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Thermobifida fusca内切β-1，4-葡聚糖酶的克隆表达及应用研究

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Thermobifida fusca内切β-1，4-葡聚糖酶的克隆表达及应用研究

作者：闫鹏安江南大学

学位级别：硕士

内切β-1,4-葡聚糖酶(EC3.***.1.4)，又名内切纤维素酶，是纤维素酶系中的重要组成部分，能随机水解纤维素的β-1,4-葡萄糖苷键，产生纤维低聚糖，目前广泛应用于饲料、食品、纺织和洗涤等工业。此外，内切纤维素酶可以非专一性水解壳聚... 详细信息

内切β-1,4-葡聚糖酶(EC3.***.1.4)，又名内切纤维素酶，是纤维素酶系中的重要组成部分，能随机水解纤维素的β-1,4-葡萄糖苷键，产生纤维低聚糖，目前广泛应用于饲料、食品、纺织和洗涤等工业。此外，内切纤维素酶可以非专一性水解壳聚糖，生成功能性低聚糖——壳寡糖(Chitosan oligosaccharides, COS)。本研究主要对Thermobifida fusca内切β-1,4-葡聚糖酶Cel5A进行克隆，并在大肠杆菌宿主中表达，研究了重组酶的酶学性质，并利用重组酶进行壳寡糖的制备。主要研究结果如下： (1)实现了Cel5A在大肠杆菌中的克隆表达。将来源于T. fusca的内切β-1,4-葡聚糖酶Cel5A，以T. fusca基因组DNA为模板，通过PCR的方法成功扩增，获得全长1293bp的cel5A基因。构建了重组表达质粒pET-24a(+)/pelB-cel5A，并将其转化宿主菌E. coli BL21(DE3)。重组菌在TB培养基中发酵48h后，胞外酶活为46.8IU/mL。 (2)在摇瓶及3L罐水平上对重组菌的发酵培养进行研究。优化后的摇瓶发酵培养基为甘油16g/L，酵母粉45g/L，磷酸盐30mmol/L，Mg4mmol/L，胞外酶活为72.6IU/mL，相对于优化前提升了55%左右。在此基础上，将重组菌在3L发酵罐上进行了小试实验，酶外酶活最高达到172.8IU/mL，总酶活(胞外酶活与周质空间酶活之和)为656.6IU/mL，生产强度达到18.8IU/(mL·h)，分别是TB摇瓶发酵的14倍和19倍，是重组S. lividans的82倍，为现有报道T. fusca来源Cel5A酶活的最高水平。 (3)将重组Cel5A进行分离纯化，并研究了重组Cel5A的相关酶学性质。经过硫酸铵盐析、阴离子层析和凝胶层析后得到电泳纯的重组酶液，并研究了重组酶的酶学性质。重组酶的最适温度为80℃，在50℃和60℃下均具有良好的热稳定性;重组酶的最适pH为5.5， pH稳定范围较宽;Ca等金属离子对重组酶未见有明显的激活与抑制作用;在50℃，pH5.5条件下，以CMC为底物，Km和Vmax分别为5.1mg/mL和48.7IU/mg;重组Cel5A在洗涤剂常用的表面活性剂中具有良好的稳定性，通过PyMOL软件对重组Cel5A的催化结构域进行了表面静电势分析，推测了其在表面活性剂环境中稳定的分子基础。 (4)考察了重组Cel5A水解壳聚糖制备壳寡糖的效果。通过对酶解液的质谱分析确定了重组Cel5A具有水解壳聚糖制备壳寡糖的能力，初步建立了利用HPLC-ELSD法分离检测壳寡糖产物的方法。确定了重组Cel5A水解壳聚糖的最优条件为底物浓度30g/L，温度50℃，加酶量2IU/g底物，反应1h，可获得聚合度为3的壳寡糖，转化率为60.3%。

关键词：内切β-1,4-葡聚糖酶大肠杆菌克隆表达发酵优化壳寡糖

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赫章县双坪乡 “支部联营”壮大村集体经济

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面向电力物联网异构信息安全的多任务调度算法

贵州日报

作者：王娇艳闫鹏宇李岩

本报讯（王娇艳闫鹏宇李岩）连日来，在赫章县双坪乡安山村万亩蔬菜基地，党员干部正组织群众为蔬菜除草、浇水。近年来，赫章县双坪乡在抓党建促乡村振兴中，坚持把发展壮大新型农村集体经济作为组织振兴的重要一环，整合各村优势特... 详细信息

本报讯（王娇艳闫鹏宇李岩）连日来，在赫章县双坪乡安山村万亩蔬菜基地，党员干部正组织群众为蔬菜除草、浇水。近年来，赫章县双坪乡在抓党建促乡村振兴中，坚持把发展壮大新型农村集体经济作为组织振兴的重要一环，整合各村优势特色，探索村村“抱团”发展方式，改变过......

关键词：双坪乡村集体经济赫章县

来源： cnki报纸评论

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电力系统自动化 2022年第15期46卷 162-170页

作者：杨挺蔡绍堂闫鹏李大帅天津大学电气自动化与信息工程学院天津市300072

新型电力系统的建设促使电力信息安全的服务呈现海量多元化,单一物理机或云计算虚拟机均无法满足各类服务任务执行的安全性和时效性需求。因此,面向电力物联网信息安全服务体系中特有的物理密码机与虚拟密码机共存的新型混合底层硬件模... 详细信息

新型电力系统的建设促使电力信息安全的服务呈现海量多元化,单一物理机或云计算虚拟机均无法满足各类服务任务执行的安全性和时效性需求。因此,面向电力物联网信息安全服务体系中特有的物理密码机与虚拟密码机共存的新型混合底层硬件模式,通过对异构计算资源的协同调控,实现在确保任务安全性的约束条件下的系统执行效率优化。首先,设计了一种三级双映射的电力物联网信息安全服务多任务调度架构,描述多轮交互保密任务和异构计算资源的映射规则;然后,基于加权深度嵌入聚类算法确定安全服务任务的执行标签;最后,采用朴素贝叶斯和量子粒子群优化算法完成运算节点的创建与任务映射。仿真结果表明,所提聚类映射调度算法能利用任务映射规则匹配新型异构安全服务计算资源,与双阶段调度算法和非支配排序遗传算法相比,其任务安全保障系数最大可提升58.4%,总完成时间最高可缩短22.24%。

关键词：电力物联网异构计算资源信息安全服务多任务调度

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机电设备安装中的问题与对策研究

中国科技期刊数据库工业A 2023年第6期 183-186页

作者：安小艳闫鹏李小江杨柳哈密职业技术学院新疆哈密839000 霍尔果斯市职业高中新建霍尔果斯835221

随着科学技术的发展,机电设备已经成为工业生产中不可缺少的设备,在国民经济中发挥着重要作用。机电安装是一项复杂的系统工程,涉及到设计、制造、施工等多个方面,必须要进行周密的组织和细致的管理,才能够保障机电设备整体的安装品质... 详细信息

随着科学技术的发展,机电设备已经成为工业生产中不可缺少的设备,在国民经济中发挥着重要作用。机电安装是一项复杂的系统工程,涉及到设计、制造、施工等多个方面,必须要进行周密的组织和细致的管理,才能够保障机电设备整体的安装品质。就目前的状况而言,机电设备安装过程中依然存在一些问题,制约着机电设备安装质量的提高。基于此,本文对机电设备安装中存在的问题进行了分析,并提出了解决这些问题的有效对策,以期为相关人员提供参考。

关键词：机电设备安装问题对策

关于国防军工类中央企业上市公司重组难点的探讨——以A公司重大资产重组为例

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现代国企研究 2023年第8期 43-47页

作者：安思颖闫鹏飞汤浩中国航天科技集团五院北京控制工程研究所北京航天神舟智能装备技术股份有限公司北京轩宇空间科技有限公司

中央企业以资产证券化为手段对央企上市公司进行产业性并购重组成为国家国有经济发展的重要推动力之一。国防军工行业作为国家战略性产业,通过资源整合和资产重组等方式,强化资本和资源向关键行业和关键领域聚焦,加快军工行业技术创新... 详细信息

中央企业以资产证券化为手段对央企上市公司进行产业性并购重组成为国家国有经济发展的重要推动力之一。国防军工行业作为国家战略性产业,通过资源整合和资产重组等方式,强化资本和资源向关键行业和关键领域聚焦,加快军工行业技术创新和产品迭代,推动军工行业向数字化、信息化和智能化方向发展,对我国国防安全和综合实力的提升均有重大的意义,而国防军工类中央企业因行业属性、管理模式等自身特点,推动军工央企资产证券化面临特有的关注要点和实施难点。

关键词：资产证券化国防军工军工行业行业技术创新行业属性资产重组 A公司央企

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山东:全力推进隐患整改清仓见底

道路交通管理 2023年第6期 66-67页

作者：祁亚萍闫鹏(图) 不详

“自G518国道新庄镇大桥施工封路以来,每天都有很多的大型货车绕道经过这条县道,核载远超这条公路和桥梁的设计承受能力,车流量骤增,噪音大,影响了当地群众的正常出行和生活,群众反映强烈。”3月15日下午,山东省费县交安委组织交警大队... 详细信息

“自G518国道新庄镇大桥施工封路以来,每天都有很多的大型货车绕道经过这条县道,核载远超这条公路和桥梁的设计承受能力,车流量骤增,噪音大,影响了当地群众的正常出行和生活,群众反映强烈。”3月15日下午,山东省费县交安委组织交警大队联合县交通运输局成立联合执法队伍,深入新庄镇、梁邱镇开展道路交通安全隐患大检查联合行动,在加强安全警示牌等道路交通设施设备建设的同时,加大警力巡查力度和密度,严查货车超载超限违法行为,预防和减少货车道路交通事故的发生。

关键词：新庄镇联合行动大型货车道路交通事故山东省费县超载超限道路交通设施大桥施工

微血管减压治疗原发性三叉神经痛术中解决岩静脉压迫方法2例临床分析

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微血管减压治疗原发性三叉神经痛术中解决岩静脉压迫方法2例临床...

定量血流分数指导冠状动脉外科血运重建手术策略的研究

作者：代明安冯树贵闫鹏杨磊河南省平顶山市一矿医院

目的:探讨原发性三叉神经痛微血管减压治疗术中发现岩静脉压迫三叉神经时的解决办法及临床效果。方法:术中发现岩静脉压迫三叉神经REZ区,在岩静脉上方颅底壁表面使用电凝适当烧灼,在岩静脉接触颅底壁表面处,滴入医用生物胶约,并迅速借... 详细信息

目的:探讨原发性三叉神经痛微血管减压治疗术中发现岩静脉压迫三叉神经时的解决办法及临床效果。方法:术中发现岩静脉压迫三叉神经REZ区,在岩静脉上方颅底壁表面使用电凝适当烧灼,在岩静脉接触颅底壁表面处,滴入医用生物胶约,并迅速借助显微器械使岩静脉牢固粘连颅底壁上,待生物胶凝固后,三叉神经REZ区完全解除压迫结果。结论:此解决岩静脉压迫的方法提高了手术成功率,减少了术后复发,且完全保留岩静脉,不影响后颅窝的静脉循环,大大降低了切断后可能出现局部引流不畅而产生的一系列并发症。

关键词：三叉神经痛微血管减压术责任血管岩静脉悬吊粘连颅底

来源： cnki会议评论

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中华胸心血管外科杂志 2022年第5期38卷 272-276页

作者：陈聪赵洋张魁闫鹏云党海明刘韬帅宋跃郑居兵李扬吴立松曹剑董然首都医科大学附属北京安贞医院心脏外科北京100029

目的探讨术前应用定量血流分数(QFR)评估冠状动脉功能性狭窄程度,指导冠状动脉旁路移植(CABG)血运重建策略的可行性。方法前瞻性纳入2019年1月至2020年9月期间在北京安贞医院心脏外科十一病房择期行单纯CABG的154例患者,对冠状动脉造影... 详细信息

目的探讨术前应用定量血流分数(QFR)评估冠状动脉功能性狭窄程度,指导冠状动脉旁路移植(CABG)血运重建策略的可行性。方法前瞻性纳入2019年1月至2020年9月期间在北京安贞医院心脏外科十一病房择期行单纯CABG的154例患者,对冠状动脉造影目测提示狭窄的病变血管进行QFR分析,获得病变血管功能性狭窄情况,外科医师术前对QFR分析结果不知情。收集患者基线资料、围手术期相关数据及近期临床结局并总结分析。结果1年后冠状动脉CTA显示,功能性显著病变(QFR安全可行的。

关键词：定量血流分数冠状动脉旁路移植术血流储备分数

降钙素原对细菌性痢疾患者病情评估的临床意义

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新疆医学 2015年第8期45卷 1078-1081页

作者：郭向东阿曼古曹丽闫鹏张荣安尼瓦尔新疆生产建设兵团第一师医院感染性疾病科阿克苏843000

目的探讨降钙素原(PCT)对细菌性痢疾患者病情评估的临床意义。方法统计分析71例细菌性痢疾患者的PCT及临床发热、腹泻、惊厥及病情程度等。了解PCT能否评估细菌性痢疾患者的临床病情。结果 71名患者的PCT阳性率为35.21%。PCT阳性组,22... 详细信息

目的探讨降钙素原(PCT)对细菌性痢疾患者病情评估的临床意义。方法统计分析71例细菌性痢疾患者的PCT及临床发热、腹泻、惊厥及病情程度等。了解PCT能否评估细菌性痢疾患者的临床病情。结果 71名患者的PCT阳性率为35.21%。PCT阳性组,22人发热,占88.00%;PCT阴性组,31人发热,占67.39%;两组差异具有统计学意义(p=0.03)。PCT阳性组最高体温为38.84±0.62℃,PCT阴性组最高体温为38.50±0.73℃,两组差异具有显著统计学意义(p0.05)。PCT阳性组中,病情重的有13例,PCT阴性组中病情重的有11例,两组差异具有显著统计学意义(p=0.01)。结论PCT可以作为细菌性痢疾患者病情评估的有效指标之一。

关键词：降钙素原细菌性痢疾发热腹泻病情评估