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HPLC-TQ-MS/MS测定加味败藤浸膏中6种有效成分的血药浓度及其药动学研究

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中国药学杂志 2017年第6期52卷 473-479页

作者：武洁朱贺吴军钟荣玲鞠建明江苏省中医药研究院南京210028 中国中医科学院江苏分院南京210028

目的建立HPLC-TQ-MS/MS分析方法同时测定大鼠血浆中的小檗碱、大车前苷、柴胡皂苷a、延胡索乙素、芍药苷和苦杏仁苷,并用于研究大鼠口服加味败藤浸膏后的药动学。方法色谱柱为Agilent Poroshell 120EC-C18柱(3.0 mm×100 mm,2.7μm),流... 详细信息

目的建立HPLC-TQ-MS/MS分析方法同时测定大鼠血浆中的小檗碱、大车前苷、柴胡皂苷a、延胡索乙素、芍药苷和苦杏仁苷,并用于研究大鼠口服加味败藤浸膏后的药动学。方法色谱柱为Agilent Poroshell 120EC-C18柱(3.0 mm×100 mm,2.7μm),流动相为0.05%甲酸-乙腈(含0.05%甲酸),按程序梯度洗脱。质谱检测方式为多反应离子监测(MRM),采用正、负离子模式切换及时间分段扫描方法。用于定量分析的离子反应分别为m/z 335.9→m/z 319.9(小檗碱,ESI+),m/z 639.1→m/z 160.9(大车前苷,ESI-),m/z 779.3→m/z 617.4(柴胡皂苷a,ESI-),m/z 356.0→m/z 192.0(延胡索乙素,ESI+),m/z 449.1→m/z 121.1(芍药苷,ESI-),m/z 456.1→m/z 323.1(苦杏仁苷,ESI-),m/z 323.9→m/z 126.9(格列齐特,内标,ESI+)和m/z 321.9→m/z 170.1(格列齐特,内标,ESI-)。大鼠单剂量口服加味败藤浸膏(3.1 g·kg-1)后眼底静脉丛取血,血浆经甲醇预处理后进入HPLC-TQ-MS/MS分析。用DAS统计软件计算加味败藤浸膏中活性成分的药动学参数。结果经方法学考证,血浆中小檗碱、大车前苷、柴胡皂苷a、延胡索乙素、芍药苷和苦杏仁苷的线性范围分别为0.59~292.50,0.68~168.75,6.05~1 512.50,0.68~337.50,6.70~1 675.00和5.60~1 400.00 ng·mL^(-1),定量限分别为0.59,0.68,6.05,0.68,6.70和5.60 ng·mL^(-1),精密度、回收率及稳定性均良好,符合生物样本的分析要求。结论本实验所建HPLC-TQ-MS/MS分析方法灵敏、简便、可靠,适用于加味败藤浸膏的药动学研究。

关键词：加味败藤浸膏高效液相色谱-质谱联用大鼠血浆药动学

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潜在肝毒性中药的成分研究进展

中国中药杂志 2016年第17期41卷 3209-3217页

作者：吴豪钟荣玲夏智黄厚才仲青香封亮宋捷贾晓斌江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药释药系统重点研究室江苏南京210028 安徽中医药大学药学院安徽合肥230038 江苏省中医药研究院实验动物中心江苏南京210028

近年来,中药在科研中所占的比例及其临床上的使用量逐渐增高。其研究价值也越来越大,然而中药在使用过程中随之而来的毒副作用也引起人们越来越多的关注。随着中药毒性研究逐渐深入,一些传统性的无毒中药也被发现有潜在的毒性。除了中... 详细信息

近年来,中药在科研中所占的比例及其临床上的使用量逐渐增高。其研究价值也越来越大,然而中药在使用过程中随之而来的毒副作用也引起人们越来越多的关注。随着中药毒性研究逐渐深入,一些传统性的无毒中药也被发现有潜在的毒性。除了中草药的本身对肝脏有损伤作用之外。还包括以下原因:1中药在生长、加工、炮制、运输等环节上受到污染或变质也会引起对机体的副作用;2临床上应该以中医理论为指导合理用药,应当遵循对症用药,配伍得当的原则;3患者体质皆不相同,除了少部分品种中药是固有型肝毒性中药外,大部分中药的潜在肝毒性具有特异质型的特征。肝脏在药物代谢中发挥重要的作用,容易受到药物的损伤作用,因此中药潜在肝毒性及其毒性成分研究成为中药研究的基本领域之一。该文在查阅肝毒性文献的基础上,归纳了肝毒性的临床分型,靶细胞损伤发病机制,并且系统的对中药潜在肝毒性成分及其毒性机制进行了一定的总结。以期为中药肝毒性研究提供思路,为中药临床安全用药提供保障。

关键词：中药潜在肝毒性临床分型化学成分

探针药物法评价大鼠体内甘草配伍大戟、甘遂和芫花对细胞色素CYP1A2活性的影响

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中国医院药学杂志 2014年第20期34卷 1721-1725页

作者：武洁沈红钟荣玲黄厚才王大为李松林江苏省中医药研究院江苏南京210028 中国中医科学院江苏分院江苏南京210028

目的:研究甘草与大戟、甘遂和芫花配伍禁忌的CYP1A2酶活性机制。方法:大鼠随机分为8组,对照组(Ⅰ)、甘草组(Ⅱ)、大戟组(Ⅲ)、大戟+甘草组(Ⅳ)、甘遂组(Ⅴ)、甘遂+甘草组(Ⅵ)、芫花组(Ⅶ)和芫花+甘草组(Ⅷ),各组大鼠连续10 d灌胃上述提... 详细信息

目的:研究甘草与大戟、甘遂和芫花配伍禁忌的CYP1A2酶活性机制。方法:大鼠随机分为8组,对照组(Ⅰ)、甘草组(Ⅱ)、大戟组(Ⅲ)、大戟+甘草组(Ⅳ)、甘遂组(Ⅴ)、甘遂+甘草组(Ⅵ)、芫花组(Ⅶ)和芫花+甘草组(Ⅷ),各组大鼠连续10 d灌胃上述提取液,于第11天灌胃给予大鼠探针药物非那西丁溶液(10 mg·kg-1)。用HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中的非那西丁,并对其药动学参数进行统计学分析。结果:甘草、甘遂对CYP1A2有诱导作用,大戟、芫花对CYP1A2无显著性影响,甘草与大戟、甘遂和芫花配伍后均表现出了对CYP1A2的诱导作用。结论:对酶活性的诱导作用可能会加速大戟、甘遂和芫花中有效成分的代谢,而使功效降低;或促使大戟、甘遂和芫花中所含前毒性成分转化成为毒性成分,导致对机体毒性作用的增强,揭示了其配伍增毒、减效的内在机制。

关键词：探针药物甘草大戟甘遂芫花 CYP1A2 非那西丁

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姜黄素纳米混悬剂在大鼠体内药代动力学考察

中国实验方剂学杂志 2013年第20期19卷 137-139页

作者：钟荣玲夏智武洁宋捷王大为黄厚才江苏省中医药研究院南京210028

目的:探讨姜黄素纳米混悬剂在大鼠体内的药代动力学过程。方法:将同等剂量的姜黄素原料药与姜黄素纳米混悬剂分别灌胃给2组大鼠,于灌胃后20,40 min和1,2,4,6,8,12,24 h眼底静脉丛取血,采用HPLC测定血浆姜黄素含量,Xterra C18色谱柱(4.6... 详细信息

目的:探讨姜黄素纳米混悬剂在大鼠体内的药代动力学过程。方法:将同等剂量的姜黄素原料药与姜黄素纳米混悬剂分别灌胃给2组大鼠,于灌胃后20,40 min和1,2,4,6,8,12,24 h眼底静脉丛取血,采用HPLC测定血浆姜黄素含量,Xterra C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),C18预柱(4.0 mm×2.0 mm),柱温35℃,流动相甲醇-1%乙酸水溶液(78∶22),流速1.0 mL·min-1,进样量20μL,计算姜黄素最低定量限,同时测定血浆中姜黄素原料药与姜黄素纳米混悬剂的药代动力学参数。结果:血浆中姜黄素的定量限15μg·L-1(S/N>10),低、中、高质量浓度的提取回收率(x珋±s,n=5)分别为(91.3±5.7)%,(93.0±4.1)%,(93.3±5.2)%。姜黄素纳米混悬剂的C max和AUC均显著高于姜黄素原料,C max分别为(863.1±390.4),(91.8±22.9)μg·L-1;原料药和混悬剂的T max分别为(4.4±2.2),(4.8±4.4)h,t1/2分别为(4.6±3.2),(5.4±3.7)h,均无显著性变化。结论:建立的HPLC分析条件稳定可靠,纳米混悬剂能明显促进姜黄素的吸收,提高其生物利用度,但吸收和代谢速度无明显差异。

关键词：姜黄素纳米混悬剂药代动力学方法学考察高效液相色谱胡椒碱药时曲线

HPLC-MS-MS法测定大鼠血浆中6种CYP450探针药物及甘草对CYP450酶活性的影响

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中国实验方剂学杂志 2014年第23期20卷 110-116页

作者：武洁钟荣玲王大为黄厚才沈红李松林江苏省中医药研究院南京210028

目的:建立高效液相色谱-二级质谱联用(HPLC-MS-MS)法同时测定大鼠血浆中6种细胞色素P450(CYP450)探针药物,即非那西丁、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、酒石酸美托洛尔、氯唑沙宗和睾酮,并用于体内评价甘草对CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E... 详细信息

目的:建立高效液相色谱-二级质谱联用(HPLC-MS-MS)法同时测定大鼠血浆中6种细胞色素P450(CYP450)探针药物,即非那西丁、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、酒石酸美托洛尔、氯唑沙宗和睾酮,并用于体内评价甘草对CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1,CYP3A4酶活性的影响。方法:采用汉邦C18柱(2.0 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液(70∶30),流速为0.2 m L·min-1,柱温35℃。电喷雾离子化,检测方式为多反应离子监测。大鼠分为2组,分别ig生理盐水和甘草提取液,连续10 d,于第11天给予大鼠探针药物,用HPLC-MS-MS法测定6种探针药物的血药浓度,并分析比较其药动学参数。结果:HPLC-MS-MS方法的灵敏度、精密度、回收率及稳定性良好。甘草能明显诱导大鼠体内CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1的活性,抑制CYP3A4的活性。结论:本法简便、准确,适用于甘草或其他药物对CYP450同工酶活性的研究。

关键词：高效液相色谱-二级质谱联用细胞色素P450 探针药物甘草

痛宁胶囊对硝酸甘油型偏头痛大鼠下丘脑、脑干NOS和5-HT表达的影响

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中成药 2012年第2期34卷 345-348页

作者：杨德功付秋菊黄厚才钟荣玲朱婉华田耀洲江苏省中西医结合医院江苏南京210028 南京中医药大学江苏南京210046 南通良春风湿病医院江苏南通226009

目的通过观察痛宁胶囊对偏头痛大鼠下丘脑、脑干一氧化氮合酶(NOS)及五羟色胺(5-HT)表达的影响,探讨痛宁胶囊治疗偏头痛的神经生物学机制。方法 SD大鼠随机分成6组:空白对照组、模型对照组、阳性药物对照组、研究药物组(痛宁胶囊高、中... 详细信息

目的通过观察痛宁胶囊对偏头痛大鼠下丘脑、脑干一氧化氮合酶(NOS)及五羟色胺(5-HT)表达的影响,探讨痛宁胶囊治疗偏头痛的神经生物学机制。方法 SD大鼠随机分成6组:空白对照组、模型对照组、阳性药物对照组、研究药物组(痛宁胶囊高、中、低剂量组)。除空白对照组外,其余各组采用皮下注射硝酸甘油法复制大鼠偏头痛模型。30min后研究药物组给予痛宁胶囊药液高、中、低剂量灌胃。阳性药物对照组按照6 mg/kg给予琥珀酸舒马普坦药液灌胃。空白对照组和模型对照组均给予等容积的蒸馏水灌胃。造模4 h后取脑组织标本,采用免疫组化SABC法观察下丘脑、脑干NOS、5-HT表达情况。结果模型对照组大鼠下丘脑、脑干NOS表达明显增强,而5-HT表达显著降低,与空白对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);痛宁胶囊尤其是高剂量组能显著抑制偏头痛大鼠下丘脑、脑干增强的NOS表达,而且能明显上调5-HT的表达,与模型对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);痛宁胶囊尤其是高剂量组与阳性药物组比较统计学无显著性差异。结论痛宁胶囊可以降低NOS的表达及上调5-HT的水平,这可能是其治疗偏头痛的作用机制之一。

关键词：痛宁胶囊偏头痛硝酸甘油模型 NOS 5-HT

钩藤散对AlCl_3所致老年痴呆模型鼠的影响

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中国中药杂志 2008年第5期33卷 553-556页

作者：黄厚才钟荣玲曹鹏王春如杨德功江苏省中医药研究院江苏南京210028

目的:观察钩藤散对老年性痴呆模型鼠脑指数,MAO-B,SOD,GSH-PX,NO,LDH等的影响,从而了解其作用机制。方法:120只大鼠随机均分为6组、实验组分高、中、低(5,2.5,1.25g·kg-1)3种剂量每天灌给钩藤散浸膏,模型组及正常组灌以等量生理盐水(0.... 详细信息

目的:观察钩藤散对老年性痴呆模型鼠脑指数,MAO-B,SOD,GSH-PX,NO,LDH等的影响,从而了解其作用机制。方法:120只大鼠随机均分为6组、实验组分高、中、低(5,2.5,1.25g·kg-1)3种剂量每天灌给钩藤散浸膏,模型组及正常组灌以等量生理盐水(0.01mL.g-1),阳性药组每天给予茴拉西坦胶囊(三乐喜,0.1g·kg-1),给药第5天时,除正常组外,各组腹腔注射AlCl3(100mg·kg-1),隔日1次,连续50d后,分别测定各组大鼠的死亡率、增重、学习成绩、脑指数、脑组织MAO-B,SOD,GSH-PX和血清NO,LDH等含量的变化。结果:实验组的脑指数显著(P<0.05)高于、SOD,GSH-PX活力和NO含量极显著(P<0.01)高于、LDH显著(P<0.05)低于、高、中剂量组的MAO-B含量极显著(P<0.01)低于、学习成绩和增重极显著(P<0.01)好于模型组,与正常组比,实验组除LDH偏高外其他各指标相近。结论:钩藤散能提高脑指数,降低死亡率,保持体重处于正常状况,增强抗氧化能力,抑制MAO-B活性,加强清除脂质过氧化物及其代谢废物的作用,减少LDH的漏出,维持NO于正常水平,从而保护细胞,抵抗痴呆。

关键词：钩藤散 AlCl3 老年性痴呆脑指数鼠

犀角地黄汤对脑缺血大鼠自噬相关蛋白表达的相关研究

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时珍国医国药 2014年第6期25卷 1530-1531页

作者：刘红权王玉黄厚才钟荣玲夏智郭立中南京中医药大学江苏南京210046 中国中医科学院江苏分院江苏南京210028

目的探讨犀角地黄汤对内毒素诱导下持续性大脑中动脉栓塞模型(pMCAO)大鼠脑组织的自噬相关LC3-II蛋白的表达;以及透射电镜下观察双层膜的自噬体。方法造模后进行分组,并采用不同剂量犀角地黄汤进行干预,分别在透射电镜下观察自噬体;检... 详细信息

目的探讨犀角地黄汤对内毒素诱导下持续性大脑中动脉栓塞模型(pMCAO)大鼠脑组织的自噬相关LC3-II蛋白的表达;以及透射电镜下观察双层膜的自噬体。方法造模后进行分组,并采用不同剂量犀角地黄汤进行干预,分别在透射电镜下观察自噬体;检测自噬体膜标志性蛋白质LC3-II的表达。结果模型组有明显的空泡现象出现,中等剂量的犀角地黄汤治疗组有明显空泡现象。造模后第3天和第6天,LC3-II蛋白表达增强,LC3-II/LC3-l比值增加(P<0.05)。结论细胞质LC3-I脂质化形成LC3-Ⅱ。中高剂量组明显降低LC3-II蛋白含量,中剂量组效果更佳,能更好地抑制自噬相关蛋白的表达。

关键词：犀角地黄汤自噬 LC3-II

LC-MS/MS分析大鼠口服清清颗粒后血浆中9种成分的药代动力学

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中国实验方剂学杂志 2017年第1期23卷 85-90页

作者：赵妍张梅任爱农武洁黄厚才钟荣玲杨玉兰李洁南京中医药大学附属中西医结合医院南京210046 江苏省中医药研究院南京210028

目的:建立同时测定大鼠血中9个成分(白芍苷、芍药苷、甘草苷、黄芩苷、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、甘草酸、黄芩素、汉黄芩素)含量的方法,并将该方法用于清清颗粒的药代动力学研究。方法:采用Promosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动... 详细信息

目的:建立同时测定大鼠血中9个成分(白芍苷、芍药苷、甘草苷、黄芩苷、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、甘草酸、黄芩素、汉黄芩素)含量的方法,并将该方法用于清清颗粒的药代动力学研究。方法:采用Promosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,流速0.3 m L·min^(-1),柱温35℃;采用正离子模式;分为两段时间检测,前7min只检测白芍苷、芍药苷和甘草苷,8~17 min检测其余化合物。结果:各成分的线性关系良好(r>0.998);日间和日内精密度RSD均<15%;准确度的相对回收率90.58%~108.67%。9种成分的达峰时间(tmax)依次为(0.25±0),(0.25±0),(0.25±0),(0.25±0),(1.00±0.10),(6.33±0.82),(1.00±0.11),(0.25±0),(3.12±1.15)h,半衰期(t1/2)依次为(0.21±0.02),(6.72±2.10),(2.70±0.36),(6.90±1.55),(5.16±0.95),(4.34±1.02),(4.74±2.52),(4.79±1.48),(5.78±2.41)h,药峰浓度(Cmax)依次为(3.08±0.94),(10.01±2.17),(18.73±2.84),(36.18±7.57),(50.76±10.61),(793.70±214.08),(54.73±18.01),(207.35±27.58),(50.79±5.95)μg·L^(-1)。结论:该方法简便、准确、重复性好,专属性强,可用于清清颗粒的药代动力学研究。

关键词：药代动力学清清颗粒白芍苷甘草苷黄酮类盐酸小檗碱