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GPSM2在CD133+胰腺癌干细胞亚群中的表达及作用

永州日报

作者：田人蒋周平钱小宝

如今，在冷水滩城区的大街小巷，总有一股文明的气息拂面而来：街巷整洁，环境优美；老旧小区，焕发新彩；文艺宣讲，弘扬新风……看得到的文明创建成果赫然在目，说不完的文明故事经久流传，市民脸上洋溢着幸福感，一幅以文明为底色的... 详细信息

如今，在冷水滩城区的大街小巷，总有一股文明的气息拂面而来：街巷整洁，环境优美；老旧小区，焕发新彩；文艺宣讲，弘扬新风……看得到的文明创建成果赫然在目，说不完的文明故事经久流传，市民脸上洋溢着幸福感，一幅以文明为底色的美丽画卷正在潇湘大地徐徐展开。每到傍......

关键词：冷水滩文明创建冷水滩区

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GPSM2在CD133+胰腺癌干细胞亚群中的表达及作用

作者：钱小宝江苏大学

学位级别：硕士

目的:探讨G蛋白信号调节蛋白2(G-protein-signaling modulator 2,GPSM2)在CD133胰腺癌干细胞亚群和CD133胰腺癌细胞亚群中的差异表达。研究GPSM2下调表达对CD133胰腺癌干细胞的增殖能力、克隆形成能力及迁移能力的影响。方法:本研究通... 详细信息

目的:探讨G蛋白信号调节蛋白2(G-protein-signaling modulator 2,GPSM2)在CD133胰腺癌干细胞亚群和CD133胰腺癌细胞亚群中的差异表达。研究GPSM2下调表达对CD133胰腺癌干细胞的增殖能力、克隆形成能力及迁移能力的影响。方法:本研究通过蛋白质印迹法(Western Bloting,WB)预实验选取GPSM2蛋白表达水平较高的胰腺癌PANC-1细胞系作为实验细胞系。以胰腺癌干细胞(Pancreatic cancer stem cells,PCSCs)表面分子标志物CD133为筛选标志,应用流式细胞分选术(Flow CytoMetry,FCM)从胰腺癌PANC-1细胞系中分选出CD133PANC-1细胞亚群和CD133PANC-1细胞亚群,通过裸鼠皮下成瘤实验及细胞周期实验进一步鉴定CD133PANC-1细胞亚群的干细胞特性;分别应用实时-逆转录聚合酶链反应实验(quantitative real-time Reverse Transcription PCR,RT-qPCR)和WB法检测GPSM2在CD133和CD133PANC-1细胞亚群中的差异表达;应用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)构建针对GPSM2基因的短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)的慢病毒载体,将慢病毒载体包装成病毒颗粒后感染CD133PANC-1细胞亚群并筛选出稳转细胞株;分别应用RT-qPCR和WB实验验证GPSM2的抑制效率;应用MTT法检测转染后CD133PANC-1细胞增殖能力;应用软琼脂集落形成实验检测转染后CD133PANC-1细胞克隆形成能力;应用细胞迁移实验检测转染后CD133PANC-1细胞迁移能力的变化。结果:本实验应用FCM法成功地从PANC-1细胞中分选出CD133PANC-1细胞亚群和CD133PANC-1细胞亚群,CD133PANC-1细胞亚群在裸鼠皮下成瘤体积明显大于同期CD133PANC-1细胞亚群[(343.05±57.59)mm vs(176.86±32.58)mm,P<0.01],瘤体质量亦明显大于同期CD133PANC-1细胞亚群[(4.13±0.37)g vs(1.07±0.21)g,P<0.01],表明CD133PANC-1细胞具有明显肿瘤干细胞特性。细胞周期实验证实,CD133PANC-1组细胞处于G0/G1期比例显著高于CD133PANC-1细胞[(65.34±3.25)%vs(56.56±4.87)%,P<0.01],符合干细胞周期分布特点。RT-qPCR及WB检测结果显示,CD133PANC-1细胞亚群中GPSM2 mRNA及蛋白表达量明显高于CD133PANC-1细胞亚群。本实验利用RNAi技术成功构建了针对GPSM2基因的shRNA慢病毒载体,并感染CD133PANC-1细胞亚群获得GPSM2-shNRA稳转细胞株。RT-qPCR及WB结果表明,GPSM2-shNRA稳转细胞株中GPSM2 mRNA及蛋白表达水平显著下调(均P<0.05)。与空白对照组(Blank组)及稳转对照组(shNC组)比较,稳转GPSM2shRNA组(shGPSM2组)的CD133PANC-1细胞亚群增殖能力和克隆形成能力降低(P<0.05),迁移能力下降(P<0.05)。结论:CD133PANC-1细胞具有明显肿瘤干细胞特性;CD133PANC-1细胞中GPSM2表达水平较CD133PANC-1细胞显著上调,下调GPSM2表达可显著降低CD133PANC-1细胞增殖和侵袭能力。综上所述,GPSM2可能成为调控PCSCs的重要靶点。

关键词：胰腺癌胰腺癌干细胞 GPSM2 CD133 慢病毒流式细胞术细胞增殖细胞迁移

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让老旧小区焕发新活力

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固本益肠片联合英夫利昔单抗对中重度溃疡性结肠炎疗效及对肠黏膜表皮生长因子受体、三叶因子3表达的影响

永州日报

作者：田人蒋周平钱小宝王伟

新增的停车位、最新迁改的路灯线杆、完善的小区绿化……5月29日上午，冷水滩区菱角山街道活龙井社区铁路宿舍居民区的老住户——铁路退休职工周红早悠闲地坐在小游园里的长椅上与街坊邻居们聊天，感慨眼下小区的新变化。周红早在小区... 详细信息

新增的停车位、最新迁改的路灯线杆、完善的小区绿化……5月29日上午，冷水滩区菱角山街道活龙井社区铁路宿舍居民区的老住户——铁路退休职工周红早悠闲地坐在小游园里的长椅上与街坊邻居们聊天，感慨眼下小区的新变化。周红早在小区居住了几十年，可以说是该小区由“旧”变“......

关键词：社区居民老旧小区菱角山街道冷水滩区

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哈尔滨医科大学学报 2022年第5期56卷 463-467页

作者：钱小宝刘志刘嫕南京医科大学附属淮安第一医院肛肠外科江苏淮安223300

目的探究固本益肠片联合英夫利昔单抗对中重度溃疡性结肠炎疗效及对肠黏膜表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)表达的影响。方法选取我院2019年6月~2021年2月收治的82例中重度... 详细信息

目的探究固本益肠片联合英夫利昔单抗对中重度溃疡性结肠炎疗效及对肠黏膜表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)表达的影响。方法选取我院2019年6月~2021年2月收治的82例中重度溃疡性结肠炎患者作为研究对象。以电脑随机数法分为联合组和单药组,每组41例,单药组予以英夫利昔单抗治疗,联合组予以固本益肠片联合英夫利昔单抗治疗。比较2组患者治疗8周后的临床疗效、中医证候评分、肠黏膜指标水平、免疫指标水平、不良反应发生率。结果联合组临床疗效优于单药组(P0.05)。结论固本益肠片联合英夫利昔单抗治疗中重度溃疡性结肠炎可有效促进肠黏膜EGFR和TFF3表达,疗效显著且安全性良好。

关键词：中重度溃疡性结肠炎英夫利昔单抗固本益肠片表皮生长因子受体三叶因子

ICOS信号介导的免疫反应在SHR大鼠肾纤维化中作用的实验研究

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中国免疫学杂志 2015年第12期31卷 1610-1615页

作者：钱小宝王瑜梅仁彪张文杰马婕王晓瑜安徽理工大学医学院基础医学系淮南232001

目的:初步探讨可诱导共刺激分子(Inducible costimulation molecule,ICOS)介导的免疫反应在原发性高血压肾损害中的作用。方法:采用无创尾动脉血压测量仪动态监测自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rats,SHR)及其野生对照组... 详细信息

目的:初步探讨可诱导共刺激分子(Inducible costimulation molecule,ICOS)介导的免疫反应在原发性高血压肾损害中的作用。方法:采用无创尾动脉血压测量仪动态监测自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rats,SHR)及其野生对照组京都维斯塔尔大鼠(Wistar-Kyoto rats,WKY)的血压情况。应用ELISA法动态检测上述大鼠的24小时尿蛋白情况。采用免疫组化技术及RT-PCR法动态检测上述大鼠肾脏中ICOS蛋白及其mRNA的表达水平。应用免疫组化技术及ELISA法动态检测大鼠肾脏及血浆中IL-17A和TGF-β1的表达水平。采用HE及MASSON染色检测各期大鼠肾脏病理改变情况。结果:SHR大鼠从第6周开始血压及24小时尿蛋白值显著高于同期WKY大鼠。SHR大鼠肾脏中ICOS蛋白及其mRNA表达水平从第6周开始亦显著高于同期WKY大鼠,且其表达水平的动态变化均与SHR大鼠肾脏纤维化评分动态变化呈显著正相关关系(r A=0.813,PA<0.05;r B=0.753,PB<0.05)。SHR大鼠血浆和肾脏中IL-17A、TGF-β1的表达在10周、23周亦显著高于同期WKY大鼠。HE和MASSON染色结果显示,与WKY大鼠相比,SHR大鼠肾脏纤维化程度明显升高,在23周后两者差异具有显著性(P<0.05)。结论:在高血压导致的肾损害中,ICOS介导的免疫反应可能起重要的作用。

关键词：可诱导共刺激分子原发性高血压自发性高血压大鼠肾纤维化

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复方黄柏液坐浴在肛周脓肿术后患者中的应用

中华现代护理杂志 2022年第36期28卷 5098-5101页

作者：杨海荣王爱凤李丹丹钱小宝南京医科大学附属淮安第一医院中医科肛肠外科淮安223300

目的探讨复方黄柏液坐浴在肛周脓肿术后患者中的应用效果。方法采用便利抽样法,选择2020年1月—2021年12月于南京医科大学附属淮安第一医院接受手术治疗的100例肛周脓肿患者,分别将2020年1—12月及2021年1—12月收治的患者纳入对照组(50... 详细信息

目的探讨复方黄柏液坐浴在肛周脓肿术后患者中的应用效果。方法采用便利抽样法,选择2020年1月—2021年12月于南京医科大学附属淮安第一医院接受手术治疗的100例肛周脓肿患者,分别将2020年1—12月及2021年1—12月收治的患者纳入对照组(50例)及观察组(50例)。对照组给予温水坐浴,观察组给予复方黄柏液涂剂坐浴。比较两组临床疗效,创面水肿、肉芽生长、创面疼痛、渗液、肛门功能恢复情况,炎性反应。结果干预7 d后,观察组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组干预7 d后的创面水肿和肉芽生长评分,创面疼痛、渗液及Wexner评分,C-反应蛋白水平均低于干预前、干预3 d后,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论复方黄柏液坐浴能够有效促进肛周脓肿术后患者的创面愈合及肛门功能改善,减轻患者炎性反应,进而提高治疗效果。

关键词：肛周脓肿坐浴复方黄柏液涂剂

九九归一大道成──浅谈我在《咫尺灵山》中扮演的“孙悟空”

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戏文 2000年第3期 29-30页

作者：钱小宝

YEATS域含蛋白质4在胰腺癌组织中的表达及预后意义

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中国普通外科杂志 2019年第6期28卷 713-718页

作者：陈吉祥章俊亚党胜春钱小宝崔磊江苏大学附属医院普通外科江苏镇江212001 江苏大学临床医学院江苏镇江212013

目的:探讨YEATS域含蛋白质4(YEATS4)胰腺癌组织中的表达及其与临床意义。方法:用手术切除且病理确诊的80例胰腺癌组织及对应癌旁组织标本构建组织芯片,利用免疫组织化学技术检测YEATS4在胰腺癌及癌旁组织中的表达情况。分析胰腺癌组织中... 详细信息

目的:探讨YEATS域含蛋白质4(YEATS4)胰腺癌组织中的表达及其与临床意义。方法:用手术切除且病理确诊的80例胰腺癌组织及对应癌旁组织标本构建组织芯片,利用免疫组织化学技术检测YEATS4在胰腺癌及癌旁组织中的表达情况。分析胰腺癌组织中YEATS4的表达与胰腺癌临床病理特征及胰腺癌患者预后的关系。结果:免疫组化结果显示,YEATS4在胰腺癌组织中的阳性表达率明显高于相应癌旁组织(56.25% vs. 26.25%,P<0.05)。YEATS4的阳性表达与胰腺癌患者的性别(P=0.037)、TMN分期(P<0.001)、神经转移(P=0.006)、淋巴结转移(P<0.001)以及脉管侵犯(P=0.042)明显有关。全组患者中YEATS4蛋白阴性表达患者生存率明显高于其阳性表达患者(χ^2=7.593,P=0.0059);亚组分析显示,YEATS4蛋白与不良预后的关系仅明显存在于TMN III/IV期、淋巴结转移、神经转移和脉管侵犯患者中(均P<0.05)。YEATS4表达是胰腺癌患者预后的独立危险因素(HR=2.1,95% CI=1.1~4.2,P=0.026)。结论:YEATS4在胰腺癌中的表达量升高,可能参与了胰腺癌的进展,并可能是胰腺癌治疗的潜在预后标记和治疗靶点。

关键词：胰腺肿瘤 YEATS域含蛋白质4 组织阵列分析预后

GPSM2过表达对人胰腺癌细胞迁移能力的影响

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中国普通外科杂志 2017年第3期26卷 311-316页

作者：魏彪张建新崔磊瞿建国钱小宝党胜春江苏大学附属医院普通外科江苏镇江212001

目的:构建G蛋白信号调节蛋白2(GPSM2)稳定高表达的胰腺癌细胞株,探讨GPSM2与人胰腺癌细胞迁移能力的关系。方法:构建GPSM2基因过表达质粒(pCMV-Tag3B-GPSM2)并鉴定,将人胰腺癌MIA-PaCa-2细胞分别转染pCMV-Tag3B-GPSM2(GPSM2转染组)或p C... 详细信息

目的:构建G蛋白信号调节蛋白2(GPSM2)稳定高表达的胰腺癌细胞株,探讨GPSM2与人胰腺癌细胞迁移能力的关系。方法:构建GPSM2基因过表达质粒(pCMV-Tag3B-GPSM2)并鉴定,将人胰腺癌MIA-PaCa-2细胞分别转染pCMV-Tag3B-GPSM2(GPSM2转染组)或p CMV-Tag3B空载体(阴性对照组),以无处理的MIA-Pa Ca-2细胞为空白对照,用RT-PCR检测各组细胞GPSM2 mRNA表达;Westernblot检测各组细胞GPSM2、β-连环蛋白(β-catenin)的表达;用Transwell实验检测各组胰腺癌细胞迁移能力。结果:成功构建了GPSM2稳定高表达的重组细胞株。与空白对照组比较,GPSM2转染组细胞GPSM2 mRNA表达量明显上调,达前者73.3倍、GPSM2、β-catenin蛋白表达量明显升高、迁移细胞计数明显增加(均P0.05)。结论:上调胰腺癌细胞中GPSM2的表达能增加胰腺癌细胞的迁移能力,该作用可能与β-catenin蛋白表达升高有关。

关键词：胰腺肿瘤 GTP酶激活蛋白质类 β连环素细胞运动