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新型香菇多糖的纯化、鉴定与免疫活性研究

新型香菇多糖的纯化、鉴定与免疫活性研究

作者：闫慧丹华南理工大学

学位级别：硕士

香菇(Lentinus edodes)，属于担子菌纲侧耳科(Pleurotaceae)真菌，是一种可食用和药用的真菌，具有很高的食补价值，在我国分布广泛。香菇含有多种有效药用成分，其中香菇多糖是其主要有效成分之一，目前对香菇多糖的研究主要集中于其... 详细信息

香菇(Lentinus edodes)，属于担子菌纲侧耳科(Pleurotaceae)真菌，是一种可食用和药用的真菌，具有很高的食补价值，在我国分布广泛。香菇含有多种有效药用成分，其中香菇多糖是其主要有效成分之一，目前对香菇多糖的研究主要集中于其结构和生物活性方面，其构效关系及生物活性机理还不清楚。本课题以香菇为原料，对香菇多糖的分离纯化、结构表征和免疫活性进行了研究，并且成功合成了一种香菇多糖钙的复合物L2-Ca，主要研究结果如下：采用水提醇沉法提取香菇多糖，经过醇沉、脱蛋白、醇沉、DEAE-52纤维素离子交换柱层析、浓缩、透析、冻干后得到香菇粗多糖组分：CL1、CL2、CL3、CL4，其中CL2所占比率最高。利用葡聚糖凝胶柱层析(填料为Sephadex-G200)对香菇粗多糖组分CL2进行进一步纯化得到高纯度香菇多糖L2，硫酸苯酚法测定L2的多糖含量为97%。高效凝胶色谱法测得香菇多糖L2的平均分子量为26KDa。紫外扫描确认香菇多糖L2不含蛋白质和核酸。红外光谱分析显示香菇多糖L2含有3418～3405cm处的O-H伸缩振动、2932～2927cm处的C-H伸缩振动以及1430～1200cm处的一组羧基的伸缩振动，表明该物质具有多糖的特征红外吸收，是多糖样品。结合其它特征吸收峰确定L2是不含糖醛酸的吡喃多糖。对香菇多糖L2进行气相色谱分析，证明了L2的单糖组成是L-阿拉伯糖、D-葡萄糖和D-半乳糖，其摩尔比大致为L-阿拉伯：D-葡萄糖：D-半乳糖=1:31:3。高碘酸氧化和Smith降解产物分析显示，L2含有1,6、1,3、1,2糖苷键，其百分比分别分别为：44.33%、37.45%、18.22%。刚果红实验结果证明L2不具有三螺旋结构，这与很多文献报道中的香菇多糖高级结构不一致。原子力显微镜图显示香菇多糖L2的分子形态为相互缠绕的链状结构，经137℃高温处理后，糖链断裂，糖链长度减小，说明L2经高温处理后，其高级结构可能发生变化。这可能是多糖高温处理后失活的原因之一。通过对小鼠巨噬细胞RAW264.7培养液中NO浓度的测定，说明DEAE-52离子交换层析得到的四种香菇粗多糖组分CL1、CL2、CL3、CL4均能显著提高小鼠巨噬细胞RAW264.7的NO释放量，其中CL2的作用最为显著。L2剂量效应关系的研究显示，当L2的浓度小于250μg/mL时，NO、TNF-α和IL-6的分泌量和L2的浓度呈显著的剂量效应关系，当L2的浓度大于250μg/mL时，NO释放量随L2浓度的增加而降低，TNF-α和IL-6的浓度没有显著变化。温度和pH值对L2的免疫活性影响分析显示，L2在137℃下处理30min后失活，在pH4.0-8.0范围内是有序的糖链结构，pH10.0时，L2的活性结构被损坏;TLR2是巨噬细胞RAW264.7识别L2的受体之一，除此之外，L2可能还有其他受体，但可以排除TLR4、CR3和Dectin。这个结果也说明L2的受体和Letinan有很大的不同。合成了香菇多糖钙复合物L2-Ca，其最佳合成工艺条件为：温度：65℃、pH9.0、反应时间60min、CaCl2与L2的质量比为5.5:1;比较香菇多糖L2与香菇多糖钙复合物L2-Ca的红外吸收光谱图，推测香菇多糖与钙的络合可能以C-O配位为主;香菇多糖钙L2-Ca的免疫活性和L2相当，同时兼有补钙作用，有望用于保健食品领域。

关键词：香菇多糖分离纯化结构免疫活性多糖钙

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服用他克莫司前后对移植肾阻力指数的影响

服用他克莫司前后对移植肾阻力指数的影响

作者：闫慧玲浙江大学

学位级别：硕士

目的：钙调神经蛋白抑制剂(CNI)是目前移植领域抗排异的一线用药,主要包括环孢素与他克莫司,二者均能引起移植肾内血管收缩。有研究认为服用环孢素后其峰浓度时能够引起移植肾阻力指数升高,本文研究在肾移植患者中他克莫司峰浓度时对移... 详细信息

目的：钙调神经蛋白抑制剂(CNI)是目前移植领域抗排异的一线用药,主要包括环孢素与他克莫司,二者均能引起移植肾内血管收缩。有研究认为服用环孢素后其峰浓度时能够引起移植肾阻力指数升高,本文研究在肾移植患者中他克莫司峰浓度时对移植肾各级血管阻力指数的影响。方法：32例肾功能恢复理想的肾移植患者,于术后12天左右分别在他克莫司给药前(谷浓度CO)和给药后2小时(峰浓度C2)测定肾动脉、段动脉、叶间动脉、弓形动脉的阻力指数,以及患者的心率、血压、血清他克莫司浓度,对服用他克莫司前后的数据进行比较。结果：移植肾肾动脉、段动脉、叶间动脉、弓形动脉的阻力指数在服用他克莫司2小时后较服药前明显升高(P0.05),校正后的弓形动脉阻力指数在服用他克莫司2小时后较服药前仍有明显升高(P=0.014)。结论：在肾功能恢复稳定的肾移植患者中,经心率校正后的移植肾内相对较大血管的阻力指数在服用他克莫司前后无明显变化,而校正后的弓形动脉阻力指数在服用他克莫司后出现升高,提示他克莫司对微小动脉有收缩作用。

关键词：他克莫司肾移植阻力指数心率多普勒超声

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结合专业特色提高大学生的实践能力

实验室研究与探索 2009年第5期28卷 113-114,121页

作者：闫慧兰王雁峰任坤高俊侠北京工业大学电子信息与控制工程学院北京100024

介绍了对电子技术传统实验教学的改革,结合专业特点开展综合性、设计性实验。培养并训练学生的综合设计水平,以提高学生的实践能力。

关键词：电子技术综合实验实践能力

芥子气染毒小鼠皮肤基底细胞的增殖动力学行为研究

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芥子气染毒小鼠皮肤基底细胞的增殖动力学行为研究

作者：闫慧敏中国人民解放军军事医学科学院

学位级别：硕士

芥子气是一种糜烂性毒剂，杀伤威力强大，素有“毒剂之王”之称。目前，芥子气仍是外军装备的主要毒剂之一，其具有穿透性强、作用持久、防治困难等特点，既可发挥强大的杀伤效能，又可发挥战时防御效果，受到各国军方的普遍关注。 ... 详细信息

芥子气是一种糜烂性毒剂，杀伤威力强大，素有“毒剂之王”之称。目前，芥子气仍是外军装备的主要毒剂之一，其具有穿透性强、作用持久、防治困难等特点，既可发挥强大的杀伤效能，又可发挥战时防御效果，受到各国军方的普遍关注。皮肤是芥子气的主要中毒途径，也是其发挥毒性的重要效应器官之一。芥子气染毒后主要造成皮肤的红斑、水肿、起疱、糜烂、坏死等病理变化。迄今为止，尚无芥子气特效抗毒药物，仅采取对症、抗炎等支持疗法，效果并不十分理想。这除了与芥子气自身的毒理学作用特点如多水平、多靶点的特性有关外，还在于对芥子气引起皮肤损伤的分子机制尚不完全了解。但众所周知，芥子气所引起的皮肤损伤的修复和重建归根结底是通过表皮基底细胞的增殖分化来实现的。那么，在小鼠皮肤芥子气染毒之后，对表皮基底细胞特别是表皮干细胞的增殖动力学行为的影响如何，目前尚未见报道。为此，我们开展了本项研究，以期了解芥子气损伤皮肤基底细胞增殖动力学的变化特点，并为从改善干细胞微环境、促进干细胞的增殖分化角度，探索促进芥子气损伤皮肤愈合的新途径以及干细胞移植疗法的建立奠定了基础，具体工作如下： 1．芥子气对小鼠皮肤基底细胞增殖动力学的影响摘要本研究采用胰蛋白酶消化法急性分离小鼠耳廓表皮细胞，通过免疫组化及流式细胞术等方法检测证实分离得到的细胞主要是pl整合素阳性细胞，即表皮基底细胞。采用Pl染色流式细胞术观察了芥子气染毒后小鼠表皮基底细胞增殖周期的时效及量效关系。当染毒浓度为犯mg/mL芥子气时，48h之前细胞周期未发生明显的改变，而染毒后48h出现S及GZ/M期细胞增多的现象;当染毒剂量增至 160m留mL及32omg/mL时，在染毒后72h均出现明显的亚二倍体峰即凋亡峰，并呈现出一定的量效、时效关系。采用Pl并Hoeehst33342双染，激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser seanning microsc叩y，CLSM)观察小鼠表皮基底细胞核形态的变化。cLsM显示320m岁mL 芥子气染毒后72h，基底细胞核染色质呈高凝集的点状结构并有核碎裂的发生。透射电镜(Transmission eleetron microseope， TEM)观察了不同剂量组(32mg/mL、 160mg/mL、咒omg/mL)芥子气染毒后基底细胞的超微结构改变。32mg/mL芥子气染毒后24h可见有典型的凋亡细胞，即出现染色质边集呈新月状，核碎裂等特征性改变;16omg/mL芥子气染毒后24h镜下可见表皮及真皮均有少量凋亡细胞存在。160m留mL及犯Om留mL芥子气染毒72h后可见表皮细胞坏死发生。可见，芥子气染毒后表皮基底细胞的增殖动力学行为发生了改变，可引起表皮基底细胞凋亡，促进细胞的终末分化。结果提示，促进基底细胞的增殖有可能对芥子气皮肤损伤的治疗起着积极的作用。 2.芥子气对小鼠表皮干细胞的影响本研究利用表皮干细胞具有慢周期性的特点，采取5一澳脱氧尿嚓咤核营 (5一bromedcoxytlndine，BrdU)标记滞留术进行表皮干细胞的分离鉴定。技术路线为:10日龄的新生乳鼠耳廓局部透皮给予Brdu(1 omg/mL X 20 p L X3次/d X Zd)，急性分离细胞，经55%乙醇固定、胃蛋白酶消化核提取法变性之后抗体孵育，流式检测。结果显示，小鼠耳廓透皮给予BrdU30天时，实验组阳性细胞率约为6%，可初步认定为表皮干细胞。而小鼠耳廓单次给予spL芥子气(160m留mL)染毒后24h及48h表皮干细胞的数目明显减少。提示通过药物诱导间充质干细胞分化为表皮干细胞从而促进皮肤损伤的愈合可能是值得探索的一个方向。 3.小鼠表皮基底细胞培养条件的初步探索中国人民解方欠月民军事医学科学卫完不页士学位论文2004 摘要本研究主要采用以下三种方法:组织块培养法、有血清培养法(无滋养层)、有血清培养法(有滋养层)。a.组织块培养法在接种后2天可见表皮基底细胞呈膜状移行生长，细胞呈扁平不规则多角形，彼此紧密相连成单层膜。7天表皮细胞成片生长呈典型的“铺路石”状，并在生长过程中形成特异性的“拉网”现象。b.采用有血清培养液，单纯多聚赖氨酸铺被培养皿，以胰蛋白酶消

关键词：芥子气小鼠表皮基底细胞增殖动力学表皮干细胞

有机高分子分散下阳极氧化电沉积法制备纳米Al2O3粉体

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有机高分子分散下阳极氧化电沉积法制备纳米Al2O3粉体

作者：闫慧敏贵州大学

学位级别：硕士

纳米材料和技术因其奇特的纳米效应，给传统产业、环境、能源、医药和信息等领域的产品升级带来新的机遇，氧化铝纳米粉体对电子和材料工业的发展有重要意义，湿化学法以其固有的优点成为了制备纳米氧化铝粉体的理想方法。本文以廉价的... 详细信息

纳米材料和技术因其奇特的纳米效应，给传统产业、环境、能源、医药和信息等领域的产品升级带来新的机遇，氧化铝纳米粉体对电子和材料工业的发展有重要意义，湿化学法以其固有的优点成为了制备纳米氧化铝粉体的理想方法。本文以廉价的AlCl·HO为原料，采用在有机高分子分散下阳极氧化电沉积法制备纳米氧化铝粉体，并在此基础上制备了纳米Zn-Al、Mg-Al复合氧化物。有机电合成制备纳米氧化铝粉体是一种工艺简单，成本低、纯度高、能够大量生产、工艺流程短等优点，是一种具有极大潜力的纳米粉体制备方法。这种制备纳米氧化铝粉体的方法，文献报道甚少。本文研究了pH值、反应温度、分散剂、分散剂的聚合度以及煅烧温度对前驱体以及纳米氧化铝的团聚、粉体粒径及形貌的影响。同时运用了X-射线衍射(XRD)、透射电子显微镜(TEM)、红外光谱(FTIR)、差热分析(DTA)等多种手段对所得产品进行了表征，研究了所得产品的粒径、晶型、形貌以及前驱体的脱水机理等。通过研究发现，加入聚乙二醇作为分散剂可以很好的抑制团聚现象的发生，而聚乙二醇的聚合度对其抑制团聚现象的发生所起到的作用也不一样。实验表明以聚合度不同的聚乙二醇匹配所起到的抑制团聚效果最好。煅烧温度对产品的晶型具有决定性的作用，煅烧温度越高，晶型越完整，不确定成分减少。在400℃即出现了γ-AlO的特征峰，在800℃时获得了成分单一，粒径小，分布均匀，比表面积高，孔容大，具有活性，晶型较完整的γ-AlO，到1200℃得到了粒径小、晶型较完整的稳定型的a-AlO。通过大量的实验确定了制备纳米氧化铝的优化工艺条件如下：以NaOH调节AlCl·6HO溶液的pH值为8左右，过滤去除沉淀物，取其清液，以聚乙二醇400与聚乙二醇10000按质量比为3：1匹配为分散剂加入所得清液中，强烈搅拌，并保持水浴温度为45℃下，进行电沉积反应。此方法所得氧化铝粉体颗粒粒径小，分布均匀。具体内容如下： (1)研究纳米氧化铝粉体的制备条件。通过大量的实验研究确定了在电沉积法制备纳米氧化铝过程中pH值、体系反应温度、分散剂、分散剂的聚合度以及煅烧温度等工艺条件。 (2)对所得氧化铝粉体进行了FTIR分析，并对氢氧化铝前驱体进行了DTA分析，研究其相变温度与脱水规律。 (3)在成功制备纳米氧化铝的基础上，通过加入ZnCl、MgCl溶液制备Zn-Al、Mg-Al复合氧化物。所得产品粒径较小，平均粒径为20nm左右，晶型完整，形貌较好，呈纤维球状。此方法将所得的前驱体在400℃下，煅烧3h就可以得到Zn-Al、Mg-Al复合氧化物。

关键词：纳米材料高分子分散电沉积纳米氧化铝复合Zn-Al 复合Mg-Al 表征

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成分输血的临床应用

医学检验与临床 2002年第4期14卷 62-40页

作者：闫慧芝刘宝义方瑞峰青岛市红十字会中心血站青岛266071

成分输血(blood component therapy)就是把全血用物理化学的方法,分离并制备成各种较浓或纯度高的制品,目前因输血医学的发展,血液成分分离技术不断进步,如白细胞中分离转移因子、白细胞介素、干扰素;血小板中制备血小板β球蛋白、血小... 详细信息

成分输血(blood component therapy)就是把全血用物理化学的方法,分离并制备成各种较浓或纯度高的制品,目前因输血医学的发展,血液成分分离技术不断进步,如白细胞中分离转移因子、白细胞介素、干扰素;血小板中制备血小板β球蛋白、血小板Ⅳ因子、血小板反应蛋白等;红细胞中制备血卟啉、血红蛋白的溶液、酶类等。目前,血浆蛋白及其他成分已制备出20余种,均被应用于临床。

关键词：成分输血临床应用血液成分血小板β球蛋白血浆蛋白丙种球蛋白晶体盐红细胞血小板反应蛋白白细胞介素献血者

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草种子活力检测技术研究进展

草业学报 2023年第11期32卷 199-211页

作者：闫慧芳聂宇婷丛丽丽张昭崔凯伦吕艳贞柴茂峰青岛农业大学草业学院山东青岛266109 黄河三角洲草地资源与生态国家林业和草原局重点实验室山东青岛266109 青岛市滩涂盐碱地特色植物种质创制与利用重点实验室山东青岛266109

草种子是建植人工草地、改良退化草地生态环境、保障草地畜牧业生产潜力的最根本物质基础,种子活力高低将直接影响草业生产和发展。种子活力检测技术研究一直是国内外种子科技领域的重点,然而,其在草种子中的研究还不够深入。目前,草种... 详细信息

草种子是建植人工草地、改良退化草地生态环境、保障草地畜牧业生产潜力的最根本物质基础,种子活力高低将直接影响草业生产和发展。种子活力检测技术研究一直是国内外种子科技领域的重点,然而,其在草种子中的研究还不够深入。目前,草种子活力检测技术包括有损检测和无损检测两类。对草种子活力检测主要技术进行了综述,介绍了基于种子发芽行为、生理生化特性的有损检测技术以及基于光学特性、外观特征的无损检测技术,并对无损检测技术在草种子活力检测中的应用前景与发展趋势进行了展望,以期能够为准确测定草种子活力提供参考。

关键词：草种子活力有损检测技术光学特性无损检测技术

2016年春运期间一次寒潮天气过程诊断分析

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2016年春运期间一次寒潮天气过程诊断分析

森林保险灾后治理及植被恢复在森林保护中的作用

第33届中国气象学会年会

作者：马严枝闫慧赵桂香张磊赵建峰山西省气象台

利用常规气象观测资料、NECP/NCAR1°×1°再分析资料和探空资料,应用天气学分析和动力气象学诊断方法,对2016年1月21~24日山西寒潮、大风和降雪过程的影响系统配置、冷空气移动路径和高低空环流形势演变进行了诊断分析,并结合山西寒潮... 详细信息

利用常规气象观测资料、NECP/NCAR1°×1°再分析资料和探空资料,应用天气学分析和动力气象学诊断方法,对2016年1月21~24日山西寒潮、大风和降雪过程的影响系统配置、冷空气移动路径和高低空环流形势演变进行了诊断分析,并结合山西寒潮的预报指标,对大风和降雪主要成因进行了分析。结果表明:此次寒潮过程属于"横槽东移型",500h Pa上贝加尔湖东部的冷涡引导冷空气沿西北路径进入山西以及地面冷高

关键词：寒潮温度平流成因

来源： cnki会议评论

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内蒙古林业调查设计 2018年第3期41卷 96-98页

作者：闫慧关瑞峰王胜兴内蒙古自治区林业监测规划院呼和浩特010020

文章通过分析内蒙古自治区呼和浩特市以西6盟市(呼和浩特市、包头市、乌海市、巴彦淖尔市、鄂尔多斯市、阿拉善盟)及森工集团2015—2016年度森林保险灾后治理植被恢复情况,阐明了以政府引导为依托、政策支持为保障的森林保险不仅可以在... 详细信息

文章通过分析内蒙古自治区呼和浩特市以西6盟市(呼和浩特市、包头市、乌海市、巴彦淖尔市、鄂尔多斯市、阿拉善盟)及森工集团2015—2016年度森林保险灾后治理植被恢复情况,阐明了以政府引导为依托、政策支持为保障的森林保险不仅可以在灾后治理和植被恢复过程中为林业生产经营者提供有力的资金支持,而且在森林保护、促进林业可持续发展中发挥着重要作用。

关键词：森林保险植被恢复森林保护