检索结果-南通市图书馆

沙蚕消化道D2菌株胞外蛋白酶抗肿瘤活性的初步探讨

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中国海洋药物 2009年第3期28卷 50-53页

作者：徐莉莉王斌闫志勇钱冬萌李鹏郑旭青岛大学医学院青岛市医药生物技术重点实验室山东青岛266021

目的研究沙蚕消化道产蛋白酶菌D2株胞外蛋白酶(D2蛋白酶)的抗肿瘤活性。方法选用鼠乳腺癌细胞EMT6作为靶细胞,用不同浓度的D2蛋白酶,对体外培养靶细胞进行细胞增值抑制率检测,并与阳性对照组(紫杉醇组)和正常细胞对照组(人胚肺细胞组)... 详细信息

目的研究沙蚕消化道产蛋白酶菌D2株胞外蛋白酶(D2蛋白酶)的抗肿瘤活性。方法选用鼠乳腺癌细胞EMT6作为靶细胞,用不同浓度的D2蛋白酶,对体外培养靶细胞进行细胞增值抑制率检测,并与阳性对照组(紫杉醇组)和正常细胞对照组(人胚肺细胞组)比较。结果与结论沙蚕消化道产蛋白酶菌D2株胞外蛋白酶对鼠乳腺癌细胞EMT6存在增殖抑制作用,显示出一定的抗肿瘤活性。

关键词：海洋微生物抗肿瘤药物 D2蛋白酶

汉滩病毒截短核蛋白在大肠杆菌中的表达及其初步应用

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中国生物工程杂志 2004年第1期24卷 45-48页

作者：王斌赵百慧钱冬萌闫志勇青岛大学医学院青岛市医药技术重点实验室青岛266021

利用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)从急性期HFRS病人外周血清总RNA中扩增获得汉坦病毒S片段部分编码基因 (SA) ,使用NCBIBlast软件对排分析证实为汉滩型 ,申请GenBank号 :AY42 5 61 2。将该片段克隆入原核表达载体 ,并在大肠杆菌中高效... 详细信息

利用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)从急性期HFRS病人外周血清总RNA中扩增获得汉坦病毒S片段部分编码基因 (SA) ,使用NCBIBlast软件对排分析证实为汉滩型 ,申请GenBank号 :AY42 5 61 2。将该片段克隆入原核表达载体 ,并在大肠杆菌中高效表达。所表达的蛋白分子量约为 490 0 0kDa,重组蛋白在菌体中主要以包涵体形式存在。Western blot分析表明该核蛋白具有较好的抗原活性。该蛋白在肾综合征出血热 (HFRS)

关键词：汉坦病毒肾综合征出血热病毒重组核蛋白免疫印迹法大肠杆菌表达

HLA-B27基因亚型检测与强直性脊柱炎相关性研究

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世界感染杂志 2007年第1期7卷 51-52页

作者：于洪臣李忠年刘珊李化会钱冬萌王斌山东省青岛市骨伤医院检验科山东青岛266021 青岛市中心医院检验科山东青岛266042 山东省青岛市立医院检验科山东青岛266026 青岛大学医学院微生物学教研室青岛市医药生物技术重点实验室山东青岛

目的探讨HLA-B27基因亚型与强直性脊柱炎的相关性。方法采用酵素免疫法检测HLA-B27，并进一步采用聚合酶链反应序列特异性引物法进行HLA-B27基因亚型分型。结果强直性脊柱炎HLA-B27检出率为95％，显著高于正常对照组，基因分型B2705分... 详细信息

目的探讨HLA-B27基因亚型与强直性脊柱炎的相关性。方法采用酵素免疫法检测HLA-B27，并进一步采用聚合酶链反应序列特异性引物法进行HLA-B27基因亚型分型。结果强直性脊柱炎HLA-B27检出率为95％，显著高于正常对照组，基因分型B2705分布最广（59.3％），其次是B2704（38．9％）。结论HLA-B27与AS具有明显的相关性，检测B2705和B2704亚型对于AS的辅助诊断具有重要意义。

关键词： HLA—B27亚型强直性脊柱炎

IL-21编码基因的克隆及其在大肠杆菌中表达

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青岛大学医学院学报 2003年第1期39卷 15-17页

作者：付强钱冬萌闫志勇侯伟赵百慧王斌青岛大学医学院微生物学教研室青岛266021

①目的　利用基因工程技术从人扁桃体细胞cDNA中克隆出白细胞介素 2 1(IL 2 1)的编码基因 ,并在大肠杆菌中进行表达。②方法　以人扁桃体细胞经PHA刺激的cDNA文库为模板 ,经PCR获得IL 2 1的全基因片段。测序确认后 ,分别设计含BamHⅠ和... 详细信息

①目的　利用基因工程技术从人扁桃体细胞cDNA中克隆出白细胞介素 2 1(IL 2 1)的编码基因 ,并在大肠杆菌中进行表达。②方法　以人扁桃体细胞经PHA刺激的cDNA文库为模板 ,经PCR获得IL 2 1的全基因片段。测序确认后 ,分别设计含BamHⅠ和SalⅠ酶切位点的引物 ,经PCR获得IL 2 1成熟肽的编码基因。将此IL 2 1基因插入表达载体 pGEX4T 2 ,重组克隆经酶切与测序确认后转化大肠杆菌DH5α进行IPTG诱导表达。 ③结果　琼脂糖凝胶电泳显示重组质粒的PCR和双酶切产物与理论值的大小相等。SDS PAGE显示经IPTG诱导后的大肠杆菌DH5α亦表达一与理论相符的条带。目的蛋白约占总菌体蛋白的 10 %。④结论　成功地构建了IL 2

关键词：白细胞介素21 人基因表达聚合酶链反应

转IE2基因荷瘤小鼠中ATF5功能影响的研究

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微生物学杂志 2019年第2期39卷 71-75页

作者：于淼刘婷胡明王斌钱冬萌青岛大学生命科学学院山东青岛266071 青岛大学基础医学院病原生物学系山东青岛266071

利用转IE2基因小鼠荷瘤的方法,对肿瘤组织中ATF5转录激活因子进行定性和定量的检测,从而探究巨细胞病毒(HCMV)即刻早期蛋白IE86对ATF5功能的影响。通过鼠胶质瘤细胞GL261对转基因鼠进行荷瘤,采用RT-PCR和Western blot的方法,对荷瘤鼠的... 详细信息

利用转IE2基因小鼠荷瘤的方法,对肿瘤组织中ATF5转录激活因子进行定性和定量的检测,从而探究巨细胞病毒(HCMV)即刻早期蛋白IE86对ATF5功能的影响。通过鼠胶质瘤细胞GL261对转基因鼠进行荷瘤,采用RT-PCR和Western blot的方法,对荷瘤鼠的肿瘤组织中转录因子ATF5的表达量进行检测。采用RT-PCR和Western blot的方法检测荷瘤鼠肿瘤组织中转录因子ATF5的表达,结果显示,转IE2基因小鼠体内ATF5表达量较正常小鼠ATF5表达量高。ATF5在转IE2基因荷瘤鼠中呈现高表达状态,ATF5是一个与凋亡密切相关的转录因子,在凋亡、分化及发育等生理过程中发挥着重要作用。

关键词：人巨细胞病毒 IE86 鼠胶质瘤细胞转录激活因子5(ATF5) 动物模型

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SARS病毒的组织嗜性和宿主趋向性

青岛大学医学院学报 2003年第2期39卷 118-120,122页

作者：赵百慧钱冬萌闫志勇侯伟付强王斌青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021

①目的　了解SARS病毒的组织嗜性和宿主趋向性。②方法　分别将具有明确致病性的 2 2种冠状病毒 (包括 6株SARS病毒 )S蛋白编码序列和 2 2种冠状病毒全基因序列 (包括 1 1株SARS病毒 )进行对排并绘制系统发生树 ,观察具有不同组织嗜性... 详细信息

①目的　了解SARS病毒的组织嗜性和宿主趋向性。②方法　分别将具有明确致病性的 2 2种冠状病毒 (包括 6株SARS病毒 )S蛋白编码序列和 2 2种冠状病毒全基因序列 (包括 1 1株SARS病毒 )进行对排并绘制系统发生树 ,观察具有不同组织嗜性和宿主范围的冠状病毒所处的位置 ,预测SARS病毒的组织嗜性和宿主趋向性。③结果　在依据编码S蛋白序列和全基因序列所绘制的系统发生树中各冠状病毒的分支明确 ,与其在美国国立医学图书馆 (NCBI)中的分类相一致。④结论　SARS病毒是冠状病毒的一个新的变种。

关键词： SARS病毒组织嗜性宿主趋向性冠状病毒 S蛋白编码序列全基因序列急性严重呼吸系统综合征

应用SELDI-TOF-MS技术建立肝细胞癌病人血清蛋白质指纹图谱筛选模型

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青岛大学医学院学报 2006年第3期42卷 191-193页

作者：闫志勇刘华丁守怡宋旭霞钱冬萌田字彬王斌青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021 青岛大学医学院附属医院消化内科

目的研究肝细胞癌(HCC)病人、乙型肝炎病毒(HBV)携带者、健康人血清蛋白质表达的差异,以建立HCC血清蛋白质指纹图谱筛选模型。方法用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)获得HCC病人、HBV携带者及健康人血清中的蛋白质... 详细信息

目的研究肝细胞癌(HCC)病人、乙型肝炎病毒(HBV)携带者、健康人血清蛋白质表达的差异,以建立HCC血清蛋白质指纹图谱筛选模型。方法用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)获得HCC病人、HBV携带者及健康人血清中的蛋白质指纹图谱,用计算机软件比较分析,并建立HCC的血清蛋白质指纹图谱模型筛选模型。结果HCC组与非肿瘤组共有11种蛋白质有显著性差异;以其中4种蛋白质生物标志物(相对分子质量3 448、6 8834、467和3 134)组建的筛选模型检测灵敏度为94.6%,特异度为92.3%。结论建立的血清蛋白质指纹图谱模型能够区分HBV携带者与HCC病人,SELDI-TOF-MS在HCC的诊断及肿瘤特异性蛋白质生物标志分子的筛选等方面具有一定价值。

关键词：肝肿瘤肽谱蛋白质工程

2种SARS冠状病毒分子生物学快速检测方法的建立

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药品评价 2005年第5期2卷 371-373页

作者：丁守怡闫志勇钱冬萌宋旭霞侯伟王斌青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021

目的建立SARS冠状病毒NS、S基因的检测方法,为青岛市可能出现的SARS病毒流行提供一个标准的、可以确证为SARS病毒感染的实验室检测方法。方法分别根据SARS-CoVnsp11基因和S基因片段序列,建立了2种SARS-CoV基因检测方法,并对2003年4月20... 详细信息

目的建立SARS冠状病毒NS、S基因的检测方法,为青岛市可能出现的SARS病毒流行提供一个标准的、可以确证为SARS病毒感染的实验室检测方法。方法分别根据SARS-CoVnsp11基因和S基因片段序列,建立了2种SARS-CoV基因检测方法,并对2003年4月20日～2003年9月20日期间收集的106份青岛市部分医院呼吸道门诊急性呼吸道感染者的血清样品进行了检测。结果106份急性呼吸道感染标本和健康对照人群的SARNS、S基因RT-PCR检测均为阴性。结论建立的2种SARS-CoV核酸RT-PCR检测的方法具有较高的特异性,可用于SARS感染的实验室检测。同期急性呼吸道感染人群中未发现SARS感染病例。

关键词：非典型性肺炎冠状病毒 RT-PCR

基因重组人白细胞介素21体外对NK细胞活性的影响

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药品评价 2005年第5期2卷 345-348页

作者：钱冬萌王斌丁守怡王静宋旭霞闫志勇青岛大学医学院医药技术重点实验室青岛266021

目的在原核系统中表达基因重组人IL-21,研究其在体外对NK细胞杀伤活性的影响。方法利用基因工程技术,获得人IL-21的编码基因,重组于表达载体pGEX4T-2中,转化***5α进行诱导表达,纯化获得重组人IL-21,分别将0、10、20、40μg/L的IL-21与... 详细信息

目的在原核系统中表达基因重组人IL-21,研究其在体外对NK细胞杀伤活性的影响。方法利用基因工程技术,获得人IL-21的编码基因,重组于表达载体pGEX4T-2中,转化***5α进行诱导表达,纯化获得重组人IL-21,分别将0、10、20、40μg/L的IL-21与健康人外周血单核细胞共同孵育,改良的MTT法检测NK细胞对靶细胞K562的杀伤活性。结果在原核表达系统中成功表达了GST-IL-21的融合蛋白,一定剂量的纯化后IL-21(40μg/L)在体外具有增强NK细胞杀伤活性的作用。结论在大肠杆菌中表达的基因重组人IL-21在体外可增强NK细胞杀伤活性,为系统研究新型的免疫调节因子IL-21奠定基础。

关键词：人白细胞介素21 原核表达 NK细胞杀细胞活性