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金纳米探针的电泳分析及其在检测上的应用

金纳米探针的电泳分析及其在检测上的应用

作者：钱俊臻重庆大学

学位级别：硕士

金纳米粒子具有小尺寸效应、表面效应、光学效应以及特殊的生物亲和效应,这些效应使得金纳米粒子广泛应用于临床医学、材料学等领域,目前,金标记技术在医学检验领域已经成为四大标记技术之一。表面结合了核酸或蛋白质的金纳米粒子在生... 详细信息

金纳米粒子具有小尺寸效应、表面效应、光学效应以及特殊的生物亲和效应,这些效应使得金纳米粒子广泛应用于临床医学、材料学等领域,目前,金标记技术在医学检验领域已经成为四大标记技术之一。表面结合了核酸或蛋白质的金纳米粒子在生物医学方面具有非常广泛的应用,为了更好地应用金纳米探针,需要对这种金纳米探针进行分析表征,目前主要是应用电镜技术,但这种技术操作比较烦琐、条件苛刻、仪器昂贵。这就需要发展一些相对简单的方法来对金纳米探针进行分析表征。本论文引入两种表面调控分子巯基己醇(MCH)和4-巯基苯甲酸(MBA),分别和金纳米粒子表面包被的核酸进行配体交换反应,在金纳米粒子表面形成二元单分子层,从而得到了表面含有MBA-DNA和MCH-DNA的金纳米粒子,即为我们所制备的金纳米探针。用凝胶电泳法、毛细管电泳法和荧光淬灭法对这种金纳米探针进行了分析表征。在凝胶电泳表征中,首先通过实验对凝胶的浓度进行了选择,并分析了金纳米粒子的粒径对分离的影响;在对金纳米探针的表征中,不仅分析了表面结合的DNA的数量对分离的影响,还详细讨论了结合的MCH的数量和MBA的数量对分离的影响;对MBA取代DNA和DNA取代MBA进行了对比实验。实验结果表明琼脂糖凝胶电泳分析的最佳浓度是2%;金纳米粒子的粒径越小其电泳迁移率就越大;金纳米粒子表面结合的DNA越多,其迁移率越小;随着MCH的量的增加,电泳迁移率先减小后增大,但MCH量过大时易使金纳米粒子发生凝聚;随着MBA的量的增加,电泳迁移率增大,含有MBA的二元单分子层能使金纳米粒子稳定地分散于水溶液;在对比实验中发现DNA取代MBA比MBA取代DNA更容易。在毛细管电泳表征中,我们实验所制备的两种金纳米探针(MBA包被的金纳米粒子和DNA包被的金纳米粒子)以1:1的比例混合后在毛细管电泳中无法分离,但在毛细管凝胶电泳中则得到了有效的分离。本论文发现金纳米粒子在荧光素溶液中可以增强荧光强度。在荧光素溶液中加入低浓度的金纳米粒子可以增强荧光素溶液的荧光3-10倍,在氨甲基芘溶液中加入金纳米粒子能增强氨甲基芘的荧光强度30倍,逐渐增大金纳米粒子的浓度又会引起这种荧光增强的减弱直至荧光淬灭,这种荧光增强和荧光淬灭之间的联系无人提及。荧光淬灭目前已广泛应用于核酸和蛋白质的定性、定量研究、利用荧光供体和受体之间距离变化所引起的能量转移作为标尺对纳米尺度的距离进行测量等方面。本论文一方面讨论了DNA的链长和金纳米粒子的粒径对荧光淬灭的影响,另一方面利用荧光淬灭法对核酸进行了检测,检测限可以达到nM级。

关键词：金纳米粒子巯基己醇 4-巯基苯甲酸凝胶电泳毛细管电泳荧光淬灭荧光增强检测

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IgG免疫纳米探针凝聚反应压电传感检测

高等学校化学学报 2007年第4期28卷 649-651页

作者：莫志宏黄红稷钱俊臻朱丽华重庆大学化学化工学院微系统研究中心重庆400044

A piezoelectric immunoassay based on nanoprobe immunoagglutination was proposed for rapid and sensitive detection of IgG. The nanoprobes were prepared by labeling gold nanoparticles with anti-IgG antibody. And a piezoelectric sensor was used to monitor the changes in solution density and viscosity caused by the immunoagglutination of IgG and anti-IgG nanoprobes. The effects of pH and ionic strength were investigated. It is found that the developed immunoagglutination assay is sensitive to IgG with the detection limit of 1.12, 0.72, 0.70 nmol/L to the detection time of 10, 20, 30 min, respectively, and it is unnecessary for immobilization of immunoactive entities.

关键词：压电免疫传感纳米探针凝聚反应 IgG检测

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纳米金对荧光素的荧光增效作用

分析化学 2006年第9期34卷 1307-1310页

作者：余林海莫志宏万巧玲钱俊臻重庆400044重庆大学微系统研究中心重庆400044 重庆大学化学化工学院重庆大学化学化工学院重庆400044

纳米金对荧光素的荧光效率具有增强作用,其增强效果取决于纳米金的尺寸大小和浓度。粒径分别为5、15、25 nm的纳米金与不同浓度的荧光素溶液作用后可以增强荧光强度3;0倍,同时讨论了溶液环境和pH值对荧光增强的影响。采用本实验提出的... 详细信息

纳米金对荧光素的荧光效率具有增强作用,其增强效果取决于纳米金的尺寸大小和浓度。粒径分别为5、15、25 nm的纳米金与不同浓度的荧光素溶液作用后可以增强荧光强度3;0倍,同时讨论了溶液环境和pH值对荧光增强的影响。采用本实验提出的方法可以在生化检测方面提高荧光检测方法的灵敏度。

关键词：纳米金荧光增强生化检测

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高校大型仪器设备开放共享工作研究

实验技术与管理 2015年第6期32卷 8-10页

作者：廖琪钱俊臻严薇重庆大学实验室及设备管理处重庆400044

针对高校大型仪器设备开放共享工作中存在的问题,从大型仪器设备的管理制度、运行机制、队伍建设、激励考核和共享平台建设等方面探索了加强高校大型仪器设备开放共享的有效方法。

关键词：大型仪器设备开放共享平台建设

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黄酮类化合物的金属配合物及其药理作用

中国药理学通报 2012年第8期28卷 1058-1062页

作者：钱俊臻王伯初谭君刘玮琦重庆大学生物工程学院重庆400044

黄酮类化合物具有较高的超离域度,完整的大π键共轭体系,强配体氧原子与合适的空间构型,可作为金属离子的良好配体。该文综述了黄酮类化合物与金属配位的结构特点,分析和评价其抗肿瘤、抗氧化活性,并提出引入量子化学方法是金属配位化... 详细信息

黄酮类化合物具有较高的超离域度,完整的大π键共轭体系,强配体氧原子与合适的空间构型,可作为金属离子的良好配体。该文综述了黄酮类化合物与金属配位的结构特点,分析和评价其抗肿瘤、抗氧化活性,并提出引入量子化学方法是金属配位化合物研究的一个重要的研究发展方向。

关键词：黄酮类化合物金属配位药理作用抗肿瘤抗氧化量子化学

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橙皮苷的药理作用研究进展

天然产物研究与开发 2010年第1期22卷 176-180页

作者：钱俊臻王伯初重庆大学生物工程学院重庆400044

橙皮苷广泛存在于各种植物中,具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗癌、调节免疫力、防辐射、保护心血管系统等多种药理活性。本文综述了近几年有关橙皮苷、及其配位修饰后的橙皮苷的药理活性方面的最新进展,并对其发展趋势做了分析和讨论。

关键词：橙皮苷配位修饰抗癌研究进展

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大型仪器设备开放基金管理及信息系统建设

实验室研究与探索 2015年第8期34卷 272-274页

作者：钱俊臻廖琪严薇重庆大学实验室及设备管理处重庆400044

大型仪器设备开放基金能促进开放共享,有效提高大型仪器设备的使用效益,保证大型仪器设备运行处于良性循环。基于大型仪器设备开放基金手工管理中存在的问题,建设了大型仪器设备开放基金信息系统,优化了管理流程,提高了管理水平和效率,... 详细信息

大型仪器设备开放基金能促进开放共享,有效提高大型仪器设备的使用效益,保证大型仪器设备运行处于良性循环。基于大型仪器设备开放基金手工管理中存在的问题,建设了大型仪器设备开放基金信息系统,优化了管理流程,提高了管理水平和效率,对学校科研工作和人才培养提供了条件支撑。

关键词：大型仪器设备开放基金管理信息系统

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配体交换调控纳米金表面寡核苷酸自组装

分析化学 2007年第8期35卷 1199-1202页

作者：杨小超莫志宏钱俊臻郭昆鹏王冠瑶重庆大学化学化工学院重庆大学化学化工学院重庆400044 重庆大学微系统研究中心

以4-巯基苯甲酸(MBA)为调控分子,对照巯基己醇(MCH),基于配体交换法对纳米金(10nm)表面的寡核苷酸(DNA)自组装进行调控,并用凝胶电泳进行表征。结果表明,在纳米金表面,MCH能完全取代DNA。当MCH与纳米金的摩尔比达到2400:1后,纳米金发生... 详细信息

以4-巯基苯甲酸(MBA)为调控分子,对照巯基己醇(MCH),基于配体交换法对纳米金(10nm)表面的寡核苷酸(DNA)自组装进行调控,并用凝胶电泳进行表征。结果表明,在纳米金表面,MCH能完全取代DNA。当MCH与纳米金的摩尔比达到2400:1后,纳米金发生凝聚,MBA不能完全取代DNA;MBA和DNA的二元组装层能使纳米金在水溶液中稳定分散。另外用DNA取代MBA的反应比用MBA取代DNA的反应更容易进行。

关键词：纳米金寡核苷酸 4-巯基苯甲酸巯基己醇配体交换

来源：博看期刊

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黄酮类化合物提取方法的研究进展

化工文摘 2008年第6期 35-37,40页

作者：钱俊臻重庆大学实验室及设备管理处重庆400044

黄酮类化合物是一类具有广泛开发应用前景的天然药物,文章对黄酮类化合物的新提取方法进行了综述,介绍了各种新的提取方法的原理、特点及其在黄酮化合物中的应用,对黄酮类化合物提取方法的发展前景进行了展望。

关键词：黄酮类化合物提取方法天然药物微波提取法