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番茄分裂泛素酵母双杂膜系统cDNA文库及SlToc159诱饵载体的构建

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植物生理学报 2022年第5期58卷 825-834页

作者：王琪闫见敏岳江李云洲须文贵州大学农学院贵阳550025 贵州大学蔬菜研究院贵阳550025

叶绿体是植物进行光合作用、脂质代谢以及氨基酸合成的重要场所。叶绿体自身基因组编码的蛋白质仅有100个左右,其余95%(约3000多个)的叶绿体蛋白质即前体蛋白是由细胞核基因组编码的,在细胞质中翻译后通过TOC-TIC转运蛋白复合体导入叶... 详细信息

叶绿体是植物进行光合作用、脂质代谢以及氨基酸合成的重要场所。叶绿体自身基因组编码的蛋白质仅有100个左右,其余95%(约3000多个)的叶绿体蛋白质即前体蛋白是由细胞核基因组编码的,在细胞质中翻译后通过TOC-TIC转运蛋白复合体导入叶绿体的特定位置而发挥生物学功能。Toc159是叶绿体外膜转运蛋白,主要负责转运初始阶段前体蛋白的特异性识别。为研究番茄SlToc159与前体蛋白的互作机制,本试验以‘Alisa Craig’番茄为材料,提取番茄幼苗叶片总RNA,采用Gateway技术构建分裂泛素化膜系统cDNA文库,同时构建诱饵载体pBT3-N-Toc159AGM和pBT3-N-Toc159GM,并用营养缺陷法检测其自激活活性。文库质量检测结果显示,文库总容量为1.6×10^(7)CFU,文库滴度为4.0×10^(6)CFU·mL^(-1),外源基因插入片段为750~2000 bp,重组率为100%,符合后续筛选互作蛋白的cDNA文库要求。酶切及测序结果表明,诱饵载体pBT3-N-Toc159AGM和短截A区的pBT3-N-Toc159GM构建成功,能够在分裂泛素化系统中正确表达且无自激活活性。本研究结果为番茄膜蛋白利用酵母双杂交筛选互作蛋白提供参考与理论基础。

关键词：番茄分裂泛素酵母双杂交系统 cDNA文库 Gateway技术叶绿体外膜转运蛋白 SlToc159 诱饵载体

SlCOMT1基因克隆及在番茄组织器官中的表达和褪黑素生物合成变化

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江苏农业科学 2022年第23期50卷 49-54页

作者：叶欣悦闫见敏杨雪莲李云洲须文贵州大学农学院贵州贵阳550025 贵州大学蔬菜研究院贵州贵阳550025

为探讨咖啡酸-O-甲基转移酶关键基因(SlCOMT1)在番茄不同生育期和组织器官中的表达特异性和褪黑素含量变化,采用RT-PCR技术从矮生型番茄Micro-Tom叶片中克隆了SlCOMT1基因,其全长1074 bp,编码357个氨基酸。生物信息学分析结果表明,SlCO... 详细信息

为探讨咖啡酸-O-甲基转移酶关键基因(SlCOMT1)在番茄不同生育期和组织器官中的表达特异性和褪黑素含量变化,采用RT-PCR技术从矮生型番茄Micro-Tom叶片中克隆了SlCOMT1基因,其全长1074 bp,编码357个氨基酸。生物信息学分析结果表明,SlCOMT1蛋白具有SAM(S-腺苷甲硫氨酸)依赖型甲基转移酶超家族典型的保守结构域,不含跨膜结构,是一种稳定的高脂溶性蛋白,含有31个磷酸化位点,二级结构以α螺旋为主。系统进化树和保守基序分析结果表明,该蛋白序列与茄科的辣椒和马铃薯具有较高的亲缘关系且含有相同的保守基序。荧光定量PCR和内源褪黑素含量分析结果表明,SlCOMT1和褪黑素在番茄不同组织器官中均有表达和积累,分别在开花后5 d、花苞中表达量最高,在其他组织中SlCOMT1的表达和褪黑素含量之间存在一定的相关性。本研究结果可为深入研究SlCOMT1基因的生物学功能提供理论依据。

关键词：番茄咖啡酸-O-甲基转移酶基因克隆褪黑素表达模式

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基因编辑技术在番茄中的研究与应用

分子植物育种 2023年第10期21卷 3308-3318页

作者：王琪黄鑫闫见敏须文吴浪李云洲贵州大学农学院贵阳550025 中国农业大学园艺学院北京100083

番茄因其营养丰富、外形美观、产值高等特点,已成为现代蔬菜的主导产业,更是乡村振兴的优势产业。为了满足消费者对番茄品质、外观和口感以及生产上抗病、抗逆的需求,定向改造番茄性状已经逐步成为番茄育种的一个趋势。基因编辑技术是... 详细信息

番茄因其营养丰富、外形美观、产值高等特点,已成为现代蔬菜的主导产业,更是乡村振兴的优势产业。为了满足消费者对番茄品质、外观和口感以及生产上抗病、抗逆的需求,定向改造番茄性状已经逐步成为番茄育种的一个趋势。基因编辑技术是定向改造植物性状的有效工具,而番茄属于二倍体植物,容易遗传转化,基因组测序已经完成,因此应用基因编辑技术定向改造番茄性状的研究与应用会越来越广泛。本研究通过归纳、总结前人利用基因编辑技术在番茄基因功能中的研究,包括抗病、抗逆、发育以及品质等,应用于番茄基因编辑的材料主要集中于‘Heinz706’、‘Ailsa Craig’(AC)、‘M82’、‘Micro-Tom’,为番茄乃至茄科蔬菜作物基于基因编辑技术育种提供参考与借鉴,为中国基于基因编辑技术蔬菜育种提供参考。

关键词：番茄基因编辑育种性状

番茄（Solanum lycopersicum L.）保护地杂交制种技术研究

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番茄（Solanum lycopersicum L.）保护地杂交制种技术研究

作者：闫见敏西北农林科技大学

学位级别：硕士

番茄是较早利用杂种一代的蔬菜作物之一,杂交品种增产效果显著,生产上已全部杂优化。随着设施番茄种植面积的不断扩大,杂交一代种子的需求量不断增加,传统的露地制种由于易受外界环境条件影响,每年固定茬次所提供杂交种子数量有限,已无... 详细信息

番茄是较早利用杂种一代的蔬菜作物之一,杂交品种增产效果显著,生产上已全部杂优化。随着设施番茄种植面积的不断扩大,杂交一代种子的需求量不断增加,传统的露地制种由于易受外界环境条件影响,每年固定茬次所提供杂交种子数量有限,已无法满足生产需求。因此,保护地制种已形成一种发展趋势,保护地制种技术的研究迫在眉睫。为了探索高效实用的番茄保护地制种技术,本试验以番茄“金棚1号”父母本为材料,在保护地条件下,从定植密度、整枝方式、授粉次数三个主要因素入手,进行单因素随机区组和三因素三水平正交试验,并对不同整枝方式各花序节位的种子产量和质量进行了分析比较,主要结果如下: 1.单因素试验 3种密度处理中,3300株/亩的座果率、单果重、单果种子数、折合亩产、千粒重、发芽势、发芽率均显著高于2500株/亩、4000株/亩。 3种整枝方式中,双干整枝、改良式单干整枝的种子千粒重、发芽势、发芽率极显著高于单干整枝;双干整枝的单果种子数、单果种子量、折合亩产、千粒重、种子发芽势、发芽率与改良式单干整枝无显著差异。单干整枝的主干第二、第三、第四花序的座果率、单果重、发芽率显著高于主干第一、第五花序。双干整枝,主干第二花序的座果率、发芽率最高;主干第三、第二花序的单果重、单果种子数、单果种子量显著高于主干第一、侧枝第二花序。改良式单干整枝各花序的座果率存在极显著差异,以主干第二花序最高;主干第三花序的单果种子数显著高于其余花序;主干第二、侧枝第一花序的单果种子量、发芽率显著高于主干第一、第四花序;主干第二、第三花序的千粒重显著高于主干第一、第四花序。授粉次数中,2次授粉、3次授粉的座果率、单果种子数、单果种子量、发芽率及发芽势显著高于1次授粉。 2.正交试验通过正交试验测得三因素对种子产量和质量影响的大小关系是:定植密度＞授粉次数＞整枝方式;对于种子产量,处理4（3300株/亩、单干整枝、授粉2次的组合）,处理5（3300株/亩、双干整枝、授粉3次的组合）与处理7（4000株/亩、单干整枝、授粉3次的组合）差异不显著。

关键词：番茄保护地杂交制种定植密度整枝方式授粉次数

叶绿体TOC-TIC蛋白复合体转运机制研究进展

同方学位论文库评论

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同方学位论文库

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园艺学报 2021年第4期48卷 689-704页

作者：王琪李云洲须文闫见敏贵州大学农学院贵阳550025

叶绿体蛋白是植物进行光合作用所必不可缺的物质。参与光合作用的大部分叶绿体蛋白在细胞质中合成,经过TOC-TIC复合体转运至叶绿体中行使其功能。本文中对参与叶绿体蛋白转运的TOC-TIC复合体、转运肽和分子伴侣蛋白的特征、作用及蛋白... 详细信息

叶绿体蛋白是植物进行光合作用所必不可缺的物质。参与光合作用的大部分叶绿体蛋白在细胞质中合成,经过TOC-TIC复合体转运至叶绿体中行使其功能。本文中对参与叶绿体蛋白转运的TOC-TIC复合体、转运肽和分子伴侣蛋白的特征、作用及蛋白转运途径进行了总结,并对近年来关于叶绿体蛋白转运研究的新发现进行了介绍和评述。

关键词：叶绿体蛋白转运 TOC-TIC复合体 TOC TIC

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“园艺植物育种学”课程思政的建立与实践

中国多媒体与网络教学学报(上旬刊) 2022年第4期 197-200页

作者：闫见敏张万萍鲁敏熊光元南红贵州大学农学院贵州大学蔬菜研究院

课程思政是高等院校培养高素质人才必不可少缺少的环节，是实现立德树人的重要措施。为了提升涉农高校园艺专业课程思政教育的教学质量，培养更多知农业、懂农业、爱农业的高素质新型农业人才，高质量发展现代园艺产业助力乡村振兴。因... 详细信息

课程思政是高等院校培养高素质人才必不可少缺少的环节，是实现立德树人的重要措施。为了提升涉农高校园艺专业课程思政教育的教学质量，培养更多知农业、懂农业、爱农业的高素质新型农业人才，高质量发展现代园艺产业助力乡村振兴。因此，本文以《园艺植物育种学》课程为例，结合教学大纲与教育目标充分挖掘和利用育种课程的思政元素，以润物细无声的方式自然地融入教学过程，为实现“三全育人”人才培养目标提供理论参考。

关键词：园艺植物育种学课程思政专业教育有效融合

授粉次数对大棚番茄杂交制种种子产量与质量的影响

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西北农业学报 2009年第3期18卷 189-191页

作者：闫见敏梁燕王建人张飞西北农林科技大学园艺学院农业部西北园艺植物种质资源与遗传改良实验室陕西杨凌712100 西安市金鹏种苗有限公司陕西临潼710603

在番茄优良杂交组合"金棚一号"母本定植密度222.7株/hm2及双干整枝的情况下,研究1次授粉、2次授粉、3次授粉对保护地杂交制种效果的影响。结果表明,3次授粉的坐果率最高与1次授粉的差异极显著,与2次授粉的差异不显著;2次授粉的单果种子... 详细信息

在番茄优良杂交组合"金棚一号"母本定植密度222.7株/hm2及双干整枝的情况下,研究1次授粉、2次授粉、3次授粉对保护地杂交制种效果的影响。结果表明,3次授粉的坐果率最高与1次授粉的差异极显著,与2次授粉的差异不显著;2次授粉的单果种子数、单果种子量、小区产量、发芽率及发芽势与1次授粉的差异显著,与3次授粉的差异不显著;种子千粒质量2次授粉的最大,1次授粉和3次授粉的差异不显著。2次授粉为最佳授粉次数。

关键词：番茄授粉次数杂交制种保护地

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番茄斑萎病毒病研究进展

园艺学报 2018年第9期45卷 1750-1760页

作者：李云洲默宁闫见敏曹贺贺庞胜群梁燕贵州大学农学院贵阳550025 西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学植物保护学院陕西杨凌712100 石河子大学农学院新疆石河子832000

番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)于1915年在澳大利亚被首次报道,现已蔓延至世界各地,自1989年在广州出现以来,已在云南、贵州、四川、广东、广西、山东、河南、河北、北京、天津、陕西、宁夏等番茄主产区大面积发生,成为... 详细信息

番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)于1915年在澳大利亚被首次报道,现已蔓延至世界各地,自1989年在广州出现以来,已在云南、贵州、四川、广东、广西、山东、河南、河北、北京、天津、陕西、宁夏等番茄主产区大面积发生,成为继番茄黄化曲叶病毒病之后的又一种重要病害。对番茄斑萎病毒的基因组结构特征特性、危害情况以及番茄抗性资源的鉴定等研究进行综述,以期为抗病育种、抗病基因的分子标记开发、基因定位以及克隆等技术提供参考。

关键词：番茄番茄斑萎病毒抗病育种

山药DoARID4基因克隆与表达特异性分析

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西北农业学报 2021年第11期30卷 1648-1655页

作者：王琪岳宁波黄鑫闫见敏李云洲贵州大学农学院贵阳550025

以‘铁棍山药’为材料,根据同源克隆的方法获得‘铁棍山药’DoARID4序列,并对其氨基酸序列进行生物信息学分析,并构建系统进化树,通过qRT-PCR试验对该基因进行初步的组织特异性表达分析初步探究DoARID4在‘铁棍山药’生长发育以及扁茎... 详细信息

以‘铁棍山药’为材料,根据同源克隆的方法获得‘铁棍山药’DoARID4序列,并对其氨基酸序列进行生物信息学分析,并构建系统进化树,通过qRT-PCR试验对该基因进行初步的组织特异性表达分析初步探究DoARID4在‘铁棍山药’生长发育以及扁茎发生中的调控作用,为ARID基因家族的进一步研究提供理论依据。结果表明,克隆得到一条长731 bp的条带,将测序结果进行Blast比对,发现其与芋头、莲藕ARID4序列相似性最高,因此将该基因命名为DoARID4。DoARID4可编码211个氨基酸,其蛋白质分子质量为23.73 ku;其蛋白分子式为C1035H1606N304O305S17,是一种脂溶性很强、非跨膜、亲水性蛋白;可能分布于细胞核及线粒体中,并且可能通过丝氨酸或苏氨酸磷酸化进行细胞信号的传导功能。DoARID4在地上茎与地下茎的相对表达量较高,而在叶片中相对表达量较低,推测DoARID4在山药茎和根的畸形发育中发挥重要作用。

关键词：富含AT互作的结构域(ARID4) 基因克隆山药生长发育