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PDGF-BB诱导的PTPRD表达下调在肺动脉高压中的功能和机制研究

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PDGF-BB诱导的PTPRD表达下调在肺动脉高压中的功能和机制研究

作者：钟燕凤深圳大学

学位级别：硕士

引言:肺高血压（PH）是继冠心病和高血压之后的第三大常见恶性致命性心血管疾病,其中最凶险的类型是肺动脉高压（PAH）。PAH具有临床症状不典型、发病年龄低、死亡率高三大特点,又被称为“心血管系统的恶性肿瘤”。血小板源性生长因子BB... 详细信息

引言:肺高血压（PH）是继冠心病和高血压之后的第三大常见恶性致命性心血管疾病,其中最凶险的类型是肺动脉高压（PAH）。PAH具有临床症状不典型、发病年龄低、死亡率高三大特点,又被称为“心血管系统的恶性肿瘤”。血小板源性生长因子BB（PDGF-BB）是血管平滑肌细胞最强的致有丝分裂原,通过结合PDGF受体（PDGFR）发挥其生物学功能。受体型蛋白酪氨酸磷酸酶D（PTPRD）是跨细胞膜的受体蛋白,其生理功能主要是对细胞内磷酸化的酪氨酸残基去磷酸化。信号转导与转录活化因子3（STAT3）磷酸化形成二聚体后入核传递刺激信号,调节靶基因转录。STAT3异常活化对PAH的发生发展有重要作用,在肿瘤细胞中PTPRD可使磷酸化的STAT3去磷酸化。为了探讨PAH的发病机制,本课题选取受PDGF-BB调控表达下调的PTPRD为研究对象,研究其对肺动脉平滑肌细胞（PASMC）的增殖、迁移和细胞黏着等细胞功能的影响及作用机制。关于PTPRD与STAT3作用关系的研究在肿瘤方面有较多涉及,但在肺高压领域尚未有研究报道。目的:研究受PDGF-BB诱导表达下调的PTPRD在肺血管重构和肺动脉高压发生发展过程中的功能及内在发病机制。方法和结果:运用RNA深度测序技术筛选出PTPR家族中受PDGF-BB调控显著下调的PTPRD作为研究对象,通过q RT-PCR技术验证RNA测序结果,并在野百合碱（MCT）诱导的PAH大鼠和PAH患者临床样品的PASMC中得到一致验证。细胞水平研究发现,在RPASMC中,PDGF-BB显著下调PTPRD表达且具有时间依赖性并与浓度相关。使用小分子抑制剂SH-4-54或Cryptotanshinone抑制STAT3活性,发现均可恢复PDGF-BB刺激PTPRD的表达下调,表明PDGF-BB可能通过STAT3信号通路调控PTPRD的表达。为了研究PTPRD的生物学功能,在RPASMC中,通过使用sh RNA抑制PTPRD表达后进行伤口愈合实验和单细胞运动示踪实验,发现沉默PTPRD可显著促进RPASMC整体的迁移能力和单个细胞的运动能力。在RPASMC中进行细胞免疫荧光染色实验发现,抑制PTPRD表达可促进细胞在迁移过程中微管的伸展和微管组织中心的重定位,并促进细胞黏着连接的形成。为了探讨PTPRD与STAT3的相互作用以及PTPRD影响RPASMC迁移功能的作用机制,通过免疫印迹实验发现抑制PTPRD的表达后,STAT3的磷酸化水平可明显上调。结论:本研究发现PDGF-BB可通过STAT3信号通路调控PTPRD的表达,而PTPRD可通过调控STAT3的磷酸化水平进而影响RPASMC中下游相关靶基因的表达,从而影响细胞迁移过程中微管的伸展、微管组织中心（MTOC）的重定位和细胞黏着连接的形成。综上所述,本课题对PTPRD的研究可为肺血管重构过程中PASMC迁移的内在机制提供理论参考,有助于深入理解肺血管重构和PAH发生发展的过程。

关键词：肺动脉高压 PTPRD STAT3 PASMC 细胞迁移

用阅读点亮学生璀璨的“心空”——浅议小学语文课内外阅读有效延伸的策略

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小学生作文辅导(读写双赢) 2019年第10期 24-25页

作者：钟燕凤安徽省合肥市长淮新村小学

通过阅读而激发起来的思维,好比是整理很好的土地,只要把知识的种子撒上去,就会发芽成长,取得收成。——苏霍姆林斯基《课标》中明确规定:"培养学生广泛的阅读兴趣,扩大阅读面,加强对课外阅读的指导。"所以,阅读对于当下的教育而言尤为... 详细信息

通过阅读而激发起来的思维,好比是整理很好的土地,只要把知识的种子撒上去,就会发芽成长,取得收成。——苏霍姆林斯基《课标》中明确规定:"培养学生广泛的阅读兴趣,扩大阅读面,加强对课外阅读的指导。"所以,阅读对于当下的教育而言尤为重要。在现今提倡的大语文观的宏观背景下,课外阅读不是浮于语文课程外围的"小装饰",而是课标中的一个"硬指标",是语文教学的一个重要组成部分。"外韧之味,久则可厌;读书之味,愈久愈深"从一

关键词：小学语文课写作方法

自然地理环境影响下的文化差异在中英语言中的体现

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现代语文（下旬．语言研究） 2010年第3期 105-107页

作者：钟燕凤新疆师范大学国际文化交流学院

影响语言文化的因素是多方面的,本文从自然地理环境角度阐述了地理环境对语言文化的影响,并主要从中英语言文化出发,探讨了地理环境对语言文化的影响。

关键词：自然地理环境文化语言中英语言

家校携手并进，共架德育之桥——试论小学德育工作新模式

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家校携手并进，共架德育之桥——试论小学德育工作新模式

CBX3在肺腺癌中的表达、预后相关性及对癌细胞生物学行为的影响

2023第一届教师教育研究学术论坛

作者：钟燕凤广东省湛江市麻章中学

现如今,在教育改革背景下,学生不仅要接受班主任的教育,还需要充分发挥家长在培养孩子过程中的作用。只有在孩子的成长路上融入家庭和学校的双重教育,才能够保证学生的身心健康。但是,在教育过程中有些家长的手段过于简单粗暴,不仅不能... 详细信息

现如今,在教育改革背景下,学生不仅要接受班主任的教育,还需要充分发挥家长在培养孩子过程中的作用。只有在孩子的成长路上融入家庭和学校的双重教育,才能够保证学生的身心健康。但是,在教育过程中有些家长的手段过于简单粗暴,不仅不能和学校教育形成衔接,还会影响孩子的正常发展。基于此,本文主要围绕家校共育背景下小学德育工作开展现状,对工作新模式的构建策略做出探讨。

关键词：家校共育小学德育现状策略

来源： cnki会议评论

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中国癌症杂志 2022年第2期32卷 152-160页

作者：侯清华钟燕凤刘林壮吴柳盛刘继先潍坊医学院临床医学院山东潍坊261053 北京大学深圳医院胸外科广东深圳518036 北京大学深圳医院中心实验室广东深圳518036

背景与目的:作为异染色质重要组分的染色体盒3(chromobox 3,CBX3)参与多种癌症的发生、发展过程,而CBX3基因在肺腺癌中的表达情况和作用尚不清楚。探讨CBX3在肺腺癌中的表达与肺腺癌患者预后的关系,并研究CBX3对A549肺腺癌细胞增殖、迁... 详细信息

背景与目的:作为异染色质重要组分的染色体盒3(chromobox 3,CBX3)参与多种癌症的发生、发展过程,而CBX3基因在肺腺癌中的表达情况和作用尚不清楚。探讨CBX3在肺腺癌中的表达与肺腺癌患者预后的关系,并研究CBX3对A549肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:下载癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中的肺腺癌转录组数据和对应的临床数据,应用R软件分析CBX3在肺腺癌中的表达差异和免疫浸润相关性,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线和Kaplan-Meier分析CBX3在肺腺癌中的预后意义;收集北京大学深圳医院智能化生物样本库-80℃新鲜冻存的2020年8月—2021年1月行肺癌姑息性切除术或根治性切除术的肺腺癌样本20例(已获得知情同意),采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测20例冻存的肺腺癌组织及配对正常肺组织中CBX3的表达;应用小干扰RNA(siRNA)转染A549细胞以沉默CBX3的表达,并根据siRNA转染的类型将A549细胞分为沉默组(si-CBX3组)和阴性对照组(si-NC组),通过用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)实验、克隆形成实验、划痕实验和transwell实验分别研究CBX3对A549肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:基于TCGA肺腺癌数据的差异分析与采集的肺腺样本RTFQ-PCR实验的结果显示,CBX3在肺腺癌中呈显著的高表达,差异有统计学意义(P<0.05);辅助型T细胞2的浸润与CBX3表达呈正相关,相关系数(r)=0.437,而肥大细胞(r=-0.444)、嗜酸性粒细胞(r=-0.380)等免疫细胞与CBX3表达呈负相关;ROC曲线下面积(area under curve,AUC)值为0.912,表明CBX3对肺腺癌具有很好的诊断价值,Kaplan-Meier分析结果显示,CBX3高表达组生存期更短,提示预后较差;沉默CBX3在A549细胞中的表达后,CCK-8实验和克隆形成实验结果表明,A549细胞的增殖能力显著降低(P<0.01);划痕实验结果表明沉默后的A549细胞的迁移率为(22.68±3.44)%,较阴性对照组迁移能力明显降低(P<0.05);Transwell实验结果表明A549细胞的相对侵袭率为(53.94±5.39)%,侵袭能力显著降低(P<0.01)。结论:CBX3在肺腺癌中显著高表达并提示肺腺癌预后不良,可作为肺腺癌的预后标志物,且CBX3的高表达促进了A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

关键词： CBX3 肺腺癌免疫浸润预后细胞功能实验

外国留学生汉字学习的笔画策略使用状况调查——以新疆师范大学和新疆大学中亚留学生为例

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乌鲁木齐职业大学学报 2010年第1期19卷 81-85页

作者：钟燕凤新疆师范大学国际交流学院新疆乌鲁木齐830054

文章调查了一部分新疆中亚留学生汉字笔画策略的使用状况,探讨留学生笔画笔顺的学习方法、笔画笔顺的学习观念及教师的教学方法对留学生笔画策略使用的影响,并讨论了初中级班和不同性别在笔画策略使用上的特点,旨在找出笔画策略使用的... 详细信息

文章调查了一部分新疆中亚留学生汉字笔画策略的使用状况,探讨留学生笔画笔顺的学习方法、笔画笔顺的学习观念及教师的教学方法对留学生笔画策略使用的影响,并讨论了初中级班和不同性别在笔画策略使用上的特点,旨在找出笔画策略使用的主要影响因素以及对教学的启示。

关键词：汉字学习笔画策略中亚留学生

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创模进入最后冲刺阶段 A02

东莞日报

作者：钟燕覃凤春

本报讯今年是我市创建国家环保模范城市的冲刺年，东莞将争取在今年迎来创模省检和国检。日前，副市长梁国英在市创模办召开的创模冲刺阶段工作会议上强调：创模工作必须突出重点抓难点，要以创模为抓手，将我市建设成一个经济强市，...

本报讯今年是我市创建国家环保模范城市的冲刺年，东莞将争取在今年迎来创模省检和国检。日前，副市长梁国英在市创模办召开的创模冲刺阶段工作会议上强调：创模工作必须突出重点抓难点，要以创模为抓手，将我市建设成一个经济强市，给子孙留下一个生态东莞。 据了

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用最短时间清除运河中心段黑臭 A02

木棉不同部位总黄酮的减压内部沸腾提取及抗氧化性研究

东莞日报

作者：钟燕覃凤春

本报讯 “我市创建国家环保模范城市活动，对新型工业化城市实现经济与环境的协调发展和对城乡一体化地区实现社会与环境的协调发展具有典型的示范意义。”在日前召开的创模工作会议上，副市长梁国英要求，创模的各有关成员单位和镇街...

本报讯 “我市创建国家环保模范城市活动，对新型工业化城市实现经济与环境的协调发展和对城乡一体化地区实现社会与环境的协调发展具有典型的示范意义。”在日前召开的创模工作会议上，副市长梁国英要求，创模的各有关成员单位和镇街要进一步解放思想，提高对“创模”工作的认

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江苏农业科学 2016年第9期44卷 293-297页

作者：翁艳英张贞发曾振芳苏秀芳钟燕凤广西民族师范学院化学与生物工程系/广西高校桂西南特色植物资源化学重点实验室培育基地广西崇左532200

为优化木棉花和木棉树皮总黄酮的减压内部沸腾提取工艺,提高总黄酮提取率,采用单因素试验的方法,考察解吸剂浓度、解吸时间、提取剂浓度、提取时间、提取温度及提取剂用量等6个因素对提取效果的影响,结果表明:木棉花用20%乙醇2.5 m L/g... 详细信息

为优化木棉花和木棉树皮总黄酮的减压内部沸腾提取工艺,提高总黄酮提取率,采用单因素试验的方法,考察解吸剂浓度、解吸时间、提取剂浓度、提取时间、提取温度及提取剂用量等6个因素对提取效果的影响,结果表明:木棉花用20%乙醇2.5 m L/g解吸15 min,30%乙醇120 m L/g在50℃和0.035 MPa下提取6 min,提取2次,提取率达到1.81%;木棉树皮用40%乙醇2.5 m L/g解吸25 min,30%乙醇50 m L/g在50℃和0.035 MPa下提取2次,每次5 min,提取率达到17.70%,而且木棉树皮总黄酮提取率是木棉花总黄酮的9.78倍。与传统醇回流提取相比,木棉花和树皮的总黄酮提取率分别提高了0.06、1.00百分点,但提取时间分别缩短了78、60 min,提取温度降低了34.7℃。减压内部沸腾提取的木棉树皮总黄酮抗氧化性研究表明,木棉树皮总黄酮对超氧阴离子、亚硝基的清除能力较强,清除率最高达到76.82%、78.33%。减压内部沸腾法快速高效,用于木棉不同部位总黄酮的提取效果良好,木棉树皮总黄酮具有较强的抗氧化活性。

关键词：木棉花木棉树皮减压内部沸腾提取总黄酮抗氧化性