检索结果-南通市图书馆

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

铁超载对小鼠肝脏原代细胞凋亡的影响

军事医学 2024年第6期48卷 445-452页

作者：苏贤王博李东东王蕾祁凤英付秋霞阎少多军事科学院军事医学研究院

目的建立稳定的小鼠肝脏原代细胞同步分离技术，研究铁超载对肝脏原代细胞凋亡的影响。方法通过胶原酶消化、percoll密度梯度离心和CD146磁珠分选等步骤，同步分离纯化小鼠肝实质细胞、肝窦内皮细胞和枯否细胞，并使用流式细胞术、免... 详细信息

目的建立稳定的小鼠肝脏原代细胞同步分离技术，研究铁超载对肝脏原代细胞凋亡的影响。方法通过胶原酶消化、percoll密度梯度离心和CD146磁珠分选等步骤，同步分离纯化小鼠肝实质细胞、肝窦内皮细胞和枯否细胞，并使用流式细胞术、免疫荧光染色等鉴定细胞类型。体外培养各类型细胞，使用0、25、50、100μmol/L的柠檬酸铁铵刺激24 h建立铁超载模型，通过普鲁士蓝染色观察细胞铁含量，流式细胞术测定细胞存活率和线粒体膜电位水平。结果肝脏原代细胞同步分离技术效率稳定，肝实质细胞得率为（4.0±0.5）×107细胞/只，存活率为（76.33±0.67）%；肝窦内皮细胞得率为（5.0±1.0）×106细胞/只，存活率和纯度分别为（93.63±0.25）%和（93.40±0.46）%；枯否细胞得率为（1.5±0.5）×106细胞/只，存活率和纯度分别为（98.33±0.12）%和（88.30±2.02）%。获得的细胞数量多、活力好、纯度高，能满足后续实验要求。与空白对照组相比，柠檬酸铁铵处理的3种类型细胞中铁含量显著增加。在柠檬酸铁铵的刺激下，肝实质细胞的存活率从（73.97±5.54）%下降至（54.10±1.68）%,JC-1聚合物平均荧光强度从326.33±30.37下降至155.00±6.56,JC-1单体平均荧光强度从1700.00±144.04上升至3713.33±81.82；肝窦内皮细胞的存活率从（90.60±1.74）%下降至（78.03±2.15）%,JC-1聚合物平均荧光强度从502.33±5.51下降至372.33±4.04,JC-1单体平均荧光强度从750.00±67.51上升至1340.00±36.39；枯否细胞的存活率从（94.23±1.44）%下降至（88.37±1.56）%,JC-1聚合物平均荧光强度从652.67±25.66下降至478.00±12.49,JC-1单体平均荧光强度从1984.33±80.65上升至3062.33±245.20。结论建立了稳定的小鼠肝脏原代细胞同步分离技术，并证实铁超载可增加肝实质细胞、肝窦内皮细胞和枯否细胞的凋亡。

关键词：铁超载肝实质细胞肝窦内皮细胞枯否细胞细胞凋亡

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

基于自组装多肽的无血清细胞冷冻保存

中国生物制品学杂志 2024年第5期37卷 605-610,616页

作者：郑义哲李东东王蕾张萱李艳宏刘坤王博阎少多付秋霞梁俊天津科技大学轻工科学与工程学院天津300457 军事医学研究院卫生勤务与血液研究所北京100039

目的实现基于自组装多肽(Peptide)的无血清低DMSO的高效细胞冷冻保存。方法使用胎牛血清(FBS)、DMSO和Peptide 3种冷冻保护剂(cryoprotectant,CPA)进行组合冷冻保存Hepa1-6细胞。采用共聚焦显微成像、流式细胞术及细胞计数等方法检测冻... 详细信息

目的实现基于自组装多肽(Peptide)的无血清低DMSO的高效细胞冷冻保存。方法使用胎牛血清(FBS)、DMSO和Peptide 3种冷冻保护剂(cryoprotectant,CPA)进行组合冷冻保存Hepa1-6细胞。采用共聚焦显微成像、流式细胞术及细胞计数等方法检测冻存后细胞的存活率、回收率及增殖能力,并通过差示扫描量热(differential scanning calorimetry,DSC)法检测CPA抑冰性能,最终确定一种用于细胞冻存的高效CPA。结果Peptide可在DMSO溶液中形成纤维网络水凝胶封装细胞,支撑细胞呈三维(3D)立体分布。在无血清条件下,与5%DMSO及0.1wt%Peptide组相比,用0.1wt%Peptide联合5%DMSO作为新型复合CPA冻存Hepa1-6细胞,可显著提高细胞存活率及冻存后回收率,且与10%DMSO+20%FBS组相比差异无统计学意义(t分别为0.983和2.164,P均>0.05)。此外,与10%DMSO+20%FBS组相比,0.1wt%Peptide+5%DMSO组冻融后细胞的增殖能力差异也无统计学意义(t=3.513,P>0.05)。DSC测试显示,基于Peptide的CPA抑冰性能良好。结论使用0.1wt%Peptide联合5%DMSO作为新型复合CPA具有良好的细胞冻存效果。

关键词：细胞冻存自组装多肽无血清 DMSO

可缓释富血小板血浆生长因子的新型自组装多肽水凝胶制备及性能表征

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2024年第15期28卷 2364-2370页

作者：祁凤英王蕾李东东阎少多刘坤郑义哲何子心易晓阳王东根付秋霞梁俊天津科技大学轻工科学与工程学院天津市300457 军事医学研究院卫生勤务与血液研究所北京市100850

背景:富血小板血浆水凝胶由于生长因子的突发释放与伤口部位蛋白酶的快速清除,导致生长因子在伤口部位的停留时间较短,近年来研究者关注利用水凝胶材料包封富血小板血浆,以改善富血小板血浆水凝胶的不足。目的:制备自组装多肽-富血小板... 详细信息

背景:富血小板血浆水凝胶由于生长因子的突发释放与伤口部位蛋白酶的快速清除,导致生长因子在伤口部位的停留时间较短,近年来研究者关注利用水凝胶材料包封富血小板血浆,以改善富血小板血浆水凝胶的不足。目的:制备自组装多肽-富血小板血浆水凝胶,探究其对富血小板血浆生物活性因子释放的影响。方法:采用固相合成法合成自组装多肽,以D-PBS配制成溶液。将不同体积的多肽溶液分别与富血小板血浆、氯化钙/凝血酶溶液混合制备水凝胶,使体系中多肽的最终质量分数分别为0.1%,0.3%,0.5%,观察成水凝胶状态,并体外检测富血小板血浆中生长因子释放情况。将质量分数1%多肽溶液与质量分数1%人血清白蛋白溶液混合激发多肽自组装,使多肽的最终质量分数分别为0.1%,0.3%,0.5%,观察液体流动状态,并检测自组装多肽的流变力学性能。通过扫描电镜与透射电镜观察多肽(质量分数分别为0.1%,0.001%)-人血清白蛋白溶液的微观结构。结果与结论:①不同体积多肽溶液与富血小板血浆均可形成水凝胶,与富血小板血浆水凝胶相比,0.1%,0.3%多肽-富血小板血浆凝胶可缓解表皮生长因子、血管内皮生长因子的突发释放,延长释放时间至48 h。②添加人血清白蛋白后,0.1%多肽组仍呈流动液体,0.3%多肽组呈半液体状态,0.5%多肽组激发自组装形成水凝胶,确定富血小板血浆中人血清白蛋白可激发多肽自组装;随着多肽质量分数的提高,自组装多肽的存储模量越高,越容易成胶。③透射电镜下可见,添加人血清白蛋白前,多肽纳米纤维较短且无序堆积;添加人血清白蛋白后,多肽纳米纤维明显变长,并且相互交联成束,形成致密的纤维网络结构。扫描电镜下可见,添加人血清白蛋白前,多肽呈无序堆积的片状结构;添加人血清白蛋白后,多肽自组装成相互交联且有序密集排列的多孔状结构。④结果显示,新型自组装多肽可由富血小板血浆激发自组装,根据人血清白蛋白与多肽的比例可精准调节自组装效果,且多肽对富血小板血浆生长因子有缓释作用,可作为一种新型的生物材料应用于组织修复。

关键词：组织工程富血小板血浆水凝胶多肽自组装纳米纤维多孔状网络生长因子缓释

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

血小板促进肝再生的作用机制及其研究进展

临床输血与检验 2022年第3期24卷 392-399页

作者：苏贤李艳宏阎少多军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所北京100850

肝脏具有强大的再生能力,肝切除术或肝移植术的成功,主要取决于术后肝脏能否恢复正常的生理功能和体积。研究表明,血小板在促进肝再生中发挥着重要作用。然而,其作用机制尚未完全明确。本文就血小板促进肝再生的作用机制及其研究进展作... 详细信息

肝脏具有强大的再生能力,肝切除术或肝移植术的成功,主要取决于术后肝脏能否恢复正常的生理功能和体积。研究表明,血小板在促进肝再生中发挥着重要作用。然而,其作用机制尚未完全明确。本文就血小板促进肝再生的作用机制及其研究进展作一综述,以期为肝切除或肝移植相关术后肝再生提供新的治疗策略。

关键词：血小板肝再生肝脏细胞信号通路

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠富血小板血浆制备方法的改良及质量检测

中国实验血液学杂志 2023年第5期31卷 1550-1555页

作者：何子心王蕾刘坤祁凤英李艳宏阎少多付秋霞李东东梁俊天津科技大学轻工科学与工程学院天津300457 军事医学研究院卫生勤务与血液研究所北京100039

目的:优化一次离心法制备大鼠富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)的实验方案。方法:用肝素钠抗凝管收集经颈动脉插管获取的大鼠动脉血后分装入无菌EP管中,使用生理盐水调整红细胞浓度后,于不同条件下(200、220、240×g离心8、10、1... 详细信息

目的:优化一次离心法制备大鼠富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)的实验方案。方法:用肝素钠抗凝管收集经颈动脉插管获取的大鼠动脉血后分装入无菌EP管中,使用生理盐水调整红细胞浓度后,于不同条件下(200、220、240×g离心8、10、12 min等)制备大鼠PRP,随后利用血细胞分析仪及流式细胞仪分别对抗凝全血及PRP进行细胞计数和质量评价,比较不同组间的差异。结果:大鼠全血抗凝后调整红细胞浓度至(5.5-6.5)×10^(12)/L时有利于PRP的提取。当以220×g离心10 min时,血小板回收率最高[(53.52±0.63)%]。且提取出的PRP凋亡情况和血小板活化水平与全血无明显差异(P>0.05)。提取的PRP中生长因子释放水平较全血显著升高(P<0.05)。结论:降低红细胞混入量是提高PRP提取效率的关键,本研究成功改良了大鼠PRP的制备方法,血小板的回收率高且质量稳定。

关键词：大鼠富血小板血浆离心条件红细胞混入量

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

4℃冷藏贮存血小板体内清除机制研究进展

中国输血杂志 2022年第5期35卷 586-591页

作者：王博苏贤阎少多军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所北京100850

血小板输注是临床上防治出血性疾病的重要手段之一,临床上常用(22±2)℃振荡保存,但其贮存期短,易受微生物污染,故极大地影响了临床血小板输注的可用性和安全性。近年来国内外多项研究显示,4℃冷藏贮存可以延长血小板贮存时限,但是同时... 详细信息

血小板输注是临床上防治出血性疾病的重要手段之一,临床上常用(22±2)℃振荡保存,但其贮存期短,易受微生物污染,故极大地影响了临床血小板输注的可用性和安全性。近年来国内外多项研究显示,4℃冷藏贮存可以延长血小板贮存时限,但是同时也会加重血小板贮存损伤(PSL),这种血小板输注人体后会被机体加速清除,严重制约了4℃冷藏血小板的临床应用。本文就4℃冷藏贮存导致的PSL,以及输注体内的清除机制研究进展做一综述。

关键词：血小板贮存 4℃冷藏储存损伤血小板清除机制输血安全

基于ClinicalTrials.gov数据分析美国军方野战输血的主要研究方向

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国输血杂志 2022年第5期35卷 532-536页

作者：王博王权查渭喆焦小杰阎少多军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所北京100850 解放军总医院医学创新研究部临床生物样本中心

目的了解美国军队野战输血医学发展的主要方向和最新动态。方法通过www.***.gov网站首页,以“United States Department of Defense”“U.S.Army Medical Research and Development Command”“United States Naval Medical Research Center”为检索词,检索自ClinicalTrials.gov成立(2002年)起至2021年5月1日野战输血医学相关临床试验项目的完整备案信息,通过研究进展状态、临床分期、任务分配、地域分布和主要研究内容及研究成果等,分析其主要特点。结果共检索到临床试验项目931项,与野战输血医学密切相关的有16项;其中全血病原体处置占25%(4/16)、血小板输注占25%(4/16)、血浆输注占25%(4/16)、全血输注占18.75(3/16)和其他类型研究占6.25%(1/16)。美国军方注重在血液安全、血液贮存等方面的新技术突破,在抗休克输血输液治疗方面的效果评价,在全血早期输注治疗方面的应用探索和在血液保障技术产品研发方面的军地互动优势。结论基于ClinicalTrials.gov对美国军方野战输血医学的分析,有利于快速了解美国军队野战输血医学的发展现状和趋势。

关键词：野战输血美军动态血液安全血液贮存抗休克输血(液) 军地互动临床试验

影响人外周血单个核细胞4℃保存效果的因素分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验血液学杂志 2022年第6期30卷 1881-1886页

作者：张萱王蕾李东东阎少多刘坤郑义哲祁凤英何子心李艳宏王博付秋霞梁俊天津科技大学轻工科学与工程学院天津300457 军事医学研究院卫生勤务与血液研究所北京100039

目的:分析4℃无血清条件下人外周血单个核细胞保存效果及其相关影响因素。方法:采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,使用不同细胞密度、添加人血清白蛋白、葡萄糖等条件对其进行4℃保存,并检测保存72 h内细胞的存活率、细胞数量... 详细信息

目的:分析4℃无血清条件下人外周血单个核细胞保存效果及其相关影响因素。方法:采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,使用不同细胞密度、添加人血清白蛋白、葡萄糖等条件对其进行4℃保存,并检测保存72 h内细胞的存活率、细胞数量、活细胞数量和细胞表型。结果:随保存时间延长,人外周血单个核细胞数量逐步下降(r=0.982),与(5-6)×10^(6)/ml细胞密度相比较,细胞保存密度为(1-2)×10^(6)/ml时细胞数量下降趋势减缓;添加人血清白蛋白和葡萄糖可有效提升人外周血单个核细胞的存活率,其中,2%人血清白蛋白保存效果更优;淋巴细胞亚群的分析结果表明,相较于对照组,添加人血清白蛋白和葡萄糖后NK细胞和T细胞数量下降趋势明显减缓。结论:(1-2)×10^(6)/ml的细胞密度、2%人血清白蛋白更适合PBMC的保存,5%葡萄糖可提升人外周血单个核细胞的4℃保存效果。

关键词：人外周血单个核细胞细胞4℃保存人血清白蛋白葡萄糖

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

日本小笠原群岛血液供应模式解析与借鉴

军事医学 2018年第11期42卷 804-805,809页

作者：阎少多张玉华雷二庆军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所北京100850

血液特别是红细胞保存时间短且需冷链储运,通常在人口稠密的大城市设立专门机构负责血液的采集与供应,以满足本区域内医院的临床用血需求。远海岛屿等人口稀少地区存在明确的临床用血需求,但一般不会设立采供血机构,血液供需矛盾突出。... 详细信息

血液特别是红细胞保存时间短且需冷链储运,通常在人口稠密的大城市设立专门机构负责血液的采集与供应,以满足本区域内医院的临床用血需求。远海岛屿等人口稀少地区存在明确的临床用血需求,但一般不会设立采供血机构,血液供需矛盾突出。小笠原群岛远离日本本土,日本东京都红十字血液中心为其建立的血液轮替供应模式有效解决了血液供需矛盾,值得解析借鉴。

关键词：岛屿血液轮替供应模式运输