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主动外排系统介导细菌多重耐药的研究进展

现代预防医学 2014年第1期41卷 118-121页

作者：姚明晓苑广盈闻新棉泰山医学院病原生物学教研室济南市第四人民医院检验科

近年来,细菌的多重耐药性越来越高,主动外排系统是细菌产生多重耐药的主要原因,本文综述了目前已知的五种导致细菌多重耐药的主动外排系统,即耐药结节细胞分化超家族(Resistance Nodulation cell Division family,RND),主要易化子超家族... 详细信息

近年来,细菌的多重耐药性越来越高,主动外排系统是细菌产生多重耐药的主要原因,本文综述了目前已知的五种导致细菌多重耐药的主动外排系统,即耐药结节细胞分化超家族(Resistance Nodulation cell Division family,RND),主要易化子超家族(Major Facilitator Superfamily,MFS),小多重耐药家族(Small Multidrug Resistance family,SMR),多药和毒性化合物外排家族(Multidrug And Toxic compound Extrusion family,MATE)和ATP耦联盒家族(ATP binding cassette,ABC)。

关键词：主动外排系统细菌多重耐药

KLK4 mRNA实时荧光定量检测方法研究

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山东医药 2007年第11期47卷 59-60页

作者：于晶胡成进闻新棉山东医学高等专科学校山东济南250002 济南军区总医院济南市第四人民医院

应用SYBR Green I作荧光染料,利用磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作内对照,建立KLK4 mRNA的实时荧光定量(FQ-PCR)检测方法。结果建立的FQ-PCR方法扩增GAPDH和KLK4 mRNA的效率分别为0.98和0.96;检测GAPDH和KLK4的批内变异系数(CV)分别为0.8%和1... 详细信息

应用SYBR Green I作荧光染料,利用磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作内对照,建立KLK4 mRNA的实时荧光定量(FQ-PCR)检测方法。结果建立的FQ-PCR方法扩增GAPDH和KLK4 mRNA的效率分别为0.98和0.96;检测GAPDH和KLK4的批内变异系数(CV)分别为0.8%和1.6%,批间CV分别为3.9%和2.4%;基因扩增产物DNA序列分析及熔解曲线分析表明该方法特异可靠。认为本研究建立的FQ-PCR检测方法简便、特异、重复性好、可信度高,可为KLK4基因表达水平的研究提供基础。

关键词：实时荧光定量 PCR KLK4 基因表达

自身免疫病患者增殖诱导配体基因mRNA表达水平的研究

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临床检验杂志 2006年第4期24卷 299-301页

作者：王燕闻新棉窦恒利仲人前中国人民解放军第二军医大学长征医院临床免疫中心上海200003 济南市立四院检验科济南市立四院外三科

目的建立检测增殖诱导配体（a proliferation—inducing ligand，APRIL）mRNA的SYBRGreenⅠ实时定量PCR方法，了解系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿性关节炎（RA）等自身免疫病患者外周血单个核细胞（PBMC）中APRIL的表达水平及其与自身... 详细信息

目的建立检测增殖诱导配体（a proliferation—inducing ligand，APRIL）mRNA的SYBRGreenⅠ实时定量PCR方法，了解系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿性关节炎（RA）等自身免疫病患者外周血单个核细胞（PBMC）中APRIL的表达水平及其与自身免疫性疾病发病机制、预后之间的关系。方法构建克隆载体pGEM—TEasy—APRIL作为定量模板，定量检测58例自身免疫病（SLE、RA）确诊病人和20例健康献血者的外周血APRIL mRNA表达量，以APRIL mRNA和内参GAPDH mRNA表达量的比值作为APRIL表达水平的指标。结果自身免疫病患者的APRIL mRNA表达范围3．95～192．0，均值为29．68±4．5。20例正常对照者APRIL mRNA的表达范围3．1-18．7，均值为10．56±2．0。自身免疫病患者APRIL mRNA的表达水平高于正常对照组；久治不愈或疗效差者APRIL mRNA表达水平显著高于初发患者及治疗后缓解患者，但后两组差异无显著性意义。结论自身免疫性疾病（SLE、RA）患者的APRIL mRNA表达水平升高，疗效差、久治不愈患者表达水平更高。

关键词：增殖诱导配体自身免疫病 SYBR Green Ⅰ荧光染料

人组织型Kallikreins基因家族研究进展

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山东医药 2005年第8期45卷 72-73页

作者：于晶闻新棉胡成进山东大学医学院山东师范大学山东省卫生学校

人组织型Kallikreins基因(下称Kallikreins)是由15个编码丝氨酸蛋白酶的基因组成的家族,1986年Watt等从精液中纯化出前列腺特异性抗原(PSA、hK3),1987年Landwall和Lilja报道了几乎完整的PSA酶原前体(Prepro-PSA)序列;接着Schedlich分离到hK2的基因组DNA.至此认为该基因家族由三个成员组成,分别命名为KLK1(编码胰/肾Kallikrein)、KLK2(编码人腺体Kallikrein2)及KLK3(编码前列腺特异性抗原)[1].

关键词：人组织型Kallikreins基因丝氨酸蛋白酶肿瘤中枢神经系统血管增生

一株携带blaCTX-M-15不发酵乳糖致病性大肠埃希菌026：K60的检测及临床分析

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中华检验医学杂志 2013年第5期36卷 452-454页

作者：边锋芝闻新棉苑广盈孙玉国郑秀峰江超济南市第四人民医院检验科 250031

在发展中国家，致病性大肠埃希菌是引起婴幼儿细菌性腹泻的主要病原菌。2010年10月笔者从济南市第四人民医院一腹泻患儿大便中分离到一株携带blaCTX-M-15舶致病性大肠埃希菌026：K60，且此菌株不发酵乳糖，比较罕见，现报告如下。

关键词：致病性大肠埃希菌026 不发酵乳糖临床分析细菌性腹泻检测发展中国家病原菌婴幼儿

KLK6 mRNA在乳腺癌中的表达及其临床病理和生物学意义

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解放军医学杂志 2007年第10期32卷 1085-1087页

作者：胡成进陈英剑闻新棉孙晓明杨道理济南军区总医院实验诊断科济南250031

目的对正常乳腺组织和癌组织KLK6 mRNA进行定量,分析其表达与临床病理特征的关系,并探讨乳腺癌细胞株MCF-7中KLK6基因被沉默后细胞增殖及凋亡的变化。方法应用实时荧光定量PCR检测48例乳腺癌切除组织中KLK6基因mRNA的表达量,并分析KLK6 ... 详细信息

目的对正常乳腺组织和癌组织KLK6 mRNA进行定量,分析其表达与临床病理特征的关系,并探讨乳腺癌细胞株MCF-7中KLK6基因被沉默后细胞增殖及凋亡的变化。方法应用实时荧光定量PCR检测48例乳腺癌切除组织中KLK6基因mRNA的表达量,并分析KLK6 mRNA的表达量与ER、PR及肿瘤转移情况的相关性。以体外化学合成的siRNA干扰乳腺癌细胞株MCF-7中KLK6基因的表达,分析细胞周期、细胞凋亡及细胞形态的变化。结果KLK6 mRNA在73%(35/48)的乳腺癌组织中表达水平增高,明显高于正常组织(P0.05);与乳腺癌相关基因CerbB-2的表达无相关性(P>0.05)。MCF-7细胞中KLK6基因表达沉默后,S期细胞增加13.23%,细胞凋亡无明显变化。结论KLK6 mRNA在乳腺癌组织表达增高,并与ER状态及肿瘤转移情况有关。体外MCF-7细胞株和体内移植瘤KLK6基因表达沉默后肿瘤细胞生长加快。提示KLK6基因表达受雌激素下调的影响,是促乳腺癌细胞增殖的抑制因子,从而为乳腺癌的防治提供了新思路。

关键词：乳腺肿瘤 KLK6 荧光定量PCR siRNA

乳腺癌组织KLK7mRNA的表达及其与临床病理特征的关系

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中国实验诊断学 2009年第4期13卷 475-477页

作者：孙晓明陈英剑胡成进闻新棉济南军区总医院实验诊断科山东济南250031

目的建立人KLK7 mRNA荧光定量检测方法,对正常乳腺组织和癌组织KLK7 mRNA进行定量,分析其表达与部分临床病理特征的关系,探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR检测48例乳腺癌切除的组织中KLK7基因mRNA的表达量,并分析KLK7 mRNA的表... 详细信息

目的建立人KLK7 mRNA荧光定量检测方法,对正常乳腺组织和癌组织KLK7 mRNA进行定量,分析其表达与部分临床病理特征的关系,探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR检测48例乳腺癌切除的组织中KLK7基因mRNA的表达量,并分析KLK7 mRNA的表达量与年龄、TNM分期、组织学类型、淋巴结转移、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)等临床病理特征的关系。结果KLK7 mRNA在乳腺正常组织相对表达水平为0.091±0.139,在乳腺癌组织中的相对表达水平为0.107±0.122,无统计学意义(P>0.05)。但KLK7 mRNA在有淋巴结转移的患者乳腺癌组织中的表达水平高于未转移组(P0.05)。结论乳腺癌组织KLK7 mRNA表达与TNM分期、ER状态及肿瘤转移情况有关。

关键词：乳腺肿瘤 Kallikrein 7 荧光定量PCR

实时荧光定量PCR检测乳腺癌组织中KLK4 mRNA表达

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临床检验杂志 2007年第5期25卷 354-356页

作者：闻新棉于晶胡成进陈英剑济南市第四人民医院检验科济南250031 山东医学高等专科学校济南军区总医院实验诊断科

目的探讨KLK4基因在人乳腺癌组织中表达的临床意义。方法用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)的方法检测39例乳腺癌组织和25例正常组织中KLK4 mRNA的表达,以及mRNA表达量与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、CerbB-2及肿瘤的转移情况进行相关性分... 详细信息

目的探讨KLK4基因在人乳腺癌组织中表达的临床意义。方法用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)的方法检测39例乳腺癌组织和25例正常组织中KLK4 mRNA的表达,以及mRNA表达量与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、CerbB-2及肿瘤的转移情况进行相关性分析。结果正常乳腺组织和癌组织KLK4 mRNA的相对表达水平分别为0.0120±0.0044和0.0272±0.0067,两者差异显著(P0.05)。结论在乳腺癌组织中KLK4 mRNA的表达水平显著高于正常乳腺组织,但在肿瘤是否转移,雌激素受体、孕激素受体及CerbB-2阳性和阴性组间无显著性差异。

关键词：乳腺癌 KLK4 mRNA 实时荧光定量PCR

乳腺癌klk6基因表达的实时荧光定量法的建立及初步应用

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中华检验医学杂志 2005年第6期28卷 610-612页

作者：胡成进沈茜陈英剑闻新棉上海第二军医大学长海医院实验诊断科 200433 济南军区总医院实验诊断科山东大学生命科学院

目的建立人乳腺癌相关基因组织型激肽释放酶基因家族成员Kallikrein6(klk6)mRNA荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQPCR)检测方法,以检测正常乳腺和乳腺癌组织中klk6基因表达水平。方法以GAPDH作参照,用SYBRGreenI荧光定量技术,建立检测klk6m... 详细信息

目的建立人乳腺癌相关基因组织型激肽释放酶基因家族成员Kallikrein6(klk6)mRNA荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQPCR)检测方法,以检测正常乳腺和乳腺癌组织中klk6基因表达水平。方法以GAPDH作参照,用SYBRGreenI荧光定量技术,建立检测klk6mRNA的FQPCR方法;并检测32份正常乳腺和乳腺癌组织标本的循环阈值(Ct),然后,通过REST软件分析klk6mRNA的表达水平。结果FQPCR方法对GAPDH和klk6mRNA的扩增效率分别为0.90和0.95,批内变异系数(CV)分别为1.0%～2.1%和0.8%～1.2%,批间CV分别为3.2%和3.9%。正常乳腺和乳腺癌组织的klk6对GAPDH的相对表达量分别为0.017±0.009和0.040±0.017。用REST软件分析,提示乳腺癌组织klk6表达水平上调。结论建立的klk6mRNAFQPCR检测方法简便,特异,重复性好,可信度高,可用于klk6基因表达水平与肿瘤相关性研究。

关键词：实时荧光定量法荧光定量逆转录聚合酶链反应初步应用变异系数(CV) 基因表达水平乳腺癌组织 GAPDH 乳腺癌相关基因 Q-PCR方法 PCR检测方法 mRNA 正常乳腺荧光定量技术软件分析 Green 癌组织标本相关性研究家族成员