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作者：闵笑颜南京医科大学

学位级别：硕士

背景：热休克蛋白27（heat shock protein 27，Hsp27），属于小分子热休克蛋白家族，已经发现Hsp27高表达可显著抑制小鼠心肌缺血／再灌注损伤，我们前期研究也发现，Hsp27对Doxorubicin诱导的小鼠心功能不全也有良好的保护作用。内毒... 详细信息

背景：热休克蛋白27（heat shock protein 27，Hsp27），属于小分子热休克蛋白家族，已经发现Hsp27高表达可显著抑制小鼠心肌缺血／再灌注损伤，我们前期研究也发现，Hsp27对Doxorubicin诱导的小鼠心功能不全也有良好的保护作用。内毒素诱导的心功能不全，是脓毒血症／脓毒症休克的一个重要致死因素，Hsp27是否对其具有保护作用，目前尚不清楚。目的：构建LPS诱导小鼠心功能不全模型，观察Hsp27对LPS诱导小鼠心功能不全的影响，并对其机制进行初步探讨。方法：1．将8周龄雄性C57BL／6J小鼠随机分为LPS处理组（腹腔注射LPS 10mg／kg）和生理盐水对照组，于处理后5min、10min、30min、1h、2h、6h、12h、24h各时间点（n=3）收集小鼠心脏，免疫印迹检测心肌TLR4依赖性通路各分子靶点的激活水平。2．8周龄Hsp27转基因小鼠（TG鼠）及其同窝野生型对照小鼠（WT鼠），于基础状态及LPS（10mg／kg）注射后6h、24h分别进行心功能测定。3．8周龄TG鼠及WT鼠分别给予腹腔注射LPS（10mg／kg）或等体积无菌生理盐水作为对照，于注射后24h收集心脏用于免疫印迹检测TLR4信号通路。4．对Hsp27稳定高表达H9c2大鼠心肌细胞（pEGFP-C3／Hsp27）和空载体稳定转染的大鼠心肌细胞（pEGFP-C3），采用LPS（100ng／ml）分别培养15min、30min、1h、2h后，收集细胞，同时将未加入LPS刺激的细胞作为空白对照。提取蛋白检测IκB的激活。对H9c2大鼠心肌细胞株瞬时转染NFκB-luc质粒、pEGFP-C3或pEGFP-C3／Hsp27质粒，采用LPS（100ng／ml）分别培养2h、4h、24h后收集细胞，同时将未加入LPS刺激的细胞作为空白对照，进行NF-κB报告基因的检测。结果：1．LPS刺激后，C57BL／6J小鼠心肌中TLR4通路被激活在心肌细胞中，小鼠腹腔注射LPS后各时间点，TLR4表达未见显著性变化。与对照组比较，LPS注射后5min，MyD88表达开始上调，但差异无统计学意义（P＞0.05），10min进一步上调（P＜0.05），2h达到高峰（P＜0.05），其后开始逐渐下降，略高于正常水平（P＞0.05）。IκB于注射5min后表达显著下降（P＜0.05），1h达最低点（P＜0005），其后开始逐渐恢复，6h后至基础水平并略有上升。2．Hsp27高表达逆转了LPS诱导的心功能不全与基础状态相比，LPS注射6h后，TG鼠较WT鼠HR、CO、SV、EF与FS等均减少了下降幅度（P＜0.05），分别为373.554±25.068 vs．457.159±15.125，0.271±0.038 vs．0.383±0.032，0.043±0.004 Vs．0.049±0.004，37.555±4.961 vs．47.419±4.706，15.394±2.384 vs．20.337±2.509，24h WT鼠HR、CO、SV等均进一步下降（P＜0.05），而TG鼠有所恢复（P＜0.05），分别为303.069±8.590vs．403.206±14.645，0.193±0.019 vs．0.350+0.028，0.038+0.003 vs．0.054±0.004。EF与FS在24h均有恢复（P＜0.05），TG鼠恢复优于WT鼠（P＜0.05），分别为46.272±2.254 vs．58.918±2.624，19.4204±1.214 vs．26.622±1.638。LVIDs、ESV在LPS处理6h后稍增加（P＜0.05），3.049±0.160 vs．2.784±0.141，0.076±0.011 vs．0.058±0.008，24h渐恢复至正常水平。AV VTI、PV VTI在LPS处理6h后均降低（P＜0.05），分别为11.158±1.398 vs．21.400±3.894，23.451±2.549 vs．34.229±1.567，24h有所恢复（P＜0.05），为13.581±1.714 vs．23.995±1.434，23.449±2.205 vs．32.959±1.426，两组间均有显著性差异（P＜0.05）。3．Hsp27抑制了心肌TLR4信号通路的激活LPS注射24h后Iκ3蛋白水平降低（P＜0.05），提示其出现降解，同时TLR4、MyD88表达显著增加（P＜0.05），提示TLR4通路被激活，而TG组TLR4、MyD88的激活显著低于WT组（P＜0.05），IκB的磷酸化降解少于WT组（P＜0.05）。4．大鼠心肌细胞中Hsp27抑制LPS诱导NF-κB激活在稳定转染的大鼠心肌细胞中，LPS处理后30min起IκB即降解（P＜0.05），且pEGFP-C3及pE

关键词：热休克蛋白27 内毒素血症心功能不全 TLR4/NF-κB信号通路

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25-羟维生素D与老年高血压自主神经功能的相关性研究

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实用老年医学 2020年第12期34卷 1287-1289页

作者：姜苏蓉吴军王森闵笑颜洪牮南京医科大学第一附属医院(江苏省人民医院)老年心血管科江苏省南京市210029

目前,随着全球范围内人口普遍老龄化,老年病人已成为高血压的主要患病人群。与中青年病人相比,相似程度的血压升高,老年人发生心脑血管事件的危险显著升高。因此,对老年高血压的诊疗愈来愈引起人们的重视[1-2]。在高血压的诸多致病因素... 详细信息

目前,随着全球范围内人口普遍老龄化,老年病人已成为高血压的主要患病人群。与中青年病人相比,相似程度的血压升高,老年人发生心脑血管事件的危险显著升高。因此,对老年高血压的诊疗愈来愈引起人们的重视[1-2]。在高血压的诸多致病因素中,现已证实自主神经系统在高血压的形成和血压调节中起重要作用,也可参与和促进高血压靶器官损害的发生与发展[3]。心率变异性(heart rate variability,HRV)是一种无创、间接检测心脏自主神经系统功能的手段。HRV即心率快慢的差异性,反映了自主神经对心脏的调节情况,是交感-副交感神经张力及其平衡的重要标志,而且低HRV是心血管疾病的预测因子[4]。

关键词：老年高血压交感神经张力自主神经功能心脑血管事件自主神经系统患病人群老年病人心率变异性

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糖肽类抗生素治疗老年患者球菌感染的疗效和肾毒性观察

糖肽类抗生素治疗老年患者球菌感染的疗效和肾毒性观察

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第三届重症医学大会

作者：闵笑颜周静周苏明周莉南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院老年医学科新疆阜康准东职工医院急诊科

目的评价万古霉素和替考拉宁治疗老年患者球菌感染的疗效和肾毒性,为临床用药提供参考。方法选择66例应用万古霉素或替考拉宁治疗球菌感染的老年患者,观察用药后两种抗生素的临床疗效、致病

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老年冠心病患者生存影响因素分析

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南京医科大学学报（自然科学版） 2022年第4期42卷 491-497页

作者：刘欢张晓宇王向明卢妙查志敏闵笑颜庞斯斯李秋爽郭妍南京医科大学第一附属医院老年心血管科江苏南京210029

目的:分析老年冠心病患者生存的影响因素。方法:收集140例老年冠心病患者的相关资料,平均随访3.5年。探讨患者发生主要不良心脑血管事件(major adverse cardiac and cerebral events,MACCE)的影响因素,进一步分析各影响因素对MACCE的预... 详细信息

目的:分析老年冠心病患者生存的影响因素。方法:收集140例老年冠心病患者的相关资料,平均随访3.5年。探讨患者发生主要不良心脑血管事件(major adverse cardiac and cerebral events,MACCE)的影响因素,进一步分析各影响因素对MACCE的预测价值。结果:根据MACCE组与无MACCE组临床资料比较、Cox回归分析及Kaplan-Meier曲线分析结果,尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、左房内径(left atrial diameter,LAD)、心脏瓣膜钙化(cardiac valve calcification,CVC)是老年冠心病患者发生MACCE的相关影响因素。未发现1,25羟维生素D3水平与MACCE的发生相关。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线显示,联合BUN、TC、LAD、CVC预测MACCE的价值最大。结论:BUN、TC、LAD、CVC是老年冠心病患者发生MACCE的重要影响因素,而未发现1,25羟维生素D3水平与MACCE的发生相关。

关键词：老年人冠心病主要不良心脑血管事件预后

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热休克蛋白27改善实验性小鼠心力衰竭的机制研究

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中华心血管病杂志 2008年第11期36卷 1021-1026页

作者：刘莉张小进钱波闵笑颜程蕴琳南京医科大学第一附属医院老年医学科 210029

目的探讨热休克蛋白27（Hsp27）改善实验性小鼠心力衰竭的机制。方法（1）心肌损伤诱导：Hsp27转基因鼠（TG）和作为对照组的野生型鼠（WT），分别腹腔注射阿霉素（25mg／kg）或生理盐水。（2）组织学检查：给药后第3天，取心脏石蜡切片... 详细信息

目的探讨热休克蛋白27（Hsp27）改善实验性小鼠心力衰竭的机制。方法（1）心肌损伤诱导：Hsp27转基因鼠（TG）和作为对照组的野生型鼠（WT），分别腹腔注射阿霉素（25mg／kg）或生理盐水。（2）组织学检查：给药后第3天，取心脏石蜡切片并HE染色。在石蜡切片上进行细胞凋亡（TUNEL染色）、心肌细胞、细胞核的三重荧光染色，激光共聚焦显微镜观察。小鼠死亡后，观察胸腔、腹腔有无积液，取心和肺进行石蜡切片和HE染色。（3）线粒体超微结构：给药后第3天，取左心室肌制超薄切片，在电镜下观察。（4）蛋白质氧化修饰测定：给药后第3天取心脏，进行抗DNP免疫印迹分析。结果尸检结果：死亡小鼠均出现明显的胸腔积液和腹腔积液，肺泡中出现红细胞渗出和肺泡塌陷，WT和TG鼠心肌细胞空泡变性，WT鼠心肌出现纤维化，而TG鼠心肌没有相应变化。阿霉素给药后第3天：WT和TG鼠心肌细胞凋亡都显著增加，但与WT鼠心肌相比，TG鼠的心肌细胞凋亡则被显著抑制；WT和TG鼠心肌的羰基化显著增加，但与阿霉素-WT鼠心肌相比较，阿霉素-TG鼠心肌的羰基化反应被显著抑制；WT和TG鼠心肌细胞中出现了几种线粒体的结构改变如电子密度增加，嵴肿胀、模糊和消失，但这些改变在WT鼠心肌中要比TG鼠中严重。结论线粒体相关的氧化应激和细胞凋亡可能参与了Hsp27对阿霉素诱导心力衰竭的保护作用。

关键词：热休克蛋白质类线粒体,心脏阿霉素心力衰竭,充血性

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急性冠脉综合征患者血清血小板衍生生长因子表达的临床研究

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中国心血管病研究 2018年第2期16卷 131-135,I0001页

作者：庞斯斯闵笑颜周传伟王向明南京医科大学第一附属医院老年心血管科

目的探讨急性冠脉综合征患者外周血及冠状动脉局部血清血小板衍生生长因子（PDGF）浓度与冠状动脉疾病严重程度的关系.方法纳入2012年9月至2013年12月在南京医科大学第一附属医院心血管科行冠状动脉造影的急性冠脉综合征患者,并纳入... 详细信息

目的探讨急性冠脉综合征患者外周血及冠状动脉局部血清血小板衍生生长因子（PDGF）浓度与冠状动脉疾病严重程度的关系.方法纳入2012年9月至2013年12月在南京医科大学第一附属医院心血管科行冠状动脉造影的急性冠脉综合征患者,并纳入同期因胸痛住院行冠状动脉造影且冠脉未见狭窄者为对照组.收集各组患者临床资料,计算SYNTAX积分,通过ELSIA方法测定患者外周血及冠状动脉局部血清PDGF浓度;分析非冠心病组与冠心病ACS组、ACS患者不同亚组间血清PDGF浓度的差异,利用Pear-son相关性分析血清PDGF浓度与SYNTAX积分的相关性.结果与对照组比较,冠心病ACS组外周血PDGF浓度显著升高[（723.29±679.53）pg/ml比（369.12.0±292.39）pg/ml,P〈0.05];冠心病ACS组中AMI组外周血PDGF浓度较UAP组显著升高[（758.36±714.56）pg/ml比（614.11 ±600.39）pg/ml,P〈0.05].ACS患者冠状动脉局部PDGF浓度较外周血PDGF浓度显著升高[（911.89±735.41）pg/ml比（723.29±679.53）pg/ml,P〈0.01].Pearson相关分析显示,外周血PDGF浓度与冠脉狭窄程度（SYNTAX评分）呈正相关关系（r=0.233,P〈0.05）.随着血清PDGF浓度的升高,平均SYNTAX积分逐步升高,高浓度组SYNTAX积分高于低PDGF浓度组.结论急性冠脉综合征患者血清PDGF浓度显著升高,尤其在冠状动脉局部PDGF呈现浓聚.血清PDGF浓度可反映冠状动脉病变的严重程度.

关键词：急性冠脉综合征血小板衍生生长因子 SYNTAX积分

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热休克蛋白27对小鼠实验性心力衰竭的保护作用

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中华心血管病杂志 2007年第7期35卷 595-598页

作者：刘莉张小进钱波闵笑颜程蕴琳南京医科大学第一附属医院老年医学科 210029

目的观察热休克蛋白27(Hsp27)心肌特异性高表达对 doxorubicin(Dox)诱导的慢性心力衰竭(心衰)小鼠的影响。方法 (1)建立心肌特异性高表达 Hsp27的转基因鼠模型;(2)经 Dox诱导小鼠的慢性心衰,并观察 Hsp27对小鼠生存率、左心室血流动力... 详细信息

目的观察热休克蛋白27(Hsp27)心肌特异性高表达对 doxorubicin(Dox)诱导的慢性心力衰竭(心衰)小鼠的影响。方法 (1)建立心肌特异性高表达 Hsp27的转基因鼠模型;(2)经 Dox诱导小鼠的慢性心衰,并观察 Hsp27对小鼠生存率、左心室血流动力学的影响。结果 (1)成功建立心肌特异性过表达 Hsp27的转基因鼠模型;(2)Hsp27心肌特异性过表达显著改善了 Dox 诱导的小鼠死亡率(P<0.01)和左心室血流动力学参数变化(P<0.05或 P<0.01);(3)Hsp27表达显著抑制了Dox 诱导的心肌氧化应激。结论 Hsp27心肌特异性过表达对 Dox 诱导的小鼠心衰具有显著的抑制作用。

关键词：心力衰竭充血性热休克蛋白质类血液动力学存活率

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心肌特异性高表达Hsp27对阿霉素所致小鼠心力衰竭的保护作用

心肌特异性高表达Hsp27对阿霉素所致小鼠心力衰竭的保护作用

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第七届海峡两岸心血管科学研讨会

作者：刘莉钱波闵笑颜张小进程蕴琳南京医科大学第一附属医院老年医学科

＜正＞背景:氧化应激及其引起的心肌细胞凋亡在充血性心力衰竭（congestive heart failure,CHF）发生发展中有十分重要的作用。我们曾报道热休克蛋白27（Heat shock protein 27,Hsp27）对体外培养大鼠心肌细胞的氧化应激性损伤、细胞凋...

＜正＞背景:氧化应激及其引起的心肌细胞凋亡在充血性心力衰竭（congestive heart failure,CHF）发生发展中有十分重要的作用。我们曾报道热休克蛋白27（Heat shock protein 27,Hsp27）对体外培养大鼠心肌细胞的氧化应激性损伤、细胞凋亡有显著抑制作用,但还不清楚Hsp27能否通过抑制氧化应激和细胞凋亡而改善心力衰竭。目的:阐明Hsp27高表达对阿霉素所致心力衰竭的影响。方法和结果心肌特异性高表达Hsp27转基因鼠（TG）和一窝所生野生型对照小鼠（WT）被腹腔注射阿霉素（25 mg/kg,IP）诱导CHF。5 d后与WT比较,TG鼠心功能不全程度显著被减轻、生存率显著提高、心脏重量丢失也显著被抑制。同时,阿霉素诱导的心肌组织活性氧自由基生成、蛋白质羰基化修饰、心肌细胞凋亡、线粒体形态学异常改变在WT鼠中非常明显,但与之相比,这些改变在TG鼠中得到显著改善。不仅如此,与WT比较,TG鼠心肌组织中热休克蛋白70和热休克蛋白32表达水平均显著上调。结论:上述结果提示,Hsp27可增加小鼠对阿霉素所致充血性心力衰竭的耐受性。

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热休克蛋白27对阿霉素诱导心力衰竭的抑制作用及其机制研究

热休克蛋白27对阿霉素诱导心力衰竭的抑制作用及其机制研究

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中华医学会第八次全国老年医学学术会议

作者：刘莉张小进钱波闵笑颜程蕴琳南京医科大学第一附属医院/江苏省人民医院老年医学科

目的：充血性心力衰竭是老年人常见的心血管疾病。本研究观察 Hsp27心肌特异性高表达对 doxoru- bicin 诱导的充血性心力衰竭的影响。方法：(1)建立心肌特异性高表达 Hsp27的转基因鼠模型;(2) doxorubicin 诱导的充血性心力衰竭,并观察 ...

目的：充血性心力衰竭是老年人常见的心血管疾病。本研究观察 Hsp27心肌特异性高表达对 doxoru- bicin 诱导的充血性心力衰竭的影响。方法：(1)建立心肌特异性高表达 Hsp27的转基因鼠模型;(2) doxorubicin 诱导的充血性心力衰竭,并观察 Hsp27对小鼠生存率、左心室血流动力学(LVSP,HR,+ dp/dt 和 dp/dt)的影响。结果：(1)成功建立心肌特异性过表达 Hsp27的转基因鼠模型;(2)Hsp27心肌特异性过表达显著改善了 doxorubicin 诱导的小鼠死亡率(P＜0．001)和左心室血流动力学参数变化 (P＜0．05或 P＜0．01);(3)Hsp27表达显著抑制了 doxorubicin 诱导的心肌细胞凋亡。结论：Hsp27心肌特异性过表达对 doxorubicin 诱导的小鼠心力衰竭具有显著的抑制作用。

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热休克蛋白27对心肌缺血再灌注损伤的抑制作用

热休克蛋白27对心肌缺血再灌注损伤的抑制作用

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中华医学会第八次全国老年医学学术会议

作者：刘莉张小进钱波闵笑颜程蕴林南京医科大学第一附属医院/江苏省人民医院老年医学科

背景和目的：各种原因诱导的心肌缺血再灌注损伤在老年人群中的发病率居高不下,寻找缓解和治疗的途径成为研究热点。热休克蛋白27在抗氧化应激性损伤、抑制细胞凋亡、抑制阿霉素诱导小鼠充血性心力衰竭中的保护作用,已经被证实。但热休...

背景和目的：各种原因诱导的心肌缺血再灌注损伤在老年人群中的发病率居高不下,寻找缓解和治疗的途径成为研究热点。热休克蛋白27在抗氧化应激性损伤、抑制细胞凋亡、抑制阿霉素诱导小鼠充血性心力衰竭中的保护作用,已经被证实。但热休克蛋白27对心肌缺血再灌注损伤是否具有保护作用,目前还不清楚。本研究将观察热休克蛋白27对小鼠心肌缺血在关注损伤的保护作用。方法：成年

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