暨南大学环境与气候研究所广州510632 清华大学气候变化与可持续发展研究院北京100084 清华大学苏世民学院北京100084 清华大学体育学部北京100084 中国科学院大气物理研究所大气科学和地球流体力学数值模拟国家重点实验室北京100029 香港大学地球科学系和地理系中国香港999077

随着中国总人口的不断增加以及改革开放以来经济的飞速发展,中国面临来自气候变化的健康威胁也在不断上升.与此同时,中国也处于一个独特的机遇窗口期,如果能够有效应对气候变化带来的健康风险,将造福今后几代人的健康.反之,如果没有及... 详细信息

随着中国总人口的不断增加以及改革开放以来经济的飞速发展,中国面临来自气候变化的健康威胁也在不断上升.与此同时,中国也处于一个独特的机遇窗口期,如果能够有效应对气候变化带来的健康风险,将造福今后几代人的健康.反之,如果没有及时、充分的应对措施,气候变化对中国居民健康和生命的威胁将与日俱增.为了推动更及时且有利于改善人群健康的气候应对行动,由清华大学牵头建立的柳叶刀倒计时亚洲中心在全球柳叶刀倒计时工作的基础上[1,2],从2020年开始,聚焦气候变化对中国人群健康的影响进行全面且系统的评估[3,4].

关键词：减缓气候变化人群健康柳叶刀居民健康窗口期倒计时应对措施把握机会

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云南保山市“9·02”暴雨洪水调查分析

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水利水电快报 2024年

作者：阮良鸿云南省水文水资源局保山分局

为全面掌握云南保山市暴雨洪水成因、特征、变化规律及灾害情况，提高水旱灾害防御的水文预报预警能力。本文基于云南保山市境内勐波罗河流域2023年“9·02”暴雨洪水水文实测资料和洪水灾害调查资料，采用短历时暴雨极值分析法、P-Ⅲ... 详细信息

为全面掌握云南保山市暴雨洪水成因、特征、变化规律及灾害情况，提高水旱灾害防御的水文预报预警能力。本文基于云南保山市境内勐波罗河流域2023年“9·02”暴雨洪水水文实测资料和洪水灾害调查资料，采用短历时暴雨极值分析法、P-Ⅲ型频率分析法和对照分析法等，对暴雨时空分布、上下游暴雨洪水的成因及演变规律，以及洪涝灾害情况进行分析研究。结果表明此场暴雨历时短强度大，形成洪水涨势迅猛，最大水位涨率达1.88m/h，最大24h降雨量及洪水洪峰流量重现期达20年一遇，达到大暴雨、大洪水量级，发生的洪涝灾害给当地造成了约2855万元的严重经济损失。分析结果可为保山市暴雨洪水的预报预警和防洪治涝决策提供参考。

关键词：暴雨洪水灾害分析保山市

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基于强化学习的混合元启发式暂态电压稳定特征选择方法及可解释性研究

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电网技术 2024年第4期48卷 1519-1531,I0043页

作者：甄永赞阮程新能源电力系统国家重点实验室(华北电力大学) 北京市昌平区102206

新型电力系统发展背景下,使用有效的特征选择方法来提取与暂态电压稳定强相关的关键响应特征,对研究暂态电压失稳机理与系统潜在安全隐患具有重要意义。为此,提出一种基于改进过滤法与混合元启发式包装法的复合框架进行特征选择的新方... 详细信息

新型电力系统发展背景下,使用有效的特征选择方法来提取与暂态电压稳定强相关的关键响应特征,对研究暂态电压失稳机理与系统潜在安全隐患具有重要意义。为此,提出一种基于改进过滤法与混合元启发式包装法的复合框架进行特征选择的新方法。基于对称不确定性值改进的最大相关最小冗余性准则进行特征粗筛;将Q学习强化学习融合至元启发式优化算法中,并采用开发探索折衷策略以增强特征细选能力,获取最优关键响应特征子集。在此基础上,采用沙普利值加性解释归因理论综合分析各筛选特征对暂态电压稳定的影响与系统薄弱环节。新型电力系统算例验证了所提方法的有效性。

关键词：暂态电压稳定特征选择强化学习混合元启发式沙普利值加性解释

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基于代价敏感支持向量机和多变量决策树的分级自适应暂态电压稳定评估

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电网技术 2024年第2期48卷 778-788页

作者：甄永赞阮程新能源电力系统国家重点实验室(华北电力大学) 北京市昌平区102206

为解决暂态电压稳定评估中失稳工况漏判率高的问题、提升多变量决策树(multivariate decision tree,MDT)应用能力,提出一种分级代价敏感多变量决策树(hierarchical cost sensitive multivariate decision tree,HCS-MDT)评估方法。基于... 详细信息

为解决暂态电压稳定评估中失稳工况漏判率高的问题、提升多变量决策树(multivariate decision tree,MDT)应用能力,提出一种分级代价敏感多变量决策树(hierarchical cost sensitive multivariate decision tree,HCS-MDT)评估方法。基于可量测电气量时空联合拓展构建特征,利用改进经验风险的代价敏感支持向量机(cost sensitive support vector machines,CS-SVM)作为MDT内部节点分类器,生成解析式组合特征判稳规则作为可视化决策依据,并能有效减少失稳漏判;将分级自适应(hierarchical self-adaptation,HSA)准则融入CS-MDT中进行暂态电压稳定评估,在提升早期评估能力的同时有效保障评估准确率。暂态电压稳定仿真算例验证了所提方法的有效性。

关键词：暂态电压稳定时空特征代价敏感支持向量机多变量决策树分级自适应

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高震区有轨电车小半径曲线连续刚架桥抗震性能研究

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铁道建筑技术 2024年

作者：阮良奉中铁第五勘察设计院集团有限公司

连续刚架桥墩梁固结具有整体性好、抗扭刚度大、桥梁建筑结构高度低等特点,在现代有轨电车小半径曲线桥建设中具有一定应用价值。目前该结构在高震区应用较少,为研究其抗震性能,结合工程实例,基于Pushover方法考虑高阶振型影响,通过Mida... 详细信息

连续刚架桥墩梁固结具有整体性好、抗扭刚度大、桥梁建筑结构高度低等特点,在现代有轨电车小半径曲线桥建设中具有一定应用价值。目前该结构在高震区应用较少,为研究其抗震性能,结合工程实例,基于Pushover方法考虑高阶振型影响,通过Midas Civil有限元软件对小半径曲线连续刚架桥进行多方向推覆分析得出能力曲线,再通过能力谱法得出结构在设防地震作用下的性能点,从结构塑性变形能力、塑性铰开展、结构内力分布等方面研究结构的抗震性能。结果表明,小半径曲线连续刚架桥具有较大的水平承载能力和位移变形能力,具有良好的抗震性能,满足抗震设防要求,可为此结构在高震区现代有轨电车小半径曲线桥中的应用提供参考价值。

关键词：现代有轨电车高震区小半径曲线连续刚架桥 Pushover分析抗震性能

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有轨电车小半径曲线梁桥减隔震措施对比研究

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结构工程师 2024年

作者：焦驰宇曹跃阮良奉乔宏北京建筑大学未来城市设计高精尖创新中心北京建筑大学土木与交通工程学院北京建筑大学工程结构与新材料北京市高等学校工程研究中心中铁第五勘察设计院集团有限公司北京建筑大学大型多功能振动台阵实验室

为适应交通路网发展需求，小半径曲线桥被广泛应用，其中有轨电车小半径曲线桥占据较高的比重。为确保地震区有轨电车的抗震安全，常采用减隔震装置以减小地震响应。然而，不同装置类型和布置方式对减隔震效果存在较大差异，因此有必要... 详细信息

为适应交通路网发展需求，小半径曲线桥被广泛应用，其中有轨电车小半径曲线桥占据较高的比重。为确保地震区有轨电车的抗震安全，常采用减隔震装置以减小地震响应。然而，不同装置类型和布置方式对减隔震效果存在较大差异，因此有必要深入研究优化策略。本文以某典型有轨电车小半径曲线桥为工程背景，基于多个单一减震装置有机组合，依据边墩控制位移、中墩降低内力的组合减震理念，提出了一种新型的组合减隔震装置，并选择适宜参数的摩擦摆支座（FPS）、铅芯橡胶支座（LRB）和液体粘滞阻尼器（FVD）三种减隔震装置，通过动力非线性时程分析，探究了各装置关键参数对于曲线桥减震效果的影响，并对采用不同减隔震装置的有轨电车小半径曲线桥地震响应进行对比分析。研究发现：本文提出的组合减隔震方案能够明显弥补单一减隔震装置的不足，达到更好的减隔震效果，值得在同类桥梁中推广应用；FPS与LRB对墩底内力控制效果较好，但会在一定程度上放大结构的墩梁相对位移；FVD对墩梁相对位移的控制效果更好，但对墩底内力的控制效果比其他两种减隔震装置差。

关键词：有轨电车小半径曲线梁桥非线性时程分析法减隔震装置

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