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生姜泻心汤加减方在宠物临床的应用

中兽医医药杂志 2024年第1期43卷 78-81页

作者：赵雁伟闫永平韩若婵翟文栋董虹田丽芳内蒙古赤峰市喀喇沁旗农牧局内蒙古赤峰024000 保定职业技术学院畜牧兽医系河北保定070051 北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室北京102206

生姜泻心汤出自于汉代张仲景的《伤寒论》,包含生姜、干姜、半夏、黄芩、人参、黄连、炙甘草、大枣八味中药,全方寒热并用,辛开苦降,攻补兼施,阴阳并调,未用理气之药,却有理气之效。该方应用广泛,尤其在胃肠疾病方面常作为基本方。笔者... 详细信息

生姜泻心汤出自于汉代张仲景的《伤寒论》,包含生姜、干姜、半夏、黄芩、人参、黄连、炙甘草、大枣八味中药,全方寒热并用,辛开苦降,攻补兼施,阴阳并调,未用理气之药,却有理气之效。该方应用广泛,尤其在胃肠疾病方面常作为基本方。笔者临床收治1例近3个月内间断呕吐、大便不成形的病猫,且应用抗菌药、抑制呕吐等西兽药等难以奏效。经中兽医诊断病猫久病而脾胃虚弱,胃失和降,浊气归于上,且寒热错杂,辨证为水热互结的痞证兼脾阳虚。治则为和胃降逆,宣散水气,健脾益气。药用生姜泻心汤加炒白术、陈皮,散水消痞,和胃降逆兼健脾,其中炒白术偏重健脾和胃,陈皮偏重于理气,服药1 d后未见呕吐,大便基本成形,食欲、精神明显好转,服药3 d病猫基本痊愈。本病例可为宠物临床治疗长期呕吐病例提供新思路,为生姜泻心汤方证的科学研究及临床应用提供借鉴。

关键词：生姜泻心汤呕吐痞证猫脾虚水热互结散水消痞和胃降逆

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牛乳铁蛋白衍生肽的设计表达及抑菌活性研究

牛乳铁蛋白衍生肽的设计表达及抑菌活性研究

作者：闫永平合肥工业大学

学位级别：硕士

抗生素滥用导致的细菌耐药性已成为全球范围内严重的生态问题,寻找有效的抗生素替代品迫在眉睫。乳铁蛋白肽(LFcinB,FKCRR WQWRM KKLGA PSITC VRRAF)是由牛乳铁蛋白(Bovine Lactoferrin,BLF)经消化酶水解产生的一类具有广谱抑菌活性的... 详细信息

抗生素滥用导致的细菌耐药性已成为全球范围内严重的生态问题,寻找有效的抗生素替代品迫在眉睫。乳铁蛋白肽(LFcinB,FKCRR WQWRM KKLGA PSITC VRRAF)是由牛乳铁蛋白(Bovine Lactoferrin,BLF)经消化酶水解产生的一类具有广谱抑菌活性的两亲性阳离子短肽,具有杀菌快速、不易产生抗药性、热稳定性及水溶性好等优点。本文以LFcinB为模板,以提高抗菌肽活性及稳定性为目标,借助生物信息学工具,以提高其电荷量、疏水性为原则,设计出新型高抗菌活性的衍生肽LFcinB-L1(LFcinB-L1,WKWRR WQWRW KKLGA PSITC VRRAF)。利用毕赤酵母GS115分泌性表达衍生肽LFcinB-L1,对发酵液进行分离纯化后检测衍生肽LFcinB-L1的体内外抑菌活性,并初步探究其抑菌机制。本课题主要研究内容和结果如下:(1)本文引入色氨酸(Trp)对LFcinB不同位点的氨基酸进行替换得到了5条衍生肽序列。利用蛋白分析工具对母肽及其衍生肽的理化参数、不同形式二级结构占比及分布和空间结构进行了模拟与分析;使用抗菌肽预测工具CAMP对衍生肽进行了抗菌活性预测,表明了衍生肽的设计在理论上的合理性。一系列生物信息学工具显示,衍生肽LFcinB-L1综合平分最高,其疏水性残基的比例提高到56%,电荷数为+8,具有与母肽相近的二级结构及空间结构,因此,本文选择衍生肽LFcinB-L1合成基因并构建表达载体。(2)使用Snapgene软件数据库中毕赤酵母密码子优化表对衍生肽LFcinB-L1基因的密码子进行优化,使其适应于酵母GS115菌株表达。利用T4-DNA连接酶将经人工优化且成功合成的LFcinB-L1基因片段与线性化的p PIC9K载体连接成为分泌型表达重组载体p PIC9K-LFcinB-L1。基因测序结果表明长度为75 bp的LFcinB-L1基因成功克隆至质粒p PIC9K,重组载体构建成功。(3)利用限制性内切酶Sac I-HF对重组载体p PIC9K-LFcinB-L1单酶切,使其线性化,然后转化至酵母GS115宿主菌,使用甲醇进行诱导发酵,分泌性表达出衍生肽LFcinB-L1。探究和优化发酵条件,得其最适发酵条件为诱导时间:72 h,甲醇浓度:2%。使用琼脂板扩散法对比分析衍生肽LFcinB-L1与母肽LFcinB的抗菌活性,结果显示LFcinB-L1对金黄色葡萄球菌的抗菌活性比母肽LFcinB高约2倍。(4)使用400 m L发酵上清液制备的冻干粉质量为8.59 g。使用福林酚法检测冻干粉中衍生肽含量,测得多肽在冻干粉中含量占比约为37.19%。(5)检测衍生肽LFcinB-L1对不同菌种的抑菌作用,结果表明LFcinB-L1对金黄色葡萄球菌(G)、大肠杆菌(G)和枯草芽孢杆菌(G)均具有良好的抑菌效果。(6)利用Ecc15感染模式生物黑腹果蝇构建果蝇结肠炎模型,该果蝇模型肠道屏障功能受损、肠道缩短、寿命缩短,肠道内ROS升高,抗氧化相关基因的m RNA水平和抗氧化相关蛋白酶活性升高。在食物中添加衍生肽LFcinB-L1及母肽LFcinB,能减少果蝇结肠炎模型体内载菌量、降低细菌活力,降低过量的ROS,回调果蝇结肠炎模型体内抗氧化相关蛋白酶活性,进而修复肠道屏障功能、维持果蝇肠道形态,延长受感染果蝇的寿命,并且衍生肽LFcinB-L1在体内表现出比LFcinB更好的抗感染活性。(7)初步探究衍生肽LFcinB-L1对金黄色葡萄球菌的抑菌机制,其最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(Minimum bactericidal concentration,MBC)分别为2 mg/m L和5 mg/m L。检测衍生肽LFcinB-L1对金黄色葡萄球菌的细胞表面疏水性、培养液中胞外碱性磷酸酶活性、β-D-半乳糖苷酶活性和核酸分子的影响。实验结果表明,LFcinB-L1降低菌体细胞表面疏水性,增加细胞壁和细胞膜的通透性,破坏菌体细胞膜的完整性,导致胞内的β-D-半乳糖苷酶及核酸大分子物质的泄漏;此外,衍生肽LFcinB-L1不影响金黄色葡萄球菌基因组稳定性,但会导致胞内蛋白含量显著降低,且出现部分蛋白的缺失,并且,衍生肽LFcinB-L1对金黄色葡萄球菌的抑菌效果显著强于母肽。综上,本文以LFcinB为模板,设计改造出衍生肽LFcinB-L1,在酵母中分泌性表达并纯化,该衍生肽在体外可抑制革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌生长,且抑菌活性比母肽高两倍以上;在肠道内可抑制病原菌生长,从而减轻由ECC15感染的果蝇结肠炎模型的一系列疾病表型。此外,探究其对金黄色葡萄球菌的抑菌机制表明该衍生肽通过破坏细胞膜及抑制蛋白表达抑制细菌生长。本研究设计、改造并获得具有高抗菌活性的抗菌肽,优化发酵条件及多肽纯化条件,并初步探究其抗菌机制,为开发

关键词：牛乳铁蛋白肽衍生肽设计分泌性表达抗菌活性抑菌机制

基于系统理论的语文大单元“整合与实践”教学理据与路径探究——以统编高中语文教材必修下册第一单元为例

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新课程评论 2023年第3期 66-73页

作者：闫永平甘肃省兰州市第十八中学

统编高中语文教材以立德树人为根本任务,以建构语文核心素养为目标,以学习任务群统整大单元为学习方式,以素质教育为主,致力于培养德智体美劳全面发展的社会主义建设者和接班人。而“整合与实践”是整部教材的主要特征,系统论的突现性... 详细信息

统编高中语文教材以立德树人为根本任务,以建构语文核心素养为目标,以学习任务群统整大单元为学习方式,以素质教育为主,致力于培养德智体美劳全面发展的社会主义建设者和接班人。而“整合与实践”是整部教材的主要特征,系统论的突现性、层次性和动态性等核心原理为此特征提供了科学理据。通过剖析并借鉴系统论的相关论述,探究出“整合与实践”任务学习的“两线三维度”实施路径,有助于高中语文大单元教学的进一步发展,从而全面提升学生的语文核心素养。

关键词：整合与实践学习任务群系统论大单元教学

认知语言学视域下“整合”教学的研究策略——以统编高中语文教材必修下册第一单元为例

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语文教学与研究 2023年第1期 38-43页

作者：闫永平甘肃省兰州市第十八中学

认知语言学从“范畴理论”和“隐喻理论”的角度把人们对来自不同认知域的框架进行整合,从而构建虚拟的心理空间,予以存储相关信息,证明了认知的开放性和隐喻性。从“范畴理论”来透析“整合”具有“创造性”和“系统性”之内涵,从“隐... 详细信息

认知语言学从“范畴理论”和“隐喻理论”的角度把人们对来自不同认知域的框架进行整合,从而构建虚拟的心理空间,予以存储相关信息,证明了认知的开放性和隐喻性。从“范畴理论”来透析“整合”具有“创造性”和“系统性”之内涵,从“隐喻理论”来透析“整合”具有“模糊性”和“开放性”之外延。二者均有无限扩张的生命和生机。为了让老师在使用统编高中语文教材时,真正意义上提升学生的语文素养,借助认知语言学、概念整合等理论对“整合”之内涵和外延进行了深刻论述,同时,提出了相应的教学策略,可以帮助老师在对“整合”的概念理性的认识的同时,熟练驾驭大概念、大任务、大情境的单元整体教学。

关键词：认知语言学整合学习任务群大单元教学

新型牛乳铁蛋白衍生肽LFcinB-W的抗感染作用

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合肥工业大学学报（自然科学版） 2023年第9期46卷 1292-1296页

作者：闫永平肖桂然吴磊李广莹合肥工业大学食品与生物工程学院安徽合肥230601

抗菌肽有望替代抗生素成为一种安全、绿色、高效的理想抗菌剂,牛乳铁蛋白肽(bovine lactoferricin,LFcinB)是由牛乳铁蛋白经消化酶水解产生的一类具有广谱抑菌活性的短肽。文章以牛乳铁蛋白肽为基础,根据抗菌肽结构与功能的关系,对LFcin... 详细信息

抗菌肽有望替代抗生素成为一种安全、绿色、高效的理想抗菌剂,牛乳铁蛋白肽(bovine lactoferricin,LFcinB)是由牛乳铁蛋白经消化酶水解产生的一类具有广谱抑菌活性的短肽。文章以牛乳铁蛋白肽为基础,根据抗菌肽结构与功能的关系,对LFcinB的结构进行优化设计得到衍生肽LFcinB-W。将设计得到的LFcinB-W基因片段与pPIC9K质粒构建重组表达载体,转化毕赤酵母细胞GS115诱导表达。对发酵上清液进行分离纯化和活性测试,结果证明该衍生肽对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有更强的抑菌活性;利用病原体Erwinia carotovora carotovora 15(Ecc15)感染模式生物果蝇肠道,进一步探究LFcinB-W对感染模型的保护作用,结果显示LFcinB-W可有效缓解病原体感染对果蝇造成的损伤,在体内表现出比LFcinB更好的抗感染作用,为进一步研究该肽的生物活性及生产应用提供参考。

关键词：牛乳铁蛋白肽(LFcinB) 结构设计果蝇抗感染作用

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百里醌对化学诱导的溃疡性结肠炎的保护作用

合肥工业大学学报（自然科学版） 2023年第6期46卷 849-852页

作者：吴磊李广莹闫永平肖桂然合肥工业大学食品与生物工程学院安徽合肥230601

百里醌(thymoquinone,TQ)是从黑种草种子中提取的一种天然化合物,被证实具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎等效果,对辐射等外部因素引起的肠炎具有治疗作用。文章利用经典模式生物果蝇研究发现,TQ对野生型果蝇的寿命具有提升作用。此外,采用化... 详细信息

百里醌(thymoquinone,TQ)是从黑种草种子中提取的一种天然化合物,被证实具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎等效果,对辐射等外部因素引起的肠炎具有治疗作用。文章利用经典模式生物果蝇研究发现,TQ对野生型果蝇的寿命具有提升作用。此外,采用化学物葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导果蝇溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型,研究TQ对肠道炎症的保护作用,结果表明,TQ能显著提高DSS诱导的UC模型果蝇的生存率与攀爬能力,并改善DSS暴露导致的成虫肠道形态及肠壁损伤。因此TQ摄入能够明显缓解DSS诱导的UC。

关键词：果蝇百里醌(TQ) 肠道炎症肠道形态肠道通透性

新课标视域下的实践性学习:内涵、特点与实施建议

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教师教育论坛 2023年第12期36卷 9-12页

作者：闫永平兰州市第十八中学兰州730084

语文实践性学习是依据《普通高中语文课程标准(2017年版2020年修订)》的指导思想和基本原则,提出的一种高效的语文学习方式。其特点主要表现为教学内容的任务性、学习活动的真实性、教学设计的情境性和学习过程的参与性。教师组织和开... 详细信息

语文实践性学习是依据《普通高中语文课程标准(2017年版2020年修订)》的指导思想和基本原则,提出的一种高效的语文学习方式。其特点主要表现为教学内容的任务性、学习活动的真实性、教学设计的情境性和学习过程的参与性。教师组织和开展实践性学习活动要以大概念为核心,注重实践学习知识的迁移性,应构建学生的认知结构,关注学生学习的顿悟理解,要以“学习任务群”为线索,贯穿实践学习过程,应以“核心素养”的生成为目标,构建多元化评价体系。以此拓展学生的思维、培养学生的审美鉴赏与创造、理解并传承传统文化,让学生在积极的语言实践中积累和构建语文学科核心素养。

关键词：新课程标准实践性学习真实情境核心素养评价

对比用齐拉西酮与奥氮平治疗首发精神分裂症的效果及对神经递质水平的影响

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当代医药论丛 2022年第2期20卷 107-110页

作者：闫喜栋闫永平太原市精神病医院普通精神科女科山西太原030045 太原市精神病医院九院沙河心理分院山西太原030045

目的:比较用齐拉西酮与奥氮平治疗首发精神分裂症的效果及对患者神经递质水平的影响。方法:选取2020年1月至12月太原市精神病医院收治的120例首发精神分裂症患者作为研究对象。随机将其分为对照组和研究组。用奥氮平对对照组患者进行治... 详细信息

目的:比较用齐拉西酮与奥氮平治疗首发精神分裂症的效果及对患者神经递质水平的影响。方法:选取2020年1月至12月太原市精神病医院收治的120例首发精神分裂症患者作为研究对象。随机将其分为对照组和研究组。用奥氮平对对照组患者进行治疗,用齐拉西酮对研究组患者进行治疗,然后比较两组患者的疗效及各项临床指标。结果:两组患者治疗的总有效率相比,P>0.05。治疗后,研究组患者空腹血糖(FBG)及血清总胆固醇(TC)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷草转氨酶(AST)的水平均低于对照组患者,P<0.05。治疗后,研究组患者阴性和阳性症状量表(PANSS)的评分、个人和社会功能量表工作表(PSP)的评分均低于对照组患者,P<0.05。治疗后,研究组患者脑内深抑制递质(INH)、乙酰胆碱(Ach)、γ-氨基丁酸(GABA)和多巴胺(DA)的水平均低于对照组患者,P<0.05。结论:用齐拉西酮与奥氮平治疗首发精神分裂症的效果均较好,但用齐拉西酮治疗此病对患者血糖、血脂及肝功能的影响更小,且能更有效地改善患者神经递质的水平,提高其个人及社会功能。

关键词：齐拉西酮奥氮平首发精神分裂症神经递质血糖血脂肝功能

果蝇脂肪体中Piwi影响生长发育的新功能鉴定

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合肥工业大学学报（自然科学版） 2023年第11期46卷 1532-1535页

作者：李广莹肖桂然吴磊闫永平纪晓雯金礼合肥工业大学食品与生物工程学院安徽合肥230601

Piwi(P-element induced wimpy testis)是一类与生殖相关的蛋白,主要在生殖系统中表达,对生殖细胞的形成和维持DNA的完整性及稳定性十分重要,但其在其他器官和组织中的功能尚不清楚。文章利用模式生物果蝇进行研究,发现降低Piwi在脂肪... 详细信息

Piwi(P-element induced wimpy testis)是一类与生殖相关的蛋白,主要在生殖系统中表达,对生殖细胞的形成和维持DNA的完整性及稳定性十分重要,但其在其他器官和组织中的功能尚不清楚。文章利用模式生物果蝇进行研究,发现降低Piwi在脂肪体中的表达导致果蝇的羽化率、生长周期和寿命出现问题,并且脂肪体的功能受到严重影响,说明脂肪体内表达的Piwi蛋白对于果蝇生长发育是必须的。进一步的研究表明,在脂肪体细胞内敲低Piwi基因引起活性氧(reactive oxygen species,ROS)的大量产生,干扰脂肪体细胞的储存功能,进而影响果蝇的生长发育。该研究为鉴定Piwi在脂肪体的新功能提供了新思路,并且对相关疾病的治疗具有重要价值。

关键词：果蝇 Piwi基因脂肪体活性氧(ROS)