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叶酸靶向胞内聚集磁性纳米药物的合成及其光热效应研究

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叶酸靶向胞内聚集磁性纳米药物的合成及其光热效应研究

作者：钟颖南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景鼻咽癌是我国南方最常见的头颈部恶性肿瘤。目前治疗上采用以适形调强放疗为主的同步放化疗,但患者接受治疗后常出现骨髓抑制、皮肤纤维化、消化道反应等副作用,且治疗费用高昂。因此,探索出一种临床适用范围广、经济有效、副... 详细信息

研究背景鼻咽癌是我国南方最常见的头颈部恶性肿瘤。目前治疗上采用以适形调强放疗为主的同步放化疗,但患者接受治疗后常出现骨髓抑制、皮肤纤维化、消化道反应等副作用,且治疗费用高昂。因此,探索出一种临床适用范围广、经济有效、副作用小的治疗方法是临床医学研究的重要课题。近红外激光介导的光热治疗(PTT)和光动力治疗(PDT)是目前肿瘤治疗研究的热点,吲哚菁绿(ICG)作为具有近红外特征吸收峰的近红外荧光染料,能够强烈地吸收光能并将其转化为热能或产生单线态氧,可用于PTT或PDT。同时,设法提高药物对肿瘤组织的靶向性、提高药物在肿瘤细胞中的积聚浓度有助于增强近红外激光的治疗效果。基于以上考虑,我们拟合成一种兼具叶酸靶向性、细胞内聚集功能和光敏性的纳米材料。我们在前期研究基础上将ICG和经过叶酸标记及醛基化海藻酸钠修饰的磁性纳米粒子FA-PEG-ASA-MNPs相结合,再合成聚集多肽Cys(StBu)-Lys-CBT与其连接,组装成对叶酸受体表达阳性的肿瘤细胞兼具靶向递药、胞内聚合和光敏杀伤功能的磁性纳米复合物FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT。通过体内和体外实验研究,明确FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT在鼻咽癌HNE-1细胞及荷瘤裸鼠体内的靶向性、生物安全性和光热疗效果及其作用机理。目的1、制备具有叶酸靶向性、细胞内聚合性及光敏感性的磁性纳米复合物FA-PEG-AS A-MNPs-ICG-CBT。2、以叶酸受体阳性的鼻咽癌HNE-1细胞、叶酸受体阴性的5-8F细胞及荷瘤裸鼠为模型,通过普鲁士蓝染色、荧光共聚焦、透射电镜、western blot、小动物活体成像、免疫组化等方法,研究FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT的靶向性。3、以FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT结合交变磁场对鼻咽癌的治疗效果作对照,探讨FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT结合近红外激光治疗鼻咽癌的治疗效果、作用机理、生物安全性和二者的优劣,为这种新型疗法在鼻咽癌治疗中应用的可行性提供实验依据。方法1、合成以Fe304为核心、醛基化海藻酸钠(ASA)改性的磁性纳米粒子ASA-MNPs;通过酰胺化反应偶联叶酸-氨基聚乙二醇FA-PEG-NH2,通过Schiffs base 反应合成 FA-PEG-ASA-MNPs;FA-PEG-ASA-MNPs 与 ICG 枝接形成 FA-PEG-ASA-MNPs-ICG;合成聚集多肽 Cys(StBu)-Lys-CBT 并与FA-PEG-ASA-MNPs-ICG 连接形成终产物 FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT,并对产物进行表征。2、培养叶酸受体阳性的HNE-1细胞株与叶酸受体阴性的5-8F细胞株,通过细胞铁染色、Hoechst染色、透射电镜观察、荷瘤裸鼠活体成像等方法,观察细胞对终产物FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT的靶向摄取情况。3、通过cck-8、活死细胞染色、流式细胞术、活性氧检测、荷瘤小动物活体成像、细胞形态学、瘤体积的动态变化和免疫组化观察FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT在裸鼠体内的转运,对主要脏器及相关基因表达的影响,结合近红外激光及交变磁场对鼻咽癌治疗后的热疗杀伤效应、抑制作用机制及生物安全性。结果1、我们成功合成了 FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT,其平均水流动力学直径约为30nm,体外用谷胱甘肽GSH处理后,纳米粒子发生聚集,粒子水流动力学直径增加达到约200-300nm。2、叶酸受体表达阳性的HNE-1细胞对含有叶酸的纳米粒子有更明显的摄取,连接叶酸分子的 FA-PEG-ASA-MNPs-ICG 与 FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT的平均光密度值分别为未连接叶酸的ASA-MNPs组的29倍、40.5倍;与未连接聚集多肽的FA-PEG-ASA-MNPs-ICG、和既未连接叶酸也未连接靶向多肽的ICG相比,同时连接叶酸和聚集多肽的FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT在裸鼠肿瘤组织内聚集浓度均更高。3、与磁热疗对照组相比,FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT接受光热疗后,HNE-1细胞增殖受到明显抑制,抑瘤率达86%,为磁热疗组的5.2倍。而对于接受光热疗的纳米粒子,同时连接叶酸和聚集多肽的FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT的活性氧产生水平也显著高于其他组,为FA-PEG-ASA-MNPs-ICG的1.6倍、ICG的4.25倍。尾静脉注射药物并用近红外激光照射后5分钟,18天后,FA-PEG-ASA-MNPs-ICG-CBT和FA-PEG-ASA-MNPs-ICG两组的荷瘤裸鼠的肿瘤完全消失,抑瘤率为100%,效应显著高于其他对照组。而单纯使用终产物FA-PEG-

关键词：叶酸靶向细胞内聚集吲哚菁绿光热疗磁性纳米粒子鼻咽癌

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天麻首乌胶囊的质量控制

中国医院药学杂志 2006年第8期26卷 965-967页

作者：钟颖湘西自治洲人民医院湖南吉首416000

目的:制定天麻首乌胶囊的质量标准。方法:用高效液相色谱法对天麻首乌胶囊中天麻素进行了定性鉴别,并对多项药材进行了薄层定性鉴别,用高效液相色谱法对何首乌中2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷进行了含量测定。结果:回归... 详细信息

目的:制定天麻首乌胶囊的质量标准。方法:用高效液相色谱法对天麻首乌胶囊中天麻素进行了定性鉴别,并对多项药材进行了薄层定性鉴别,用高效液相色谱法对何首乌中2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷进行了含量测定。结果:回归方程为A=104277.11C+820.84,r=0.9999;平均回收率为99.44%,RSD为1.67%。结论:本方法具有良好的精密度、稳定性和重复性,可作为天麻首乌胶囊的质量控制标准。

关键词：高效液相色谱法天麻首乌胶囊天麻素

地方政府支出对居民消费需求的影响研究——来自中国区域面板数据的证据

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上海经济研究 2013年第8期25卷 24-31页

作者：李晓嘉钟颖对外经济贸易大学公共管理学院 100029

本文分别从全国和区域两个层面对我国地方政府支出与居民消费的关系进行实证分析。文章选取1990-2011年的面板数据,从总量和结构的角度分析地方政府支出对我国居民消费的政策效应。研究表明,样本区间内我国地方政府支出总体上对居民消... 详细信息

本文分别从全国和区域两个层面对我国地方政府支出与居民消费的关系进行实证分析。文章选取1990-2011年的面板数据,从总量和结构的角度分析地方政府支出对我国居民消费的政策效应。研究表明,样本区间内我国地方政府支出总体上对居民消费起到了挤入作用,但不同的政府支出类型对居民消费具有不同的政策效应,同类型的政府支出对居民消费的政策效应也存在着明显的区域性差异。

关键词：地方政府支出居民消费面板数据模型区域差异

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完美范本素描头像速写100例

关于初中英语写作教学的研究——浅谈如何利用“整体教学法”提高中学生英语写作能力

2009年

作者：钟颖慧

学习美术，是实施素质教育的一项重要策略。不仅能提高学习者的审美判断能力、形象思维能力和整体的人文修养水准，而且还对我们的道德水准、生活情趣的提高有着潜移默化的影响。本书是“完美范本”系列之，该书由专业画家精心打造，书... 详细信息

ISBN: (纸本)9787531822271

学习美术，是实施素质教育的一项重要策略。不仅能提高学习者的审美判断能力、形象思维能力和整体的人文修养水准，而且还对我们的道德水准、生活情趣的提高有着潜移默化的影响。本书是“完美范本”系列之，该书由专业画家精心打造，书中收集了大量优秀作品的范本，为您阐述了素描头像速写的绘画方法及步骤，对于正准备美术考试的读者和美术爱好者来说是一本不错的临摹范本。

关键词：肖像画素描技法美术高等学校入学考试自学参考资料

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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中小学英语教学与研究 2009年第2期 47-50页

作者：钟颖广东省深圳市南山外国语学校

一、写作教学的重要性西方语言文学大师、著名教育家、翻译家李赋宁教授在语言学国际研讨会上曾讲过，“只有通过创造性的练习（creative exercises），学生才能清楚有条理和连贯地表达思想”。写作能力是认识能力、思考能力和文字运用... 详细信息

一、写作教学的重要性西方语言文学大师、著名教育家、翻译家李赋宁教授在语言学国际研讨会上曾讲过，“只有通过创造性的练习（creative exercises），学生才能清楚有条理和连贯地表达思想”。写作能力是认识能力、思考能力和文字运用能力的综合反映。要使语言输入最有效率地转换成输出，就要在输入的同时尽可能多地进行输出。这样，语言的交际功能才能真正得以实现。

关键词：英语写作能力英语写作教学高中学生整体教学法利用初中文字运用能力西方语言

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关于区域会展业发展战略的思考

商业时代 2007年第22期 102-104页

作者：钟颖广西财经学院南宁530003

本文在研究我国对会展业宏观管理方针和举措的基础上,通过分析广西南宁市会展业的现状及地位,提出了南宁会展业的发展战略,并对实现这个战略的策略进行阐述,以期对发展区域会展战略提供可借鉴的依据。

关键词：宏观管理南宁市会展业区域会展战略

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古道苍茫亲历茶马古道

正中神经电刺激对促醒相关神经递质影响的研究进展

2004年

作者：钟颖刘琨

本书分为春秋篇、飞越篇、热谷篇、商贾篇、冰峰篇、湖河篇、圣地篇介绍了作者亲历茶马古道、探索茶马古道的实情。

ISBN: (纸本)7536728484

本书分为春秋篇、飞越篇、热谷篇、商贾篇、冰峰篇、湖河篇、圣地篇介绍了作者亲历茶马古道、探索茶马古道的实情。

关键词：历史、地理地理中国地理

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中国康复医学杂志 2015年第3期30卷 299-301页

作者：钟颖君冯珍南昌大学第一附属医院康复医学科南昌330006

正中神经（median nerve）由臂丛外侧束与内侧束共同形成,沿肱二头肌内行走,降至肘窝后,穿旋前圆肌二头之间行于前臂正中指浅、深屈肌之间达腕管,穿掌腱膜深面至手掌,分成数支指掌侧总神经,每一指掌侧总神经又分为两支指掌侧固有神经沿... 详细信息

正中神经（median nerve）由臂丛外侧束与内侧束共同形成,沿肱二头肌内行走,降至肘窝后,穿旋前圆肌二头之间行于前臂正中指浅、深屈肌之间达腕管,穿掌腱膜深面至手掌,分成数支指掌侧总神经,每一指掌侧总神经又分为两支指掌侧固有神经沿手指两侧行至指尖.研究发现,正中神经与尺神经之间存在交通支[1],电刺激正中神经其兴奋效应能够扩散到尺神经,具有双重效应.有学者指出,内关穴区的肌肉由正中神经支配,针刺内关可直接刺中正中神经干[2],内关穴主治一系列心脏疾病及神志病症,为治疗昏迷的主要穴位之一,由此认为正中神经与昏迷促醒有关.近年来国内外有较多文献报道临床上用正中神经电刺激治疗昏迷患者,疗效良好.因此,临床上将正中神经电刺激（median nerve stimula-tion,MNS）作为较常用的周围神经电刺激方法之一.

关键词：神经电刺激神经递质促醒指掌侧总神经指掌侧固有神经正中神经电刺激治疗内关穴区

基于品牌展会评价标准的展会品牌战略管理思考

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商场现代化 2007年第8S期 217-218页

作者：钟颖广西财经学院

本文在对商贸类展会品牌概念和品牌实质进一步确认和明晰基础上,提出了我国品牌展会的八条评价标准,并以此为依据对展会运营机构进行品牌战略管理给出了若干建议。

关键词：展会品牌标准战略