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通过调节细胞膜组成提高乳杆菌冻干存活率的研究

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通过调节细胞膜组成提高乳杆菌冻干存活率的研究

作者：钱志浩江南大学

学位级别：硕士

乳杆菌是一类具有维持肠道菌群稳态、提高免疫力、拮抗病菌等功能的益生菌,要使乳杆菌可以发挥理想的益生效果,必须保证乳杆菌的数量足够并具有活力。采用真空冷冻干燥技术并加入适宜的冻干保护剂是目前最常用的乳杆菌制剂制备方法。但... 详细信息

乳杆菌是一类具有维持肠道菌群稳态、提高免疫力、拮抗病菌等功能的益生菌,要使乳杆菌可以发挥理想的益生效果,必须保证乳杆菌的数量足够并具有活力。采用真空冷冻干燥技术并加入适宜的冻干保护剂是目前最常用的乳杆菌制剂制备方法。但是冻干保护剂的保护效果具有菌株特异性,同种保护剂对不同种属的乳杆菌保护效果存在很大差异,而要对每一种乳杆菌都进行保护剂的筛选优化显得费时费力。因此,本论文从调节乳杆菌细胞膜组成提高抗逆性的角度出发,考察了高冻干存活率乳杆菌的细胞膜脂肪酸组成特点,并探究了多种调节细胞膜组成的方法对乳杆菌冻干存活率及稳定性的影响,在此基础上将多种有效方法组合使用,对制备高活性乳杆菌菌粉具有指导意义。主要研究内容和结果如下:首先探究了高冻干存活率乳杆菌的细胞膜脂肪酸组成特点。使用相同的培养条件培养不同种属的二十四株乳杆菌并收集菌泥,在相同的冻干保护剂及相同的冻干工艺条件下进行真空冷冻干燥。同时使用相同的菌泥,通过镜检统计形态大小,通过硫酸蒽酮法检测荚膜多糖水平,提取并通过GC-MS检测细胞膜脂肪酸组成。挑选出低荚膜多糖水平、形态大小接近的乳杆菌,比较其冻干存活率差异及细胞膜脂肪酸组成差异,探究高冻干存活率乳杆菌的细胞膜脂肪酸组成特点。结果表明,不同种属乳杆菌在相同的冻干条件下冻干存活率有显著差异(33.29%-82.47%),并且冻干存活率较高的菌株具有细胞膜脂肪酸不饱和度较高、平均链长较短的特点。然后选择植物乳杆菌N8作为研究对象,使用各种环境胁迫处理,研究胁迫处理后细胞膜脂肪酸组成与冻干存活率的变化。结果表明,经过各种环境胁迫处理后的植物乳杆菌N8的细胞膜不饱和度、环丙烷脂肪酸比例、平均酰基链长组成发生有规律的小幅度变化,冻干存活率的变化也不大,仅有小幅的提高或下降。另外,植物乳杆菌N8经过胁迫处理后初始活菌数及储藏稳定性都发生了下降。接着,使用不同的外源脂肪酸及吐温对植物乳杆菌N8的细胞膜进行调节,实验表明大多数外源中链、中长链脂肪酸添加后植物乳杆菌N8无法正常生长,无法利用其调节乳杆菌细胞膜组成,只有油酸、吐温80以及吐温20的添加不影响植物乳杆菌N8的正常生长。检测添加这几类脂肪酸类物质使乳杆菌细胞膜脂肪酸组成发生变化并比较乳杆菌冻干存活率,结果表明:添加吐温80后植物乳杆菌N8细胞膜脂肪酸不饱和度从58.64±0.46%提高至79.15%±0.56%,存活率从55.40±3.45%提升至64.84±1.05%;添加油酸提高不饱和度,存活率小幅提高;添加吐温20缩短细胞膜脂肪酸的平均链长,略微提高冻干存活率。进一步通过一些机制明确的能调节细菌细胞膜组成的物质,如多异戊二烯结构的β胡萝卜素、维生素k1(甲萘醌)、角鲨烯;吸附于细胞膜表面,调节膜流动性的氨基酸衍生物褪黑素;还有环糊精、维生素E等可以进入细胞膜、调节细胞膜的物质。通过添加这些物质,检测冻干存活率变化及细胞膜脂肪酸变化。结果发现:这些调节物质对乳杆菌的冻干存活率产生有差异的效果,添加β胡萝卜素、褪黑素后植物乳杆菌N8有较为明显的冻干存活率的提高,从53.97±1.46%分别提高到了68.53±1.79%和72.67±2.32%。添加β胡萝卜素培养后冻干,菌粉在37℃储存2个月后仍有51.30±1.83%的存活率,活菌数3.65±0.11×10CFU·g。最后将有效提高植物乳杆菌N8冻干存活率的调节方式进行组合使用,研究组合使用是否可以增强调节效果进一步提高乳杆菌的冻干存活率,结果表明添加2mg/m L的吐温80、500μg/m L的β胡萝卜素和500μg/m L的褪黑素后,植物乳杆菌N8的冻干存活率从53.97±1.46%提高到86.05±1.27%,大幅提高。使用这些物质培养其他种属的乳杆菌后,冻干存活率均发生了显著提升。

关键词：乳杆菌冻干存活率稳定性细胞膜

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基于径向基函数的冷却塔风场重构

工程力学 2019年第5期36卷 226-234页

作者：李维勃王国砚钱志浩王昊同济大学航空航天与力学学院上海200092

采用径向基函数法根据风洞试验结果对冷却塔的塔筒外表面进行风场重构,比较了重构前后喉部高度处迎风点和背风点的时程风压系数的相对误差,得出当体型常数C=0.5 C_(max)时(C_(max)为C值的最大取值),在整个采样时间内绝大多数时程风压系... 详细信息

采用径向基函数法根据风洞试验结果对冷却塔的塔筒外表面进行风场重构,比较了重构前后喉部高度处迎风点和背风点的时程风压系数的相对误差,得出当体型常数C=0.5 C_(max)时(C_(max)为C值的最大取值),在整个采样时间内绝大多数时程风压系数的相对误差在5%以内;将若干子午线上和环线上的重构结果与刚性模型测压风洞试验结果进行对比,证明了重构前后风压系数分布一致;分析了径向基函数中3种不同的C值对重构风场的影响,得出在这3种C值重构的结果中,取C=0.5 C_(max)时重构的效果最好;最后比较了两种不同点集密度重构风场的风场特性,得出加密前后风场特性不变的结果,为优化后续的结构瞬态动力响应分析提供了依据。该文研究表明,基于径向基函数法进行冷却塔风场重构是一种简单、有效的方法。

关键词：冷却塔结构风场重构径向基函数风洞试验风荷载时程

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油气地质实验分析技术发展趋势与展望

石油实验地质 2003年第B11期25卷 621-624页

作者：曹寅钱志浩中国石化石油勘探开发研究院无锡实验地质研究所江苏无锡214151

该文是作者在实践和调研过程中所接触到的一些当前油气地质实验分析的主要进展,包括基础理论研究(干酪根热降解成烃理论、陆相有机质成烃理论、未成熟—低成熟石油生成理论等)和油气地质实验分析技术(分析测试仪器和分析测试技术等)的... 详细信息

该文是作者在实践和调研过程中所接触到的一些当前油气地质实验分析的主要进展,包括基础理论研究(干酪根热降解成烃理论、陆相有机质成烃理论、未成熟—低成熟石油生成理论等)和油气地质实验分析技术(分析测试仪器和分析测试技术等)的概括介绍。此外,作者还对油气地质实验分析发展趋势及今后油气地质实验分析展望提出了建议。

关键词：有机质成烃理论微观地质研究理性勘探实验分析油气地质

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新疆塔里木盆地北部原油运移地球化学效应

石油实验地质 2001年第2期23卷 186-190页

作者：钱志浩曹寅中国石化无锡实验地质研究所江苏无锡214151

文中提出的 6个新的原油轻烃指纹运移参数以及轻重烃、生物标志物等其它运移参数 ,应用于塔北地区原油运移地球化学效应的研究 ,取得了一定成效。海西晚期生成的油气在运移指标上都反映与奥陶系源岩有关 ,应是沿着海西不整合面大规模由... 详细信息

文中提出的 6个新的原油轻烃指纹运移参数以及轻重烃、生物标志物等其它运移参数 ,应用于塔北地区原油运移地球化学效应的研究 ,取得了一定成效。海西晚期生成的油气在运移指标上都反映与奥陶系源岩有关 ,应是沿着海西不整合面大规模由阿瓦提和满加尔坳陷的油源区向北侧向运移到沙雅隆起的产物。而喜山期生成的油气其运移指标不仅反映与奥陶系源岩有关 ,也与三叠-侏罗系源岩有一定关系。它也能接受北面库车坳陷向南侧向运移的陆相油气。

关键词：轻烃指纹运移参数侧向运移原油地球化学效应塔里木盆地北部

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轻质原油地化新参数与塔里木盆地油源岩探讨

石油实验地质 1997年第1期19卷 58-65页

作者：周锦南钱志浩周桂英地矿部石油地质中心实验室无锡214151

本文介绍了一种轻质原油的新的仪器分析方法，即质谱族组成分析方法。一次进样分析可快速获得链烷、环烷及芳烃共计11类化合物的族组成数据。作者用本方法分析了新疆塔里木盆地等几个不同地区的26个油样。为充分利用分析结果，用数理统... 详细信息

本文介绍了一种轻质原油的新的仪器分析方法，即质谱族组成分析方法。一次进样分析可快速获得链烷、环烷及芳烃共计11类化合物的族组成数据。作者用本方法分析了新疆塔里木盆地等几个不同地区的26个油样。为充分利用分析结果，用数理统计方法对全部质谱分析结果进行了计算分析，由此提取出可用于研究石油成熟度、生油母质类型和油气运移程度的3个地球化学新参数。最后，作者运用这3个新参数对塔里木盆地可能的油源岩作了研究性的探讨。

关键词：轻质原油质谱族组成分析塔里木盆地油源岩

耦合拉格朗日-欧拉方法及其在海洋工程中的应用

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哈尔滨工程大学学报（英文版） 2024年第2期23卷 366-397页

作者：钱志浩杨腾茂刘谋斌 College of Engineering Peking UniversityBeijing 100871China Joint Laboratory of Marine Hydrodynamics and Ocean Engineering Laoshan LaboratoryQingdao 266237China

Combining the strengths of Lagrangian and Eulerian descriptions,the coupled Lagrangian–Eulerian methods play an increasingly important role in various *** work reviews their development and application in ocean ***,we briefly outline the advantages and disadvantages of the Lagrangian and Eulerian descriptions and the main characteristics of the coupled Lagrangian–Eulerian ***,following the developmental trajectory of these methods,the fundamental formulations and the frameworks of various approaches,including the arbitrary Lagrangian–Eulerian finite element method,the particle-in-cell method,the material point method,and the recently developed Lagrangian–Eulerian stabilized collocation method,are detailedly *** addition,the article reviews the research progress of these methods with applications in ocean hydrodynamics,focusing on free surface flows,numerical wave generation,wave overturning and breaking,interactions between waves and coastal structures,fluid–rigid body interactions,fluid–elastic body interactions,multiphase flow problems and visualization of ocean flows,***,the latest research advancements in the numerical stability,accuracy,efficiency,and consistency of the coupled Lagrangian–Eulerian particle methods are reviewed;these advancements enable efficient and highly accurate simulation of complicated multiphysics problems in ocean and coastal *** building on these works,the current challenges and future directions of the hybrid Lagrangian–Eulerian particle methods are summarized.

关键词： Coupled Lagrangian–Eulerian description Ocean engineering Wave–structure interaction Particle methods Arbitrary Lagrangian–Eulerian(ALE)methods Particle-in-cell(PIC) Material point method(MPM) Lagrangian–Eulerian stabilized collocation method(LESCM)

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基于SNMP和OPC的泵站监控代理的实现

计算机工程 2009年第21期35卷 244-246页

作者：钱志浩王建中杭州电子科技大学信息与控制研究所杭州310018

为实现对城市污水泵站设备的远程实时监测与控制,分析简单网络管理协议(SNMP)和OLEforProcessControl(OPC)技术的特点及其实现方法。结合2种技术,运用AgentX协议及在SNMPAgent中嵌入OPC客户端的方式构建扩展代理/管理系统,通过举例分析... 详细信息

为实现对城市污水泵站设备的远程实时监测与控制,分析简单网络管理协议(SNMP)和OLEforProcessControl(OPC)技术的特点及其实现方法。结合2种技术,运用AgentX协议及在SNMPAgent中嵌入OPC客户端的方式构建扩展代理/管理系统,通过举例分析,验证SNMP和OPC技术可增强设备的运行安全,提高泵站运行效率。

关键词：监控系统简单网络管理协议 OPC技术代理 AgentX协议