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作者：闻金萱上海海洋大学

学位级别：硕士

鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid Herpesvirus 2,CyHV-2)是双链DNA病毒,主要感染鲫和金鱼引起病毒性造血器官坏死病(Herpes Viral Haematopoietic Necrosis,HVHN),给鲫养殖产业造成了严重的经济损失。DNA病毒基因可根据其表达的时序划分为立即... 详细信息

鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid Herpesvirus 2,CyHV-2)是双链DNA病毒,主要感染鲫和金鱼引起病毒性造血器官坏死病(Herpes Viral Haematopoietic Necrosis,HVHN),给鲫养殖产业造成了严重的经济损失。DNA病毒基因可根据其表达的时序划分为立即早期基因(又称极早期基因,IE),早期基因(E)与晚期基因(L)。立即早期基因在病毒感染的早期表达,调控病毒早期和晚期基因以及相关宿主基因的转录和翻译。在本实验室前期的研究中,利用放线菌酮(CHX)和阿糖胞苷(Ara C)两种药物建立了立即早期基因筛选模型,得到5个立即早期基因(ORF54、ORF121、ORF141、ORF147和ORF155),其中ORF121基因在感染CyHV-2濒死鲫的各个组织中表达量较高,但该基因在CyHV-2感染过程中的功能尚未得知。因此,本研究主要围绕ORF121及其互作的宿主因子开展实验,主要结果如下:1利用酵母双杂交系统筛选鲫蛋白中与ORF121蛋白相互作用的宿主蛋白,并对其结构进行生信分析。为探究ORF121基因的功能,用Mating法筛选与ORF121蛋白互作的鲫蛋白。将pGBKT7-ORF121转化Y2H Gold酵母菌株与转化鲫cDNA文库的Y187酵母菌株共培养,经二缺、三缺、四缺平板筛选后得到5个与ORF121互作的候选蛋白:C-Myc转录调控因子,中心体和纺锤极相关蛋白异构体X4,锌指蛋白518B,Prem RNA加工因子40同源物A,半乳糖凝集素3。生物信息学分析结果显示鲫CMyc存在一段结合DNA序列的BHLH结构域,ORF121的Tyr 68和Gln 127分别与C-Myc的Glu 349和Lys 332结合。2利用Dot-Blot overlay、亚细胞共定位等方法证实ORF121与C-Myc的相互作用。利用siRNA敲降C-Myc,发现C-Myc与CyHV-2复制密切相关。病毒和宿主之间的互作影响病毒的侵染和复制。为探究其机制,在酵母中明确ORF121与C-Myc转录调控因子互作的基础上,用Dot-Blot overlay实验证实二者互作,并用亚细胞共定位实验发现ORF121与C-Myc共同定位于细胞核。为进一步探究C-Myc在病毒感染中起到的具体作用,对C-Myc的功能进行研究。在CyHV-2感染中,ORF121与C-Myc呈同步上调趋势。用siRNA干扰C-Myc基因表达,发现ORF121的表达随之降低,CyHV-2的拷贝数显著降低。综上,推测C-Myc蛋白与ORF121蛋白互作,从而调控CyHV-2的复制。3转录组分析显示PI3K/AKT/mTOR信号通路在CyHV-2感染中显著上调。10058-F4抑制实验表明C-Myc的表达不仅影响CyHV-2基因组的转录,还影响PI3K/AKT/mTOR信号通路基因的表达。雷帕霉素抑制实验表明ORF121与C-Myc互作通过调控mTOR的磷酸化影响PI3K/AKT/mTOR信号通路。为探究ORF121与C-Myc互作通过调控哪些途径影响CyHV-2的复制,首先检测C-Myc在鲫和金鱼各组织中的分布,结果显示C-Myc在鳃组织中表达量最高,约为其他组织的4.5倍。将CyHV-2 SH-01株病毒人工注射鲫和金鱼并与健康的鲫和金鱼一同进行转录组分析。结果发现PI3K/AKT/mTOR信号通路在病毒感染中显著上调,并在感染CyHV-2的GiCF细胞的RT-qPCR实验中证实这一点。CMyc抑制剂10058-F4抑制实验结果显示ORF121在转录和翻译水平均被抑制,其余4个立即早期基因(ORF54、ORF141、ORF147和ORF155),1个早期(ORF24)和1个晚期基因(ORF7)的表达也被抑制,CyHV-2拷贝数降低,PI3K/AKT/mTOR信号通路基因被抑制。mTOR抑制剂雷帕霉素抑制实验结果显示,mTOR磷酸化被抑制后ORF121和C-Myc在转录水平被抑制。CyHV-2的其余4个立即早期基因(ORF54、ORF141、ORF147和ORF155),1个早期(ORF24)和1个晚期基因(ORF7)的表达均被抑制,CyHV-2拷贝数下降。PI3K/AKT/mTOR信号通路部分基因被抑制。综上,本研究揭示了一个新的与CyHV-2立即早期基因ORF121互作的宿主蛋白——C-Myc转录调控因子。C-Myc转录调控因子的表达与CyHV-2复制密切相关。且ORF121与C-Myc互作通过调控mTOR的磷酸化来介导PI3K/AKT/mTOR信号通路,从而影响CyHV-2的复制。本研究发现C-Myc与mTOR可能是两个有效抑制CyHV-2感染的潜在药物靶点,为CyHV-2的防控以及新型环保绿色渔药的研发提供新策略。

关键词： CyHV-2 C-Myc 立即早期基因 ORF121 PI3K/AKT/mTOR

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表没食子儿茶素没食子酸酯衍生物及过硫酸氢钾复合物粉体外抑制Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒的研究

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微生物学报 2023年第4期63卷 1432-1446页

作者：徐伟闻金萱李鹏飞吕利群王浩上海海洋大学国家水生动物病原库上海201306 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306 上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 广西科学院广西南宁530000

【目的】为了将表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG)的2种衍生物和过硫酸氢钾复合物粉(compound potassium peroxymonosulfate powder, KMPS)运用于体外细胞实验中,以评估这3种药物对I型草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus, GCRV)的抑制和杀灭效果。【方法】利用MUSE法和CCK-8法评估表没食子儿茶素没食子酸酯棕榈酸酯(epigallocatechin gallate palmitate,EGCG-P)、乙酰化表没食子儿茶素没食子酸酯(peracetylated epigallocatechin gallate, Ac EGCG)和过硫酸氢钾复合物粉3种药物对细胞的安全浓度,利用体外细胞感染病毒模型,使用不同浓度测试物处理病毒或细胞后感染病毒,通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, q RT-PCR)法分析不同测试物对病毒的抑制和杀灭效果。使用不同浓度测试物处理细胞后,利用q RT-PCR法检测宿主免疫相关基因变化情况。【结果】EGCG-P和Ac EGCG对GCRV-JX01感染细胞的抑制作用呈剂量依赖性,且EGCG-P的抑制效果优于Ac EGCG,EGCG-P浓度为10μg/m L和40μg/m L时病毒量相对于对照组上清中病毒的滴度分别降低了102 copies/μL和103 copies/μL,而Ac EGCG浓度为60μg/m L和120μg/m L时才能达到相同抑制效果。杀灭实验结果表明,EGCG-P、Ac EGCG和KMPS对GCRV-I毒株均有杀灭效果,最低有效杀灭剂量KMPS (5μg/m L)

关键词：草鱼出血病草鱼呼肠孤病毒表没食子儿茶素没食子酸酯棕榈酸酯乙酰化表没食子儿茶素没食子酸酯过硫酸氢钾复合物粉

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实时荧光重组酶聚合酶扩增技术(RPA)快速检测Ⅱ型鲤疱疹病毒

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微生物学通报 2021年第2期48卷 676-685页

作者：闻金萱杨倩玲陈燕孙萌王浩上海海洋大学国家水生动物病原库上海201306 上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306 上海科技大学上海201210

【背景】Ⅱ型鲤疱疹病毒(Cyprinid Herpesvirus 2,CyHV2)感染鲫引起的疱疹病毒性造血器官坏死病(Herpes Viral Haematopoietic Necrosis,HVHN)是鲫养殖业的主要病害,造成严重的经济损失。目前尚无治疗HVHN的有效药物。对CyHV2进行早期... 详细信息

【背景】Ⅱ型鲤疱疹病毒(Cyprinid Herpesvirus 2,CyHV2)感染鲫引起的疱疹病毒性造血器官坏死病(Herpes Viral Haematopoietic Necrosis,HVHN)是鲫养殖业的主要病害,造成严重的经济损失。目前尚无治疗HVHN的有效药物。对CyHV2进行早期监测和有效防控是阻止该病暴发的有效手段。【目的】建立一种针对CyHV2的orf72基因的实时荧光重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)检测方法,并评价其特异性和灵敏度。【方法】通过比较CyHV2五株毒株间orf72核苷酸序列,在保守区设计特异性引物和探针。设置5个反应温度,优化实时荧光RPA反应的条件。在最优的条件下验证实时荧光RPA检测方法在不同水产动物病毒间的特异性。以梯度稀释的CyHV2阳性DNA为模板比较实时荧光RPA与qPCR的灵敏度。【结果】实时荧光RPA能在37.8°C条件下20 min内快速准确地检测CyHV2病毒,而且种间特异性高,与其他病毒无交叉反应,反应灵敏度与qPCR相同。【结论】研究建立的实时荧光RPA可用于CyHV2的现场快速检测,具有一定应用价值。

关键词：实时荧光RPA Ⅱ型鲤疱疹病毒鲫 orf72

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政策视角下转型气候风险对能源企业碳排放效率的影响

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中国软科学 2024年第S1期 118-124页

作者：夏晖陈曦闻月电子科技大学经济与管理学院

基于2015—2021年中国能源行业A股上市公司数据，采用文本分析法构造转型气候风险指标，运用超效率SBM模型计算能源企业碳排放效率并进行实证。结果表明：在能源转型初始阶段，气候转型风险会显著降低企业碳排放效率，而加大企业创新能... 详细信息

基于2015—2021年中国能源行业A股上市公司数据，采用文本分析法构造转型气候风险指标，运用超效率SBM模型计算能源企业碳排放效率并进行实证。结果表明：在能源转型初始阶段，气候转型风险会显著降低企业碳排放效率，而加大企业创新能够缓解气候转型风险对碳排放效率的负面效应；异质性检验表明该效应在电力行业显著而其他行业不显著。研究结论对制订相关环境政策以及能源企业碳减排提供了理论参考。

关键词：气候转型风险碳排放效率文本分析超效率SBM

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《反对本本主义》中的问题导向

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求索 2024年第2期 107-116页

作者：杨振闻中共湖南省委党校(湖南行政学院)哲学教研部湖南长沙410006

《反对本本主义》是“经过一番大斗争后写出来的”,具有鲜明的问题导向。在文章中,毛泽东不但痛批了革命初期出现的一系列具体问题,包括“瞎说一顿”的问题、在困难面前只知道叹气的问题、唯上唯书不唯实的问题等,而且深刻揭示了这些具... 详细信息

《反对本本主义》是“经过一番大斗争后写出来的”,具有鲜明的问题导向。在文章中,毛泽东不但痛批了革命初期出现的一系列具体问题,包括“瞎说一顿”的问题、在困难面前只知道叹气的问题、唯上唯书不唯实的问题等,而且深刻揭示了这些具体问题背后所反映出来的更深层次的问题。在对问题“把脉问诊”之后,毛泽东还提出了问题的解决之道:坚持实事求是,强调没有调查就没有发言权;坚持走群众路线,强调深入群众、依靠群众来解决问题;坚持独立自主,强调中国革命斗争胜利要靠中国同志了解中国情况;四是坚持从斗争中创造新局面,坚持理论和实际相结合,反对主观主义。重温《反对本本主义》,特别是把握其中的问题导向,具有重大现实意义。

关键词：毛泽东《反对本本主义》问题导向调查研究

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后革命的魅影与永恒的革命幽灵——对读电影《夜半歌声》的1937年版与1995年版

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文艺理论与批评 2024年第3期 79-94页

作者：高竞闻北京师范大学文学院

电影《夜半歌声》的两个版本——由马徐维邦导演的1937年版与由张国荣主演的1995年版——对“革命”这一主题的表现迥然相异。电影所依托的小说原著《剧院魅影》及其默片版本隐藏、压抑了法国革命,但在中国的版本中,阶级革命得到凸显与... 详细信息

电影《夜半歌声》的两个版本——由马徐维邦导演的1937年版与由张国荣主演的1995年版——对“革命”这一主题的表现迥然相异。电影所依托的小说原著《剧院魅影》及其默片版本隐藏、压抑了法国革命,但在中国的版本中,阶级革命得到凸显与反转。首先,调用戏中戏的“元剧场”功能:1937年版使用《热血》等曲目将爱情并入革命;1995年版则颇具后革命气质,此版与1937年版中“剧场演讲”一成一败的结局彰显了过往革命的弱点与后革命斗争的变化。其次,影片的视觉核心“毁容脸”,体现出一个面孔或审美的政治化问题。1937年版中,毁容的怪脸蕴含着主体性与深刻的政治潜力;1995年版中,张国荣的明星脸自带“变形”特性,明星与“诸众”的互看,创造了剧场民主秩序与非物质劳动的艺术,半边毁容所保留的记述行为促进了人群的思考和反抗。然而,这也显出魅影“美容”兼具的后革命意味:追捧“美丽怪物”或许意味着诸众的斗争只能得到虚幻的胜利。

关键词：《夜半歌声》《歌剧魅影》革命后革命审美政治化

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保息蕃育：出土文献所见秦汉生育保障初探

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史学月刊 2024年第9期 33-42页

作者：冯闻文江南大学江南文化研究院

秦汉时期的生育保障覆盖从怀孕到生产再到抚育的不同阶段。出土文献中包含了关于秦汉时期生育保障的丰富史料。通过对相关史料的系统梳理可知，国家以法律手段对妊娠期的女性加以保护，给予刑具宽松、判决延期的区别对待。在婴儿出生后... 详细信息

秦汉时期的生育保障覆盖从怀孕到生产再到抚育的不同阶段。出土文献中包含了关于秦汉时期生育保障的丰富史料。通过对相关史料的系统梳理可知，国家以法律手段对妊娠期的女性加以保护，给予刑具宽松、判决延期的区别对待。在婴儿出生后，政府则会要求在八月案户比民之际著录其户籍，为后续的福利发放提供依据。政府给予产子家庭一定时间的赋役免除，以保障亲职的履行。对于多子家庭，生育福利则会随着子女数量的增加而累进。

关键词：出土文献生育福利产妇福利慈幼

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排山楼公司多举措深化设备能源管理

排山楼公司多举措深化设备能源管理

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中国黄金报

作者：金萱

本报讯　今年以来，辽宁排山楼黄金矿业有限责任公司持续在设备能源管理上下功夫，锚定“一利稳定增长、五率持续优化”工作目标，在“稳产量、增储量、控成本、增效益，保安全、防风险”上做文章，全面深化设备能源管理，实现了设备能... 详细信息

本报讯　今年以来，辽宁排山楼黄金矿业有限责任公司持续在设备能源管理上下功夫，锚定“一利稳定增长、五率持续优化”工作目标，在“稳产量、增储量、控成本、增效益，保安全、防风险”上做文章，全面深化设备能源管理，实现了设备能源管理的全面升级，为公司高质量发展注入......

关键词：直购电能源管理排山楼

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产时发热的影响因素

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中华围产医学杂志 2024年第5期27卷 402-405页

作者：安闻生蔺莉北京大学国际医院妇产科北京102206

目的分析产时发热的影响因素。方法回顾性研究2017年5月1日至2020年5月30日于北京大学国际医院产前检查并分娩、产时发热的357例(发热组)及未发热的454例(未发热组)产妇。收集产妇产前和产时临床资料,采用独立样本t检验、Mann-Whitney ... 详细信息

目的分析产时发热的影响因素。方法回顾性研究2017年5月1日至2020年5月30日于北京大学国际医院产前检查并分娩、产时发热的357例(发热组)及未发热的454例(未发热组)产妇。收集产妇产前和产时临床资料,采用独立样本t检验、Mann-Whitney U检验或χ^(2)检验进行组间比较,采用单因素和多因素logistic回归分析,筛选与产时发热相关的危险因素。结果(1)发热组年龄≥35岁和合并贫血的比例低于无发热组[10.9%(39/357)与17.0%(77/454),χ^(2)=5.94,P=0.015;7.3%(26/357)与20.3%(92/454),χ^(2)=27.09,P<0.001],总产程及胎膜破裂至胎儿娩出时间长于无发热组[12.7 h(10.0~16.1 h)与8.0 h(5.4~11.2 h),Z=-6.41;11.0 h(6.2~17.7 h)与3.1 h(1.1~8.2 h),Z=-6.41;P值均<0.001],胎膜早破、实施分娩镇痛、分娩时羊水胎粪污染、合并阴道炎和促宫颈成熟的比例高于无发热组[44.3%(158/357)与22.7%(103/434),χ^(2)=42.60;95.2%(340/357)与53.1%(241/454),χ^(2)=174.79;31.6%(113/357)与15.0%(68/454),χ^(2)=32.05;17.1%(61/357)与7.3%(33/454),χ^(2)=18.93;20.4%(73/357)与6.6%(30/454),χ^(2)=34.53;P值均<0.001]。(2)多因素logistic回归分析显示,胎膜早破(OR=2.052,95%CI:1.172~3.606)、分娩镇痛(OR=5.909,95%CI:3.238~11.42)、总产程(OR=1.231,95%CI:1.169~1.299)、分娩时羊水胎粪污染(OR=1.963,95%CI:1.267~3.066)、合并阴道炎(OR=3.587,95%CI:1.943~6.847)、促宫颈成熟(OR=3.947,95%CI:2.243~7.170)和胎膜破裂至胎儿娩出时间(OR=1.045,95%CI:1.012~1.081)是产时发热的独立危险因素(P值均<0.05)。合并贫血(OR=0.358,95%CI:0.192~0.647,P<0.05)可能是产时发热的保护因素。(3)胎膜早破(OR=2.138,95%CI:1.189~3.865)、总产程延长(OR=1.240,95%CI:1.174~1.315)、合并阴道炎(OR=3.353,95%CI:1.719~6.926)、胎膜破裂至胎儿娩出时间延长(OR=1.047,95%CI:1.013~1.085)、分娩时羊水胎粪污染(OR=2.154,95%CI:1.357~3.466)和促宫颈成熟(OR=3.880,95%CI:2.136~7.363)是接受分娩镇痛的产妇发生产时发热的危险因素(P值均<0.05)。结论产时发热的影响因素包括胎膜早破、分娩镇痛、总产程、分娩时羊水胎粪污染、合并阴道炎、促宫颈成熟、胎膜破裂至胎儿娩出时间和合并贫血等。临床医师应加强产妇体温的监测和对产程的管理,关注产时发热的影响因素,尤其应加强对促宫颈成熟、分娩镇痛、胎膜破裂后的产程管理,减少产时发热,改善母婴结局。

关键词：分娩并发症发热镇痛,产科胎膜早破危险因素病例对照研究

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北宋前期的取士政策与文臣群体转型

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山东社会科学 2024年第7期 123-133页

作者：闻轩轩河南师范大学历史文化学院

伴随着政治形势和统治思想的转变,北宋前期取士政策先后经过多次调整。宋太祖采取重吏道和用吏治之臣的统治策略,形成文吏主政的政治局面。宋太宗则大兴科举,重用文学之士,使得朝中臣僚逐渐从文吏转变为文士;其对举子和官吏习法明法的提... 详细信息

伴随着政治形势和统治思想的转变,北宋前期取士政策先后经过多次调整。宋太祖采取重吏道和用吏治之臣的统治策略,形成文吏主政的政治局面。宋太宗则大兴科举,重用文学之士,使得朝中臣僚逐渐从文吏转变为文士;其对举子和官吏习法明法的提倡,促使科举出身的文士兼具吏能。然而在诗赋取士下,宋廷面临着“文士虽多,通经者甚少”的问题,臣僚反对诗赋取士的呼声不断高涨。针对这一情况,宋真宗先是规定“策问宜用经义,参之时务”,又推行“兼考策论”的取士政策,于是到宋仁宗天圣、明道年间,进士阶层不仅兼善文学、吏能,还具备一定的经学素养。文臣群体的身份转型,为宋代士大夫政治的建立奠定了基础。

关键词：北宋前期文臣群体取士政策士大夫

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