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羊膜基质在组织修复中的应用研究进展

生物医学工程学杂志 2002年第4期19卷 676-679页

作者：闫国和艾国平粟永萍第三军医大学全军复合伤研究所重庆400038

羊膜 ( Am niotic mem brane)由羊膜上皮、基底膜及基质 3部分组成。羊膜是一种易得的生物材料 ,也易于加工、处理、保存和运输 ,并且在贮存相当长的时间 (一年 )后其适用性仍然不会受到损害 ,它在实验室和临床中已得到了广泛的应用。... 详细信息

羊膜 ( Am niotic mem brane)由羊膜上皮、基底膜及基质 3部分组成。羊膜是一种易得的生物材料 ,也易于加工、处理、保存和运输 ,并且在贮存相当长的时间 (一年 )后其适用性仍然不会受到损害 ,它在实验室和临床中已得到了广泛的应用。异源性羊膜移植后一般不发生排斥反应 ,是一种可被降解吸收的生物材料。本文旨在对羊膜作为生物敷料与其它生物敷料的比较、羊膜的组织结构、生物特性。

关键词：羊膜羊膜移植生物敷料组织修复皮肤移植

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固定剂对染色效果影响的研究

第三军医大学学报 1996年第1期18卷 70-72页

作者：古德全闫国和粟永萍第三军医大学预防医学系防原医学教研室

固定剂对染色效果影响的研究Ｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｆｉｘａｔｉｖｅｓｏｎｓｔａｉｎｉｎｇ古德全，闫国和，粟永萍（第三军医大学预防医学系防原医学教研室）重庆，６３００３８固定对染色效果的影响，直接关系到组... 详细信息

固定剂对染色效果影响的研究Ｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｆｉｘａｔｉｖｅｓｏｎｓｔａｉｎｉｎｇ古德全，闫国和，粟永萍（第三军医大学预防医学系防原医学教研室）重庆，６３００３８固定对染色效果的影响，直接关系到组织化学染色的成败和质量的高低。为此...

关键词：染色法固定剂组织学技术

慢病毒介导 shRNA 沉默鼠肝星状细胞 TGFβ1 对 α1Ⅰ型胶原表达的影响

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第三军医大学学报 2014年第5期36卷 456-460页

作者：张荣华闫国和汪国建粟永萍第三军医大学西南医院中西医结合科重庆400038 第三军医大学军事预防医学院全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

目的构建大鼠转化生长因子β1(transforming growth factor,TGFβ1)基因RNA干扰慢病毒载体,并观测其对大鼠肝星状细胞HSC-T6的TGFβ1基因沉默效应与对Ⅰ型胶原α1(alpha-1 typeⅠcollagen,Col1α1)表达的影响。方法针对大鼠TGFβ1基因CD... 详细信息

目的构建大鼠转化生长因子β1(transforming growth factor,TGFβ1)基因RNA干扰慢病毒载体,并观测其对大鼠肝星状细胞HSC-T6的TGFβ1基因沉默效应与对Ⅰ型胶原α1(alpha-1 typeⅠcollagen,Col1α1)表达的影响。方法针对大鼠TGFβ1基因CDs序列,筛选3个干扰靶点,合成其3对小干扰RNA(siRNA),将各对siRNA分别转入HSC-T6细胞,采用RT-PCR法从3对siRNA中筛选出最佳siRNA,设计并合成针对最佳siRNA靶序列的shRNA,退火形成双链,与载体pGreenPuro连接,构建pGreenPuro/TGFβ1 shRNA慢病毒载体,予以酶切与测序鉴定。pGreenPuro/TGFβ1 shRNA慢病毒载体经293细胞包装,将包装产生的高感染力的慢病毒颗粒感染HSC-T6细胞,倒置显微镜观察经感染的HSC-T6细胞的GFP表达情况,在mRNA与蛋白水平检测重组慢病毒pGreenPuro/TGFβ1 shRNA对HSC-T6细胞的TGFβ1基因的沉默效应及对Col1α1表达的影响。结果筛选到TGFβ1基因的最佳干扰靶序列。酶切与测序结果证实,构建pGreenPuro/TGFβ1 shRNA慢病毒载体成功。HSC-T6细胞经pGreenPuro/TGFβ1 shRNA慢病毒感染48 h后,RT-PCR检测未见TGFβ1基因表达,Col1α1基因较弱表达;Western blot检测显示TGFβ1、Col1α1蛋白表达均非常弱。结论成功构建大鼠TGFβ1基因RNA干扰慢病毒载体,该载体能有效沉默HSC-T6细胞的TGFβ1基因,并抑制Col1α1的表达。

关键词：转化生长因子β1 Ⅰ型胶原α1 RNA干扰小分子慢病毒载体

骨髓间充质干细胞在肌组织局部成肌分化的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2005年第1期19卷 70-73页

作者：王劲罗成基徐辉冉新泽闫国和粟永萍程天民第三军医大学全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室

目的　探讨骨髓间充质干细胞 (marrow mesenchmal stem cells,MSCs)移植至肌肉组织后的原位成肌分化情况。　方法　以 Bal B/ C雌性小鼠 36只 ,建立放射损伤合并创伤 (切割伤 +冻伤 )的严重肌损伤模型 ,再将分离扩增的雄性小鼠的单纯 M... 详细信息

目的　探讨骨髓间充质干细胞 (marrow mesenchmal stem cells,MSCs)移植至肌肉组织后的原位成肌分化情况。　方法　以 Bal B/ C雌性小鼠 36只 ,建立放射损伤合并创伤 (切割伤 +冻伤 )的严重肌损伤模型 ,再将分离扩增的雄性小鼠的单纯 MSCs及经 10μmol/ L 5 -氮杂胞苷 (5 - azacytidine,5 - Aza- CR)诱导 2 4 h的 MSCs以局部注射移植法 ,植入雌性小鼠正常肌肉组织和创伤后的肌肉组织 ,采用荧光标记的原位杂交法、免疫组织化学法在移植后 1、3、6、9、12及 15 d检测植入的 MSCs在肌肉组织原位的数量变化及成肌分化情况。　结果　植入的 MSCs数量随着时相延长而减少 ;单纯 MSCs植入正常肌肉组织 15 d,5 - Aza- CR诱导后的 MSCs植入正常肌肉组织 6 d,可见 MSCs分化为肌细胞 ,表达 desmin阳性 ;5 - Aza- CR诱导的 MSCs植入损伤肌肉组织 3d,单纯 MSCs植入损伤肌肉组织 6 d,可见 MSCs分化为肌细胞 ,表达 desmin阳性。　结论　 MSCs局部移植至肌肉组织局部可实现成肌分化 ,但经 5 - Aza- CR诱导后的MSCs植入损伤肌肉组织的 MSCs其成肌分化时相明显早于单纯 MSCs植入正常肌组织的

关键词：植入正常分化 MSC 肌肉组织诱导局部荧光标记骨髓间充质干细胞肌细胞

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鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化的防治作用

世界华人消化杂志 2011年第1期19卷 13-18页

作者：艾志波张荣华闫国和中国人民解放军第三军医大学西南医院中西医结合科重庆市400038 中国人民解放军第三军医大学军事预防医学院全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市400038

目的:研究鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(HF)的防治作用及对TGF-β1和Sman3/7蛋白表达的影响,探讨其机制.方法:SD♂大鼠90只,随机取10只作为正常对照组(A组),其余大鼠用皮下注射40%CCl4橄榄油油剂3mL/kg诱导大鼠肝纤维化模型8wk,于第2周... 详细信息

目的:研究鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(HF)的防治作用及对TGF-β1和Sman3/7蛋白表达的影响,探讨其机制.方法:SD♂大鼠90只,随机取10只作为正常对照组(A组),其余大鼠用皮下注射40%CCl4橄榄油油剂3mL/kg诱导大鼠肝纤维化模型8wk,于第2周时随机处死5只大鼠证实HF形成后,将剩下的大鼠随机分为肝纤维化模型组(B组)、鳖甲煎改良方高剂量组[C组,28.4g/(kg·d)]、中剂量组[D组,14.2g/(kg·d)]、低剂量组[E组,7.1g/(kg·d)]、复方鳖甲软肝片组[F组,0.6g/(kg·d)],每组15只.C、D、E、F组给予10mL/(kg·d)相应药液灌胃治疗,A、B组同时给予等剂量的生理盐水灌胃处理.8wk后采血测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、草氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白和球蛋白含量;取肝组织作HE染色观察肝纤维化程度变化;Westernblot方法检测TGF-β1、Smad3和Smad7蛋白的表达.结果:8wk后,与B组比较,C、D、E组和F组肝小叶结构破坏明显减轻,肝纤维化程度分级较B组明显好转;ALT和AST含量显著降低(P<0.01),白蛋白含量显著增加(37.85g/L±3.08g/L,38.25g/L±1.90g/L,38.13g/L±1.50g/L,38.09g/L±3.27g/Lvs27.05g/L±4.81g/L,均P<0.01);TGF-β1、Smad3蛋白表达显著减少(TGF-β1:0.127±0.014,0.122±0.051,0.126±0.027,0.119±0.020vs0.332±0.074,均P<0.01;Smad3:0.415±0.057,0.427±0.074,0.425±0.080,0.432±0.075vs0.527±0.054,均P<0.01),Smad7蛋白的表达明显增加(0.308±0.077,0.326±0.086,0.315±0.071,0.348±0.065vs0.185±0.059,均P<0.01),且C、D、E组和F组间疗效比较无明显差异.结论:鳖甲煎改良方能够显著减轻CCl4导致的大鼠肝纤维化程度,其作用机制可能与鳖甲煎改良方调控TGF-β1和Sman3/7信号转导蛋白表达有关.

关键词：鳖甲煎改良方肝纤维化转化生长因子β1 Smad3 Smad7

内皮素和一氧化氮在烧冲复合伤肺损伤中的作用

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第三军医大学学报 2003年第15期25卷 1361-1364页

作者：屈纪富郑怀恩林远闫国和程天民第三军医大学预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所重庆400038

目的　探讨内皮素 (Endothelin ,ET)和一氧化氮 (NO)在烧冲复合伤肺损伤中的作用及可能机制。方法　制作大鼠烧冲复合伤模型 ,用 99Tcm 人聚巨蛋白 ( 99Tcm macro aggregatedalbumin ,99Tcm MAA)标记方法观察肺部血液循环状况和肺血管... 详细信息

目的　探讨内皮素 (Endothelin ,ET)和一氧化氮 (NO)在烧冲复合伤肺损伤中的作用及可能机制。方法　制作大鼠烧冲复合伤模型 ,用 99Tcm 人聚巨蛋白 ( 99Tcm macro aggregatedalbumin ,99Tcm MAA)标记方法观察肺部血液循环状况和肺血管通透性 ,并检测血液流变学和动脉血气变化 ;分别用ET受体 (ETR)拮抗剂PD 14 2 893和NO合酶 (NOS)抑制剂硝基左旋精氨甲酯 (Nitro L argininemethylester ,L NAME)干预 ,观察其对上述与肺损伤密切相关的指标变化。结果　烧冲复合伤大鼠全血粘度、动脉血气分析、支气管肺泡灌洗液 (Bronchoalveolarlavagefluid ,BALF)放射性活性和肺部血液循环状况均出现了显著变化 (P <0 .0 5 ) ,给予PD 14 2 893和L NAME分别可减轻和加重这些指标的变化 (P <0 .0 5 )。结论　烧冲复合伤大鼠可出现明显肺损伤 ,ET和NO通过多种途径影响烧冲复合伤肺损伤的发生和发展。

关键词：内皮素一氧化氮烧冲复合伤肺脏

烧冲复合伤后内皮素和一氧化氮的变化及其意义

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第三军医大学学报 1998年第4期20卷 314-316页

作者：屈纪富郑怀恩林远古德全闫国和第三军医大学预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所重庆400038

目的：探讨烧冲复合作后肺组织内皮素（ET）和一氧化氮（NO）的变化特点及其意义。方法：检测伤后不同时间肺组织ET和NO含量的变化，并对伤后大鼠给以内皮素受体（ETR）拮抗剂和一氧化氮合酶（NOS）抑制剂干预治疗，观察肺脏的大体和镜... 详细信息

目的：探讨烧冲复合作后肺组织内皮素（ET）和一氧化氮（NO）的变化特点及其意义。方法：检测伤后不同时间肺组织ET和NO含量的变化，并对伤后大鼠给以内皮素受体（ETR）拮抗剂和一氧化氮合酶（NOS）抑制剂干预治疗，观察肺脏的大体和镜下改变，结果：伤后肺组织ET、NO含量及ET／NO比值均出现了明显变化，ET／NO比值变化与伤情呈显著正相关。ETR拮抗剂和NOS抑制剂分别可减轻和加重肺损伤。结论：伤后肺组织ET／NO比值升高，ET和NO之间平衡被破坏，这对烧冲复合伤肺损伤的发展具有重要意义。

关键词：烧冲复合伤肺脏内皮素一氧化氮

人羊膜负载猪骨髓间充质干细胞生长的形态学研究

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第三军医大学学报 2002年第7期24卷 775-777页

作者：闫国和粟永萍艾国平屈纪富程天民第三军医大学预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所重庆400038

目的　建立人羊膜 (HAM)负载培养骨髓间充质干细胞 (MSCs)生长的组织工程方法 ,观察MSCs生长增殖的形态特点。方法　将贵州小香猪的MSCs原代培养 ,传代扩增后 ,以不同密度多次接种于HAM基质面 ,逐日于倒置显微镜下观察MSCs的生长增殖变... 详细信息

目的　建立人羊膜 (HAM)负载培养骨髓间充质干细胞 (MSCs)生长的组织工程方法 ,观察MSCs生长增殖的形态特点。方法　将贵州小香猪的MSCs原代培养 ,传代扩增后 ,以不同密度多次接种于HAM基质面 ,逐日于倒置显微镜下观察MSCs的生长增殖变化情况 ,并于培养 8、1 8d后进行光镜、电镜观察。结果　接种后 30min内明显见到MSCs在HAM上贴附生长 ,MSCs能以合适的接种密度在羊膜上良好生长。结论　HAM对MSCs有明显的促增殖作用 ,MSCs可以HAM为载体在体外进行培养。

关键词：羊膜骨髓间充质干细胞形态学皮肤组织工程学皮肤损伤真皮替代物

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胫骨放射性损伤病理学改变的实验研究

中华放射医学与防护杂志 2002年第6期22卷 426-428页

作者：李建福程天民冉新泽闫国和林远第三军医大学全军复合伤研究所重庆400038

放射性骨损伤的发病学实质目前尚不清楚，多年来学者们在其发病机理方面存在很大分歧，矛盾焦点集中在射线对骨组织损伤是直接作用，还是致微循环障碍，以及二者之间的关联。故笔者采用病理组织形态学、超微结构观察及骨的微循环检测手... 详细信息

放射性骨损伤的发病学实质目前尚不清楚，多年来学者们在其发病机理方面存在很大分歧，矛盾焦点集中在射线对骨组织损伤是直接作用，还是致微循环障碍，以及二者之间的关联。故笔者采用病理组织形态学、超微结构观察及骨的微循环检测手段，探讨射线对长骨局部照射后的近、远期效应，试图揭示放射性骨损伤微血管系统与骨坏死间的内在联系，并为阐明发生机理提供依据。

关键词：胫骨放射性损伤病理学实验研究