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HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴细胞活化亚群与病毒载量的相关性

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中国全科医学 2016年第8期19卷 869-872页

作者：李强李杰桑锋刘真岳静宇沈俊岭钱洁玉何书杰徐立然河南中医学院第一附属医院艾滋病临床研究中心河南省病毒性疾病中医药防治重点实验室河南省郑州市450000

目的探讨HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴细胞活化亚群与病毒载量相关性。方法 2012年6-8月选择河南省某AIDS高发地区HIV感染者322例和AIDS患者87例为研究对象,分别采用流式细胞仪和全自动病毒载量仪检测HIV感染者和AIDS患者外周血T淋... 详细信息

目的探讨HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴细胞活化亚群与病毒载量相关性。方法 2012年6-8月选择河南省某AIDS高发地区HIV感染者322例和AIDS患者87例为研究对象,分别采用流式细胞仪和全自动病毒载量仪检测HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴细胞及其活化亚群和血浆病毒载量,根据病毒载量水平将研究对象分为Ⅰ-Ⅳ组。结果HIV感染者与AIDS患者CD_3^+T细胞相对值、CD_(28)^+/CD_4^+比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HIV感染者淋巴细胞绝对值和相对值、CD_3^+T细胞绝对值、CD_3^+CD_8^+T细胞绝对值、CD_3^+CD_4^+T细胞绝对值和相对值、CD_3^+CD_4^+CD_8^+T细胞绝对值均高于AIDS患者,CD_3^+CD_8^+T细胞相对值低于AIDS患者,辅助性T细胞与抑制性T细胞比值(H/S)、CD_(28)^+/CD_8^+高于AIDS患者,CD_(38)^+/CD_8^+低于AIDS患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组淋巴细胞绝对值和相对值、CD_3^+T细胞相对值、CD_3^+CD_8^+T细胞相对值、CD_3^+CD_4^+T细胞绝对值和相对值及H/S、CD_(28)^+/CD_4^+、CD_(28)^+/CD_8^+、CD_(38)^+/CD_8^+比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。CD_3^+T细胞相对值、CD_3^+CD_8^+T细胞相对值及CD_(38)^+/CD_8^+与病毒载量水平呈正相关(r_s=0.128、0.291、0.409,P<0.05);CD_3^+CD_4^+T细胞绝对值和相对值、H/S、CD_(28)^+/CD_4^+、CD_(28)^+/CD_8^+与病毒载量水平呈负相关(r_s=-0.246、-0.318、-0.297、-0.184、-0.204,P<0.05)。结论 HIV感染者和AIDS患者T淋巴细胞活化过程发生变化;随着病毒载量水平变化,HIV感染者和AIDS患者的T淋巴细胞活化亚群水平也不同。

关键词：获得性免疫缺陷综合征 HIV T淋巴细胞亚群病毒载量

氧化石墨烯增强的骨仿生静电纺左旋聚乳酸纳米纤维支架的制备及表征

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材料科学与工程学报 2016年第4期34卷 535-539,555页

作者：邵伟力桑锋何书杰钱洁玉李强王倩天津工业大学复合材料研究所先进纺织复合材料教育部重点实验室天津300387 河南中医学院第一附属医院河南郑州450000 河南省病毒性疾病中医药防治重点实验室河南郑州450000

利用静电纺丝技术制备了左旋聚乳酸/氧化石墨烯(PLLA/GO)复合纳米纤维毡。通过扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、孔隙率测试、傅里叶红外光谱分析(FTIR)以及拉伸测试分别对PLLA/GO纳米纤维的形貌结构、孔隙率及力学性能进行... 详细信息

利用静电纺丝技术制备了左旋聚乳酸/氧化石墨烯(PLLA/GO)复合纳米纤维毡。通过扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、孔隙率测试、傅里叶红外光谱分析(FTIR)以及拉伸测试分别对PLLA/GO纳米纤维的形貌结构、孔隙率及力学性能进行了研究。将小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)种植在TSF/PLLA纳米纤维上,通过荧光显微镜分析和碱性磷酸酶(ALP)测试、SEM观察细胞在材料表面的生长以及矿物沉积情况评价复合纳米纤维的生物学性能。结果表明,与纯的PLLA静电纺纳米纤维支架相比,PLLA/GO复合纳米纤维支架的纤维直径显著减小,孔隙率增大,力学性能明显得到改善,拉伸强度和杨氏模量均高于纯PLLA纳米纤维支架将近3倍,而且能够更好地促进MSCs的粘附、增殖和分化。

关键词：聚左旋乳酸氧化石墨烯力学性能生物学性能

基于两种方法探讨益艾康含药血清对NK-92MI细胞毒效应的影响

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基于两种方法探讨益艾康含药血清对NK-92MI细胞毒效应的影响

益艾康含药血清对人NK-92MI细胞凋亡及其受体NKG2A、NKG2D、细胞因子IFN-γ表达的影响

中华中医药学会防治艾滋病分会2018年学术年会

作者：钱洁玉桑锋李强徐立然河南中医药大学第一附属医院河南省病毒性疾病中医药防治重点实验室

目的:探讨MTT、LDH两种实验方法检测益艾康含药血清对人自然杀伤细胞细胞毒效应的影响。方法:培养人NK-92MI细胞系,设空白对照组,4﹪、8﹪、10﹪、15﹪含药血清组,48h后分别加入空白鼠血清及不同浓度的益艾康含药血清,继续培养6h后采用... 详细信息

目的:探讨MTT、LDH两种实验方法检测益艾康含药血清对人自然杀伤细胞细胞毒效应的影响。方法:培养人NK-92MI细胞系,设空白对照组,4﹪、8﹪、10﹪、15﹪含药血清组,48h后分别加入空白鼠血清及不同浓度的益艾康含药血清,继续培养6h后采用MTT、LDH法检测对其靶细胞K562的细胞毒效应;结果:两种方法均显示出8﹪、10﹪益艾康含药血清组NK-92MI细胞的细胞毒效应明显高于空白对照组(P﹤0.05);结论:两种实验方法虽然实验原理不同,但在评判NK-92MI细胞杀伤效应方面具有一致性,均显示出益艾康含药血清能够显著增强NK细胞的细胞毒功能。

关键词： NK-92MI 细胞毒效应 LDH MTT 益艾康

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中华中医药杂志 2021年第11期36卷 6756-6759页

作者：钱洁玉桑锋刘真李杰沈俊岭张清燕李强河南中医药大学第一附属医院郑州450000 河南省病毒性疾病中医药防治重点实验室郑州450000

目的:探讨益艾康含药血清对NK-92MI细胞凋亡及其受体NKG2A、NKG2D,细胞因子γ干扰素(IFN-γ)表达的影响。方法:利用细胞系NK-92MI为研究对象,设4%、8%、15%、25%含药血清及空白对照组,培养48h后分别加入空白鼠血清及不同浓度的益艾康含... 详细信息

目的:探讨益艾康含药血清对NK-92MI细胞凋亡及其受体NKG2A、NKG2D,细胞因子γ干扰素(IFN-γ)表达的影响。方法:利用细胞系NK-92MI为研究对象,设4%、8%、15%、25%含药血清及空白对照组,培养48h后分别加入空白鼠血清及不同浓度的益艾康含药血清,再培养6h后收集细胞。流式细胞术检测细胞凋亡率及NKG2A、NKG2D膜抗体的表达;ELISA检测NK-92MI细胞IFN-γ分泌的改变;Real-Time PCR检测细胞NKG2A、NKG2D、IFN-γ mRNA的表达。结果:与空白对照组比较,8%益艾康含药血清组能显著下调NK-92MI细胞NKG2A mRNA的表达(P<0.05);也能显著促进其细胞因子IFN-γ的分泌(P<0.05),8%含药血清组能显著抑制NK-92MI细胞早期凋亡率(P<0.05),15%含药血清组能显著抑制NK-92MI细胞晚期凋亡率(P<0.05)。结论:益艾康含药血清增强NK-92MI细胞毒功能的机制可能与抑制NK细胞凋亡,下调其抑制性受体NKG2A表达,促进IFN-γ分泌有关。

关键词：益艾康 NK-92MI 凋亡率 NKG2A NKG2D γ干扰素

益艾康含药血清对人NK-92MI细胞增殖及其效应分子颗粒酶穿孔素基因表达的影响

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时珍国医国药 2015年第4期26卷 873-875页

作者：钱洁玉桑锋李杰刘真何书杰李强徐立然河南中医学院第一附属医院河南省病毒性疾病中医药防治重点实验室河南郑州450000

目的探讨益艾康含药血清对人自然杀伤细胞增殖及其效应分子颗粒酶、穿孔素基因表达的影响。方法培养人NK-92MI细胞系,设空白对照组,4﹪、8﹪、10﹪、15﹪含药血清组,48h后分别加入空白鼠血清及不同浓度的益艾康含药血清,继续培养6h后观... 详细信息

目的探讨益艾康含药血清对人自然杀伤细胞增殖及其效应分子颗粒酶、穿孔素基因表达的影响。方法培养人NK-92MI细胞系,设空白对照组,4﹪、8﹪、10﹪、15﹪含药血清组,48h后分别加入空白鼠血清及不同浓度的益艾康含药血清,继续培养6h后观测NK-92MI细胞数量变化、增殖及对其靶细胞K562的细胞毒效应;Real Time PCR检测NK细胞效应分子颗粒酶、穿孔素基因的表达。结果与空白对照组相比,不同浓度的益艾康含药血清均能够促进NK-92MI细胞增殖,8﹪、10﹪益艾康含药血清组NK-92MI细胞的细胞毒效应明显高于空白对照组(P﹤0.05);2-△△Ct法分析表明8﹪益艾康含药血清能明显上调NK-92MI细胞颗粒酶基因的表达。结论益艾康含药血清能显著促进NK-92MI细胞增殖,增强NK-92MI细胞毒功能,其机制可能与上调颗粒酶基因的表达有关。

关键词：益艾康 NK-92MI 细胞毒效应颗粒酶穿孔素

益艾康对HIV-1感染者CD_(4)^(+)T淋巴细胞ICAM-1、LFA-1表达水平的影响

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中华中医药杂志 2023年第8期38卷 3986-3989页

作者：岳静宇李杰刘真钱洁玉张清燕王丹妮徐立然河南中医药大学第一附属医院河南省病毒性疾病中医药防治重点实验室郑州450000

目的:观察益艾康对人类免疫缺陷病毒(HIV)-1感染者CD_(4)^(+)T淋巴细胞ICAM-1、LFA-1表达水平的影响。方法:收集20例HIV-1感染者(HARRT治疗组和益艾康+HARRT治疗组各10例)和6名健康组EDTA抗凝全血,流式细胞技术检测各组CD_(4)^(+)T淋巴... 详细信息

目的:观察益艾康对人类免疫缺陷病毒(HIV)-1感染者CD_(4)^(+)T淋巴细胞ICAM-1、LFA-1表达水平的影响。方法:收集20例HIV-1感染者(HARRT治疗组和益艾康+HARRT治疗组各10例)和6名健康组EDTA抗凝全血,流式细胞技术检测各组CD_(4)^(+)T淋巴细胞数量,ELISA检测血清中ICAM-1、LFA-1α水平,荧光定量PCR方法观察各组ICAM-1、LFA-1mRNA表达水平。结果:与健康组比较,两治疗组CD_(4)^(+)T淋巴细胞绝对计数显著降低(P<0.05),HARRT治疗组ICAM-1、LFA-1 mRNA表达显著升高(P<0.05);与HARRT治疗组比较,艾益康+HAART治疗组CD_(4)^(+)T淋巴细胞绝对计数显著升高(P<0.05),ICAM-1水平及LFA-1mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论:益艾康可降低HIV-1感染者CD_(4)^(+)T淋巴细胞ICAM-1、LFA-1的表达,益艾康可能通过稳定或提高CD_(4)^(+)T淋巴细胞数量来调节HIV-1患者的免疫功能。

关键词：益艾康人类免疫缺陷病毒细胞间黏附分子1 免疫功能

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HIV潜伏库形成与维持机制的研究进展

病毒学报 2024年第5期40卷 1173-1179页

作者：易立政邓博文张清燕桑锋刘真岳静宇钱洁玉李强李杰河南中医药大学第一附属医院艾滋病临床研究中心郑州450000 河南中医药大学第一临床医学院郑州450000 河南省病毒性疾病中医药防治重点实验室郑州450000

人体感染人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)后,虽然抗逆转录病毒疗法(Antiretroviral therapy,ART)可有效控制病毒复制,却无法彻底清除HIV,这主要是由于潜伏病毒库的存在。HIV潜伏库是目前治愈HIV感染的主要挑战,其... 详细信息

人体感染人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)后,虽然抗逆转录病毒疗法(Antiretroviral therapy,ART)可有效控制病毒复制,却无法彻底清除HIV,这主要是由于潜伏病毒库的存在。HIV潜伏库是目前治愈HIV感染的主要挑战,其形成及维持机制是近几年的研究热点,本文从HIV RNA代谢角度探讨HIV潜伏库的形成机制、从细胞克隆扩增方面分析HIV潜伏库的维持机制,并对HIV RNA代谢和克隆扩增途径治愈HIV潜伏库的研究进展进行系统综述,以期为根除潜伏病毒提供新思路。

关键词： HIV 潜伏病毒库 RNA代谢克隆扩增维持机制

益艾康胶囊对IFN-γ损伤肠黏膜屏障的紧密连接及相关蛋白Claudin-1、Claudin-5表达的影响

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中国医院药学杂志 2020年第8期40卷 897-901页

作者：姚静漪邓博文李承乘刘志斌刘真钱洁玉李强桑锋河南中医药大学河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院河南郑州450006 河南省病毒性疾病中医药防治重点实验室河南郑州450006

目的:通过研究益艾康胶囊对IFN-γ损伤肠黏膜屏障模型的紧密连接结构及紧密连接蛋白Claudin-1、Claudin-5表达的影响,揭示益艾康胶囊对HIV/AIDS肠黏膜屏障损伤的保护作用机制。方法:利用人结肠癌细胞株Caco-2联合Transwell技术构建肠黏... 详细信息

目的:通过研究益艾康胶囊对IFN-γ损伤肠黏膜屏障模型的紧密连接结构及紧密连接蛋白Claudin-1、Claudin-5表达的影响,揭示益艾康胶囊对HIV/AIDS肠黏膜屏障损伤的保护作用机制。方法:利用人结肠癌细胞株Caco-2联合Transwell技术构建肠黏膜屏障模型,IFN-γ刺激肠黏膜屏障模型模拟体内HIV损伤肠黏膜的病理过程。本实验设置空白对照组(空白鼠血清)、模型组(IFN-γ组)、益艾康胶囊组(IFN-γ+益艾康胶囊含药血清)、姜黄素组(IFN-γ+姜黄素),检测24 h、48 h、72 h跨细胞膜电阻抗值、荧光素钠透过率、紧密连接蛋白Claudin-1、Claudin-5mRNA及蛋白的变化情况。结果:与空白对照组相比,模型组的跨膜电阻值,降低明显(P<0.05),随干预时间呈下降趋势。与模型组相比,益艾康胶囊组在不同时间点均能提高Caco-2细胞单层电阻值,且数值高于同等条件下的姜黄素组;在模型组中,荧光素钠的渗漏量随干预时间增加而增加,48 h后明显降低。与模型组相比,益艾康胶囊组与姜黄素组荧光素钠的渗漏量均明显降低(P<0.05),但2组之间不存在统计学差异;与空白对照组相比,IFN-γ诱导Caco-2细胞单层Claudin-1、Claudin-5mRNA及蛋白表达下降(P<0.05),与模型组相比益艾康胶囊组Claudin-1、Claudin-5 mRNA及蛋白的表达上调(P<0.05)。结论:益艾康胶囊能降低IFN-γ引起的肠黏膜屏障的通透性,维持肠黏膜屏障的完整性,其机制与抑制紧密连接蛋白Claudin-1、Claudin-5的表达下降从而维持正常的紧密连接相关。

关键词：艾滋病肠黏膜屏障损伤 IFN-γ 益艾康胶囊 Claudin-1 Claudin-5

基于CCR5受体的中药化合物抑制剂的虚拟筛选及活性评价

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中国医院药学杂志 2021年第12期41卷 1185-1191,1196页

作者：段晨晨邓博文康宁桑锋刘真钱洁玉李杰刘志斌张清燕李强河南中医药大学河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院艾滋病研究中心河南郑州450006 河南省病毒性疾病中医药防治重点实验室河南郑州450006 河南中医药大学第一附属医院妇产科河南郑州450006

目的:以C-C趋化因子受体5(C-C chemokine receptor type 5,CCR5)为靶点,利用计算机辅助药物设计技术中的虚拟筛选技术、体外抗病毒活性实验、细胞毒性测试以及分子动力学实验筛选出低毒性、高抗艾滋病病毒(HIV)活性的中药化合物抑制剂,... 详细信息

目的:以C-C趋化因子受体5(C-C chemokine receptor type 5,CCR5)为靶点,利用计算机辅助药物设计技术中的虚拟筛选技术、体外抗病毒活性实验、细胞毒性测试以及分子动力学实验筛选出低毒性、高抗艾滋病病毒(HIV)活性的中药化合物抑制剂,并探究其内在结合机制。方法:接受者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评估Ledock、AutoDock Vina对接软件对于CCR5结构灵敏性,选择适合CCR5抑制剂筛选的对接软件,运用多级筛选的策略对中药系统药理数据库和分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)中的中药化合物进行筛选。利用荧光素酶报告基因的表达检测中药化合物的抗HIV活性,细胞毒性实验测试中药化合物对MAGI-CCR5、L02细胞毒性,分子动力学实验验证中药化合物与CCR5的结合作用。结果:ROC曲线确定了分子对接软件(Ledock,AUC=0.899),虚拟筛选得到8种潜在拮抗CCR5的中药天然小分子;抗HIV活性实验及细胞毒性测试获得2个低毒性、高抗HIV活性中药化合物MT[IC50,(21.79±4.12)μmol·L^(-1);CC50MAGI-CCR5,(170.20±7.75)μmol·L^(-1);CC50L02,(108.04±11.64)μmol·L^(-1)]及FY[IC50,(6.69±1.40)μmol·L^(-1);CC50MAGI-CCR5,(97.82±10.57)μmol·L^(-1);CC50L02,(114.70±10.40)μmol·L^(-1)]。分子动力学实验表明,MT-CCR5、FY-CCR5体系均方根偏差(root mean square deviation,RMSD)值均较小,平均分别为2.77?、2.18?,表明两化合物可与CCR5紧密结合,两者与CCR5结合的主要作用力包括氢键(结合氢键平均个数分别为5.19和4.65个)、范德华力(MTΔEvdw=-232.04±3.45 kJ·mol^(-1),FYΔEvdw=-193.66±0.56 kJ·mol^(-1))及非极性相互作用(MTΔEvdw±ΔGnonpolar=-255.73±4.03 kJ·mol^(-1),FYΔEvdw±ΔGnonpolar=-222.39±0.60 kJ·mol^(-1))。结论:中药化合物MT和FY可与CCR5结合从而具有一定的抗HIV活性,可作为先导抗病毒中药化合物进行下一步结构改造。

关键词：虚拟筛选 C-C趋化因子受体5 假病毒活性检测细胞毒性分子动力学