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流感嗜血杆菌对离体气管粘膜上皮细胞的作用及细菌感染对COPD患者气道炎症影响的研究

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流感嗜血杆菌对离体气管粘膜上皮细胞的作用及细菌感染对COPD患者...

作者：钱建美第二军医大学

学位级别：硕士

目的探讨不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)与气液界面无血清培养原代兔气管粘膜上皮细胞的相互作用;将该菌作用于原代培养人的气管、支气管粘膜上皮细胞，诱导其分泌和表达前炎症细胞因子并观察其变化;了解上海地区门急诊COPD急性加重期(AE... 详细信息

目的探讨不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)与气液界面无血清培养原代兔气管粘膜上皮细胞的相互作用;将该菌作用于原代培养人的气管、支气管粘膜上皮细胞，诱导其分泌和表达前炎症细胞因子并观察其变化;了解上海地区门急诊COPD急性加重期(AECB)患者气道的细菌感染情况，分别比较脓痰组、白粘痰组的痰炎性细胞数与细菌阳性率，并研究AECB患者气道细菌感染对气道炎症的影响。方法 (1)用低温酶消化法分离兔气管粘膜上皮细胞，无血清培养基及胶原覆盖膜形成的气液界面培养方式培养，使上皮细胞分化成假复层粘膜纤毛上皮细胞，然后加入NTHi感染上皮细胞，24小时后行扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)检查;(2)同上法分离人气管、支气管粘膜上皮细胞(HBEC)，无血清培养基培养细胞融合成片，分别用NTHi、NTHi+红霉素(0.1mg／L)、NTHi+红霉素(10mg／L)、NTHi+庆大霉素(100mg／L)、NTHi+地塞米松(0.1mM)、正常未处理为对照组感染HBEC24h后，ELISA法检测培养上清液中IL-8、TNF-α的水平和免疫组化法检查细胞表达ICAM-1的变化;(3)收集门急诊慢性支气管炎、COPD急性加重期患者159份痰液进行分离培养，并对痰颜色进行评分、炎症细胞计数与细胞分类检查，研究脓痰组、白粘痰组的痰炎性细胞数与细菌阳性率的差异;(4)收集97份取自于97例AECB患者痰，被分为5组，铜绿假单胞菌组、肺炎克雷白杆菌组、流感嗜血杆菌组、副流感嗜血杆菌组和无细菌生长组，15份痰取自于15例正常健康对照组，对痰液进行炎性细胞计数与细胞分类检查，并用ELISA法测定痰上清液中白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素6(IL-6)与肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果 (1)NTHi感染24h后SEM示气管粘膜上皮细胞表面结构破坏，90％细胞凋亡或死亡，纤毛倒伏、断裂，细菌与非纤毛上皮细胞连接，TEM示细胞表面有较多微绒毛，细菌粘附在细胞表面，伴微绒毛延伸或伪足包绕细菌，将其吞噬至胞内;(2)NTHi能显著诱导HBEC释放IL-8、TNF-α和细胞膜表达ICAM-1，与正常对照组相比(P＜0.001)，0.1mg／L红霉素、庆大霉素组与NTHi组类似显著诱导HBEC释放IL-8、TNF-α和ICAM-1的表达，10mg／L红霉素、地塞米松组抑制IL-8、TNF-α分泌和ICAM-1的表达，尤以地塞米松组为显著;(3)共鉴定出致病菌92株(57.9％)，省二军医大学不士学位论文主要为流感嗜血杆菌、肺炎克雷白杆菌、铜绿假单胞菌，159份痰中副流感嗜血杆菌共57株o5．90），脓痰87份，细菌阳性率为82．7o，白粘痰72份，细菌阳性率 27．8％，两组相比有显著差异沙功力01），脓痰白细胞总数显著高于白粘痰？＜O．001）： K）AECB患者痰中＊｛、IL6、TNF川的水平及中性粒细胞计数显著高于健康对照组，铜绿假单胞菌组、Hi组、肺炎克雷白杆菌组IL－8、TNF－Q的水平及中性粒细胞计数均显著高于无细菌生长组，铜绿假单胞菌组和Hi组IL－8、TNF－Q的水平高于肺炎克雷白杆菌，HP组与无细菌生长组相比IL－8、TNF－a的水平无显著差异，但中性粒细胞显著升高，AECB患者各组IL6无显著差异。靴＊）NTHi粘附在上皮细胞表面，通过伪足和微绒毛延伸包绕细菌，将细菌吞噬在胞内，NTlli对上皮细胞有毒性作用，致上皮细胞变性坏死;＠）HBEC能分泌IL8和hFk，NTHi作用后显著诱导人气管粘膜上皮细胞分泌和表达前炎症细胞因子，庆大霉素无抗炎作用，红霉素有抗炎作用，地塞米松有显著抗炎作用：O） AECB患者脓痰中细菌阳性率较白粘痰显著增高，可以作为抗菌药物治疗指征，气道细菌感染导致中性粒细胞明显增高，痰颜色加深，气道炎症加重;以）AECB患者气道有Hi、铜绿假单胞菌、肺炎克雷白杆菌感染，其有关气道炎症标志增加，支持它们在AECB中起着病原学作用。

关键词：流感嗜血杆菌气道粘膜上皮细胞痰 COPD急性加重期细菌气道炎症 IL-6 IL-8 TNF-α ICAM-1

不可分型流感嗜血杆菌对气管黏膜上皮细胞的作用

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第二军医大学学报 2004年第7期25卷 769-772页

作者：钱建美修清玉王桂芳颜泽敏第二军医大学长征医院呼吸内科上海200003

目的 :探讨不可分型流感嗜血杆菌 (NTHi)与气液界面无血清培养原代兔气管黏膜上皮细胞的相互作用。方法 :利用低温酶消化法分离兔气管黏膜上皮细胞 ,无血清培养液及胶原覆盖膜形成的气液界面培养 ,使上皮细胞分化成假复层黏膜纤毛上皮... 详细信息

目的 :探讨不可分型流感嗜血杆菌 (NTHi)与气液界面无血清培养原代兔气管黏膜上皮细胞的相互作用。方法 :利用低温酶消化法分离兔气管黏膜上皮细胞 ,无血清培养液及胶原覆盖膜形成的气液界面培养 ,使上皮细胞分化成假复层黏膜纤毛上皮细胞 ,然后加入 NTHi感染上皮细胞 ,通过扫描电镜 (SEM)和透射电镜 (TEM)观察其形态结构变化。结果 :NTHi感染 2 4h后 ,SEM示气管黏膜上皮细胞表面结构破坏 ,90 %细胞凋亡或死亡 ,纤毛倒伏、断裂 ,细菌与非纤毛上皮细胞连接 ;TEM示细菌黏附在细胞表面 ,细胞表面有较多微绒毛 ,伴微绒毛延伸或伪足包绕细菌 ,将其吞噬胞内。结论 :NTHi黏附在上皮细胞表面 ,上皮细胞通过伪足形成和微绒毛延伸包绕细菌 ,将细菌吞噬在胞内 ;NTHi对上皮细胞有毒性作用。

关键词：不可分型流感嗜血杆菌气管黏膜上皮细胞:细胞凋亡

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如何在初中数学中培养学生的问题解决能力

智力 2020年第20期 51-52页

作者：钱建美溧阳市竹箦中学

初中时期是学生能力发展的重要时期,对他们的长远发展起着重要作用。所以,在这一时期,教师在数学教学中需要注重对学生问题解决能力的培养,这是他们在数学学习中的必备能力。为此,教师应从发现问题、分析问题、解决问题等多个方面对学... 详细信息

初中时期是学生能力发展的重要时期,对他们的长远发展起着重要作用。所以,在这一时期,教师在数学教学中需要注重对学生问题解决能力的培养,这是他们在数学学习中的必备能力。为此,教师应从发现问题、分析问题、解决问题等多个方面对学生进行培养,锻炼他们的数学思维,并促进他们的数学素养发展。

关键词：初中数学问题解决能力培养策略研究

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关于培养中学生问题解决能力的教学策略研究

数理化解题研究 2019年第11期 16-17页

作者：钱建美江苏省溧阳市竹箦中学

由于现阶段的教育考核方式的限定,无论是小学还是中学数学教师过多地强调数学知识以及相应的解题技巧,忽视了学生发现并解决问题能力的培养,不利于学生的自主发展.因此教师要针对学生的学习兴趣以及问题解决能力进行加强巩固,培养学生... 详细信息

由于现阶段的教育考核方式的限定,无论是小学还是中学数学教师过多地强调数学知识以及相应的解题技巧,忽视了学生发现并解决问题能力的培养,不利于学生的自主发展.因此教师要针对学生的学习兴趣以及问题解决能力进行加强巩固,培养学生自主发现问题的能力,加强学生解决问题的动力,从而使得学生数学素养得以提升.

关键词：发现问题解决问题培养策略

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趣味性,数学课堂亮丽的风景线

小学时代 2020年第21期 52-53页

作者：钱建美江苏省海门市海洪小学

数学是枯燥、乏味的,这是长久以来人们对数学的认知,也是因为此,学生对数学知识的学习望而生畏。素质教育模式下,教师要提高数学课堂的教学效率,这就要在课堂上有所改变,改变传统的教学方式,让数学课堂变得生动有趣,教学内容变得丰富多彩。

关键词：趣味性数学课堂风景线

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依托问题,深化自主学习

数学大世界(中旬) 2019年第3期 96-97页

作者：钱建美江苏省海门市海洪小学

自主学习是学生重要的学习方式,是促进学生学会学习的关键,而在自主学习中,我们不能放任学生自由地走马观花,而是要寻找适切的问题,推动学生在思考中学习,在交流中研究,在研究中提升。

关键词：自主探究问题个性化学习学以致用

免疫球蛋白联合低分子肝素对于绒毛膜下血肿患者的治疗效果、妊娠结局及INF-γ、IL-10的影响

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中国妇幼保健 2019年第4期34卷 749-752页

作者：钱建美诸暨市中心医院产科浙江诸暨311800

目的观察免疫球蛋白联合低分子肝素治疗绒毛膜下血肿(SCH)患者的效果、妊娠结局及对患者干扰素(INF-γ)、白细胞介素-10 (IL-10)表达水平的影响,为提高SCH患者成功分娩率、改善母婴结局、提高产妇预后生活质量提供参考。方法选取2015年1... 详细信息

目的观察免疫球蛋白联合低分子肝素治疗绒毛膜下血肿(SCH)患者的效果、妊娠结局及对患者干扰素(INF-γ)、白细胞介素-10 (IL-10)表达水平的影响,为提高SCH患者成功分娩率、改善母婴结局、提高产妇预后生活质量提供参考。方法选取2015年1月-2016年6月诸暨市中心医院收治的88例绒毛膜下血肿孕妇患者随机分为对照组与研究组各44例,对照组采取常规治疗,研究组在对照组治疗的基础上给予免疫球蛋白联合低分子肝素治疗;治疗后评估两组患者的临床效果,观察两组患者治疗前、后血孕期激素水平、血清细胞因子表达水平及免疫功能指标的变化情况;全部患者均随访至妊娠结束,统计两组妊娠结局。结果研究组患者临床治愈率70.45%、总有效率86.36%优于对照组52.27%、65.91%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者E_2、P、β-h CG水平均高于治疗前,且研究组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组INF-γ、IL-10、Th1/Th2均较治疗前有明显改善,且研究组改善优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组正常分娩率75%高于对照组的27.27%,流产率、孕期不良事件发生率、早产率、胎儿异常率均低于对照组,差异均有统计学(P<0.05)。结论免疫球蛋白联合低分子肝素治疗绒毛膜下血肿效果理想,能够减少孕期不良事件与流产的发生率,降低早产风险,促进患者孕期激素及INF-γ、IL-10表达水平的恢复,具有临床推广应用价值。

关键词：绒毛膜下血肿免疫球蛋白低分子肝素妊娠结局干扰素白细胞介素-10

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